单细胞转录组测序技术(scRNA-seq)因其单细胞分辨率解析细胞异质性与动态基因表达的优势，正逐步革新家禽生物学研究方式。本文系统综述了单细胞转录组测序技术在家禽领域的应用进展：单细胞测序技术通过逐个分析家禽细胞，为提升产蛋效率、改良肉质和增强抗病能力提供了新方法。然而，当前研究仍面临家禽单细胞图谱覆盖不足、功能验证体系匮乏及农业转化成本高昂等瓶颈。未来需聚焦低成本测序技术开发、多组学数据整合(如scATAC-seq与代谢组)及CRISPR/Cas9家禽模型的靶向验证，以驱动精准育种与繁殖调控的智能化设计。本文为深入解析家禽细胞命运决定机制及其应用提供了理论基础与技术展望。

基因修饰是指通过人为干预对生物体的DNA序列进行精准编辑，以定向改造其基因组结构或功能。近年来，随着分子生物学和基因工程技术的发展，基因修饰技术(如转基因技术和基因编辑技术)结合辅助生殖技术，在牛羊抗病育种领域展现出巨大潜力。该技术不仅可以对抗病性状进行精准改良，提升牲畜的健康水平和生产性能，还弥补了传统选育方法效率低、周期长的不足。然而，与猪、鸡的抗病育种相比，牛羊在该领域仍有较大的进步空间。目前通过基因修饰技术优化牛羊基因组，正成为突破传统防控瓶颈的前沿方向。本文从动物转基因和基因编辑技术两方面阐述基因修饰技术的发展现状，并简要概括了该技术在牛羊抗病育种上的应用现状，为未来牛羊抗病育种研究提供一定参考。

断层带(fault bars)是羽毛生长过程中由于角蛋白合成受阻形成的一种畸形，其形成使得羽枝变得脆弱甚至断裂，引起羽片缺失，进而损害鸟类的飞行能力与生存适应性。在野生鸟类上的研究表明，羽毛断层带的出现可能与营养缺乏、环境、疾病感染及遗传等多种因素有关。尽管成因仍不明确，但动物在羽毛生长过程中遭受到生理或心理应激可诱导断层带的发生已被广泛接受。现代化高密度养殖环境中，家禽易遭受多种应激，福利水平受到影响。然而在实践中对家禽应激水平进行评价一直是福利评估中的难点。近年来羽毛断层带作为一种无伤害、操作性强的潜在家禽福利评估指标逐渐受到关注。本文就羽毛断层带形成的影响因素和形成机制，及其目前在家禽福利评价中的应用进行综述，以期为完善家禽福利评价体系提供参考。

细胞外囊泡(extracellular vesicles，EVs)属于细胞分泌衍生的膜结构，是细胞间信息物质传递的载体，在动物生殖过程中发挥着关键作用。哺乳动物繁殖是一个较为复杂的过程，受多种因素调控。随着对EVs在动物繁殖中研究的不断深入，其在猪繁殖中的应用也逐渐展现出巨大潜力。EVs主要通过参与多种生理功能来实现生殖过程中的平衡，确保猪繁殖过程中配子发生、受精、囊胚植入、胚胎着床及分娩等环节的顺利进行。本文对EVs的生物学特征及其在猪繁殖各阶段的作用进行了综述，旨在为EVs在猪繁殖中的研究应用提供一定的理论参考。

母猪二胎综合征在全球范围内普遍存在，具有二胎综合征的母猪二胎产仔数低，通常也表现出发情率低、淘汰率高，浪费了低胎次母猪的繁殖性能，且二胎综合征母猪终身繁殖成绩相对降低，养殖成本相应增加。本文综述了二胎综合征形成的原因、发生机制，并有针对性地提出了防治措施，为母猪繁殖性能稳定发挥、养猪业平稳健康发展提供理论依据和技术支撑；也为深入探究不同猪场二胎综合征的发生机理提供科学思路，以期避免二胎综合征对后续胎次繁殖性能的影响。精准饲喂、营养调控以及繁殖调控药物的研发与科学使用，将是解决二胎综合征的重点。

