畜牧兽医学报

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1. 北京地区鸡群网状内皮组织增殖病感染的血清学调查研究

何勇群;张中直;杨汉春

畜牧兽医学报 1998, 29 (1): 71-78.

摘要（899）

PDF（pc）（1752KB）（5891）

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2. 纳豆芽孢杆菌对瘤胃微生物发酵的影响

邓露芳;王加启;姜艳美;刘亮;卜登攀;周凌云

畜牧兽医学报 2008, 39 (8): 1062-1068.

摘要（1089）

PDF（pc）（504KB）（4028）

本试验通过人工瘤胃持续发酵体系，研究添加不同浓度纳豆芽孢杆菌对瘤胃微生物发酵的影响。本研究设3个处理组，空白对照组（CK），添加人工瘤胃发酵罐容积1%的纳豆芽孢杆菌处理1组（TR1）和添加人工瘤胃发酵罐容积5%的纳豆芽孢杆菌处理2组（TR2）。试验结果表明，添加纳豆芽孢杆菌处理组有提高瘤胃pH的趋势，但差异不显著（P>0.05）。TR2组NH₃-N浓度始终高于对照组（CK）（P<0.05），但TR1与CK比较没有显著差异（P>0.05）。本试验中TR1和TR2组微生物蛋白（MCP）值均显著低于CK组（P<0.05）。与CK组相比较，添加纳豆芽孢杆菌处理组挥发性脂肪酸（VFA）各指标均有不同程度的提高，其中TR2组乙酸、丙酸、丁酸和挥发性脂肪酸总量分别提高6.52%、1.96%、11.02%和5.77%（P<0.05），乙酸∶丙酸比例显著上升（P<0.05）；但TR1和TR2组之间，TR2组除了丁酸含量显著高于TR1组（P<0.05）外，其余指标差异均不显著。研究结果表明,纳豆芽孢杆菌对瘤胃氮的转化利用有一定负面影响，但提高了瘤胃碳水化合物的消化代谢。

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3. 拷贝数变异及其研究进展

刘欣;王立刚;王立贤

畜牧兽医学报 2010, 41 (8): 927-931.

摘要（793）

PDF（pc）（358KB）（3545）

拷贝数变异作为遗传变异的一种新来源在表型多样性和进化中起着重要作用，引起了研究者广泛的兴趣。拷贝数变异（copy number variation ,CNV）是指大小从kb到Mb范围内亚微观DNA片段的变异。CNV在人类正常个体和许多模式动物中已经做了很多的研究工作，并通过生物信息学和杂交的方法确定了CNV的区域。进一步研究发现拷贝数变异与疾病的致病机理有着密切的联系。本文从概念、检测方法和研究进展方面对CNV进行了较为全面的介绍与阐述，分析了目前CNV研究存在的一些问题，并对它在疾病和其他方面的前景做出一些展望。

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4. 东北白鹅CD8α基因的克隆及其胞外区基因的表达与抗血清的制备

张雪莲，魏双施，刘晓玫，邵建伟，张树栋，李珊珊，高明春，张文龙，邢育钢，马波，王君伟

畜牧兽医学报 2015, 46 (4): 672-680. DOI: 10.11843/j.issn.0366-6964.2015.04.023

摘要（334）

PDF（pc）（22813KB）（3047）

根据GenBank公布的绿头鸭CD8α（AF378373）基因序列设计引物，通过RT-PCR获得东北白鹅CD8α基因。根据测序结果设计特异性引物，克隆得到东北白鹅CD8α胞外区基因，并在pET-30a（+）及pET-28a（+）/Rosetta(DE3) pLysS系统中进行原核表达。经IPTG诱导重组蛋白质获得表达，Ni-NTA柱亲和层析获得纯化的重组蛋白质，以纯化的重组蛋白质（pET-30a-CD8ex）为免疫原制备兔抗鹅CD8α胞外区抗血清。I-ELISA、Western blot分析表明抗血清可特异识别分离获得的东北白鹅外周血T淋巴细胞与重组蛋白质（pET-28a-CD8ex），间接免疫荧光试验证实，纯化的抗血清可特异性识别瞬时真核表达的鹅CD8α胞外区蛋白质。利用激光共聚焦显微镜观察到分离获得的鹅外周血淋巴细胞的细胞膜处出现明显的荧光信号。本研究结果说明制备的抗血清可作为鹅CD8⁺T淋巴细胞的检测试剂。

