N6-甲基腺嘌呤(N6-methyladenosine, m6A) 修饰是真核mRNA中普遍存在的一种动态可逆修饰, 对脂肪代谢调控具有重要作用。m6A修饰通过调节mRNA的稳定性、剪接、运输及翻译等过程, 参与脂肪细胞分化、脂质合成和分解等生物学过程。本文系统地综述了m6A修饰调控脂肪细胞分化、脂质合成和分解的作用机制, 旨在为调控动物脂质生成、提高肉品质、促进畜牧业发展提供新策略。

全球气候变暖导致气温逐渐升高，增加了猪对热应激的敏感性，进一步加剧了热应激带来的挑战。妊娠期环境对母猪及后代健康和发育至关重要。目前相关研究已逐渐关注到宫内热应激对猪生产性能的生物学效应，并开始阐明其遗传机制。母猪在高温下排汗功能不全、体温调节困难，并且妊娠期代谢需求增加，更易于发生热应激。宫内热应激条件下的妊娠母猪还会增加胎儿发育风险，并通过子宫内环境影响其后代，进而影响仔猪胚胎存活率、出生重等重要生产性能经济指标，造成经济损失。因此，本文聚焦于猪宫内热应激对母猪产后表型、生产性能、遗传及生殖等方面的影响，探讨其生理和遗传机制，以期为猪热应激的研究及耐热新品种的培育提供参考。

孵化是家禽业生产的重要一环。种蛋管理和孵化技术直接影响优良种源的扩繁效率和生产效益。在目前的家禽生产系统模式下，为了获得足够多同时孵化的种蛋，延长种蛋储存时间是不可避免的。种蛋的不恰当保存不仅对种蛋的孵化性能产生负面影响，还影响胚胎发育进程，甚至导致雏鸡质量的下降。因此，研究种蛋保存期间相关关键指标的变化规律，研发提高种蛋孵化率的处理技术引起了产业和研究人员的广泛关注。本文将综合已有的研究成果，探讨环境因素引起的种蛋保存期间的变化与提高种蛋孵化率处理技术的关系的最新进展，并展望未来研究方向，为提高家禽产业制种效率和生产效益提供理论基础。

随着高通量测序技术的快速发展和基因组研究水平的逐步深入，越来越多畜禽的基因组信息被公开，极大地推动了家畜重要经济性状在全基因水平上的研究。全基因组重测序技术被广泛运用于基因组选择、群体结构解析、遗传多样性评估、进化机制研究等领域，特别是在揭示由基因组序列变异如何影响经济性状方面表现出重要价值。本文旨在综述全基因组重测序技术在地方黄牛群体遗传结构、遗传多样性、起源进化、适应性性状和重要经济性状等研究中的应用进展，为地方黄牛种质资源的改良和保护提供了重要参考。

T-2毒素是一种广泛存在于谷物和饲料中的霉菌毒素，对人类和动物的健康构成严重威胁。本文旨在全面总结T-2毒素的来源、理化性质及其对雄性生殖系统的毒性作用，尤其是其在生殖过程中的机制与影响。本文回顾了T-2毒素通过氧化应激、线粒体损伤、细胞凋亡等途径对睾丸、精子质量及生殖内分泌系统的损害，还探讨了T-2毒素暴露对雄性动物睾丸间质细胞、支持细胞及精子生成的影响，并总结了抗氧化物质及天然解毒剂在减轻T-2毒素引起的生殖障碍中的潜在应用。通过分析T-2毒素的毒性机制，本文为未来研究提供了指导，为制定有效的防治策略和开发解毒药物提供科学依据，进而保障畜禽生殖健康及畜牧业的可持续发展。

超数排卵作为牛体内胚胎生产中的关键技术，不仅是获得胚胎的重要方法，也是其他胚胎工程技术的基础。在超数排卵生产体内胚胎的过程中，多种生殖激素被用来促进卵泡的发育和排卵，其中促卵泡素是至关重要且核心的激素之一。近年来，由于垂体提取促卵泡素产量的下降，市场对促卵泡素的需求却不断增加，这引发了越来越多研究者对重组类促卵泡素开发的研究以及其在牛超数排卵中效果的关注。本文基于促卵泡素蛋白结构以及蛋白改造工程相关理论基础，介绍了重组促卵泡的发展历程，同时综述了国内外近十年来重组促卵泡素应用于牛超数排卵相关的研究进展，还对其在牛超数排卵领域中的潜在关注点进行了深入思考。旨在为建立高效的重组促卵泡素超数排方案提供有价值的参考。

玉米赤霉烯酮(ZEN)及其衍生物在全球范围内对农作物及其制品构成了严重的污染问题，不仅影响农业生产和饲料安全，还对动物和人类健康构成威胁，导致机体免疫机能降低、生长受阻，诱发雌激素相关的疾病甚至癌症。因此，ZEN及其衍生物的毒害越来越受到广泛关注。但目前对ZEN衍生物的研究较少，本文对现有的ZEN及其衍生物毒性和减毒机制进行汇总，包括类雌激素作用、诱导器官损伤、引发细胞凋亡和自噬、诱发炎症、激活致癌基因以及DNA损伤等毒性机理，归纳了物理法、化学法和生物法对其的减毒机理。旨在为开发更加高效、安全的ZEN及其衍生物减毒药物提供参考。

油茶籽粕作为油茶籽提取茶油后的副产物，富含蛋白、脂肪、糖类等营养成分及皂苷类、黄酮类、蛋白酶、多糖和多酚等生物活性成分。这些功能成分具有显著的抗氧化、抗炎、抑菌、免疫调节、脂质代谢调节、降血糖和抗癌等功能。将油茶籽粕添加到畜禽饲料中，显示出提高畜禽生长性能、增强免疫力和改善肠道菌群结构与功能的巨大潜力。本文系统综述了油茶籽粕的生物活性成分及其生物学功能，并深入探讨了其在畜禽生产中的应用前景，为油茶籽粕在畜禽生产中广泛应用提供科学支撑。

奶牛瘤胃内栖息着数量庞大、种类繁多的微生物，其与身体形成了一种“互惠互利”的共生关系。其中短链脂肪酸(SCFAs)作为微生物的代谢产物，与微生物相互作用为机体提供营养，维持内环境稳定。本文阐述了SCFAs与奶牛瘤胃微生物的互作关系，重点关注其对奶牛瘤胃健康及稳态的影响，综述了奶牛瘤胃内SCFA调控内环境的作用机制，为SCFAs营养调控奶牛机体健康提供理论依据。

随着我国畜禽养殖业的快速发展，畜禽粪便排放量大、处理率低等问题日益严重。养殖场产生的臭气主要来源于畜禽的粪尿、污水、垫料等，这些气体不仅具有强烈的刺激性气味，还会损害畜禽的生产性能和健康。采取切实有效的措施来减少臭气的产生，对环境保护、动物的健康生长以及养殖业的可持续发展具有重要的意义。除臭方法有物理、化学和生物三种。其中，微生物除臭技术是利用微生物的生理代谢活动去除臭味物质的方法，相较于物理和化学除臭技术，其具有环保、安全、高效等优势。因此，微生物除臭技术展现出巨大的应用潜力和价值。本文阐述了畜禽养殖中臭气的来源和危害，不同除臭技术的特点及原理，并对微生物除臭技术在畜禽养殖中的应用进行了综述和展望，以期为微生物除臭技术的进一步研究提供参考。

心脏病已成为犬猫死亡的主要原因之一。影像技术，凭借其无创、便捷和高分辨率的显著优势被广泛应用于心脏病的临床诊疗中。然而，相较于人类，目前犬猫心脏影像检查仍以X线和超声为主，犬猫心脏成像技术发展较缓。为动物心脏病诊断提供借鉴和指导，以及推动犬猫心脏疾病动物模型的发展为人类心脏病诊疗提供临床前研究基础，本文综述了犬猫常见心脏病的影像学诊断新技术应用进展、特点和难点，并对其发展方向进行展望。