黄酮类化合物是源自天然植物的一类活性成分，具有抗氧化、抗炎、降低氧化应激、改善肠道菌群结构、保护肠黏膜、调节免疫和促进生长等药理效果。本文系统性地综述了黄酮类化合物在动物肠道健康及屏障保护中的作用，简述了其独特的物理化学特性，归纳了其在生物体内的消化、吸收及代谢途径，重点阐述了黄酮类化合物与肠道微生物的互作效应，深入剖析了黄酮类物质可通过介导肠道微生物区系，产生短链脂肪酸、胆汁酸及其受体和色氨酸等关键代谢产物来影响肠道屏障的生理功能。旨在为植物源黄酮类化合物在动物饲养与生产实践中的开发利用，尤其是幼龄动物肠道健康的研究中奠定坚实的理论基础。

儿茶素类物质是一种从植物中提取的酚类活性物质，因其显著的抗氧化、抗炎、抗菌与抗肿瘤等生物特性，在保护肠道健康与稳态方面表现出优异特性，而稳定、健康的肠道环境是维持动物体的生长发育与机体健康的关键性因素。近年来，国内外的大量临床研究报道了儿茶素类物质缓解肠道损伤的作用机制，包括调节细胞间隙连接、激发炎症与氧化应激相关通路调节免疫功能以及调节肠道菌群的平衡等方面稳定肠道稳态，但在动物实际生产中的应用鲜有报道。本文综述了儿茶素类物质的生物学特性、修复肠道屏障的效果与机制，并展望儿茶素类物质于动物生产中应用的研究进展，为儿茶素类物质在养殖业中的合理利用提供参考。

胃肠道是动物体最大的微生态系统，复杂的微生物群落组成了动物体的肠道微生物屏障。5-羟色胺(5-hydroxytryptamine，5-HT)又称血清素，是动物体内的一种神经递质，90%以上由肠道产生，具有调节肠道蠕动、分泌、免疫和维护肠道屏障功能等生物学特性，作为肠-脑轴中的核心信号分子，其可通过神经、内分泌、免疫系统传递信息，对维持神经、肠道稳态和调控疾病至关重要。目前关于5-HT的研究多集中在生物学、医学、行为学和心理学等领域，在畜禽中的相关研究鲜有报道。本文系统综述了5-HT在鼠、畜禽的神经性异常行为和肠道疾病中的调控机制，并探讨通过添加色氨酸前体如瘤胃保护型五羟色胺酸(5-hydroxytryptophan，5-HTP)、益生菌或植物提取物(如黄芪多糖、天然辣椒素)来调控肠道5-HT合成与菌群平衡，改善断奶仔猪腹泻、肉鸡坏死性肠炎等肠道疾病；针对热应激、运输应激等场景，利用有益菌提升5-HT水平或通过初乳喂养调节肠道5-HT受体基因表达，缓解应激导致的行为异常与免疫紊乱，以期为畜牧生产实践提供理论依据。

瘤胃是反刍动物特有的消化器官，其中栖息的大量各类微生物共同组成了一个复杂且高效的微生态系统。瘤胃微生物发酵的正常进行是保障反刍动物机体健康和生产性能的重要前提。反刍动物饲草料中的霉菌毒素污染较为普遍，其被反刍动物采食后会导致瘤胃微生态紊乱、影响瘤胃发酵，进而危害反刍动物的消化机能与生理健康。本文综述了各类霉菌毒素对反刍动物瘤胃微生物发酵所产生的影响，并探讨了霉菌毒素影响瘤胃微生物发酵的可能机制，以期为防控霉菌毒素危害反刍动物提供新思路。

UL7基因在疱疹病毒科成员中高度保守，其编码的pUL7蛋白在病毒感染的致病调控过程中发挥着关键的生物学作用。本文梳理了UL7基因编码蛋白的结构特征，并全面总结了pUL7在病毒复制、转录、蛋白表达、病毒粒子组装与释放等生命周期关键阶段的功能，同时探讨了其与其他病毒及宿主蛋白的相互作用机制，旨在为疱疹病毒UL7基因的深入研究提供参考。

