子宫复旧是动物繁殖过程中的重要环节, 其复旧程度决定母畜能否成功受孕。母畜分娩后子宫复旧的完成通常受到营养、产后护理和分娩季节等因素影响。反刍动物子宫复旧主要通过下丘脑-垂体-性腺轴(hypothalamic-pituitary-gonadal axis, HPGA) 来调控。然而, 目前对母羊子宫复旧机制方面的研究尚不系统, HPGA调控母羊子宫复旧的机制尚不明析。基于此, 本文将从母羊子宫复旧机制、子宫复旧影响因素以及子宫复旧过程中HPGA的作用机制方面进行综述, 以期为深入理解HPGA对母羊子宫复旧的重要性提供参考, 为HPGA调控母羊子宫复旧机制的深入研究提供理论依据。

尽管我国畜牧业已取得了显著进步，但提升畜禽繁殖力仍然是畜牧场不懈追求的目标。卵泡闭锁是未发生排卵的卵泡，这在畜禽中极为普遍，以成为制约畜禽繁殖能力的重要因素，日益受到广泛关注。颗粒细胞作为影响卵泡闭锁的关键因素，在卵泡闭锁过程中发挥了关键的作用，目前，大多研究发现颗粒细胞的增殖可影响卵泡的发育，而颗粒细胞的凋亡会导致卵泡的闭锁，但其背后的潜在机制仍有待深入探究。本文探讨了颗粒细胞在凋亡、自噬、铁死亡、焦亡以及坏死性凋亡等多个方面的作用，为揭示卵泡闭锁的复杂机制提供新的视角和思路。

胆汁酸作为一种天然的动物内源性物质，其抑菌性能正日益受到关注。目前，对胆汁酸抑菌机制的多样性尚缺乏系统性分析。笔者综述了胆汁酸抑菌作用研究的最新进展，归纳了胆汁酸的直接抑菌机制(表面活性剂机制、破坏细胞膜稳态机制和氧化损伤机制)和间接抑菌机制(激活宿主抗菌物质表达机制、影响细菌功能基因表达机制)，并在此基础上提出了提高胆汁酸抑菌性能的结构改性策略(二/多聚化、引入正电荷基团和次级胆汁酸合成生物学开发)，以期为胆汁酸在畜牧养殖中病原菌防控方面的应用提供理论参考和依据。

日粮添加抗生素减少了畜禽生产中动物疾病的发生，发挥了促生长作用，但同时也导致了动物衍生产品和环境中抗生素的残留、动物多重耐药菌增多等问题，对食品安全和畜牧业的发展造成严重影响，威胁着人类健康与生态环境。在国家出台“饲料禁抗、养殖减抗”政策背景下，使用可增强动物抗病力的替抗产品成为研究热点，其中，中药以其来源广、副作用小、不易产生耐药性等优点受到广泛关注，单独使用或与抗菌药物联合使用展现出良好的抗菌效果。文章探讨了我国动物源细菌耐药性的现状，并对能够消减动物源细菌耐药性的中药及其作用机制进行了综述，以期为深入研究与防控动物源细菌耐药性提供科学依据。

猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus，PEDV)是一种引起仔猪急性腹泻、呕吐、脱水等症状的病毒，由于其高发病率和高致死率，给全球养猪业造成了巨大的经济损失。虽然疫苗接种是当前预防猪流行性腹泻(porcine epidemic diarrhea, PED)最经济和有效的措施，但PEDV变异株的频繁出现使得现有疫苗的免疫保护效果不佳，因此开发有效的抗病毒药物显得尤为迫切。近年来，研究者致力于筛选和评估具有潜在抗PEDV活性的物质，其主要通过靶向病毒的入侵、复制或装配过程，或通过增强宿主的免疫响应来发挥作用。本文从化学药物、天然产物和其他生物制剂抗PEDV作用及机制进行概述，以期为抗PEDV药物的筛选和研究提供新的方向和思路。

猪流行性腹泻病(porcine epidemic diarrhea，PED)是由猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus，PEDV)引起的一种以呕吐、脱水和腹泻为主要特征的急性、高度接触性肠道传染病。近年来，由于PEDV变异毒株的不断出现，许多国家的养猪业遭受了巨大的经济损失。由此，探究PEDV的致病机制及其有效防控措施，可为生猪养殖提供重要保障。本文综述了PEDV在抑制干扰素产生，调控细胞凋亡、细胞自噬、细胞焦亡与炎症反应过程中的逃避机制，分析了PEDV的疫苗和营养防控研究进展，旨在为PED的有效控制提供理论参考。

猪流行性腹泻(porcine epidemic diarrhea，PED)是由猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus，PEDV)引起的高度接触性传染病，主要症状为呕吐、水样腹泻、脱水和体重下降，哺乳仔猪感染后死亡率可高达100%，给全球养猪业带来了巨大的经济损失。目前尚无有效的治疗药物，且其疫苗也存在一定的局限性。在病毒感染过程中，病毒蛋白与宿主蛋白通过相互作用，一方面促进病毒逃避宿主先天免疫以完成其复制，另一方面调节宿主免疫反应以抑制病毒感染。因此，鉴定病毒蛋白与宿主蛋白相互作用对于了解宿主对病毒感染的防御和病毒性传染病的发病机制至关重要，从而发现新的抗病毒靶点。本文详细阐述了PEDV感染过程中的病毒蛋白与宿主蛋白的相互作用，总结了PEDV的致病机制，以期为设计有效的疫苗或药物来预防和控制PEDV的传播提供新思路。

狂犬病(rabies)是由弹状病毒科(Rhabdoviridae)狂犬病病毒属(Lyssavirus，也称丽沙病毒属)病毒引起的一种人兽共患的烈性传染病。根据国际病毒分类学委员会第10次报告的最新分类，狂犬病病毒属目前被分为17个种。其中，血清Ⅰ型狂犬病病毒(rabies virus，RABV)是狂犬病病毒属的成员之一，是最常见的狂犬病病原体。随着测序技术的发展，越来越多狂犬病病毒的全基因组序列被测定，这有助于人们在分子水平更深入地理解该病毒的流行情况和自然演化过程。本文对狂犬病病毒的分布、传播规律、起源及系统进化等方面进行综述，为追溯狂犬病病毒的起源，掌握其传播及遗传演化规律，制定科学的狂犬病防控策略提供理论参考。

犬埃里希体是一种由血红扇头蜱传播的病原，主要寄生于宿主的血细胞中，在世界范围内严重威胁到人类和动物健康，具有重要的人兽共患意义。犬埃里希体的传播及分布和虫媒丰度、自然环境、犬年龄、用途、健康状况等多种因素密切相关。本文综述了犬埃里希体的病原学、临床症状、全球范围内的流行情况和影响犬埃里希体传播及分布的风险因素，为埃里希体病的防控提供新的视角和策略。

旨在通过对豫南黑猪进行全基因组拷贝数变异分析及其与背膘厚度进行关联分析，并挖掘影响豫南黑猪背膘厚度的关键拷贝数变异(copy number variation, CNV)及候选基因，为豫南黑猪的遗传改良提供新的育种思路。本研究以120头豫南黑猪核心群个体为研究对象，利用基因组SNP芯片及PennCNV软件进行CNV检测；并使用PennCNV对检测结果进行质量控制；通过合并重叠CNV确定拷贝数变异区域(copy number variation region, CNVR)。使用背膘测定仪对120头豫南黑猪P2点、肩部最厚处、六七肋骨处、最后肋骨处、腰荐结合处的背膘厚度进行测量及对平均背膘厚度进行计算；利用Plink软件对CNV与背膘厚度进行关联分析；利用BioMart和GeneCards注释挖掘影响猪背膘厚度的关键候选基因。共有104个个体符合质控标准，全基因组拷贝数变异分析结果显示，在104个样本中共检测到252个CNV，合并后共62个CNVRs，分布于猪的1~18号常染色体上。全基因组关联分析结果显示，1、8和16号染色体上存在4个与背膘厚度显著关联的位点。在显著关联位点附近共注释到11个候选基因(SOCS6、PTTN、CD226、NR3C2、ARHGAP10、DCLK2、IQCM、CDH9、CDH10、U2和U6)。本研究在120头豫南黑猪核心群个体中通过基因组SNP芯片的拷贝数变异分析，共发现252个CNV，筛选出11个候选基因。11个候选基因中大部分与畜禽生长信号通路有关，分别是SOCS6、NR3C2和CDH10与脂肪沉积过程相关；CD226、U2和U6与肉品质性状和生殖性状相关；ARHGAP10与生长性状和体重调控相关。本研究结果对豫南黑猪的精准育种和背膘厚度相关基因的进一步探索提供了重要参考价值。