冠状病毒严重危害人类及动物健康，其基因组极易发生突变和重组，给冠状病毒病防控带来极大困难和挑战。除了安全高效的疫苗，急需广谱抗病毒药物。针对病毒复制依赖的宿主因子的抗病毒药物具有广谱性和不易产生耐药性的优点。脂筏是位于细胞膜表面的一类特殊脂质微结构域，也是多种病毒入侵宿主细胞的结合位点，在冠状病毒感染过程中起到至关重要的作用。本文就脂筏的结构和功能、冠状病毒入侵及其与脂筏的关联性、脂筏参与冠状病毒感染的研究、脂筏在冠状病毒病防治中应用的最新进展进行综述，旨在为冠状病毒治疗靶点的研发提供方向和参考。

旨在探究光周期对泰和乌鸡产蛋性能影响的分子机制。本试验选用80只体重相近的132日龄健康泰和乌鸡，随机分为对照组(CP组)和长光周期组(LP组)，每组设4个重复，每个重复10只鸡，试验时间为240 d。试验结束后，屠宰解剖并采集血清和卵巢组织，其中血清进行激素测定，卵巢组织进行HE染色、抗氧化水平检测及转录组(RNA-seq)分析。结果表明，延长光周期增加泰和乌鸡初级卵泡、次级卵泡、总卵泡(P＜0.01)、小白卵泡(P＜0.05)和大白卵泡(P＜0.05)的数目，但不影响小黄卵泡、大黄卵泡、等级卵泡和排卵后卵泡的数目(P＞0.05)；同时，延长光周期显著提高泰和乌鸡血清激素FSH、LH水平(P＜0.05)，而对E2、P4、PRL、Mel水平无明显影响(P＞0.05)，且延长光周期对卵巢自由基清除率、MDA、CAT和ROS水平无显著影响(P＞0.05)；卵巢转录组结果显示，两组间共筛选出230个差异表达基因(differentially expressed genes, DEGs)，主要富集在神经活性配体-受体相互作用(neuroactive ligand-receptor interaction)、色氨酸代谢(tryptophan metabolism)、昼夜节律(circadian rhythm)、GnRH信号通路(GnRH signaling pathway)等信号通路，其中APOLD1、KCNK3、RORC、SEMA6C等基因表达显著上调。以上结果提示，延长光周期激活泰和乌鸡原始卵泡，促进卵泡发育，增加各级卵泡数目，提高产蛋性能。

旨在探究连产性状的遗传特性并筛选适宜的指标改良肉种鸡繁殖性能。本研究以黄羽肉鸡GF33A系2个世代共计4 273只母鸡作为研究群体，以连产性状为研究对象，综合运用产蛋时间节点划分、遗传参数估计以及相对选择效率计算等方法，系统探究连产性状的遗传特性及其与产蛋数之间的遗传关系，进而筛选出用于改良产蛋数的连产性状选育指标。通过对产蛋率变化趋势的深入分析，划分出4个关键的产蛋时间节点，分别为35、43、51和63周龄。基于上述产蛋时间节点，定义了4个产蛋时期，并对这4个时期的连产性状进行遗传参数估计，同时计算它们与63周龄产蛋数的相对选择效率。结果显示，第一时期间歇次数(NP1)、第二时期连产次数(NC2)和第三时期连产次数(NC3)这3个指标具有较高的遗传力，与63周龄产蛋数的遗传关系强，且相对选择效率高。NP1、NC2和NC3可作为母鸡产蛋数选育的候选指标，通过负向选择的方式，间接实现全期产蛋数的改善，为肉种鸡繁殖性能的改良提供科学依据。

旨在探究产蛋后期蛋鸡蛋壳质量的变化及影响因素以提高蛋壳质量，减少禽蛋在交易过程中的损失。本试验选取体重相近、健康状况良好的产蛋高峰期(D280)及产蛋后期(D580)海兰白蛋鸡各60只，随机分为6个重复，每个重复10只，进行采样、检测和观察。首先采集两组的蛋各60枚检测蛋壳质量，利用扫描电子显微镜观察蛋壳超微结构的差异；随后每组随机取6只鸡，采集蛋壳腺组织，一部分制作石蜡切片用于蛋壳腺组织结构的观察，一部分提取RNA用于检测蛋壳腺组织OC-17、OC-116、OCX-32基因表达水平。结果表明，与产蛋高峰期蛋鸡相比，产蛋后期蛋鸡存在下列变化：①蛋壳厚度、蛋壳强度、蛋壳百分比、蛋壳有效厚度分别降低了8.33%、9.98%、5.15%、4.17%；②蛋壳超微结构显示，蛋壳乳突间隙的宽度、乳突宽度及乳突层的有效厚度显著增加；③蛋壳腺绒毛长度显著降低，相邻两绒毛之间的宽度显著增加；④蛋壳腺OC-17、OC-116、OCX-32基因表达量显著下调。以上结果提示，产蛋后期蛋鸡蛋壳腺组织结构的变化可能导致了蛋壳腺分泌能力的下降，影响了子宫液中矿物质离子的浓度。同时，蛋壳腺组织中OC-17、OC-116、OCX-32基因表达量的显著下调表明蛋壳腺矿物质沉积能力下降，两方面的因素共同影响了蛋壳在蛋壳腺中的矿化过程，使蛋壳超微结构发生了改变，导致蛋壳质量下降。

旨在评估基于基因组标记的机器学习(machine learning, ML)算法在品种分类中的有效性，检验不同ML算法在绵羊品种分类中的应用效果如何。本研究采用2种方式对10个绵羊品种进行单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms, SNPs)位点选择，第一种利用群体间分化指数(fixation index, F_ST)进行选择，第二种方式是在F_ST的基础上使用Boruta特征选择算法对SNPs位点进一步筛选。采用K-近邻、支持向量机(support vector machines, SVM)和自适应增强(adaptive boosting, AdaBoost)等8种不同类别的ML算法对绵羊品种进行分类，采用准确性评估不同SNPs选择方式和不同ML算法在品种鉴定中的差异，鉴定绵羊品种分类的最佳组合方式。本研究采用的数据中既有遗传关系较远的品种，也有遗传相似的品种，保证了后续分析的可靠性。根据前1%的筛选标准，F_ST分析每次筛选出5 361个SNPs位点，Boruta算法最终保留(328±11.7)个SNPs位点用于ML品种分类，且在多次迭代后，被标记为“确认”的SNPs位点得分稳定高于阴影特征和被标记的其他两类SNPs位点。Boruta算法保留的SNPs位点数远低于F_ST分析。在使用ML模型进行品种分类时，大多数模型的准确性均高于0.9。其中，经过Boruta算法选择SNPs位点之后使用SVM模型进行品种分类准确性最高(0.953)，AdaBoost表现也同样优秀(0.947)，仅使用F_ST选择SNPs位点之后使用NB模型分类效果最差(0.601)。除NB外，其余模型接收者操作特征曲线下面积均接近于1。无论使用哪种SNPs选择方式均具有较强的区分能力，使用Boruta算法后效果略好。根据上述结果表明，ML方法的实施有效提高了品种分类的准确性，在绵羊品种鉴定中有良好的应用潜力。

旨在对湖羊SNP芯片基因分型结果进行选择信号检测，探索湖羊的种群结构，挖掘与湖羊重要经济性状相关的候选基因，为进一步创新利用湖羊品种提供理论基础。本研究对高繁殖湖羊群体中396只个体(320只母羊、76只公羊)使用绵羊50K SNP芯片进行基因分型。经质控后对所选湖羊群体进行主成分分析与亲缘关系评估。通过整合单倍体型得分(iHS)、中性检验统计量(Tajima’s D)、复合似然比检验(CLR)和连续性纯合片段(ROH)四种选择信号方法综合筛选候选区域并进行基因注释，通过GO-KEGG富集分析、NCBI数据库、检索文献及GWAS ATLAS数据库确定候选基因的功能。主成分分析结果显示，大部分湖羊个体集中分布，亲缘关系结果表明湖羊个体间亲缘关系较远，湖羊群体平均近交指数F_ROH=0.010 3，表明湖羊种群近交水平较低，同时ROH分析结果显示绝大多数ROH片段为 < 10 Mb的短ROH片段，说明湖羊在较远世代发生过近交。设置群体内iHS、Tajima ’s D、CLR以及ROH结果的top5%为受选择区域，共找到45.86 Mb的候选区域，约占绵羊参考基因组的1.75%。经基因注释后iHS检测到1 424个基因，Tajima ’s D检测到760个基因，CLR检测到964个基因，ROH检测到647个基因，取两种及以上方法得到的基因交集部分挖掘到337个候选基因。GO-KEGG富集结果显示，GO分析富集(P < 0.05)到角质化、中间长丝组织和骨骼系统发育等条目，KEGG分析富集(P < 0.05)到ECM受体相互作用、致心律失常性右心室心肌病与GnRH分泌等通路。功能注释发现65个与重要经济性状相关的候选基因，其中大部分候选基因与生长和繁殖性状相关。本试验对湖羊高繁单群体进行分析，筛选出与湖羊生长性状相关的基因包括：初生重(CAPN3、ERLEC1、LAP3)、骨骼发育(ACAN、COL5A2、HAPLN1、HAPLN3)、肌肉发育(FLVCR1、MUSTN1、PDLIM5)、饲料转化率与采食量(PLIN1、CCSER1、LAP3)和体尺(CSMD3、GPC6、LCORL)等，与湖羊繁殖性状相关的基因包括产羔数(BMPR1B、GPRIN3、HCRTR1、MEPE、MAST4)等，以及与其他经济性状相关的基因，对提升湖羊品种选育效率，优化绵羊品种选育方法提供了一定的理论依据和技术支撑。