冠状病毒种类多，感染谱广，对人和动物健康危害严重。以猪流行性腹泻病毒(PEDV)为代表的猪肠道冠状病毒对全球养猪业构成严重威胁。近年来，新发现的猪丁型冠状病毒(PDCoV)已被证实具备突破物种屏障、感染人类的潜在风险。病毒是严格的胞内寄生物，其感染宿主涉及黏附、侵入、复制、组装以及释放等复杂过程。其中，病毒囊膜表面刺突蛋白与宿主细胞膜特异性受体/辅助因子的相互作用，不仅决定其组织嗜性和宿主范围，更是影响病毒跨物种传播能力的关键分子基础。本文主要介绍上述猪肠道冠状病毒的功能受体和入侵相关宿主因子的发现思路、研究现状、存在问题以及未来方向，以期为揭示冠状病毒的感染与致病机制提供借鉴，同时对发掘靶向受体的新型抗病毒药物以及基于基因编辑的抗病育种具有潜在意义。

DNA/RNA甲基化和赖氨酸乙酰化修饰同为重要的表观遗传修饰，在调控基因表达和蛋白活力等生命过程中起重要作用，也是极具应用前景的药物作用靶标。本文将主要对DNA/RNA甲基化修饰和组蛋白乙酰化修饰调控顶复门原虫发育转化的研究进展进行综述，以期为新型抗顶复门原虫药物靶标筛选提供依据。

禽源多杀性巴氏杆菌是一种广泛分布的革兰阴性短杆菌，能够引起禽霍乱，给全球家禽养殖业带来巨大经济损失。目前禽霍乱防控长期依赖抗生素治疗，导致家禽中对抗生素耐药的细菌不断增加。本文统计了近二十年国内外17个地区的禽源多杀性巴氏杆菌流行情况和耐药性。统计结果表明，禽源多杀性巴氏杆菌广泛分布于全球各大洲，尤其在禽类养殖和消费较为普遍的地区，流行率大于43.50%。国内禽源多杀性巴氏杆菌在江苏省(53.73%)和广东省(48.97%)的流行率较高，流行率大于48%。对数据库中禽源多杀性巴氏杆菌基因组分析显示，共检测到31个ST型，其中ST159(115/733，15.69%)和ST128(82/733，11.19%)分别对鸡和鸭具有宿主偏好性。耐药性方面，国内外均发现对多种常用抗生素耐药的菌株，对卡那霉素(99/165，60%)、氯霉素(124/230，53.91%)和四环素(258/556，46.40%)等抗生素耐药率较高。对数据库中基因组进行分析，共检测到29种耐药基因，涵盖了八大类抗生素，其中sul2(13.64%)和tet(B)(10.64%)携带率最高。综上所述，禽源多杀性巴氏杆菌国内外流行率存在差异且对多种常用抗生素耐药率较高。可根据地区流行特点针对性使用疫苗、噬菌体等防治手段，减少耐药率高的抗生素使用，以实现高效的治疗效果，建立绿色、可持续的养殖模式。

旨在通过全基因组关联分析(GWAS)解析大白猪关键生长性状的遗传机制，为分子标记辅助育种提供理论依据。本研究以5 701头大白猪为研究对象，采集猪达100kg体重日龄(AGE)、达100 kg体重背膘厚(BF)及达100 kg体重眼肌面积(LMA)的表型数据，结合Illumina 50K SNP芯片基因分型数据，采用混合线性模型进行全基因组关联分析，鉴定与猪生长性状相关的SNPs与候选基因。结果表明：AGE、BF和LMA遗传力分别为0.50、0.45和0.43，均属中高遗传力性状，AGE与BF的遗传相关系数为-0.13，表型相关系数为-0.20；AGE与LMA的遗传相关系数为-0.09，表型相关系数为-0.31；BF与LMA的遗传相关系数为0.22，表型相关系数为0.06；GWAS分析共鉴定出13个显著SNPs，其中AGE鉴定出8个显著SNPs，关联到PIK3CG等11个候选基因；BF鉴定出3个显著SNPs，关联到IFN-ALPHA-15等6个候选基因；LMA鉴定出2个显著SNPs，关联到ALDH6A1基因。本研究通过长白猪生长性状的GWAS鉴定了PIK3CG、ELOVL2、IFN-ALPHA-15和ALDH6A1等20个与猪生长性状相关的候选基因。研究结果为猪生长性状的分子标记辅助选择育种提供了重要参考。