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5. CRISPR/Cas9系统介导基因组编辑的研究进展

刘志国

畜牧兽医学报 2014, 45 (10): 1567-1583. DOI: 10.11843/j.issn.0366-6964.2014.10.001

摘要（554）

PDF（pc）（5283KB）（2878）

由规律成簇间隔短回文重复序列（Clustered regularly interspaced short palindromic repeats，CRISPR）以及CRISPR相关蛋白9（CRISPR-associated protein 9，Cas9），即CRISPR/Cas9系统改造的第3代人工核酸内切酶，与锌指核酸内切酶(Zinc finger endonuclease，ZFN)以及类转录激活因子效应物核酸酶(Transcription activator-like effector nuclease，TALEN)相比，具有构建方法简单快捷、突变效率高、成本低廉、适用范围广等许多优点，已成为一种热门的基因组编辑工具。该技术已成功应用于细菌、人类细胞、斑马鱼、小鼠、猪、食蟹猴以及多种植物的基因组精确修饰，是最具有临床与应用前景的基因治疗技术之一。但是CRISPR/Cas9系统目前也面临着脱靶率高、特异性差的难题，这无疑是CRISPR/Cas9系统应用于基础研究和临床治疗的最大的挑战。本文从CRISPR/Cas9系统的发现、分类、作用机制以及CRISPR/Cas9基因编辑系统在基因定点修饰方面的研究进展进行介绍，希望能够为畜牧领域的科研工作者提供参考。

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6. 羊流产衣原体主要外膜蛋白基因的克隆与序列分析

苗振川;哈斯阿古拉;赵亚芳;张宝发;张鹤龄

畜牧兽医学报 2001, 32 (1): 86-91.

摘要（428）

PDF（pc）（1319KB）（2014）

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7. 山羊GDF9基因在卵丘卵母细胞复合体体外成熟过程中的表达

郑爱燕;吴曼;尚利青;丁家桐

畜牧兽医学报 2010, 41 (6): 671-677.

摘要（769）

PDF（pc）（1547KB）（1988）

本研究采用实时荧光定量PCR技术，从mRNA水平探讨了山羊卵丘卵母细胞复合体体外成熟（IVM）过程中（0、6、12、18、24和27 h）GDF9基因的相对表达变化，分析其与卵丘细胞扩散之间的关系。结果表明，GDF9 mRNA在山羊卵丘卵母细胞复合体体外成熟过程中均有表达，且在成熟培养初期表达量较低，其表达峰值出现在IVM 12 h，与卵丘细胞开始扩散的时间一致，之后又有所下降。由此推测，GDF9基因在山羊卵丘扩散和卵母细胞体外成熟过程中起着重要的作用。

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8. 全基因组关联分析方法的研究进展

郝兴杰，胡林，张淑君

畜牧兽医学报 2016, 47 (2): 213-217. DOI: 10.11843/j.issn.0366-6964.2016.02.001

摘要（407）

PDF（pc）（1161KB）（1910）

全基因组关联分析目前已经成为研究复杂性状和疾病遗传变异的有效方法，但是由于群体结构的存在，导致分析结果出现虚假关联。经过数十年的发展，各种新方法不断出现和完善，用于减少群体结构对分析的影响。本综述将对在全基因组关联分析中能够处理群体结构的方法进行介绍，以期为进一步选择GWAS方法准确揭示各种性状的遗传背景提供参考。

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9. 猪繁殖与呼吸综合征病毒致病机理及其抗病育种研究进展

陈婧瑶，刘小娟，王宇航，李笠，胡晓湘，李宁

畜牧兽医学报 2013, 44 (11): 1693-1699. DOI: 10.11843/j.issn.0366-6964.2013.11.001

摘要（338）

PDF（pc）（753KB）（1904）

由猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）引起的猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）是一种严重危害世界养猪业的传染病。研究表明PRRSV通过与HS、Sn、CD163三种受体分子互作侵入宿主细胞，通过抑制天然免疫、延迟中和抗体产生等多种途径抑制机体的免疫应答，导致病毒的持续性感染。抗病育种能提高机体的天然免疫力，现在猪的抗病育种主要采取直接选择、间接选择、转基因3种途径。作者对PRRSV致病机理及抗病育种的国内外研究现状进行了分析和综述，并提出了新的研究设想。

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10. 病毒宏基因组学的研究现状及应用

何彪，涂长春

畜牧兽医学报

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11. 新生仔猪小肠上皮细胞的分离培养和鉴定

王静;张彦明;仝钢;刘芳宁;周宏超;何雷;杨小云;徐彦召;洪海霞

畜牧兽医学报 2010, 41 (1): 92-98.