旨在探究干扰Adiopr2基因对藏猪皮下腹股沟脂肪细胞产热的影响，揭示AdiopR2-AMPK通路活性对脂质合成和ATP生成影响的分子机制。本研究采集20日龄冬季藏猪(TW组，平均环境温度-15℃)、夏季藏猪(TS组，平均环境温度25℃)和夏季长白猪(LS组，平均环境温度25℃)的皮下腹股沟脂肪组织，每组5头。Adipor2的小干扰RNA (small interfering RNA, siRNA)用于转录后沉默Adipor2的表达。采用实时荧光定量聚合酶链反应(reverse transcription-quantitative polymerase chain reaction，RT-qPCR)检测脂肪组织中脂联素受体基因、siRNA-AdipoR2的干扰效率、以及AMPK下游信号、脂质合成相关基因、产热相关基因和线粒体复合物Ⅰ-Ⅲ基因的mRNA水平，细胞计数试剂盒(cell counting kit-8，CCK-8)分析藏猪脂肪细胞的增殖能力，蛋白印迹(Western blot，WB)方法检测AMPK及其下游信号的表达，油红O染色用于检测藏猪脂肪细胞的脂质沉积能力，JC-1线粒体膜电位和ATP生成试剂盒检测藏猪脂肪细胞的产热。结果表明：在体内，长期冷暴露下藏猪皮下腹股沟脂肪组织Adipor1/2表达显著升高(P < 0.01或P < 0.000 1)；在体外，藏猪诱导成熟脂肪细胞的第4、8、12天Adipor2的表达显著高于长白猪，Adipor1的表达显著低于长白猪(P < 0.01或P < 0.000 1)。siRNA-AdipoR2显著抑制了Adipor2的表达，促进脂质合成基因Fasn的表达，抑制产热基因(Dio2和Cidea)和线粒体复合物Ⅰ Ndufa的表达(P < 0.05，P < 0.001或P < 0.000 1)。此外，干扰Adipor2后48 h时细胞扩增效率显著降低，显著抑制AMPK的磷酸化，促进脂质沉积(P < 0.05，P < 0.01或P < 0.001)。JC-1聚合物线粒体膜电位和ATP生成分析发现，siRNA-AdipoR2显著抑制线粒体膜电位和ATP生成(P < 0.01或P < 0.001)。本研究结果显示，干扰Adipor2能够抑制AMPK信号，促进脂质沉积并抑制藏猪脂肪细胞的产热作用，为探究藏猪独特的耐寒机制提供分子依据和理论基础。

旨在激活SIRT1，通过转录组测序探究其在家禽巨噬细胞中的免疫调节作用及相关靶基因和信号通路。本试验用SIRT1的一种选择性激活剂：SRT1720 HCl 1 μmol·L^-1处理鸡巨噬细胞，试验分为对照组(DMSO)和试验组(SRT1720 HCl)，每组5个生物学重复，处理24 h后通过提取细胞总RNA反转录，使用Illumina Novaseq X Plus进行高通量测序，利用生物信息学方法进行分析。以|log₂FC|>1和校正后的P < 0.05为阈值筛选差异表达基因，共筛选到1 183个差异表达表达基因(P < 0.05)，其中781个基因表达上调，402个基因表达下调，包括CD14、TLR7、IL10RA、NFKBIA和JUN等重要基因。从差异表达基因中选取5个基因进行实时荧光定量验证，结果与转录组结果一致。对筛选到的差异表达基因进行GO和KEGG功能富集分析，GO分析显著富集到代谢过程、免疫系统过程、生物粘附和催化活性等GO条目(P < 0.05)；KEGG分析显著富集到MAPK信号通路、TOLL样受体信号通路和NOD样受体信号通路等，值得注意的是分析富集到了沙门氏菌感染信号通路，提示激活禽巨噬细胞SIRT1后可能影响感染沙门氏菌；通过构建蛋白互作网络发现SIRT1可能与NFKBIA、JUN等基因关系密切。本研究利用SIRT1基因激活后鸡巨噬细胞转录组分析筛选到与免疫相关的基因和重要通路，为探究SIRT1在家禽免疫中的作用提供研究基础。

旨在统计国内白羽肉鸡胸肌异质肉的发生率以及意大利面肉(spaghetti meat, SM)和木质肉(wooden breast，WB)在组织学特征、肉品质指标及加工属性之间的异同。本研究以两个饲养条件一致的白羽肉鸡群体共1 900个42日龄屠宰后胸肌样本为素材，采用表观评分法对意大利面肉、木质肉和白条纹肉(white striping，WS)严重等级进行判定并统计发生率，选取其中326个样本分为4大组，包括46个正常组、78个意大利面肉组、174个木质肉组以及28个意大利面肉和木质肉共同发生组，用于测定胸大肌重、压缩力、剪切力、腌渍吸收率、滴水损失和肉色；另选取131个样本也分为4组，包括20个正常组、35个意大利面肉组、70个木质肉组以及6个意大利面肉和木质肉共同发生组，用于分析蒸煮损失和pH。结果显示，两个群体异质肉总发生率分别为48.88%、48.67%，其中意大利面肉发生率分别为14.60%、13.90%，中度和重度木质肉发生率分别为9.20%、8.40%。苏木精-伊红染色和天狼猩红染色分析结果表明，意大利面肉和木质肉肌束膜的结缔组织均明显异于正常胸肌，呈现出Ⅰ型和Ⅲ型胶原纤维杂乱排列的状态，而意大利面肉肌束离散程度更大，且胶原纤维更少更短，以Ⅲ型纤维为主。肉品质分析结果表明，意大利面肉严重程度与剪切力和压缩力显著负相关；木质肉的压缩力、肉色亮度值显著上升而红度值显著下降，与胸大肌重显著正相关(P < 0.05)。意大利面肉和木质肉pH均显著高于正常肉(P < 0.05)。加工属性分析结果表明，意大利面肉腌渍吸收率和滴水损失无显著变化(P>0.05)，而木质肉腌渍吸收率显著下降(P < 0.05)。综上所述，意大利面肉和木质肉的发生改变了胸肌的胶原纤维类型、肉品质以及加工属性，这为通过遗传、养殖或加工手段改善白羽肉鸡胸肌异质肉问题提供了必要的参考信息。

本研究从长链非编码RNA (long non-coding RNA, lncRNA)切入，旨在探究敖汉细毛羊群体中粗毛返祖(ancestral-like coarse, ALC)个体的转录组特性。本研究采集了3只30日龄ALC羔羊和3只30日龄非返祖(称为MF)细毛羔羊的皮肤样本，进行RNA测序(RNA-seq)，挖掘与细毛羊“返祖”现象存在潜在关联的mRNA和lncRNA，通过生物信息学分析探究lncRNA在细毛羊毛囊发育中的作用，并进行lncRNA与mRNA的联合分析。本研究筛选出1 540个差异表达lncRNA (differentially expressed lncRNA, DE-lncRNA)和513个差异表达基因(differentially expressed genes, DEGs)，富集到Wnt、PPAR、MAPK等多个与毛囊发育相关的信号通路中，均存在显著下调。对差异显著(P < 0.05)的DE-lncRNA进行分析，其中包含被认为与初级毛囊早期发育密切相关的lncRNA，如GTL2等。对DE-lncRNA靶向基因和DEGs进行GO和KEGG富集分析，DE-lncRNA靶基因和DEGs富集到WNT、PPAR、MAPK等多个与毛囊发育相关的信号通路，以及与TGF-β负调控相关的生物学过程。此外，DE-lncRNA和DEGs富集分析都显示，ALC羔羊有多个物质和能量代谢通路上调。DEGs与DE-lncRNA相关性分析筛选出90个可能受DE-lncRNA调控的基因，ADIPOQ、BRCA1、CCAR2、KIF20B、SOAT1等基因涉及与细胞增殖、细胞命运决定、细胞周期调节、物质结合、催化活性等有关的过程。结果显示，ALC羔羊在毛囊相关的lncRNA方面与MF羔羊存在显著差异，ALC羔羊的初级毛囊可能处在全面退化的初始阶段；MAPK和PI3K/AKT信号通路在ALC绵羊幼龄返祖现象比较重要；ALC羔羊代谢相较于MF羔羊更旺盛，GTL2等DE-lncRNA可能与ALC羊较强的适应性存在关联。本研究通过挖掘细毛羊ALC性状相关的lncRNA，为后期深入研究细毛羊毛囊发育机制提供参考线索，对细毛羊抗逆育种有重要参考价值。