旨在以绵羊原代细胞为材料，验证CRISPR/Cas12i系统介导的以ssODN为供体进行HDR精准修复的基因编辑效率，以及5种小分子药物对Indels效率和敲入效率的影响。本研究以两种绵羊原代细胞为试验对象，验证CRISPR/Cas12i系统在25个靶基因位点的基因编辑效率；然后选取绵羊胎儿成纤维细胞的3个靶点(SOCS2-gRNA1、SOCS2-gRNA3和TBXT-gRNA5)，绵羊后腿肌细胞的5个靶点(MSTN-gRNA2、MSTN-gRNA5、Myf6-gRNA4、Myf6-gRNA5和MyoG-gRNA4)检测5种小分子药物(SCR7、Nocodazole、RS-1、Vorinostat及Entinostat)对各靶点Indels效率的影响，最后在MSTN-gRNA2靶点检测5种小分子药物对CRISPR/Cas12i系统介导的以ssODN为供体进行HDR精准修复的基因敲入效率的影响。本研究验证了CRISPR/Cas12i系统在两种绵羊原代细胞的25个不同靶点均具有高基因编辑活性，添加小分子药物处理后，SCR7会降低绵羊原代细胞各靶点Indels效率，而RS-1、Entinostat和Vorinostat处理后对各位点Indels效率均有提升效果，Nocodazole对两种细胞作用效果不一致。在添加5种小分子药物处理后，MSTN-gRNA2位点敲入效率均有不同程度提高，其中2 μmol·L^-1 Vorinostat和4 μmol·L^-1 Entinostat处理组提升效果最高，敲入效率分别为7.67%和7.73%。该试验为CRISPR/Cas12i基因编辑系统的应用与推广提供了借鉴，为创制具有优良性状的基因编辑绵羊提供了新思路，为加速精准分子育种工作提供了技术支撑。

旨在挖掘绵羊中与优异性状相关基因，对遗传改良与育种实践具有重要价值。本研究以93只策勒黑羊、33只皮山红羊和13只瓦格吉尔羊为对象，进行颈静脉采血、DNA提取、基因分型。用PLINK软件对基因型数据进行质量控制(质控标准为：剔除个体检出率小于90%、SNP检出率小于95%、最小等位基因频率小于5%、哈代温伯格平衡P < 1×10^-6的SNPs)和主成分分析(PCA)，构建进化树、群体祖先成分分析和连锁不平衡分析(LD)，同时基于全基因组长纯合片段(runs of homozygosity, ROH)分析和群体遗传分化指数(F_ST)分析，选择前10%的ROH片段作为高频区域和F_ST值的前5%位点作为受选择区域，参考绵羊基因组Oar＿v4.0注释基因并进行GO和KEGG分析。F_ST和F_ROH结果表明，3个群体之间遗传分化水平较低，且在K=4呈现清晰的遗传背景分化。同时识别出ACVR1、ACVR1C、UPP2、CRY1和NR4A2等是南疆地方绵羊品种在干旱沙漠环境中形成遗传适应性的候选基因。本研究通过群体遗传结构多样性和选择信号分析，揭示了南疆地方绵羊品种的遗传变异特征，从多维度的遗传变异视角寻找到相关优异基因，为绵羊种质资源保护、新品种培育及资源多样性提升提供了重要参考依据。