为探究鹅肥肝形成的分子机制，利用4D-DIA定量蛋白质组学技术分析了3个不同填饲阶段的朗德鹅肝脏样品。本研究选取同批次体况相近的70日龄朗德鹅，分别在填饲前期(7 d)、填饲中期(16 d)、填饲后期(25 d)随机选取3只鹅屠宰，采集肝大叶肝尖组织样，用于4D-DIA定量蛋白组学分析，共3组，每组3个生物学重复。结果：1)在3个不同填饲阶段的朗德鹅肝脏共鉴定出5 208个蛋白。2)通过主成分分析发现，3个填饲阶段鹅肝脏蛋白谱存在明显差异，填饲前期与中期鉴定出449个差异蛋白，中期与后期鉴定出303个差异蛋白。3)通过代谢通路分析发现，鹅肥肝形成过程中发生显著变化的通路主要涉及类固醇激素生物合成、脂肪细胞因子信号通路、氨基糖和核苷酸糖代谢、半胱氨酸和蛋氨酸代谢、花生四烯酸代谢、氨基酸的生物合成等，并利用荧光定量PCR技术筛选了关键差异基因ADIPOQ、PASK。填饲导致鹅肝脏蛋白组谱发生显著变化，与类固醇激素生物合成、脂肪细胞因子信号通路等相关的蛋白可能参与到了鹅肥肝形成的分子调控。

旨在探究西藏自治区10个黄牛群体的线粒体基因组遗传多样性及其母系起源。本研究通过线粒体基因组序列比对对西藏自治区10个黄牛群体的167个个体的线粒体基因组序列进行分析，重点探究其线粒体基因组遗传多样性及其母系起源。通过系统发育学和遗传多样性分析，检测到167个黄牛拥有120种单倍型，其中包括普通牛的T2、T3和T4单倍型，原牛的Q单倍型；瘤牛的I1和I2单倍型；以及牦牛的单倍型。T3单倍型还包括T3₁₁₉和T3₀₅₅两个东亚普通牛特异的亚单倍型。线粒体基因组遗传多样性分析结果显示，巴桑牛的单倍型多样度最高，为0.990±0.028，白朗牛的最低，为0.867±0.107；核苷酸多样度最高的为吉隆牛0.030±0.000 5，最低的为日喀则牛0.001±0.000 2。系统发育树和单倍型网络图表明，10个黄牛群体主要为普通牛母系起源，有少量牦牛及瘤牛母系起源。总体而言，10个黄牛群体均具有较高的遗传多样性，具有普通牛、瘤牛和牦牛的母系起源，表明这10个黄牛群体母系遗传多样性丰富，并且和牦牛之间存在基因交流。这些结果对于深入理解西藏自治区黄牛的遗传演化机制以及合理保护和利用这一珍贵遗传资源具有重要意义。

旨在利用大规模群体数据分析泌乳牛各类健康问题对其繁殖、产奶和淘汰的影响。本研究统计了来自宁夏地区13个牧场2015—2021年的58 549头泌乳牛，25类健康性状(包括6类整合性状和19类直接性状)，4种繁殖性状，5种产奶性状和淘汰数据。采用SAS 9.2的GLM过程分析健康问题对奶牛重要经济性状的影响；利用Logistic回归模型分析健康问题对奶牛淘汰的影响。研究结果显示，健康问题的发生使奶牛产犊至产后首次配种间隔延长1.51 d，首末次配种间隔增加13.24 d，空怀天数增加15.42 d和产犊间隔增加14.92 d。直接性状中，子宫内膜炎、肠炎和蹄病对繁殖性能的负面影响较大。健康问题发生的频次对奶牛繁殖性能的负面影响显著。相同健康水平下，初产牛的繁殖性能均优于经产牛。初产牛产犊至产后首次配种间隔和空怀天数对健康问题的敏感性高于经产牛。临床乳房炎、早产流产、腹泻和真胃变位对奶牛产奶性能影响最明显，使305天产奶量减少1 225.99~2 416.48 kg，高峰产奶量减少6.29~8.52 kg，日乳蛋白量减少0.14~0.22 kg·d^-1，日乳脂量减少0.16~0.22 kg·d^-1。健康问题发生频次和类型同样对奶牛产奶性能有显著的负面影响。经产牛305天产奶量、高峰产奶量、日乳蛋白量和日乳脂量对健康问题的敏感性高于初产牛。各类健康问题均显著增加了泌乳牛的淘汰风险(1.45~17.81倍)，蹄底角质裂开使奶牛的淘汰风险增加17.81倍。本研究基于大规模牛群健康记录，发现奶牛各类健康问题均严重影响其生产性能，发生频次和类型数越多影响越显著，初产牛和经产牛生产性能对不同健康问题的敏感性不同。本研究探讨了奶牛健康问题的重要性，明确了各类健康问题对重要经济性状的具体影响程度，为牧场管理提供理论参考，并为奶牛抗病选育的研究提供理论依据。

旨在探讨谷氨酰胺在绵羊精子冷冻保护过程中的作用机制。本研究使用6头2~4岁健康的成年湖羊精液，检测冷冻解冻后的精子活力、质膜和顶体完整性、线粒体膜电位、ATP含量、α-酮戊二酸脱氢酶活性和异柠檬酸脱氢酶活性及精子HSP70、HSF1及pHSF1蛋白表达。结果表明，在冷冻稀释液中添加谷氨酰胺能够显著提高绵羊精子总活力(P < 0.05)。5 mmol·L^-1谷氨酰胺组解冻后精子活力、质膜和顶体完整性、线粒体膜电位、ATP含量、α-酮戊二酸脱氢酶和异柠檬酸脱氢酶活性均显著高于对照组(P < 0.05)。谷氨酰胺显著提高了解冻后精子HSP70和pHSF1的表达(P < 0.05)，HSF1的抑制剂DTHIB抑制了这一过程，并显著降低了解冻后精子的总活力(P < 0.05)，通过外源补充HSP70蛋白可以抵消DTHIB的抑制作用，并显著降低DTHIB处理导致的精子总活力降低(P < 0.05)。本研究通过检测绵羊解冻后精液的各质量参数，发现谷氨酰胺可通过上调冷冻-解冻精子中HSF1蛋白的磷酸化水平、提高HSP70蛋白的表达、保护线粒体功能，进而改善绵羊精子的冷冻保存效果。