为明确牛骨骼肌不同发育阶段miRNA表达情况，筛选影响牛骨骼肌发育的关键miRNA。本研究利用胚胎切割和胚胎移植技术获得的来源相同、遗传背景高度一致的3月龄、6月龄胚胎肌肉组织和9月龄胎儿肌肉组织进行RNA-seq测序分析，运用生物信息学筛选差异表达的miRNA，并进行靶基因预测和功能富集分析。6月龄vs.3月龄、9月龄vs.6月龄、9月龄vs.3月龄分别筛选出262个(上调130个，下调132个)、397个(上调199个，下调198个)、448个(上调224个，下调224个)差异表达miRNA，同时分别预测到靶基因3 854个、7 434个、8 167个。对这些靶基因进行功能注释及信号通路分析，发现6月龄vs.3月龄差异表达miRNA靶基因主要参与肌肉细胞中的细胞骨架、焦点粘连以及动物自噬等5条与肌肉发育相关通路；9月龄vs. 6月龄差异表达miRNA靶基因主要参与肌肉细胞中的细胞骨架、焦点粘连以及生长激素的合成、分泌和作用等4条与肌肉发育相关通路；9月龄vs.3月龄差异表达miRNA靶基因主要参与肌肉细胞中的细胞骨架、焦点粘连以及肌动蛋白细胞骨架的调节等6条与肌肉发育相关通路；构建差异表达miRNAs与骨骼肌发育相关功能靶基因的调控网络图，发现其中bta-miR-139、bta-miR-499、bta-miR-7、bta-miR-148a、bta-miR-204等38个miRNA可能在牛不同时期骨骼肌生长发育中起调控作用。本研究结果为深入理解牛骨骼肌发育的分子机制提供重要的理论依据，同时为后续牛骨骼肌miRNA研究提供了基础资料。

旨在构建奶牛乳腺CRISPR/Cas9全基因组敲除细胞文库，用于筛选与奶牛泌乳、应激及疾病等相关的功能基因。本研究靶向牛全基因组蛋白编码基因，利用CRISPR/Cas9技术设计合成转录sgRNAs文库，克隆至慢病毒载体LentiCRISPR-V2，建立牛全基因组CRISPR/Cas9敲除质粒文库，并进行gEditing ScreeningTM文库测序验证；然后将敲除质粒文库进行慢病毒包装和滴度测定，感染牛乳腺上皮细胞(bovine mammary epithelial cells，bMECs)后经嘌呤霉素抗性筛选及RT-qPCR、Western blot技术确定最佳感染效果，最终通过高通量测序验证敲除细胞库中sgRNA覆盖率确定细胞文库质量。本研究构建的全基因组敲除质粒文库共靶向20 545个蛋白编码基因，包含61 237条sgRNA和3 062条牛基因组上无靶点的sgRNA；gEditing ScreeningTM质粒文库测序结果显示，全基因组质粒文库覆盖率为100%，均一性为2.35，测序深度为577×；进一步对质粒文库进行慢病毒包装，获得滴度为7.01×10⁸ TU·mL^-1的病毒液并感染bMECs, 嘌呤霉素筛选14 d得到MOI=0.2、0.3、0.4、0.5的稳转细胞株，RT-qPCR、Western blot结果表明，MOI=0.2时感染效果最佳；高通量测序结果显示，细胞文库覆盖率为78.74%，碱基稳定、序列质量较高。综上所述，牛全基因组质粒文库、全基因组敲除细胞文库符合质量标准和试验需求，能为挖掘调控牛泌乳性状及乳腺健康的关键基因研究提供重要的细胞筛选平台。

旨在探究Msh同源框2(Msh-homebox 2，MSX2)在长毛兔毛囊毛乳头细胞(dermal papilla cell，DPC)增殖中的调控模式。本试验选取12只健康6月龄长毛兔，采集背部皮肤分离培养DPCs, 通过克隆MSX2基因的编码序列(coding sequence，CDS)，利用生物信息学对MSX2的生物学特性进行初步分析, 分别探究过表达和敲低MSX2对DPC增殖的影响，及相关基因对其调控作用。结果显示，MSX2基因的编码序列全长807 bp，可编码268个氨基酸。通过在DPCs中过表达与敲低MSX2，检测毛囊发育相关基因的表达水平变化。过表达MSX2后，CCND1、EGF、Wnt2、Hoxc13基因的mRNA表达量极显著升高(P＜0.01)，STAT1、SFRP2和Wnt5a基因的mRNA表达量显著或极显著下降(P < 0.05或P < 0.01)；而敲低MSX2后，则显示出相反的趋势。同时，MSX2能够显著促进DPC增殖。本研究结果为进一步研究MSX2在家兔毛囊发育中的作用提供了理论支持。

旨在探究低密度SNP芯片在猪育种中的应用效果，尤其是在基因型填充和育种值估计准确性方面的表现。本研究在中高密度SNP芯片“中芯一号”的基础上设计了一款密度为5K的低密度SNP芯片，可用于检测种猪遗传标记分型，并填充至质控后的“中芯一号”的面板上，最终应用于基因组选择。随后本研究使用来自某种猪育种场的3 239头纯种大白猪数据，通过五折交叉验证方法探究该低密度芯片的基因型填充准确性和填充后数据的基因组育种值估计准确性。结果表明，基因型填充的等位基因正确率达到了99.46%，达100 kg校正日龄和达100 kg背膘厚的遗传评估准确性均值分别达到了0.374 2和0.402 1，与原始基因型数据相比，准确性损失仅为0.001 5和0.001 2。结果提示，低密度SNP芯片在降低检测成本的同时，保留了绝大部分原始信息。本研究为畜禽全基因组低密度芯片的设计提供了依据和参考，这种策略大幅降低了基因型检测的成本，促进了我国猪全基因选择的普及。

旨在分析鸡白痢沙门菌感染太行鸡后盲肠菌群的变化。采集19日龄未感染组(C组)和感染组(B组)太行鸡盲肠内容物，构建16S rRNA基因V3-V4区终文库，分析两组微生物菌群组成、丰度及多样性；利用Metastat和LEfSe分析方法寻找组间差异物种；利用PICRUSt进行基因功能预测；使用STAMP软件进行基因功能差异分析。结果发现C组潜在有益菌毛螺菌科(Lachnospiraceae)、丹毒丝菌科(Erysipelotrichaceae)和普拉梭菌(Faecalitalea_sp_)相对丰度显著高于B组(P < 0.05)。B组梭菌(Clostridiales_bacterium)相对丰度显著高于C组(P < 0.05)。PICRUSt基因功能预测表明，两组显著富集在6个主要代谢通路(P < 0.05)，其中B组微生物更多参与CMP-唾液酸合成酶中，可能影响鸡白痢沙门菌的感染。本研究通过鸡白痢沙门菌太行鸡感染模型探究盲肠微生物菌群特征，推测鸡白痢沙门菌可能通过梭菌(Clostridiales_bacterium)和CMP-唾液酸合成酶影响宿主肠道微生物菌群，为鸡白痢沙门菌感染的研究提供参考数据。

旨在研究玉米赤霉烯酮(zearalenone，ZEA)对彭波半细毛羊睾丸支持细胞的生殖毒性及N-乙酰半胱氨酸(NAC)对睾丸支持细胞抗氧化应激的保护机制。本试验选取体质健康3月龄雄性彭波半细毛羊((13.87±0.46) kg)的睾丸组织用以分离支持细胞进行体外染毒试验，试验组ZEA染毒剂量分别为25、50、100、200 μmol·L^-1，对照组(NC组)仅添加0.1% DMSO，每组3个重复，筛选ZEA试验浓度。采用组合酶消化法、差速贴壁法和免疫荧光染色(IF)法进行彭波半细毛羊睾丸组织支持细胞分离、纯化培养及特异性抗体GATA4和Vimentin鉴定。CCK-8法、EdU法检测睾丸组织支持细胞活率及增殖能力。qRT-PCR和Western blot技术从转录和翻译水平检测细胞增殖(pcna)、凋亡(bax、caspase3、caspase9)和氧化应激(cat、gsh-px、sod1)等相关基因和蛋白的表达变化规律以及NAC的保护作用。结果发现，组合酶消化法和差速贴壁法能够获得满足ZEA染毒试验的SCs，随ZEA染毒浓度升高，SCs细胞活性和细胞增殖数量逐渐下降，200 μmol·L^-1 ZEA处理组SCs活性和细胞增殖数量极显著低于NC组(P < 0.01)；细胞增殖基因pcna的mRNA相对表达量和蛋白表达量均极显著低于NC组(P < 0.01)；促凋亡相关基因bax、caspase3、caspase9的mRNA相对表达量极显著高于NC组(P < 0.01)，CASPASE3蛋白表达量极显著高于NC组(P < 0.01)，BAX、CASPASE9蛋白表达量显著高于NC组(P < 0.05)；抗凋亡基因bcl-2的mRNA相对表达量和蛋白表达量显著低于NC组(P < 0.05)；氧化应激相关基因gsh-px和sod1的mRNA相对表达量极显著高于NC组(P < 0.01)，cat的mRNA相对表达量显著高于NC组(P < 0.05)，CAT、SOD1蛋白表达量极显著于NC组(P < 0.01)。N-乙酰半胱氨酸(NAC)预处理后，与NC组对比，试验组cleaved-CASPASE-9、cleaved-CASPASE-3蛋白表达量极显著下降(P < 0.01)，BAX蛋白表达量显著下降(P < 0.05)，BCL-2蛋白表达量显著上升(P < 0.05)。综上表明，ZEA暴露能够对彭波半细毛羊产生生殖毒性，抑制睾丸SCs增殖，促进SCs凋亡，导致SCs发生氧化损伤，而NAC对ZEA诱导的彭波半细毛羊睾丸SCs氧化损伤具有保护作用。