旨在研究CTCF对绵羊前体脂肪细胞分化的作用及其调控机制。本研究采集4只8月龄的广灵大尾羊不同部位脂肪组织，实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测CTCF的表达水平；1只3日龄健康广灵大尾羊中分离原代前体脂肪细胞，在前体脂肪细胞内过表达或干扰CTCF基因，每个处理组设置3个重复。采用qRT-PCR、蛋白质印迹法(Western blotting)和油红O染色技术检测该基因对绵羊前体脂肪细胞分化的调控作用；对过表达CTCF的绵羊前体脂肪细胞进行转录组测序分析，筛选差异基因和通路，探索CTCF调控脂代谢相关信号通路的分子机制。结果表明，CTCF在尾部脂肪中的表达量显著高于肾周和皮下脂肪组织(P < 0.05)；与对照组相比，过表达CTCF后，成脂标志基因的表达水平较对照组显著升高(P < 0.05)，细胞内脂滴生成量增加；干扰CTCF后结果相反。转录组分析结果显示，两组间筛选出1 079个差异表达基因，这些差异表达基因富集到一些脂肪代谢相关通路，包括鞘脂信号通路、FoxO信号通路和AMPK信号通路等，筛选出CCND2、ITGA7、BRCA1、LAMA5和CCNE2等影响脂肪代谢的候选基因。本研究结果表明，CTCF能够促进绵羊前体脂肪细胞的分化，并揭示出影响CTCF脂肪代谢的相关通路及候选基因。

旨在探究生长期三花鹅和皖西白鹅绒羽生长发育情况、羽囊特性以及调控羽囊发育相关基因的表达。本研究以皖西白鹅和三花鹅为研究对象，分析鹅90日龄朵绒长、千朵绒重、绒朵直径的变化；对鹅皮肤进行苏木精-伊红染色(HE染色)和三色染色(Masson染色)并观察各个阶段羽囊生长变化；采用荧光定量PCR法研究不同生长期白鹅皮肤组织中Wnt5a、IGF-1、BMP2和FGF5基因的表达情况。结果表明：1)观察不同部位绒羽形态发现皖西白鹅比三花鹅的绒羽更加蓬松，绒羽更大。2)观察绒羽的显微结构发现，60日龄三花鹅绒羽的绒小枝节点呈叉状节点，90日龄时绒小枝节点呈现三角形节点。60日龄皖西白鹅绒羽的绒小枝节点呈现三角形和叉状节点两种，90日龄时绒小枝节点呈现出三角形节点并在末端出现叉状节点。3)通过测量发现90日龄三花鹅和皖西白鹅不同部位的绒羽性状指标均显著优于60日龄同品种同部位。4)测定不同羽囊直径发现90日龄三花鹅和皖西白鹅不同部位的次级羽囊显著高于60日龄同品种同部位。5)荧光定量PCR结果显示，60日龄时皖西白鹅皮肤中Wnt5a基因表达量最高，但其在90日龄三花鹅和90日龄皖西白鹅皮肤中的表达量无显著差异(P>0.05)。60日龄皖西白鹅皮肤中BMP2、IGF-1基因表达量极显著高于60日龄三花鹅和90日龄皖西白鹅(P < 0.01)；其中90日龄时三花鹅皮肤中BMP2、IGF-1基因表达量最低。FGF5基因在不同日龄三花鹅和皖西白鹅皮肤中的表达量无显著差异(P>0.05)。从绒羽测定指标发现，日龄越大绒羽质量越好，无论是三花鹅还是皖西白鹅背部绒朵质量最好。从基因水平可见，60、90日龄皖西白鹅背部皮肤中Wnt5a、BMP2、IGF-1基因表达量均显著高于三花鹅。另外，鹅绒羽质量与羽囊发育密切相关，而羽囊发育受多种基因的调控。

旨在利用全基因组重测序技术分析豁眼鹅(五龙鹅)群体遗传多样性，评估种质资源保护状况，为后续保种工作提供参考。本研究从山东莱阳豁眼鹅(五龙鹅)保种场随机选取了40只公鹅进行全基因组重测序，分析了其遗传多样性、群体遗传结构和连续纯合片段等。结果表明，40只豁眼鹅(五龙鹅)平均测序深度为13×，质控后共鉴定到13 251 291个SNPs位点。群体遗传多样性分析发现，本保种群体平均多态信息含量(PIC)为0.264，平均观察杂合度(Ho)为0.323，平均期望杂合度(He)为0.327，群体近亲系数(F)为0.012。LD衰减分析结果可知，最大R²值为0.47，衰减距离为162 kb。豁眼鹅(五龙鹅)保种群体共检测到309个连续纯合片段(ROH)，基于ROH值计算得出的近交系数(F_ROH)为0.009，表明群体近交程度较低。IBS距离矩阵和G矩阵的结果趋势相似，只有少部分的个体间亲缘关系较近。主成分分析与NJ聚类分析结果同样显示, 保种群总体呈离散状态。总体而言，本次调查的山东莱阳豁眼鹅(五龙鹅)保种场种群遗传多样性良好、近交程度较低，保种效果良好。