旨在探究GnIH对小鼠颗粒细胞增殖、凋亡以及雌激素分泌水平的影响。本研究选取健康的21~23 d雌性ICR小鼠，分离小鼠卵巢GCs，利用FSHR进行鉴定，并采用qRT-PCR对小鼠颗粒细胞中GnIH和GnIH-R基因进行检测。构建pshRNA-1, 2, 3, 4干扰质粒载体和pLV-GnIH过表达质粒载体对GnIH基因分别进行干扰和过表达(GnIH干扰组分为：pshNC组和pshRNA1~4组，GnIH过表达组分为：PLV-NC组和PLV-GnIH组)。采用慢病毒滴度检测和qRT-PCR方法检测干扰和过表达效率，利用MTT法检测干扰和过表达GnIH后小鼠颗粒细胞增殖变化情况，采用Annexin V-FITC/PI流式细胞仪检测小鼠卵巢颗粒细胞的凋亡情况，并采用ELISA检测GCs培养液上清中孕酮和雌二醇的分泌水平，以上结果均重复3次。结果发现，在转染48 h和96 h时pshRNA-1, 2, 3, 4均能够极显著地干扰GnIH的表达(P＜0.01)，而在72 h时只有pshRNA-4能够极显著地下调GnIH的表达(P＜0.01)；72 h时pLV-GnIH能够极显著上调GnIH的表达(P＜0.001)。过表达GnIH后颗粒细胞增殖活力极显著下调(P＜0.001)，且能促进细胞凋亡(P＜0.001)，极显著抑制小鼠颗粒细胞雌激素的分泌(P＜0.001)。而转染pshRNA-2, 4 72 h和96 h时则极显著上调颗粒细胞增殖活力(P＜0.1)和雌激素的分泌(P＜0.05)，且显著抑制颗粒细胞凋亡(P＜0.05和P＜0.01)。本研究发现，GnIH能够抑制小鼠卵巢颗粒细胞增殖，促进颗粒细胞凋亡，降低雌激素的分泌水平。

猪表皮生长因子(pEGF)与三叶因子协同给药已被证明能有效促进猪的肠道增殖与修复。本研究旨在构建食品级重组乳酸乳球菌强组成型表达系统并将其用于融合表达pEGF以及对猪肠道有益生作用的鼠李糖乳杆菌衍生蛋白p40，以克服目前乳酸乳球菌重组表达中组成型表达量低的现状以及避免抗生素使用的问题，并初步探索一种更强效的猪肠道益生制剂。首先，通过金黄色葡萄球菌核酸酶报告系统，以常用乳酸乳球菌组成型启动子P32为对照，从乳酸乳球菌NZ9000组成型高表达蛋白质的启动子以及前人研究发现的乳酸乳球菌强组成型启动子中，可视化地筛选出乳酸乳球菌NZ9000的伸长因子Tu的启动子(P1)活性最强。进一步地，将pNZ8148的氯霉素抗性基因替换为乳链菌肽抗性基因，成功构建了具有良好的乳链菌肽耐受性且完全失去氯霉素抗性的食品级重组乳酸乳球菌强组成型表达系统NZ9000/pP1NR。同时，本研究利用该系统成功表达pEGF和融合蛋白pEGF-p40。细胞增殖试验结果显示，含有pEGF-p40的菌株培养上清更有效地促进猪小肠上皮细胞IPEC-J2的增殖。通过qRT-PCR检测了刺激后IPEC-J2细胞的SGLT-1、GLUT-2、SUC、EGFR和GLP2R，结果显示含有pEGF-p40的培养上清调节相关基因的表达情况不同于仅含有pEGF的培养上清。本研究构建了食品级重组乳酸乳球菌强组成型表达系统，成功表达了对猪肠道具有益生作用的pEGF-p40，为其他益生物质的安全生产提供借鉴，为开发一种强效的猪肠道益生制剂做了先行探究。

旨在分离与鉴定猪轮状病毒(PoRV)的流行毒株，对其基因组序列的遗传变异以及病毒致病性进行分析。选择PoRV阳性的腹泻仔猪小肠样品，处理后接种于MA104细胞进行分离培养，通过病毒核酸检测、血清学检测和形态学观察对细胞培养物进行鉴定。利用RT-PCR和测序获得全基因组序列，比较分析其遗传进化关系，并对该分离株的致病性进行评估。结果表明，成功分离出了1株可在体外培养的PoRV毒株，将其命名为HLJ/2021，其基因型为G5-P[7]-I5-R1-C1-M1-A1-N1-T1-E1-H1型。致病性试验结果表明，该分离株能够导致仔猪出现水样腹泻、消瘦等症状，在感染后60~174 h，可在仔猪粪便中检测到病毒；剖检观察到感染仔猪肠壁变薄，内容物呈水样，病理组织学检测可见感染仔猪回肠肠绒毛高度萎缩；肠组织中病毒载量检测结果显示，回肠、盲肠、结肠和直肠中均可检测到病毒，其中回肠中病毒载量最高。综上所述，本研究成功分离1株G5P[7]型PoRV毒株，其对仔猪具有致病性。该结果为了解PoRV的流行情况提供了重要信息。

旨在探讨黄芩苷对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的体外抑制作用。利用实时定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)、间接免疫荧光(IFA)、半数组织培养感染剂量(TCID₅₀)等试验观察黄芩苷对PRRSV感染阻断、直接杀灭、增殖抑制3种作用方式；吸附、内化、复制、释放4个复制环节以及与PRRSV病毒粒子直接相互作用的影响。结果发现，黄芩苷在不同作用方式下均可抑制PRRSV复制，感染阻断4 h时抑制作用显著(P < 0.05)；黄芩苷可以抑制PRRSV复制过程各个阶段，吸附和内化阶段抑制效果显著(P < 0.05)，且呈剂量依赖；黄芩苷可直接与PRRSV病毒粒子相互作用，抑制PRRSV复制(P < 0.05)。综上，黄芩苷在体外对PRRSV的复制具有抑制作用。

本研究旨在筛选口蹄疫病毒(foot and mouth disease，FMDV)负链RNA复制过程中与3′UTR结合的宿主蛋白。首先，通过RNA pull down结合质谱，鉴定出与3′UTR负链结合的宿主蛋白。对质谱鉴定到的蛋白结果进行GO功能注释分析、KEGG通路富集分析和互作网络筛选分析，并构建真核表达质粒以及原核表达质粒，表达该互作蛋白来验证RNA与蛋白的互作特异性。其次，截短3′UTR探究RNA与蛋白的互作区域，最后利用Co-IP探究宿主互作蛋白与病毒蛋白的互作关系。结果发现与3′UTR互作结合的蛋白多为核仁蛋白，其中以DEAD-box RNA解旋酶蛋白家族的Ddx18蛋白作为重点研究对象。通过构建该蛋白的真核表达载体，利用RNA pull down、RIP, 以及EMSA证实Ddx18确实与3′UTR负链互作。转录出截短的3′UTR负链RNA，利用RNA pull down试验得出Ddx18与3′UTR负链的互作不依赖poly(U)，且不与截短后的SL1和SL2互作。利用Co-IP试验证明2C病毒蛋白能与Ddx18蛋白互作。综上，3′UTR与Ddx18蛋白的互作可能基于RNA的空间结构，而2C病毒蛋白与Ddx18蛋白结合，提示2C可能间接结合3′UTR而共同形成复制复合物参与到FMDV的复制中。通过筛选与3′UTR负链互作的宿主蛋白，为进一步探究FMDV复制相关机制从而研究相关药物靶点奠定实验基础。

本研究旨在对制备的Eudragit L100修饰的铝锰双金属有机框架纳米粒作为灭活猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus，PEDV)口服递送载体进行评价。利用金属离子Al³⁺、Mn²⁺和2-氨基对苯二甲酸有机配体之间的配位作用，将灭活PEDV原位封装Al/Mn-MOF中, 得到Al/Mn-MOF@PEDV纳米粒。通过静电相互作用，将阴离子聚合物Eudragit L100结合于Al/Mn-MOF@PEDV纳米粒表面，得到L100@Al/Mn-MOF@PEDV纳米粒。采用扫描电子显微镜考察其形态、纳米粒度电位仪测定表面电势、傅里叶红外光谱仪分析组成成分、X射线衍射仪测定晶格结构。采用ELISA和抗原检测卡表征对灭活PEDV的负载效率。配制模拟胃液考察L100@Al/Mn-MOF@PEDV纳米粒的稳定性，并用ELISA测定灭活PEDV的释放率。使用激光共聚焦观察巨噬细胞对Al/Mn-MOF@PEDV纳米粒的摄取。采用CCK8法测定不同浓度的纳米粒的细胞毒性。采用ELISA试剂盒测定Al/Mn-MOF@PEDV纳米粒对巨噬细胞分泌免疫调节因子的影响。结果表明，L100@Al/Mn-MOF@PEDV纳米粒成功制备，尺寸小于1 μm。在PEDV/金属离子/有机配体投料比为0.42 ∶1 ∶1时，对灭活PEDV的负载率可达到99.6%。L100@Al/Mn-MOF@PEDV在模拟胃液中孵育2 h仍具有高稳定性，对灭活PEDV的释放率仅为12.73%左右。在小鼠RAW264.7细胞的摄取试验中，用激光共聚焦观察到细胞对Al/Mn-MOF@PEDV摄取情况优于未经负载的灭活PEDV。且Al/Mn-MOF@PEDV能够显著增强RAW264.7细胞中Th1型因子IFN-γ和Th2型因子IL-4的表达。本研究为PED灭活疫苗口服载体的设计提供了新思路，并为后续应用于动物免疫的研究奠定基础。