旨在解析非编码RNA (non-coding RNA, ncRNA)对绵羊卵巢发育过程的分子调控机制，筛选提高绵羊繁殖力的关键基因。本研究以多胎型(小尾寒羊)和单胎型(乌珠穆沁羊)绵羊为材料，选取健康成年母羊各3只，构建卵巢组织ncRNA及mRNA表达谱，筛选差异表达(differentially expressed, DE) lncRNAs、circRNAs、miRNAs及mRNAs，并对其进行靶基因预测以及功能和信号通路的富集分析，筛选出繁殖相关通路进一步构建ceRNA (lncRNA-miRNA-mRNA和circRNA-miRNA-mRNA)调控网络，最后总结调控网络中的关键miRNA。结果显示，乌珠穆沁羊和小尾寒羊卵巢组织共筛选出差异表达lncRNAs共1 579个，circRNA共561个，miRNAs共175个及mRNAs共3 095个。GO和KEGG富集分析结果显示，差异表达的靶基因显著富集于胚胎的形态发生、减数分裂的激活等生物过程及粘蛋白型O-聚糖生物合成、鞘糖脂生物合成、精氨酸鸟氨酸代谢等信号通路。筛选繁殖相关通路上富集到的差异表达基因，构建1个ceRNA网络(包含87个lncRNA，27个circiRNA，3个miRNA和3个mRNA)，获得3个关键miRNAs (miR-140、miR-338及miR-423-5p)及对应的靶向调控ceRNA网络。采用qRT-PCR方法对随机选取的9个差异表达lncRNAs、circRNAs、miRNAs、mRNAs进行验证，结果证实了RNA-seq测序的准确性。本研究对DE ncRNAs与对应靶基因的协调调控机制进行分析，为阐明调控绵羊卵巢发育的关键基因及分子机制提供有效理论依据，进而充分了解绵羊的繁殖生物学特性，对于提高繁殖效率具有重要指导意义。

为了明确FGF2、LIF和IGF1(FLI)改善牛卵母细胞体外成熟的作用机制。本研究使用屠宰场收集的卵巢，将从卵巢中抽取的卵丘卵母细胞复合体(COCs)随机分为对照组和FLI组，进行体外成熟，每组30枚COCs，每个试验重复3次。体外成熟24 h后检测第一极体排出率、卵丘扩展情况、线粒体膜电位、皮质颗粒分布、培养基中葡萄糖消耗量和丙酮酸含量、卵母细胞氧化还原态、TZPs数量、活性氧含量、相关基因的表达；并统计后续胚胎发育的卵裂率、囊胚率和囊胚细胞数。结果表明，FLI组卵丘扩展指数显著高于对照组(分别为3.16±0.04和2.43±0.02，P < 0.001)。与对照组相比，FLI组卵母细胞的卵丘扩展相关基因表达升高(P < 0.05)，皮质颗粒向卵周迁移增多(P < 0.05)，但是卵母细胞第一极体排出率、线粒体膜电位没有显著变化(P＞0.05)。与对照组相比，FLI组的培养基中葡萄糖的消耗、丙酮酸的含量显著增加(P < 0.05)，卵母细胞内NADPH显著增加(P < 0.001)，并且糖代谢相关基因的表达显著上升(P < 0.05)。添加FLI可以显著降低卵母细胞内氧化还原水平、FAD++和ROS水平(P < 0.05)。IVM 8 h时，FLI组TZPs数量显著高于对照组(分别为106±6.91和78±8.76，P < 0.001)。体外受精后，FLI组卵裂率和囊胚率显著高于对照组(分别为(86.49±0.80)%、(37.44±0.42)%和(74.08±0.91)%、(27.34±1.08)%，P < 0.05)。结果显示，FLI通过增加糖代谢提高了卵母细胞体外成熟质量和胚胎发育。

旨在探究奶牛外周血浆中激素、氧化应激指标及微量元素等因子与早期妊娠的相关性，为奶牛早期妊娠诊断提供参考。本研究选取宁夏某奶牛场120头健康经产荷斯坦奶牛(2~3胎次)，体况评分相近，经同期发情处理后，在定时人工授精(timed artificial insemination, TAI)后第7天采集血浆。TAI后18~24 d采用计步法观察返情，第35天采用B超进行妊娠诊断。随后根据诊断结果将奶牛分为妊娠组(n=46)、未妊娠组(n=34)和返情组(n=40)。使用ELISA检测3组血浆样本总抗氧化能力(total antioxidant capacity, T-AOC)、丙二醛(malondialdehyde, MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4, GPX4)、过氧化氢酶(catalase, CAT)、皮质醇(cortisol, COR)、褪黑素(melatonin, MT)、前列腺素E2(prostaglandin E2, PGE2)、前列腺素F2α(prostaglandin F2α, PGF2α)、孕酮(progesterone, P4)、雌二醇(estradiol, E2)、铜(copper, Cu)和锌(zinc, Zn)等指标的含量。结果显示：1)120头奶牛中46头妊娠(妊娠组，38.33%)、40头返情(返情组，33.33%)、34头未妊娠(未妊娠组，28.34%)；2)妊娠组和未妊娠组奶牛血浆PGE2、COR、T-AOC、GPX4、CAT和Zn的浓度显著高于返情组(P < 0.05)；未妊娠组奶牛MDA浓度显著高于妊娠组(P < 0.05)，其余各组各指标间差异不显著(P>0.05)；3)分析各指标浓度与妊娠率之间的关系发现，E2、P4、PGE2、PGF2α、MT、COR、T-AOC、GPX4、CAT、MDA、SOD、Cu和Zn的浓度分别为239.27~292.73 ng·L^-1、4.71~6.95 ng·mL^-1、767.36~941.70 ng·L^-1、386.70~489.05 ng·L^-1、1 664.34~2 271.51 ng·L^-1、316.32~382.36 ng·mL^-1、0.34~0.39 mmol·L^-1、62.80~71.90 mg·mL^-1、10.67~17.75 U·mL^-1、1.15~1.80 nmol·mL^-1、14.20~15.73 U·mL^-1、12.00~24.00 μmol·L^-1和14.71~16.53 μmol·L^-1时奶牛的妊娠率最高，分别为75%、47%、63%、56%、48%、60%、57%、50%、50%、50%、57%、50%和50%；4)根据ROC曲线计算AUC值，奶牛在TAI后第7天血浆中Zn、COR和PGE2的AUC值较高(AUC>0.6)。综上，TAI后第7天低浓度的T-AOC、CAT、GPX4、COR和PGE2和Zn与奶牛返情相关，低浓度的MDA与奶牛妊娠相关，且其不同浓度对应了奶牛妊娠率的差异，Zn、COR和PGE2可作为返情奶牛早期妊娠诊断的候选生物标志物。

旨在研究饲粮不同净能水平和标准回肠可消化赖氨酸水平对荣昌母猪妊娠后期繁殖性能、血清激素、泌乳性能和粪便菌群多样性的影响。试验选取72头2~4胎次荣昌母猪，随机分为9组，每组8个重复，每个重复1头母猪。采用2因素3水平试验设计，饲粮净能(NE)水平分别为8.75、9.48、10.04 MJ·kg^－1，标准回肠可消化赖氨酸(SID Lys)水平分别为0.52%、0.62%、0.72%。试验从母猪妊娠第84天开始至分娩结束。结果表明：饲粮NE水平对妊娠母猪背膘变化、发情间隔及仔猪初生个体重影响显著(P < 0.05)，10.04 MJ·kg^－1 NE组和9.48 MJ·kg^－1 NE组母猪背膘厚变化和仔猪初生个体重显著高于8.75 MJ·kg^－1 NE组，发情间隔显著低于8.75 MJ·kg^－1 NE组(P < 0.05)；饲粮NE水平和SID Lys水平分别为10.04 MJ·kg^－1和0.52%时，母猪窝产活仔数和仔猪初生窝重最高。饲粮NE水平对母猪血清激素水平影响显著(P < 0.05)，10.04 MJ·kg^－1 NE组胰岛素、促卵泡素和促黄体素含量显著高于8.75 MJ·kg^－1 NE组，类胰岛素生长因子-I含量显著高于9.48 MJ·kg^－1 NE组(P < 0.05)。饲粮NE水平对初乳成分影响显著(P < 0.05)，10.04 MJ·kg^－1 NE组乳糖含量显著高于8.75 MJ·kg^－1 NE组(P < 0.05)，8.75 MJ·kg^－1 NE组乳蛋白和干物质含量显著高于9.48 MJ·kg^－1 NE组(P < 0.05)。饲粮NE水平对母猪粪便菌群相对丰度有显著影响(P < 0.05)，10.04 MJ·kg^－1 NE组厚壁菌门(Firmicutes)相对丰度显著高于8.75 MJ·kg^－1 NE组和9.48 MJ·kg^－1 NE组，乳杆菌属(Lactobacillus)相对丰度显著高于8.75 MJ·kg^－1 NE组(P < 0.05)，链球菌属(Streptococcus)相对丰度显著低于8.75 MJ·kg^－1 NE组和9.48 MJ·kg^－1 NE组(P < 0.05)。相关性分析发现，Lactobacillus相对丰度与母猪血清中胰岛素含量呈正相关，unclassified_p_251_o5相对丰度与胰岛素、促黄体素含量呈负相关(P < 0.05)。此外，饲粮SID Lys水平对妊娠母猪各项指标均无显著影响(P>0.05)。综上所述，饲粮NE水平对妊娠后期母猪繁殖性能、血清激素水平、初乳成分及粪便菌群组成的影响均大于SID Lys水平的影响；饲粮NE水平为10.04 MJ·kg^－1、SID Lys水平为0.52%时，荣昌母猪窝产活仔数最高。