摘要（908）

PDF（pc）（1686KB）（1838）

为更快捷地进行猪肠道病毒性、细菌性疾病及细胞永生化的研究提供便利，本研究使用多种酶消化法及其他培养法尝试分离培养肠上皮细胞。结果，利用组织块培养法能成功建立新生仔猪小肠上皮细胞株，获得的上皮细胞具有较强的增殖能力，22 h 内贴壁并发生细胞分裂，6～7 d 明显增殖，10～12 d 汇合成单层，连续传代培养至12代，细胞基本失去上皮样特征。倒置显微镜下观察，10代前培养细胞为多角状或卵圆形，单层生长不重叠，呈铺路石状排列，11～12代细胞发生变形，间隙增大。细胞角蛋白18鉴定二者均为阳性。电镜下，纹状缘整齐，紧密连接结构清晰可见。结果表明利用组织块培养法可以获得能够连续传代、活力较好的猪小肠上皮细胞。

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12. 猪圆环病毒2型疫苗的研究进展

王一平, 郭龙军, 唐青海, 刘长明

畜牧兽医学报 2012, 43 (9): 1337-1345.

摘要（449）

PDF（pc）（440KB）（1730）

猪圆环病毒2型（PCV2）是引起断奶仔猪多系统衰竭综合征（PMWS）的主要病原，给全球养猪业造成了巨大经济损失。PCV2感染可以破坏动物机体的免疫系统，造成严重的免疫抑制，容易诱发多种细菌及病毒的混合感染与继发感染，给疾病的诊断和治疗带来巨大的困难。疫苗免疫接种是防控PCV2感染的有效手段，有关PCV2疫苗的研究已成为国内外学者的关注热点。迄今为止，欧美几家跨国公司已先后推出商品化的PCV2灭活疫苗、亚单位疫苗及嵌合病毒疫苗，国内也已研制出PCV2灭活疫苗，这些疫苗的推广应用为有效防控猪圆环病毒病发挥了重要作用。鉴于这些疫苗尚不能完全阻断PCV2传播，无法彻底清除体内感染的病毒，因此，开发高效、价廉的新型活载体疫苗、核酸疫苗及标记疫苗是今后研究的趋势。笔者在本文中概括地介绍了目前商品化的PCV2疫苗的特性和免疫效力，并对近年来有关PCV2活载体疫苗、核酸疫苗及标记疫苗等新型疫苗的研究进展进行综述，以期为猪圆环病毒病的防制提供参考。

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13. 家兔豆状囊尾蚴病的组织病理学研究

孙晓林;陈怀涛;才学鹏

畜牧兽医学报 2008, 39 (8): 1100-1106.

摘要（2294）

PDF（pc）（2891KB）（1711）

为研究家兔豆状囊尾蚴病的病理学变化，从33只自然感染病例采取肝脏、心脏、肾脏与肺脏组织块，经甲醛固定，梯度乙醇脱水，石蜡切片，切片厚度5～6 μm，HE染色，光镜观察。结果表明，肝脏发生由豆状带绦虫六钩蚴穿行所致的出血坏死区以及在此基础上形成的上皮细胞、巨细胞肉芽肿。这种特异性病变可作为该病病理诊断的重要指征之一。同时也发现间质性肝炎、肾炎、肺炎及心肌纤维萎缩等变化。本研究为阐明该病的肝脏特征性病理变化及进一步探讨其发生机制奠定了基础。

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14. 鹅黑素皮质素受体-4基因的克隆与序列分析

张同燕;陈宏权;梁忠;李艳和;甘小伟

畜牧兽医学报 2007, 38 (9): 913-919.