旨在比较分析宁强马和济州马的遗传多样性及矮小体型的遗传基础。本研究基于199匹现代家马的重测序数据比较分析了宁强马和济州马的遗传结构、遗传多样性和遗传分化，重点比较了矮小体型的遗传基础。群体结构分析显示，宁强马属于中国西南矮马，而济州马具有区别于西南矮马的祖先成分。核苷酸多样性、近交系数和ROH分析表明，济州马近期经历了较强的人工选育，遗传多样性较低，而宁强马具有较高的遗传多样性。此外，宁强马与德保矮马的遗传距离最近(F_ST=0.02)，而济州马与国内11个马品种均具有中等程度的遗传分化(F_ST>0.05)。全基因组选择扫描在宁强马和济州马基因组中检测到多个差异候选区域，鉴定到与生长发育(TBX5、TBX3、MEIS1、CECR2)和免疫(ADA2、AP3B1)相关的基因。综上，宁强马和济州马具有不同的祖先成分和选育程度，遗传分化明显，且矮小体型的遗传基础不同。这些结果对于深入了解世界矮马矮小性状的遗传基础以及中国马品种的保护和利用具有重要意义。

旨在优化荣昌猪体内胚胎冷冻方法，提高冷冻胚胎冻后囊胚孵化率。本试验使用50头荣昌猪经同期发情、定时输精和手术冲胚获得体内胚胎，通过比较不同冷冻载体(SOPS与Cryotop)，不同玻璃化冷冻保护剂(Medium-199、NCSU23与TL-PVA)，桑葚胚冻前脂质离心极化和解冻后胚胎透明带消化等处理，通过检测解冻后胚胎的存活率、继续发育能力和囊胚细胞数等，筛选最优的荣昌猪体内胚胎冷冻方法。荣昌猪经同期发情和手术冲胚后，平均获囊胚9.22枚·头^-1；结合体外培养，平均可生产囊胚12.16枚·头^-1。Cryotop冻胚存活率与发育率均显著高于SOPS(P < 0.05)；NCSU23组冻胚存活率和继续发育率最高，分别达85.91%±3.27%和80.61%±10.06%，优于Medium-199和TL-PVA；在解冻后囊胚细胞数方面，NCSU23组>Medium-199组>TL-PVA组；研究结果表明，NCSU23是荣昌猪胚胎的最适冷冻液。冷冻前离心极化脂质的桑葚胚，冷冻后未见继续发育。冷冻胚胎的透明带消化时间延长，透明带硬化阻碍了冻胚进一步扩张与孵化，通过消化透明带可促进冻胚扩张。荣昌猪体内胚胎生产结合体外培养可有效提升单位供体的囊胚获得数，平均生产囊胚12.16枚·头^-1。使用NCSU23冷冻保护剂和Cryotop玻璃化冷冻的方法，可获最高85.91%±3.27%的冻胚存活率和80.61%±10.06%的囊胚扩张/孵化率，且囊胚细胞数显著提高。解冻后消化透明带可促进解冻后的胚胎扩张。

旨在评估体细胞克隆技术(SCNT)在托佩克E系超级公猪快速扩群中的应用效果。本研究以12头超级公猪为供体，进行细胞分离培养、冻存和扩增传代培养出1 100个胚胎并移植至6头母猪，最终4头分娩29头仔猪(克隆效率2.63%)，并对克隆猪与非克隆猪的生长发育、精液品质及所配母猪繁殖性能进行比较分析。结果，克隆猪与供体正常后代在生长发育上无显著差异，克隆猪在精液体积((188.17±49.27)mL)和有效精子数((486.35±159.56)亿)相较于供体同胞后代和供体半同胞无显著差异(P＞0.05)，配种后的母猪繁殖性能无明显差异，且SNP检测证明克隆猪与供体基因不一致率均在0.14%以下，表明遗传信息来源于供体。综上，克隆猪相较于供体后代繁殖性能和生长性能无明显差异，SCNT技术可有效用于超级公猪扩群生产。