本研究旨在分析表达非洲猪瘟病毒基因B602L-B646L的重组腺病毒和杆状病毒的免疫原性。联合CpG佐剂注射3 d后或单独免疫rAd-F-Hsp70 21 d后用rBac-F加强免疫，或以rBac-F为初免21 d后用rAd-F-Hsp70进行加强免疫，免疫剂量1×10⁸·只^-1。在初免21和42 d后采集血清检测针对ASFV pB602L和p72蛋白的抗体水平。检测初免42 d后的由抗原刺激后外周血单核细胞(PBMCs)上清中干扰素-γ(IFN-γ)和白细胞介素-4(IL-4)的含量。结果显示：自免疫后第21天起，所有免疫猪的血清中均能检测到特异性IgG抗体，且在加强免疫后，抗体水平显著上升。CpG联合rAd-F-Hsp70/rBac-F免疫组血清中，pB602L和p72抗体水平均显著高于rAd-F-Hsp70/rBac-F(P < 0.01)和rBac-F/rAd-F-Hsp70(P < 0.01)，其中rAd-F-Hsp70/rBac-F免疫组特异性抗体水平也显著高于rBac-F/rAd-F-Hsp70(P < 0.01)。用ASFV pB602L和p72重组抗原刺激PBMCs后，CpG佐剂联合rAd-F-Hsp70/rBac-F免疫组细胞上清中IFN-γ和IL-4含量显著高于其他免疫组(P < 0.01)，表明以rAd-F-Hsp70作为首免载体优于rBac-F以及CpG佐剂显著提高体液免疫和细胞免疫效果。综上，以rAd-F-Hsp70作为初免疫苗和以rBac-F作为加强疫苗，同时联合使用CpG佐剂显著增强了针对pB602L和p72特异性抗体和细胞因子水平，为进一步优化非洲猪瘟病毒相关疫苗策略提供了数据支持和参考依据。

紧密连接蛋白在多种病毒感染过程中起着重要作用，紧密连接蛋白4(claudin-4，CLDN4)是紧密连接蛋白家族中的主要成员之一，其在猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus，PEDV)感染中作用尚不明确。为探索PEDV感染对CLDN4表达的影响以及CLDN4在PEDV感染中的作用，本研究通过荧光定量PCR (qPCR)和Western blot检测了PEDV感染后CLDN4的转录水平与蛋白表达情况。其次，构建了CLDN4基因的真核表达质粒，设计了靶向CLDN4的特异性干扰RNA，通过qPCR、Western blot、间接免疫荧光(IFA)和PEDV病毒滴度测定检测了过表达和敲减CLDN4对PEDV复制的影响。最后，检测了过表达CLDN4对PEDV吸附与侵入阶段的影响。结果显示，PEDV感染可上调细胞中CLDN4的转录与蛋白表达水平，过表达CLDN4显著促进PEDV的复制，而干扰CLDN4表达抑制PEDV复制，并且CLDN4蛋白可促进PEDV的吸附与侵入。本研究表明CLDN4蛋白具有促进PEDV感染与复制的作用，为研究CLDN4的功能与解析PEDV的复制机制提供参考。

旨在探究原核表达的猪防御素-1(porcine β-defensin-1)的体内外抑菌作用，为临床乳房炎的治疗提供材料和理论依据。本试验通过构建PBD-1的原核表达载体，优化诱导表达条件，过量表达纯化后测定最小抑菌浓度并绘制杀菌动力曲线。分别用E.coli 13-1和S.aureus 4-1构建小鼠乳房炎模型，并用不同浓度的PBD-1进行乳房内灌注治疗试验，通过乳腺组织病理变化及其载菌量观察治疗效果。结果显示，成功构建PBD-1的原核表达载体，重组PBD-1为可溶性表达，表达量为328.6 mg·mL^-1。体外抑菌试验显示，PBD-1对E.coli 13-1、S.aureus 4-1和S.epidermidis 25-1均有抑制作用，且MIC为82.15 μg·mL^-1。乳房内灌注试验结果显示，1×MIC和2×MIC的PBD-1对S.aureus 4-1和E.coli 13-1小鼠乳房炎模型有一定的治疗作用。重组PBD-1对3种细菌均具有体外抑制作用，且对S.aureus 4-1和E.coli 13-1的乳房炎模型具有治疗作用。

旨在探究单核细胞趋化蛋白诱导蛋白3(monocyte chemotactic protein-induced protein 3，MCPIP3)对猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus，PEDV)复制的影响。通过RT-qPCR测定PEDV感染后ZC3H12C转录水平的动态变化；进而以猴肾上皮细胞cDNA为模板，PCR扩增出ZC3H12C基因，克隆到P3×Flag-CMV-14真核表达载体上，构建MCPIP3蛋白表达真核重组载体；分别于非洲绿猴胚胎肾细胞(MARC-145)上过表达或干扰MCPIP3蛋白，通过Western blot、荧光定量PCR、病毒滴度测定等方法探究其对PEDV复制的影响。结果表明，PEDV感染MARC-145细胞后显著上调ZC3H12C转录水平；成功构建MCPIP3重组质粒，其转染细胞后可诱导MCPIP3蛋白外源高表达，且特异性siRNA可显著下调ZC3H12C转录水平；与对照组相比，MCPIP3高表达后显著抑制PEDV N蛋白的表达水平，下调PEDV N基因的转录水平及细胞上清内病毒滴度，而干扰MCPIP3表达具有相反的效应，说明MCPIP3对PEDV在MARC-145细胞中的增殖具有显著抑制作用；同时，MCPIP3高表达显著下调PEDV感染诱导的IL-8、IL-12β及TNF-α的转录水平。本研究拓展了MCPIP3蛋白的功能研究，为PEDV复制机制研究提供了理论基础。

旨在了解近年来我国猪圆环病毒3型(porcine circovirus type 3, PCV3)的分子流行病学特征和遗传变异情况。本研究选取GenBank数据库中168个国内(收录于2017—2023年)和9个国外PCV3基因组序列，利用生物信息学软件对其进行系统发育树构建、核苷酸同源性比对、氨基酸序列比对、抗原表位预测以及基因重组等分析，以期阐明PCV3在我国的传播及遗传进化规律。结果显示，我国PCV3的基因型可被划分为两个亚型，即PCV3a和PCV3b，且PCV3a和PCV3b均可进一步划分为不同的基因簇：PCV3a-1~PCV3a-3和PCV3b-1~PCV3b-5，其中PCV3a-1和PCV3b-2数量最多，占比最高；177个PCV3的全基因组序列相似性在98.3%~100%之间，其ORF2基因编码的氨基酸序列存在3个主要的点突变区，无碱基缺失和插入等情况。此外，基因重组分析表明，这些PCV3全基因组序列之间仅存在1个可能的重组事件，说明目前我国PCV3流行的基因型处于一个相对稳定的阶段。综上，本研究通过严格标准界定寻找到一种未来很可能被广泛认可的基因分型方法，且基于这种基因分型方法再对2017—2023年我国PCV3的遗传变异情况进行分析时所得到的结果较为可靠，这一结果不仅为未来PCV3的遗传变异分析研究提供了统一框架，更为进一步揭示PCV3的分子流行病学特征、遗传多样性和疫苗设计及防控策略的制定提供了基础资料。