本研究旨在开发一种猪瘟E2纳米颗粒疫苗，并对其免疫原性进行分析。以猪瘟病毒石门株E2基因序列为模板，对其胞外域进行人源密码子优化，通过293F哺乳动物细胞真核表达系统制备E2、E2-pFc(E2与猪源抗体的Fc片段融合表达)、SpyTag-E2(E2与SpyTag融合表达)以及纳米骨架蛋白LS(lumazine synthase-protein A)，原核表达系统纯化纳米骨架蛋白mi3(mi3-SpyCatcher)，进一步组装成纳米颗粒LS-E2-pFc NP和mi3-E2 NP，并通过透射电镜和动态光散射试验进行鉴定，各组蛋白分别与ISA201佐剂乳化，制备亚单位疫苗。选用1.5~2.0 kg重的日本长耳大白兔35只，随机分为7组，包括空白对照组(n=3)、PBS阴性对照组(n=3)、E2组(n=5)、E2-pFc组(n=5)、LS-E2-pFc NP组(n=5)、mi3-E2 NP组(n=5)和CSFV E2商业化亚单位疫苗组(n=3)。于0、21 d进行肌肉注射免疫，42 d将CSFV C株经耳缘静脉按照100 RID₅₀ ·只^-1进行攻毒，通过阻断ELISA、中和试验、体温监测和RT-qPCR等试验评估兔的特异性抗体水平、中和抗体水平、兔体定型热反应以及脾脏病毒载量。结果显示，各组分蛋白成功表达，纯化后的蛋白条带单一，纯度较高。透射电镜可观察到粒径在10~70 nm的纳米颗粒结构，动态光散射试验观察到mi3-E2平均粒径(68 nm)大于mi3(42.73 nm)，LS-E2-pFc平均粒径(42.4 nm)大于LS(13 nm)。免疫试验结果表明，E2、E2-pFc、LS-E2-pFc NP、mi3-E2 NP疫苗和商业化亚单位疫苗均有良好的免疫效果，攻毒前7 d，血清中特异性抗体阻断率均在89%以上，组间差异不显著(P>0.05)。攻毒后，PBS阴性对照组出现典型的兔体定型热反应，其余免疫组的体温变化不明显；攻毒后7 d，E2、E2-pFc、LS-E2-pFc NP、mi3-E2 NP疫苗和商业化亚单位疫苗组的中和抗体效价分别为1 ∶10 392.4、1 ∶37 168.4、1 ∶75 473.6、1 ∶20 201.8、1 ∶2 407，其中，LS-E2-pFc NP组的中和抗体水平最高。RT-qPCR结果显示，E2组有一只兔检出低拷贝的病毒载量，拷贝数为5.83 copies ·μL^-1，其余免疫组未检到病毒载量。以上结果显示LS-E2-pFc NP免疫组效果最好，中和抗体水平最高。这种“标记”疫苗可以对自然感染和免疫接种的动物进行鉴别诊断，有助于猪场净化猪瘟。

牛溶血性曼氏杆菌(Mannheimia haemolytica，Mh)是引起牛呼吸道疾病(bovine respiratory disease，BRD)的最主要病原之一，严重影响牛群的健康养殖及食品安全。本研究采集了伴有发热、流鼻涕等呼吸道症状的犊牛鼻拭子进行细菌分离培养，并对分离株进行血清型鉴定、16S rRNA测序分析和PCR分型，测试了分离菌株对15种抗生素的耐药表型；同时通过小鼠死亡率以及临床剖检结果对小鼠作为Mh替代动物感染模型的可能性进行评估，构建小鼠细菌感染模型，并评估了分离株的致病性与免疫原性。结果显示：分离株纯化后经鉴定为A6型牛溶血性曼氏杆菌，将其命名为KQ-Mh-1。该菌株对阿米卡星、美洛西林、庆大霉素、链霉素、阿莫西林和磺胺异恶唑等多种药物耐药，对头孢噻肟、诺氟沙星、头孢哌酮、环丙沙星、多黏菌素、新霉素和多西环素表现出较高的敏感性。分离株KQ-Mh-1对BALB/c小鼠的半数致死量(LD₅₀)为7.29×10⁹ CFU ·mL^-1，感染死亡小鼠均表现为肺脏、脾脏严重出血。将KQ-Mh-1制备成不同抗原含量的灭活疫苗进行其免疫原性评估，其中高抗原含量(2.5×10¹⁰ CFU ·mL^-1)的灭活疫苗免疫小鼠后对于A6型溶血性曼氏杆菌的攻毒具有70%的保护率。本研究成功分离出一株可导致牛BRD的Mh菌株，并对其生物学特性、致病性和免疫原性进行探究，为牛BRD疫苗的研发提供了良好的疫苗候选菌株。

旨在了解奶牛乳腺炎源粪肠球菌的耐药特征和毒力情况，本研究对107株患乳腺炎源粪肠球菌进行药物敏感性试验、耐药基因和毒力基因的检测；选取粪肠球菌F2为代表菌株，对该菌株进行全基因组测序和生物学特性研究，进一步用感染复数(MOI)为1 000的肠球菌JH2-2和粪肠球菌F2感染奶牛乳腺上皮细胞(BMECs)，检测F2菌株对BMECs的黏附、入侵能力和菌株对BMECs增殖和损伤的影响；最后建立大蜡螟幼虫感染模型，通过幼虫生存率和病理组织切片两个方面验证该菌株对幼虫组织损伤的病理学特征。结果表明，乳腺炎源粪肠球菌对林可霉素、四环素、红霉素耐药率最高，为100%~90%；分离菌株中有95株粪肠球菌检测出携带耐药基因，84株粪肠球菌检测出携带毒力基因，耐药基因携带率最高的是ermB(91.6%)，毒力基因的携带率最高的是esp(78.6%)。对F2菌株全基因测序结果显示该菌株对林可酰胺类、大环内酯类、喹诺酮类等23类抗生素耐药，存在3个携带耐药基因的接合转移元件(ICE)和efaA、gelE、ace、AS等91个相关毒力因子。F2菌株具有较强的环境耐受性，在高温、酸性和碱性环境下存活率较高，具有运动能力和较强的生物膜形成能力(OD_{570 nm}值＞2 ODc)，细菌侵染BMECs 6 h后，F2菌株对BMECs的黏附、入侵能力极显著(P＜0.001)高于对照组，随着时间的推移F2菌株对BMECs的毒性增加，细胞损伤严重、死亡数量增加；F2感染大蜡螟幼虫1 d后，幼虫死亡率为100%，幼虫体内有大量炎性细胞浸润且体腔破坏严重。本研究显示，乳腺炎源粪肠球菌耐药性严重，存在多重耐药现象，可引起BMECs的损伤；该试验结果为后续研究乳源粪肠球菌耐药性和致病性的传播提供实验基础。

旨在探究多杀性巴氏杆菌致病性的分子基础。本试验测定了兔源A型多杀性巴氏杆菌Pm3株和Pm6株的致病性，并进一步对其进行全基因组测序和比较基因组学分析。攻毒试验结果显示，Pm3和Pm6滴鼻攻毒后不仅能使试验兔产生严重的化脓性胸膜肺炎，还能导致试验兔的高死亡率。比较基因组学分析结果显示，Pm3和Pm6的基因组都比兔源低毒力多杀性巴氏杆菌s4株和AH09株的大。与s4和AH09相比，在Pm3和Pm6的基因组中鉴定到约120个具有重要生物学功能的特有基因，且有约100个这些特有基因也存在于兔源强毒力多杀性巴氏杆菌的基因组中。此外，不同动物源多杀性巴氏杆菌基因L3型脂多糖核心寡糖外核合成酶基因natC和gatF的序列存在多态性，但兔源菌株(除SD11、CIRMBP-0873和CIRMBP-0884外)的这两个基因序列却完全一致，表现出一定的宿主特异性。Pm3和Pm6均为强毒力菌株。在Pm3和Pm6基因组中鉴定到的存在于兔源强毒力菌株基因组中但不存在于兔源低毒力菌株基因组中的基因可能在Pm3和Pm6的致病过程中发挥重要作用。