摘要（1812）

PDF（pc）（678KB）（1690）

黑素皮质素受体-4（Melanocortin receptor-4，MC4R）是其黑素皮质素受体MCR（MC1-5R）家族成员之一，属G蛋白偶联受体。它可与瘦蛋白、神经肽、α-黑素细胞刺激素等一起调节动物体重和采食量。参考鸡MC4R基因序列设计引物，克隆并测序了鹅MC4R基因。结果表明，鹅MC4R基因编码区全长996 bp，其核苷酸序列与鸡的同源性为95.3%，与人、牛、猪等哺乳动物同源性在75%~79%；其氨基酸序列与鸡的同源性达到98.5%。构建哺乳类、鸟类和鱼类MC4R基因核苷酸进化树显示，鹅较早地与哺乳类动物分化开来。分析MC4R蛋白的氨基酸残基特性参数表明，MC4R的7次跨膜结构与MC4R的亲水性区域、电荷密度以及氨基酸残基位于表面概率的变化规律相一致。

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15. 四君子汤对脾虚大鼠肠道菌群多样性的影响

孟良艳，陈秀琴，石达友，黄海定，郭世宁

畜牧兽医学报 2013, 44 (12): 2029-2035. DOI: 10.11843/j.issn.0366-6964.2013.12.025

摘要（400）

PDF（pc）（2894KB）（1667）

探讨四君子汤对脾虚大鼠肠道菌群多样性的影响。将48只大鼠随机分为空白组、模型组、中药四君子汤组、柳氮磺吡啶肠溶片（SASP）组，每组12只。将除空白组外的其余各组大鼠用利血平法造脾虚模型。然后给四君子汤、SASP分别灌胃治疗后，通过16S rDNA测序法分析肠道菌群多样性变化。结果表明:与模型组比较，四君子汤组中的肠道菌群多样性明显升高，但与西药组中的肠道菌群多样性有差异。四君子汤能通过改善肠道菌群的多样性调理脾虚证。

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16. 利用CRISPR/Cas 9技术构建大肠杆菌aroA基因的敲除系统及其初步应用

余深翼，赵金荣，郑玲红，朱二鹏，周五朵，吴宝成

畜牧兽医学报 2016, 47 (4): 762-770. DOI: 10.11843/j.issn.0366-6964.2016.04.016

摘要（544）

PDF（pc）（2217KB）（1612）

旨在利用CRISPR/Cas 9新型基因编辑技术构建大肠杆菌aroA基因的敲除系统，并分析其对不同大肠杆菌aroA基因敲除、修复的差异。首先构建靶向aroA基因的CRISPR/Cas 9载体；随后人工设计同源修复供体基因序列，并亚克隆到CRISPR/Cas 9载体中，构建成完整的CRISPR/Cas 9基因敲除体系；将该系统分别应用到大肠杆菌DH10B、DH5α和JM109细胞中，PCR鉴定筛选到的阳性菌株，并回收其扩增条带进行克隆、测序。CRISPR/Cas 9载体的酶切与测序结果均正确，表明载体构建成功；PCR鉴定结果显示，该系统对三种大肠杆菌均能进行aroA基因的有效敲除，敲除效率为46%~58%；测序结果进一步证实目的基因敲除成功。本试验成功构建大肠杆菌aroA基因CRISPR/Cas 9敲除系统，为进一步研究致病菌aroA基因功能及开发减毒大肠杆菌疫苗提供新型、有效的基因敲除工具。

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17. 牛催乳素受体(PRLR)基因HinfⅠ多态性与奶牛生产性能相关性研究

张佳兰;昝林森;申光磊

畜牧兽医学报 2007, 38 (9): 888-892.