旨在研究牛支原体(Mycoplasma bovis, Mb)分子伴侣Dnak (chaperone protein Dnak)蛋白的免疫原性和黏附特性。根据GenBank中Mb HB0801株Dnak基因设计引物，利用Overlap PCR扩增获得Mb Dnak基因，构建重组质粒pET-Dnak, 经双酶切和测序鉴定正确后，将重组质粒转入大肠杆菌BL21(DE3)并通过异丙基硫代半乳糖苷(isopropyl-β-D-thiogalactopyranoside, IPTG)诱导表达。将纯化的重组蛋白免疫新西兰白兔获得抗rDnak血清，利用Western blot、ELISA和间接免疫荧光检测Dnak蛋白的免疫原性以及Dnak蛋白在Mb中的分布。通过补体介导的杀菌试验分析检测rDnak抗血清介导的激活补体杀支原体活性。利用黏附及黏附抑制试验分析Dnak蛋白对宿主细胞的黏附功能。结果表明，重组蛋白rDnak主要以上清可溶形式在大肠杆菌中成功表达，其相对分子质量约为70 ku，具有良好的免疫原性；其多抗血清可有效激活补体杀伤支原体；Dnak蛋白在Mb的细胞膜和细胞质中均存在，是Mb的一种黏附相关蛋白，参与对EBL细胞的黏附。综上，Dnak蛋白是Mb中具有良好免疫原性的黏附相关蛋白，为探究Mb的致病机制奠定基础。

旨在了解我国李斯特菌相关专利发展现状。本研究对李斯特菌相关技术专利申请数量、技术生命周期、技术专利领域、申请人、研究核心等数据进行分析。结果发现，我国李斯特菌相关技术专利在2016年达到申请高峰，2015—2016年和2018—2019年申请量和申请人数量都大幅提升；申请人的主体覆盖了高校、企业、科研院所、个人等；研究核心侧重在单增李斯特菌及其血清型的检测方法。综上，本研究以期为进一步探究李斯特菌的技术研发和防控提供参考。

旨在了解甘肃牦牛肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae, Kp)的流行特征、毒力基因、耐药基因、耐药表型以及遗传多样性等情况。本研究从甘肃某屠宰场采集牦牛肺样本156份，通过分离纯化、染色镜检等对肺炎克雷伯菌进行分离鉴定，运用分子生物学手段对分离株的血清型、毒力基因和耐药基因进行检测，并用纸片扩散法对分离株的耐药谱进行检测。结果显示，从156份肺组织样品中分离出84株肺炎克雷伯菌，分离率为53.85%；8种荚膜血清型均未检出，可能是分属其他血清型；毒力基因检测结果显示，菌毛合成相关基因fimH(84.52%)和mrkD(95.23%)、脂多糖相关基因uge(94.05%)、脲酶相关基因ereA(88.10%)、铁摄取系统基因ybtA(97.62%)的检出率较高，其余毒力基因检出率低或未检出；耐药基因检测结果显示，ESBLs类的bla_TEM基因(85.71%)、碳青霉烯类VIM基因(79.76%)以及氨基糖苷类的acc(6’)-Ib(77.38%)的检出率较高，其余耐药基因检出率较低或未检出；药敏试验结果显示，分离株对复方新诺明(98.81%)、红霉素(97.62%)、万古霉素(95.24%)和克林霉素(94.05%)高度耐药，对其余药物均有不同程度的耐药；ERIC-PCR结果显示，相似度>60%的可分为一簇，分为E1~E6，其中E1为优势簇，占比50.00%。本研究对甘肃牦牛肺炎克雷伯菌的流行情况、毒力基因、耐药基因、耐药表型等进行了分析研究，对临床和预防的指导用药有一定的参考意义。

产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens)分泌的β毒素(CPB)可引起家畜和野生动物发生肠炎和肠毒血症以及人类严重的食物中毒。因此，开发有效的检测方法对于鉴定该菌株的感染至关重要。本研究通过建立产气荚膜梭菌CPB纳米抗体文库和噬菌体展示技术淘选其特异性纳米抗体(命名为CPB-VHH)，并对该纳米抗体半衰期、亲和性及温度稳定性进行评估。同时，分别以CPB-VHH为捕获抗体和羊驼抗CPB多克隆血清为检测抗体，建立双抗夹心ELISA方法，并对该方法临界值、灵敏性、交叉反应及准确性进行评价。结果显示，本研究筛选获得一种针对CPB的特异性纳米抗体CPB-VHH，其半衰期为2.152 h，亲和性常数为0.961 2，在37℃以内的稳定性较好；以该抗体为基础，建立一种检测CPB的双抗夹心ELISA方法，临界值为0.183，灵敏度为0.977 ng·mL^-1，准确率为92%，且与产气荚膜梭菌CPA、CPB、ETX重组蛋白、产单核细胞李氏杆菌(L. monocytogenes)、金黄色葡萄球菌(S. aureus)、火鸡沙门菌(Salmonella)、大肠杆菌(Escherichia coli)无交叉反应，特异性良好。本研究建立的双抗夹心ELISA方法为B型和C型产气荚膜梭菌感染提供一种诊断方法，同时也为涉及CPB定量的疫苗研发及该毒素致病性研究提供指导。

Ⅵ型分泌系统(type Ⅵ secretion systems，T6SS)广泛存在于革兰阴性菌中，其效应蛋白Tse1在细菌种间竞争中发挥着重要的作用。本研究旨在探究Tse1对金黄色葡萄球菌(Staphylococcu saureus，S.aureus)的抑菌作用，探索其在耐药性细菌中的表现和影响。利用含有重组质粒pET-28a-Tse1的大肠杆菌原核表达系统诱导Tse1蛋白表达并纯化。通过荧光显微镜及扫描电镜观察重组蛋白Tse1对金黄色葡萄球菌细胞壁的破坏作用。最后，采用琼脂孔扩散抑菌试验、微量肉汤稀释法测定重组蛋白Tse1对金黄色葡萄球菌的抗菌活性及其与抗生素联合作用的效果。结果表明，在16℃，IPTG浓度为0.5 mmol·L^-1诱导16 h时，Tse1蛋白的表达量达到最高并以可溶性形式存在于上清液中，蛋白相对分子质量约为22 ku。重组蛋白Tse1与S.aureus共培后可发现蛋白结合在菌体表面并能破坏其细胞壁，破坏程度表现为剂量依赖形式。琼脂孔扩散抑菌试验表明重组蛋白Tse1对S.aureus不同菌株均有明显抑菌作用，并且与青霉素(PG)联合使用能明显提升Tse1蛋白的抑菌效果。本试验建立了Tse1蛋白的原核表达及纯化方法，证明了Tse1蛋白对金黄色葡萄球菌具有抑菌作用，与青霉素联合应用能增强其抑菌效果，为挖掘新型抗生素替代品提供了相关理论基础。

为系统了解图们江流域蜱携带病原情况及蜱体内菌群，本试验对图们江流域血蜱属与革蜱属的蜱传病原体分子流行病学、蜱体内菌群进行调查。在图们江流域3个市县的5个采样点采集到森林革蜱、日本血蜱和嗜群血蜱。采用高通量测序技术对蜱携带细菌进行调查，对147只蜱携带细菌16S基因的V3-V4可变区进行二代测序分析；对442只蜱虫携带斑点热群立克次体、无形体和巴贝斯虫进行PCR检测。研究结果显示，高通量测序结果分析发现存在至少2种蜱传病原体，6种属内存在部分致病性菌种的潜在致病菌属。3个市县不同种属、不同性别之间的蜱携带的微生物菌群存在差异。在该地区蜱中检测出1种斑点热群立克次体(饶氏立克次体)，1种无形体(山羊无形体)，1种巴贝斯虫(驽巴贝斯虫)。所获结果为该地区的蜱携带病原体、微生物菌群提供了基础数据，为蜱类和蜱传疾病的防控提供数据支持。

旨在利用AmpR(氨苄青霉素抗性)报告基因表达系统，构建不同数量乳酸菌组成型启动子P_ldh串联、启动子P_ldh与AmpR报告基因不同顺序的乳酸菌表达载体系统，分别检测AmpR报告基因转录水平、蛋白表达量并评价AMPR酶活性，从而筛选出稳定且强表达的组成型多启动子表达系统，为乳酸菌活菌载体表达外源抗原或功能性蛋白提供理论依据。对P_ldh启动子进行生物信息学分析，构建不同数量启动子P_ldh串联的重组乳酸菌以及启动子与外源基因AmpR不同顺序重组乳酸菌。通过实时荧光定量PCR、Western blot、间接ELISA检测以及氨苄青霉素活菌筛选试验综合评估不同表达系统中外源基因表达的强弱。PCR结果显示重组乳酸菌成功扩增出600、900、2 300和2 300 bp的P_ldh-P_ldh、P_ldh-P_ldh-P_ldh、P_ldh-AmpR-P_ldh-AmpR和P_ldh-P_ldh-AmpR-AmpR目的片段；Western blot结果显示重组菌均可表达AMPR蛋白，目的蛋白大小均约为28 ku。间接ELISA、荧光定量PCR和AMPR酶活性检测结果均显示，在不同数量启动子P_ldh串联乳酸菌表达载体系统中，三启动子驱动AmpR报告基因表达的效率显著高于双启动子(P < 0.05)，三启动子、双启动子驱动AmpR报告基因表达的效率均极显著高于单启动子(P < 0.01)，且均极显著高于对照菌pPG-Ampr/HLJ-27(P < 0.01)；在启动子P_ldh与AmpR报告基因不同顺序的乳酸菌表达载体系统中，重组菌pPG-P_ldh-P_ldh-Ampr-Ampr/HLJ-27驱动AmpR报告基因表达的效率极显著高于重组菌pPG-P_ldh-Ampr-P_ldh-Ampr/HLJ-27(P < 0.01)。本研究利用AmpR报告基因成功构建了5种组成型多启动子P_ldh乳酸菌表达系统，结果显示在不同数量启动子P_ldh串联驱动单外源蛋白载体系统中，启动子调控转录进而驱动外源基因表达量与启动子数量呈正相关；在双启动子驱动双外源蛋白载体系统中，连续串联两个启动子调控转录进而驱动双外源基因表达效率显著高于两个启动子分别驱动双外源基因表达效率；以上数据为乳酸菌表达载体对外源蛋白的表达效率优化提供了必要的依据。