近年来，人与动物感染弓形虫的风险因素增多，因此对弓形虫流行情况的调查愈加重要。鉴于镧系微球荧光寿命长、stockes位移大、光稳定性强等特点，本研究将其应用于血清中弓形虫抗体的检测。为提高检测准确性，以可溶性表达的SAG1、SAG2、GRA1的三种抗原的混合液为包被原，以荧光微球标记SPA为探针，以间接免疫侧流层析法研制检测弓形虫抗体试纸条，优化了上样方式、微球血清共孵育时间、反应时间等条件，考察了试纸条的特异性、灵敏性、重复性及可靠性。结果显示，制备的镧系微球免疫层析试纸条特异性好，与其他病原感染血清无交叉反应；灵敏度高，阳性血清稀释1 600倍仍可被检出；反应快速，最快10 min即可获得结果；稳定可靠，通过血清样本检测，Kappa分析揭示了镧系微球试纸条检测方法和ELISA之间有较好的一致性。本研究为弓形虫抗体检测提供了快速、灵敏、可定量的镧系微球免疫层析检测方法。

本研究旨在制备禽4型腺病毒(fowl adenovirus type 4，FAdV-4)的单克隆抗体，鉴定其特异性结合位点，并评估其在免疫组化(immunohistochemistry，IHC)和免疫沉淀反应中的应用价值。使用纯化的FAdV-4-AH-F41株全病毒免疫小鼠，通过间接酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)方法筛选出一株阳性杂交瘤细胞并进行亚克隆，并对所制备的单克隆抗体进行效价检测。利用间接免疫荧光(indirect immunofluorescence assay, IFA)与蛋白免疫印迹(Western blot)方法鉴定单克隆抗体生物学特性，构建了pCold TF-Hexon、pET-32a(+)-Fiber1、pCold TF-Penton、pCold TF-Fiber2的原核表达载体，并通过Western blot初步鉴定所得单克隆抗体的特异性结合位点，在检测出抗体的亚型后，将其初步应用于IHC和免疫沉淀试验。结果表明本试验获得1株稳定分泌抗Fiber1蛋白的单克隆抗体，并将其命名为5C7。该抗体效价为1∶102 400，亚型为IgG-2b，表现出良好的生物学特性。在IHC中，能够观察到明显的病变特征；在免疫沉淀试验中，5C7可作为捕获抗体，与病毒感染细胞中的Fiber1蛋白特异性结合。结果提示，本试验通过全病毒粒子免疫小鼠所制备的单克隆抗体能够特异性识别Fiber1蛋白，并在IHC和免疫沉淀反应中显示出良好的应用前景，为FAdV-4实验室病理诊断方法的建立和Fiber1蛋白的功能研究奠定了基础。

赛鸽养殖中，普遍存在抗生素滥用现象，造成耐药菌株增加，多重耐药性加剧。本研究旨在了解通辽市赛鸽源大肠杆菌耐药性及耐药基因流行情况，为赛鸽源大肠杆菌病临床治疗提供参考。使用大肠杆菌鉴别培养基，16S rRNA测序等方法对通辽地区送检腹泻赛鸽粪便病原菌进行分离纯化。通过药敏试验及耐药基因的PCR检测了解分离菌株的耐药性及耐药基因分布情况。对两株耐药性较强的大肠杆菌进行全基因组测序分析。结果显示：分离得到8株赛鸽源大肠杆菌，均为多重耐药菌株，其中卡那霉素和链霉素耐药率均为100%，全部菌株对头孢哌酮/舒巴坦敏感。E-ge1，E-ge2耐药性严重，对两株菌进行全基因组测序分析，获得完整基因组序列，两株菌基因组长度分别为4 680 817 bp与4 691 799 bp，分别编码4 888与5 070个基因，两菌株均携带3个质粒。E-ge1共携带81个耐药基因，E-ge2携带74个耐药基因。通辽地区赛鸽源大肠杆菌耐药形势严峻，菌株携带大量耐药基因，应优化用药策略，控制耐药性的加剧和耐药基因的传播。

非洲猪瘟(African swine fever，ASF)是由非洲猪瘟病毒(African swine fever virus，ASFV)引起的猪的一种急性、烈性和高度接触性传染病，2018年8月ASFV首次传入我国，给养猪业带来灾难性打击。为明确我国分离获得的ASFV CN2018株的病理损伤特征，本文对一例人工感染猪主要脏器进行病理学观察。试验猪在人工感染ASFV CN2018株后第11天死亡，对尸体进行系统剖检和组织病理学检查。大体剖检可见皮肤、全身淋巴结、肾脏、膀胱、盲肠、胆囊、心脏、大脑等脏器表面或浆膜面分布出血斑点，胸腔和腹腔积血，肺脏淤血、水肿，呈全身出血性败血症病变。镜检病变以弥漫性出血和淤血为主，伴微血栓形成，淋巴结和脾脏中淋巴细胞严重缺失。免疫组化染色结果显示，巨噬细胞、肾小管上皮细胞及肝细胞胞质中呈ASFV抗原阳性。综上，ASFV CN2018株人工感染猪表现广泛性出血性病变，损伤的主要靶器官及抗原分布与之前报道类似。推测ASFV感染引起的广泛性出血主要与单核巨噬细胞系统激活损伤导致的炎症因子风暴及血管内皮细胞损伤有关，为深入研究我国ASFV流行毒株的致病机制提供了理论数据。

本研究旨在对不同类型犬卵巢肿瘤进行病理学诊断，总结分析其组织病理学特征，为犬卵巢肿瘤精准诊断提供参考。回顾性选择中国农业大学动物医学院国家牛传染性海绵状脑病检测实验室2013—2023年间诊断的犬卵巢肿瘤病例及其详细病例信息，进行组织病理学诊断，并对病例特征、发病情况进行总结归纳。结果显示：诊断卵巢上皮性肿瘤7例，其中卵巢乳头状腺瘤4例，卵巢乳头状腺癌1例，卵巢网腺瘤1例，卵巢网囊腺瘤1例；诊断卵巢性索间质瘤8例，其中卵巢颗粒细胞瘤3例，卵泡膜细胞瘤1例，黄体瘤4例。11岁以上患犬占所有病例33.3%。综上，卵巢上皮性肿瘤与性索间质瘤发病率相当，发病率最高的上皮性肿瘤为卵巢乳头状腺瘤，性索间质瘤中黄体瘤和颗粒细胞瘤均常发；老龄犬患病率高，且患病率随年龄增长而增加；卵巢肿瘤的发生与犬类品种无明显相关性。

本研究探索了谷胱甘肽(glutathione，GSH)对镉(cadmium，Cd)所引起的PK-15细胞损伤的修复功能及其背后的作用机制。本研究主要针对猪肾PK-15细胞，利用MTT检测、光学显微镜观察、透射电镜观察、JC-1染色、彗星试验和流式细胞术等多种研究方法，检测GSH对Cd所造成的细胞氧化损伤及细胞凋亡的修复作用。结果显示，GSH显著缓解了Cd引起的PK-15细胞活性下降，维持ROS的稳态，从而缓解DNA和线粒体损伤及细胞凋亡等现象。Western blot结果表明，GSH可能通过上调抑制凋亡蛋白Bcl-2的表达、下调促凋亡蛋白Bax的表达，进而对Cd诱导的PK-15细胞凋亡产生抑制作用。综上所述，GSH可以通过抑制氧化应激反应和减少细胞凋亡来缓解Cd诱导的PK-15细胞损伤。