摘要（2072）

PDF（pc）（483KB）（1606）

采用PCR-RFLP方法检测了牛催乳素受体（PRLR）基因intron 8多态性。结果表明：中国荷斯坦牛、加拿大荷斯坦和澳洲荷斯坦牛群体中Hinf Ⅰ酶切后均有A和B两个等位基因存在。利用最小二乘分析研究了该多态位点对奶牛305 d产奶成年当量、乳脂肪率、乳蛋白率、初次配种日龄和初次产犊日龄的影响。结果表明：不同基因型个体的乳脂率、初次配种日龄和初次产犊日龄的差异均未达到显著水平，但呈现出AA>AB>BB的趋势。BB型个体的305 d成年当量与AA型、AB型个体有显著差异（P<0.05），BB型个体的乳蛋白率与AA型、AB型个体有极显著差异（P<0.01）。对305 d成年当量、乳脂肪率、乳蛋白率、初次配种日龄和初次产犊日龄A基因的加性效应分别为296.00 kg/胎次、0.08%、-0.14%、4.55 d/头、15.10 d/头，A等位基因的显性效应为259.80 kg/胎次、0.07%、-0.10%、0.95 d/头和4.90 d/头。

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18. 猪Cathepsin B基因cDNA分子克隆、序列分析及遗传多态性分析

陈磊;李学伟;朱砺;李强;李明洲

畜牧兽医学报 2008, 39 (4): 385-392.

摘要（1506）

PDF（pc）（1027KB）（1557）

采用RT-PCR结合克隆测序的方法，从猪肌肉组织总RNA中克隆出了猪组织蛋白酶B（Cathepsin B，CTSB）基因的cDNA序列，并推导出其编码的氨基酸序列。猪CTSB基因开放阅读框（ORF）全长1 008 bp，编码335个氨基酸。同源性分析结果表明，猪与人、鼠、牛的CTSB基因cDNA编码区（CDS）同源性分别为85%、81%、90%，推测的氨基酸序列同源性分别为81%、79%、91%。利用同源性结合序列特征预测表明该蛋白具有信号肽和前肽序列。蛋白质结构同源建模分析表明，该蛋白具有木瓜蛋白酶家族的典型空间结构，包括1个底物结合凹槽和3个相互靠近的活性位点。另外采用PCR-SSCP方法，在147头个体中分析了CTSB基因第6内含子内的SSCP位点多态性，检测到3个等位基因6种基因型。FF基因型个体的各项嫩度指标最高，其最大剪切力与硬度值分别为6.56 kg和23.55 kg·s，极显著地高于EE和EF基因型个体（P<0.01），平均剪切力为4.85 kg，显著地高于EF基因型个体（P<0.05）。

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19. 11个猪品种生长激素（pGH）基因多态性及其遗传分化研究

帅素容;李学伟;朱砺;李辉;赵中权

畜牧兽医学报 2007, 38 (8): 753-759.

摘要（2112）

PDF（pc）（721KB）（1544）

利用PCR和测序技术，检测了11个猪品种共65个个体的生长激素（pGH）基因全序列多态性，发现43个SNPs 和1个位于内含子3的7 bp缺失片段。分析结果表明，pGH基因DNA序列不同功能区变异程度各不相同，外显子区、内含子区、5′和3′端非编码区SNPs位点各占SNPs位点总数的18.60%、74.42%、6.98%；外显子区8个SNPs位点导致4个氨基酸位点变异，外显子2是编码区的高变域；各SNPs的变异属典型的中性突变；不同品种有其独特的单倍型。分子方差分析（AMOVA）结果表明，pGH基因DNA序列品种内的变异（方差比率73.45%）大于品种间的变异（方差比率26.55%），品种间差异极显著(P＜0.01)，存在较明显的遗传分化；pGH基因自身进化及品种进化主要体现在内含子区，品种间的遗传分化与地理分布和基因交流有关。

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20. 有机酸抑菌分子机理研究进展

张军;田子罡;王建华;王安如

畜牧兽医学报 2011, 42 (3): 323-328.

摘要（686）

PDF（pc）（777KB）（1514）

有机酸作为一种可有效抑制畜禽体内病原微生物增殖的饲用生长促进剂，正日益受到关注。不同有机酸抑菌机理不尽相同。笔者综述了有机酸分子水平抑菌机理研究的最新进展，包括基于能量竞争、透化细菌外膜、提高胞内渗透压、抑制生物大分子合成、诱导宿主产生抗菌肽等5种作用机制；认为细菌胞内酸根离子的聚集是有机酸抑菌作用的重要决定因素，细菌胞内外pH梯度及胞外酸根离子浓度又是影响胞内酸根离子聚集的主要因素。

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中国标准连	ISSN 0366-6964
续出版物号	CN 11-1985/S

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