本文旨在报道1例猫鼻神经内分泌恶性肿瘤的病理和免疫组化特征。4岁雄性英国短毛猫，在他院按肺炎治疗一个月未见好转遂转至本院，检查发现鼻部肿块，手术活检取鼻腔肿块进行组织病理学和免疫组化检查。组织病理学结果显示肿瘤细胞大小形态不一，异型性明显，细胞核多呈泡状，且已侵袭至周围组织；免疫组化结果显示神经元特异性烯醇化酶(neuron specific enolase，NSE)、突触素(synaptophysin，Syn)、血管活性肠肽(vasoactive intestinal peptide，VIP)、CD99(cluster of differentiation 99，CD99)呈阳性。根据实验室检查、组织病理学以及免疫组化结果，最后诊断为鼻神经内分泌恶性肿瘤，更倾向于低分化神经内分泌癌(neuroendocrine carcinoma，NEC)。本病例可为诊断该肿瘤并与其他鼻腔肿瘤相区分提供参考依据。

本研究旨在探究JAK2/STAT3信号通路及其调节的细胞增殖关键蛋白PCNA在不同年龄牦牛肺脏中的表达分布及可能发挥的作用。本试验以初生、幼年、成年和老年健康牦牛肺脏为研究对象，利用实时荧光定量PCR (quantitative real-time PCR，qRT-PCR)检测JAK2、STAT3和PCNA mRNA在不同年龄牦牛肺脏中的表达情况，采用免疫组织化学(immunohistochemistry，IHC)和免疫蛋白印迹(Western blot)方法检测JAK2、STAT3、P-JAK2/STAT3及PCNA蛋白在不同年龄牦牛肺脏中的表达分布情况。结果显示：JAK2、STAT3、P-JAK2/STAT3和PCNA的表达分布基本一致，主要分布在支气管上皮与血管内皮，支气管壁平滑肌层、血管平滑肌以及肺泡细胞等部位。JAK2 mRNA的表达量在不同年龄牦牛肺脏中呈现先升高后降低趋势，成年组表达最高；STAT3 mRNA在肺脏中的表达量随牦牛年龄的增加而增加，老年组表达最高；PCNA mRNA在成年组和老年组的表达量明显高于初生组及幼年组。此外，JAK2、STAT3、P-JAK2/STAT3及PCNA蛋白在不同年龄牦牛肺脏中表达不同，P-JAK2/STAT3与JAK2/STAT3趋势基本一致，JAK2、P-JAK2蛋白在幼年组表达量最高，STAT3、P-STAT3蛋白在初生组和成年组表达量显著高于幼年组及老年组，其中初生组高于成年组；PCNA蛋白在初生组表达量明显高于幼年、成年和老年三组。综上，JAK2/STAT3信号通路及其调节的PCNA在不同年龄牦牛肺脏中的表达分布存在差异，提示JAK2/STAT3信号通路参与了牦牛肺脏发育过程。研究结果为进一步明确JAK2/STAT3信号通路及其靶向调节的PCNA在牦牛肺脏对高原低氧适应过程中发挥的作用提供研究依据。

旨在探讨阿司匹林丁香酚酯(AEE)对蛋鸡脂肪肝出血综合征(fatty liver hemorrhagic syndrome，FLHS)的预防作用。将78羽160日龄的海兰褐蛋鸡，随机分为6组，每组13只鸡。Ⅰ组饲喂基础日粮；Ⅱ~Ⅴ组饲喂高能低蛋白质日粮，并分别在饲料中添加0、25、50、100 mg·kg^-1阿司匹林丁香酚酯；Ⅵ组饲喂含有氯化胆碱2 g·kg^-1的饲料，试验期90 d。结果显示：1)相较于Ⅰ组，Ⅱ组产蛋率和平均蛋重显著降低(P < 0.05)，料蛋比显著升高(P < 0.05)；相较于Ⅱ组，在不同时间段Ⅲ~Ⅵ组产蛋率和平均蛋重显著升高(P < 0.05)，料蛋比显著降低(P < 0.05)。2)相较于Ⅰ组，Ⅱ组蛋鸡体重显著增加(P < 0.05)；相较于Ⅱ组，Ⅲ~Ⅵ组体重显著降低(P < 0.05)。3)相较于Ⅰ组，Ⅱ组蛋鸡肝脏明显肿大，呈土黄色，表面有点状出血，质脆易碎；HE染色结果显示，肝细胞呈紊乱排列，并出现不同大小的脂肪空泡；相较于Ⅱ组，Ⅲ~Ⅵ组肝脏结构恢复正常。4)相较于Ⅰ组，Ⅱ组蛋鸡肝指数、血清和肝脏中三酰甘油(TG)、胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL)水平显著升高，高密度脂蛋白(HDL)水平显著降低(P < 0.05)；相较于Ⅱ组，Ⅲ~Ⅵ组肝指数、血清和肝脏中TG、TC、LDL水平显著降低，HDL水平显著增加(P < 0.05)。5)相较于Ⅰ组，Ⅱ组蛋鸡肝脏中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH)、过氧化氢酶(CAT)活性显著降低，丙二醛(MDA)水平显著升高(P < 0.05)；相较于Ⅱ组，Ⅲ~Ⅵ组SOD、CAT、GSH活性显著增加，MDA水平显著减少(P < 0.05)。综上，饲喂蛋鸡高能低蛋白日粮可以诱导蛋鸡脂肪肝出血综合征病理模型；添加低、中、高剂量AEE在高能低蛋白日粮对蛋鸡脂肪肝出血综合征均起到一定的预防效果。

本研究旨在探究过表达Klotho的犬脂肪间充质干细胞来源的外泌体(exosomes from canine adipose derived mesenchymal stem cells overexpressing Klotho, KL-Exos)对犬急性肾损伤(acute kidney injury, AKI)的治疗作用。构建过表达Klotho的重组质粒pCDH-EF1-copGFP-T2A-PURO-Klotho(EF1-KL重组质粒)，并转染至犬脂肪间充质干细胞(canine adipose derived mesenchymal stem cells, cADMSCs)，超速离心细胞培养液上清收集KL-Exos。选取8只一岁左右体况相近的雄性中华田园犬，随机分为4组，分别为正常对照组(NC)、急性肾损伤组(AKI)、Exos治疗组(Exo)和KL-Exos治疗组(KL-Exo)。AKI组、Exo组和KL-Exo组注射硫酸庆大霉素, 剂量为60 mg·(kg·次)^-1，每日两次，连续5 d；Exo组和KL-Exo组于第6、9、12天分别注射300 μg的Exos或KL-Exos进行治疗，NC组和AKI组注射同等剂量的生理盐水。治疗完成后分别依次通过影像学、血清学、解剖学、组织学和分子生物学方法检测相关指标来综合评价治疗效果。测序结果表明，成功构建了EF1-KL重组质粒。相较于转染空载体组，转染EF1-KL重组质粒的cADMSCs的Klotho表达水平显著上调(P＜0.001)，提示成功建立了过表达Klotho的cADMSCs(KL-cADMSCs)。对该细胞培养液超速离心得到的沉淀进行检测，其粒径在150 nm左右，呈“茶托样”，表达外泌体标志蛋白CD63和Alix，以上结果均证明该沉淀属于外泌体。治疗结果显示，相较于AKI组犬，Exo组和KL-Exo组犬的肾功能显著提高、肾脏的形态质地和组织结构明显恢复好转、肾脏氧化应激程度下降。相较于Exo组犬，KL-Exo组犬的血清肌酐(Cre)浓度(P＜0.000 1)和尿素氮(Bun)浓度(P＜0.000 1)极显著下降；B超检查未见明显的肾脏积液；肾脏呈红褐色，质地柔软光滑；苏木精-伊红(HE)染色结果显示，肾小管排列整齐，未见淤血等病变；肾脏组织中超氧化物歧化酶(SOD)浓度显著升高(P＜0.000 1)，过氧化氢(H₂O₂)(P＜0.000 1)和丙二醛(MDA)(P＜0.01)浓度显著下降；肾脏中kelch样ECH相关蛋白1(Keap1)的基因表达水平显著上调(P＜0.05)，核因子红细胞2相关因子2(Nrf2)的基因表达水平的下调趋势更加明显。KL-Exos主要通过减少肾脏组织氧化应激，提高机体抗氧化能力来治疗犬的AKI，Keap1-Nrf2信号通路可能是KL-Exos治疗AKI的关键通路。