猪α干扰素(PoIFN-α)可用于治疗和预防病毒感染，但天然猪α干扰素抗病毒活性低，寻找高生物活性的突变体序列对猪传染性疾病的防治措施研究具有重要意义。运用生物信息学方法分析和比对PoIFN-α的各亚型氨基酸序列，对天然PoIFN-α序列的八个位点进行定点突变构建PoIFN-α 8s突变体并进行原核表达纯化；获得重组蛋白后在PK-15细胞上针对水疱性口炎病毒(VSV)进行活性测定，同时在小鼠体内验证PoIFN-α 8s突变体对猪伪狂犬病病毒(PRV)的抑制能力。结果发现，重组PoIFN-α 8s测得抗病毒活性为1.13×10⁷ IU·mg^-1，对比PoIFN-α产品，PoIFN-α 8s可降低PK-15细胞上VSV的病毒滴度和基因拷贝数达10倍以上，具有更高的体外抑制VSV增殖能力；动物试验表明，PoIFN-α 8s可降低感染PRV小鼠体内各器官的病毒载量。综上，本研究成功构建高效的PoIFN-α 8s突变体，并验证了其良好的体内外抗病毒活性。

本研究旨在完善猫急性应激(cat acute stress, CAS)诊断标准，并将该标准应用于临床试验，以评价加巴喷丁片预防CAS的有效性和安全性。使用猫应激评分(cat stress score, CSS)法诊断CAS，在临床收集健康猫和急性应激猫各15只，分别纳入健康组和急性应激组。通过临床资料对比、CSS评估、促肾上腺激素释放激素(corticotropin releasing hormone, CRH)、促肾上腺激素(adrenocorticotropic hormone, ACTH)和肾上腺素(epinephrine, EPI)检测，评价3种激素的诊断价值并完善CAS诊断标准。再使用完善后的CAS诊断标准，在临床收集106只急性应激猫，随机平均分为赋形剂组和加巴喷丁组，共进行3次就诊。第2次就诊前1.5 h，两组试验猫需分别口服推荐剂量的赋形剂片和加巴喷丁片。通过临床资料对比、基础生理指标检查、行为学评估、血常规检查、血生化检查、激素检查和不良反应监测，评价加巴喷丁片预防CAS的有效性和安全性。结果表明，健康组和急性应激组临床资料具备同质性；CRH、ACTH和EPI联合诊断CAS的最佳临界值为0.212，曲线下面积为0.973，灵敏度为100.00%，特异度为86.67%。药物临床试验中，赋形剂组和加巴喷丁组临床资料具备同质性；与赋形剂组相比，加巴喷丁组的CSS差值、体温差值、呼吸频率差值、心率差值、ACTH差值、EPI差值和不良反应发生率(无力、共济失调、嗜睡)显著升高，而整体镇静评分差值显著降低；上述不良反应约发生在用药2~3 h后，持续时间为1.5~3.0 h；加巴喷丁片未导致血常规和血生化指标的改变。综上，本研究建议CAS的诊断标准完善为猫在检测前数小时内受到应激源刺激，检测时血清CRH(pg·mL^-1)、ACTH(pg·mL^-1)和EPI(ng·mL^-1)浓度联合诊断的预测概率值＞0.212，且检测时CSS＞3分。在应激事件前1.5 h以推荐剂量单次口服加巴喷丁片，对CAS有一定预防作用，但可能出现无力、共济失调和嗜睡的不良反应。

本研究旨在探究太子参多糖(Radix pseudostellariae polysaccharide, RPP)调控微小核糖核酸(microRNA, miRNA)Let-7d-3p对伪狂犬病病毒(pseudorabies virus, PRV)感染引起炎症基因表达的影响及其机理。体外培养猪肾细胞(porcine kidney 15, PK-15)，使用不同浓度RPP(0.5~32.0 mg·mL^-1)处理PK-15细胞，通过细胞增殖与活性检测试剂盒(cell counting kit-8, CCK8)法检测细胞存活率。接着将PK-15细胞分为空白组、PRV组、0.5 mg·mL^-1 RPP组、1.0 mg·mL^-1 RPP组、2.0 mg·mL^-1RPP组，通过实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR, qPCR)检测各组细胞中炎症因子白细胞介素(interleukin, IL)-6、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α, TNF-α)、IL-17的mRNA转录水平。转染Let-7d-3p抑制物至PK-15细胞，经0或0.5 mg· mL^-1RPP干预后，采用qPCR检测Let-7d-3p和炎症因子mRNA转录水平。选择15只健康小鼠随机分为空白组、PRV组、RPP(10 mg·kg^-1)组(每组5只)，qPCR检测小鼠肾组织中Let-7d-3p和炎症因子mRNA转录水平。结果显示，在0~4.0 mg·mL^-1 浓度RPP无细胞毒性。与空白组相比，PRV感染PK-15细胞会显著上调炎症因子IL-6、TNF-α、IL-17的mRNA转录水平(P < 0.01)，显著下调Let-7d-3p转录水平(P < 0.01)。与PRV组相比，三个浓度的RPP作用细胞后均显著上调Let-7d-3p的转录水平(P < 0.01)，同时显著下调3个炎症因子的mRNA转录水平(P < 0.01)。抑制Let-7d-3p后，与PRV组相比Let-7d-3p抑制组的IL-6、TNF-α、IL-17的mRNA转录水平呈现显著上调(P < 0.01)。而与PRV+RPP组相比，抑制Let-7d-3p后加入RPP干预，细胞炎症因子的mRNA转录水平显著上调(P < 0.01)。体内试验结果表明，与空白组相比，PRV感染组小鼠肾中Let-7d-3p的转录水平显著下降(P < 0.01)，且炎症因子IL-6、TNF-α、IL-17的mRNA转录水平显著上调(P < 0.01)。与PRV组相比，RPP处理小鼠后肾脏中Let-7d-3p转录水平显著上升(P < 0.01)，炎症因子IL-6、TNF-α、IL-17的转录水平显著下降(P < 0.01)。体内体外结果表明，RPP可通过Let-7d-3p下调PRV感染引起的炎症基因转录水平，在mRNA水平上发现RPP具有一定的抗炎效用，为后续研究太子参多糖缓解PRV引起的炎症提供思路。

本研究旨在探索茶皂素对猪源多重耐药性产肠毒素大肠杆菌(enterotoxigenic E.coli, ETEC)的抑菌效果，并解析其抑菌机制，为防控ETEC感染引起的仔猪腹泻提供新思路。本研究首先采用标准的纸片扩散法，评估所选取的猪源ETEC菌株对一系列抗生素的敏感性，并利用96孔微量肉汤稀释法测定抗生素及茶皂素对该ETEC菌株的最小抑菌浓度(MIC)。通过对比有无茶皂素处理条件下，该ETEC菌株的生长曲线变化、超微结构变化，以及胞内核酸、蛋白质和碱性磷酸酶等物质的泄漏情况，明确茶皂素对猪源多重耐药性ETEC的抑菌作用。此外，还采用转录组学技术分析有无茶皂素处理条件下细菌基因表达谱的差异，揭示茶皂素对该猪源ETEC的抑菌作用机制。此外，利用CCK-8方法评估茶皂素在猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)上的安全性和有效性。药敏试验结果显示，该猪源ETEC菌株对临床常用的14种抗生素中的9种具有耐药性，属于多重耐药菌株。而茶皂素的MIC为50 mg·mL^-1，在1×MIC和2×MIC的浓度下，它对猪源多重耐药ETEC菌株展现出较强的抑菌活性，能在12 h的作用时间内有效抑制该ETEC菌株的生长和繁殖。经过1×MIC和2×MIC浓度的茶皂素处理后，细菌的形态结构发生显著变化。具体表现为细菌细胞结构受到严重破坏，导致细菌胞外的核酸、可溶性蛋白质以及碱性磷酸酶的浓度在最初的2 h内显著性上升，并且在整个12 h的观察期内，这些物质的浓度均显著高于对照组，最终导致细菌的死亡。SDS-PAGE电泳结果显示，经过茶皂素处理的ETEC菌株，在相对分子质量15~25 ku的蛋白质条带明显减少。转录组分析进一步揭示，茶皂素的抑菌机制可能涉及多个层面，包括抑制脂多糖的生物合成、影响核糖体的功能以及干扰细菌蛋白质的合成过程等相关通路。此外，研究还发现，在0.781~12.5 μg·mL^-1的浓度，茶皂素对IPEC-J2细胞无明显的毒副作用。特别地，在12.5 μg·mL^-1的浓度下，茶皂素能显著提高IPEC-J2细胞在受到ETEC感染后的存活率。综上所述，茶皂素对猪源多重耐药性ETEC菌株具有显著的抑菌活性，其抑菌机制复杂且多层面。研究结果为茶皂素作为天然抑菌剂在畜牧业中的应用提供了理论支持。