和厚朴酚(honokiol, HNK)为厚朴酚异构体，为中药厚朴抗菌消炎的有效成分。为了增强和厚朴酚对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin resistant Staphylococcus aureus, MRSA)的抗菌作用，本研究以一水醋酸铜和均苯三甲酸为原料合成了MOF材料(HKUST-1)，并包载HNK制备了载药纳米颗粒HNK/HKUST-1。通过体外药物释放试验考察其在不同介质中药物释放性能；通过FIC试验验证HKUST-1与HNK联用对HNK抗菌作用的影响；通过测定其对于MRSA的最小抑菌浓度、最小杀菌浓度、抑菌率、细胞膜破坏情况以及活性氧生成情况来评价其抗菌活性。结果显示：HNK/HKUST-1纳米颗粒外观呈典型多面晶体结构，粒径为496.93 nm±7.01 nm；载药量为18.88%±0.11%；HNK/HKUST-1在酸性介质中的药物释放能力明显优于中性介质；HKSUT-1与HNK联用对于MRSA的FIC值为5/8，能够发挥相加作用；HNK/HKUST-1纳米颗粒对MRSA的杀菌效果均优于HNK，其抗菌作用更加持久；经HNK/HKUST-1处理后，包括β-半乳糖苷酶、蛋白质和DNA在内的细胞内容物发生显著渗漏，且细胞内活性氧浓度显著升高，表明该纳米颗粒可通过破坏细胞膜完整性和激发细胞内活性氧生成来发挥抗菌作用，且其效果均优于单独使用HNK。综上所述，使用HKUST-1对HNK进行包载，极大增强了HNK对MRSA的抗菌效果，并且其细菌感染部位的酸性环境具有潜在释药能力，有望在临床应用中增强HNK的疗效。

本研究基于肿瘤细胞糖原代谢途径探究新藤黄酸(gambogenic acid，GNA)抑制犬骨肉瘤(osteosarcoma，OS)细胞恶性生物学行为的作用及机制。选用Mckinely犬OS细胞系，通过CCK-8试验确定GNA的给药剂量；通过平板克隆试验探究GNA对犬OS细胞增殖的抑制作用；通过划痕愈合试验、Transwell试验及Western blot试验探究GNA对犬OS细胞迁移及侵袭的抑制作用；通过糖原代谢物试剂盒、酶活力试剂盒、RT-PCR及Western blot试验探究GNA对犬OS糖原代谢途径的影响。通过CCK-8试验确定了后续细胞试验所需剂量，低剂量(0.24 μmol·L^-1)、中剂量(0.28 μmol·L^-1)及高剂量(0.32 μmol·L^-1)；细胞恶性生物学行为相关试验结果表明，GNA呈剂量依赖性地显著抑制犬OS的增殖、迁移及侵袭行为(P < 0.05)；Western blot试验结果表明，GNA呈剂量依赖性地显著抑制Vimentin、MMP-9及Snail蛋白表达(P < 0.05)；糖原代谢检测结果表明，GNA能显著促进犬OS细胞葡萄糖的摄取及细胞内糖原含量的增加，并显著抑制GPa的酶活力；RT-PCR结果显示，GNA显著促进犬OS细胞GLUT1表达(P < 0.05)，但对犬OS细胞HK2及PYGL的表达均无显著影响(P>0.05)；Western blot试验结果与RT-PCR结果基本一致；细胞免疫荧光检测结果表明，GNA能抑制PYGL入核，且PYGL的平均荧光强度随GNA浓度升高而逐渐降低(P < 0.05)。GNA能抑制Mckinely犬OS细胞的增殖、迁移与侵袭且与PYGL所介导的糖原分解途径被抑制相关。

旨在通过转录组学方法探究中草药饲料添加剂对湖羊肝组织胆汁酸代谢和免疫功能的影响。选取3月龄体重相近((19.57±1.56) kg)的健康湖羊公羔18只，随机分为3组，每组6只羊。对照组饲喂基础饲粮，试验Ⅰ、Ⅱ组的中草药饲料添加剂按照饲粮中精料补充料的0.5%和1%添加，预试期10 d，正试期90 d。试验结束时对每组6只羊进行屠宰，采集肝组织样品，提取肝组织中RNA进行转录组学测序，基于|log2Fold Change|>1且FDR < 0.05的筛选标准得到差异表达基因，并针对差异表达基因进行GO功能和KEGG通路富集分析，并通过荧光定量来检测肝组织中与胆汁酸代谢和免疫功能相关基因的表达量。采用试剂盒检测肝中免疫指标(IgA、IgG、IgM、C3、C4)含量。免疫指标结果显示：试验Ⅰ组的肝IgA、IgG、C3含量显著高于对照组(P < 0.05)。测序结果显示：各组间两两比较获得915个差异表达基因(DEGs)，与对照组相比，试验Ⅰ组和试验Ⅱ组分别各有237和270个上调基因以及78和106个下调基因。其中，GO功能注释的结果显示，差异表达基因主要富集在病毒防御调控、免疫和激素调节与生物合成相关的GO条目上。KEGG富集分析结果显示，与对照组相比，试验Ⅰ组主要富集在胆固醇合成、花生四烯酸代谢等与生物过程和代谢途径相关的通路，其中通路中多数基因显著上调。随着中草药饲料添加剂剂量的进一步升高，试验Ⅱ组的DEGs更多地富集到谷胱甘肽、咖啡因代谢等代谢相关的通路。通过对胆汁酸代谢相关基因(FXR、UGT2B18、ABCC4、UGT1A6、CYP7A1、HMGCR、SHP、FGFR4、GPBAR1、HSL)和免疫相关基因(LOC101119773、MAPK4、XAF1、AHR、TLR2、TLR4、IL-16)进行RT-qPCR验证发现，SHP、FXR基因在试验Ⅰ组表达显著高于对照(P＜0.05)，而FGFR4、CYP7A1、GPBAR1、ABCB11、HSL基因在试验Ⅰ组表达呈上升趋势，但与对照组差异不显著(P＞0.05)。LOC101119773、MAPK4、XAF1、AHR、TLR4、TLR2、IL-16基因在试验Ⅰ组显著高于对照组(P＜0.05)。结果提示，中草药饲料添加剂可促进湖羊肝的胆汁酸合成和分泌，增强免疫力，在本试验条件下添加0.5%效果最佳。

本研究旨在开发一种针对非洲猪瘟病毒(African swine fever virus, ASFV)的重组腺病毒疫苗，为ASFV疫苗的临床应用和研发提供科学依据。利用pAdEasy-1系统构建融合表达ASFV CP530R基因和分支结核杆菌热休克蛋白70(Hsp70)的重组腺病毒(rAd-CP530R-Hsp70)。通过间接免疫荧光和Western blot验证目的蛋白的表达。将rAd-CP530R-Hsp70重组腺病毒免疫小鼠，检测小鼠体内产生的抗体和细胞因子水平。结果显示：重组腺病毒成功诱导小鼠产生针对pp62的特异性抗体，免疫后35 d抗体滴度达到1.33。免疫后小鼠脾细胞培养上清中IL-2、IL-4和IFN-γ水平显著升高，显示该疫苗能够有效激活体液和细胞免疫应答。构建的重组腺病毒疫苗可有效诱导小鼠产生免疫应答，为非洲猪瘟疫苗的研发提供数据支持。

河南某免疫过口蹄疫疫苗的猪场出现水泡样疫病，疑似感染A型塞内卡病毒(Senecavirus A, SVA)。本研究旨在分离鉴定该病毒，并进行遗传演化分析。将RT-PCR和FQ-PCR检测为核酸阳性的样品接种BHK-21细胞，并进行传代培养。通过间接免疫荧光试验、电镜观察、病毒全基因组序列测定等对该毒株进行鉴定，并进行演化分析。结果表明，该毒株为SVA，将其命名为HeNXX/swine/2017；电镜观察发现该病毒粒子呈典型的二十面体，直径30 nm左右；该毒株可在BHK-21细胞上高效增殖，病毒滴度最高为10^9.5TCID₅₀·mL^-1；基因组全长7 288 bp (不含PolyA)，与美国毒株同源性最高。本研究成功分离到一株SVA，为相关疾病的进一步研究提供基础。