白屈菜可用于治疗多种消化道和呼吸道炎症，但其作用机制尚不明确。本研究基于指纹图谱和网络药理学预测分析白屈菜的药效成分及作用机制。采用HPLC法建立15批白屈菜指纹图谱并进行相似度评价和主成分分析；通过网络药理学方法建立白屈菜活性成分-靶点网络，分析其核心抗炎成分，通过蛋白互作网络分析其核心靶点，并进行GO和KEGG富集分析；将指纹图谱指认的共有峰与网络药理学筛选出的核心成分取交集，MTT法和ELISA法研究其对IPEC-J2细胞炎症损伤的影响。结果发现，15批次白屈菜中有12批次相似度>0.9，标定出21个共有峰，指认出其中6个分别为原阿片碱、白屈菜碱、黄连碱、血根碱、小檗碱和白屈菜红碱；网络药理学筛选出8个核心抗炎成分，分别为异紫堇定碱、(s)-金罂粟碱、(s)-氢化小檗碱、小檗碱、白屈菜碱、白屈菜红碱、氧化血根碱和(+/-)-高白屈菜碱；上述2组成分交集为白屈菜碱、小檗碱和白屈菜红碱，参考中国药典规定，选取白屈菜红碱，研究其对IPEC-J2细胞炎症的影响，发现2.5~10 μg·mL^-1白屈菜红碱能显著提高细胞存活率，显著升高IL-4和IL-10含量，降低NO、IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α和TGF-β1含量。综上，本研究建立了白屈菜HPLC指纹图谱，结合网络药理学方法初步揭示了白屈菜的药效成分及作用机制，为其质量控制与深入开发提供参考。

本试验旨在制备负载连翘酯苷A(forsythoside A，FTA)和山奈酚(kaempferol，KPF)的乳源外泌体(milk-derived EVs，miEVs)递药系统，并体外评价其对脂多糖(lipopolysaccharides，LPS)诱导牛乳腺上皮细胞(mammary alveolar cells-large T，MAC-T)炎症模型的细胞迁移效果及相关炎性因子的影响。利用前期已建立并优化的乙酸法提取乳源外泌体，低温超声共孵育的方法制备负载FTA乳源外泌体(FTA-miEVs)和负载KPF乳源外泌体(KPF-miEVs)，以及建立炎症模型，并通过透射电子显微镜(transmission electron microscope，TEM)和免疫印迹(Western blot)方法评估制备效果，液质联用方法进行载药量测定，免疫荧光和划痕试验观察炎症模型对负载抗炎药物的乳源外泌体摄取，及炎症模型的细胞迁移效果的影响，酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay，ELISA)和实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR，RT-qPCR)方法验证负载抗炎药物的乳源外泌体对炎症模型中相关炎性因子分泌及基因表达水平的影响。结果表明：FTA-miEVs和KPF-miEVs均具有外泌体典型结构，外形呈圆形，有部分凹陷，似“茶托”形结构；均可表达表面及内部特异性标记蛋白白细胞分化抗原81(cluster of differentiation 81，CD-81)和热休克蛋白70(heat shock protein 70，HSP70)；载药量分别为0.78%和9.79%；在8 h内，LPS诱导的MAC-T炎症模型对其摄取效果良好；且在24 h时，FTA-miEVs和KPF-miEVs对炎症模型细胞迁移的抑制率分别为608.48%和522.88%，显著高于单独使用miEVs、FTA和KPF的效果；其对炎症模型中白细胞介素-6(interleukin-6，IL-6)、白细胞介素-8(interleukin-8，IL-8)和肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor α，TNF-α)的分泌及基因表达水平均优于单独使用miEVs、FTA和KPF。综上所述，本试验成功制备FTA-miEVs和KPF-miEVs递药系统，综合结果发现在同等药量下可提高FTA和KPF的抗炎效果，为外泌体在药物递送系统的制备及临床应用提供新的思路。

本研究旨在探究红景天苷对甲泼尼龙诱导的肉鸡股骨头坏死动物模型骨代谢的影响及其机理。将32只1日龄爱拔益加肉鸡随机分为对照组、甲泼尼龙处理组、红景天苷干预组和红景天苷对照组，每组8只。在肉鸡42日龄时，对肉鸡进行步态评分与称重后，取血液和肝脏样本进行甘油三酯和总胆固醇检测；取股骨头组织样本进行骨代谢指标检测；取股骨和胫骨进行骨密度和骨强度检测。结果显示：与甲泼尼龙处理组相比，红景天苷干预组肉鸡体重显著增加；股骨的重量、长度、杨氏模量和断裂载荷显著增加；胫骨刚度显著增加；股骨头Collagen-1和Runx2基因的转录显著上调；软骨陷窝空泡减少，软骨Collagen-2、Aggrecan和BMP2基因转录显著上调，MMP13基因转录显著下调；肝脏和血清中的甘油三酯和总胆固醇的含量显著下降；股骨头FASN和SCD1基因表达下调。综上表明, 红景天苷可以调控脂代谢和软骨基质合成，缓解甲泼尼龙诱导的肉鸡股骨头坏死。

旨在结合白术多糖和超大介孔二氧化硅两者的优势，开发新型中药多糖黏膜免疫佐剂。本研究首先制备白术多糖超大介孔二氧化硅(AMP-UCMS)纳米颗粒并对其进行一系列表征，包括透射电镜、粒径、电势、聚合物分散性指数(polymer dispersity index，PDI)和红外光谱，然后进一步研究口服AMP-UCMS作为H9N2型禽流感灭活病毒的黏膜免疫佐剂活性。试验选取150只雏鸡随机分成6组并进行不同免疫处理，分别为阴性对照(Control)、全灭活病毒(whole inactivated virus, WIV)、WIV+AMP、WIV+UCMS、WIV+AMP-UCMS、市售疫苗(Vaccine)，其中各组选取6只雏鸡用H9N2禽流感病毒滴鼻攻毒。通过血凝抑制(HI)试验测定各组鸡血清HI抗体效价；采用ELISA方法检测空肠H9N2型禽流感病毒特异性sIgA抗体水平；利用HE染色观察空肠和肺的组织形态变化；利用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)测定空肠IgA J-chain、pIgR、TNF-α和IL-1β的mRNA表达水平以及攻毒后鸡的肺组织病毒载量等各项指标。试验结果显示，与Control组相比，WIV+AMP-UCMS组可极显著提高鸡血清HI抗体效价(P < 0.000 1)和空肠特异性sIgA抗体水平(P < 0.01)，并能够极显著降低肺组织病毒载量(P < 0.000 1)，鸡空肠组织中IgA J-chain(P < 0.001)、pIgR(P < 0.000 1)、TNF-α和IL-1β(P < 0.000 1)的mRNA表达水平都极显著提高，此外还能够增加鸡空肠iIEL数量，降低攻毒后肺组织的损伤。综上表明，白术多糖被成功装载到超大介孔二氧化硅中，AMP-UCMS能够有效诱导鸡的全身免疫和黏膜免疫应答。这些研究结果为新型中药多糖黏膜免疫佐剂在畜禽口服疫苗领域的开发应用提供了参考。

旨在研究安徽地区新型鸭呼肠孤病毒(NDRV)的流行现状及遗传变异情况。本研究从安徽一养殖场患有脾梗死的麻鸭中分离出1株NDRV，命名为AH812。通过RT-PCR、鸭胚分离鉴定及动物致病性试验，结合σC基因序列分析，结果显示：分离的病毒为NDRV，纯净性试验显示，其他常见病原(鸭肝炎病毒、鸭坦布苏病毒、番鸭细小病毒、腺病毒与鸭圆环病毒)均为阴性；致病性试验通过腿部肌肉途径注射0.5ml分离病毒AH812(TCID₅₀=10^-4.25/0.1 mL)，雏鸭出现脾肿大、出血等典型症状。序列分析表明，分离株AH812与2020年山东分离株NDRV-N7(登录号：MW030529.1)亲缘关系最近。综上，本研究成功分离得到1株NDRV病毒AH812，对麻鸭有较强的致病性。