旨在优化绵羊卵母细胞小群(5枚/组)体外培养体系，改善其成熟质量及后续发育潜能。本研究通过设置不同培养体积(50 COCs/500 μL、5 COCs/500 μL、5 COCs/50 μL)及添加外源BMP15与GDF9蛋白(200 ng·mL^-1)，评估颗粒细胞扩展指数及其相关HAS2基因表达、卵丘和卵母细胞凋亡相关基因(BAX、BCL2、C-Myc)表达、卵母细胞氧化还原稳态(GSH、ROS、GPX-1、GSR)及胚胎发育指标(卵裂率、囊胚率、囊胚平均细胞数)，并进一步优化体外成熟培养时长(18 h、21 h、24 h)，确立优化方案。结果表明，添加BMP15和GDF9显著提升卵丘扩展指数(P < 0.01)，上调HAS2基因表达，改善氧化还原稳态(GSH水平升高，ROS降低)；500 μL培养液结合21 h成熟方案使小群培养卵母细胞体外受精后的48 h卵裂率达到70.23%±2.78%及囊胚率35.33%±1.53%，而21 hIVM组较24 h IVM组BAX表达量和BAX/BCL2比值显著降低。5 COCs /500 μL小群培养效果优于5 COCs/50 μL，联合添加BMP15和GDF9蛋白可降低细胞凋亡并提升胞内氧化还原能力，体外成熟时长由24 h缩短至21 h可通过降低细胞凋亡并促进囊胚OCT4、CCNB1基因表达并且提高囊胚平均细胞数。

旨在研究鞣花酸(EA)及其代谢物尿石素A(UA)、尿石素B(UB)和尿石素C(UC)对贵州黑山羊卵巢颗粒细胞(OGCs)促增殖、抗氧化、抑凋亡的效果对比，以期寻找相较于EA更优的选择。本研究通过采集健康且性成熟的羊卵巢组织，分离培养OGCs，经鉴定后用于后续研究。同时，基于课题组前人的研究发现，1 μmol·L^-1浓度的EA对OGCs具有最优的生物学效应。因此，试验分为5组：对照组(CON组)、EA组、UA组、UB组、UC组，处理组分别添加1 μmol·L^-1对应药物。随后，采用CCK-8检测添加各组药物0、24、36及48 h对OGCs细胞增殖的影响，采用细胞划痕试验检测其对OGCs细胞迁移的影响，采用ROS试剂盒检测其对OGCs的ROS水平影响，最后通过qRT-PCR检测其对抗凋亡基因Bcl-2，促凋亡基因Bax、Caspase-3、Caspase-9，炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α及繁殖相关基因GDF9、BMPR-1B、CYP19A1、FSHβ mRNA表达的影响。UA对OGCs的增殖效果最好，其次是EA与UB，最后是UC；细胞划痕试验发现UA显著促进了细胞迁移能力，UB显著抑制了细胞迁移，且EA与UA相比，两者之间并无显著性差异；ROS试验发现，UA与EA显著降低了细胞内ROS含量；qRT-PCR结果发现，与CON组相比，UA、UB、UC、EA组中促凋亡基因CASP3、CASP9、BAX的mRNA表达水平显著降低，而在抗凋亡方面，UA组中BCL-2的表达量显著高于其他组。对炎症因子mRNA表达水平的检测结果显示，UA、UC、EA组IL-1β相对表达量显著低于CON组，且UA组mRNA表达量最低；各组IL-6的表达量与CON组无显著差异，但TNF-α含量均显著降低。对繁殖相关基因的检测结果显示，UA、EA组GDF9、BMPR-1B、CYP19A1和FSHβ的表达量均显著高于CON组，其中UA组表达量最高。本研究发现，与EA及EA其他代谢物相比，UA在促进OGCs增殖、迁移、抗氧化、抗凋亡及调控生殖-炎症相关基因表达方面具有显著优势，可作为哺乳动物繁殖调控的重要添加剂进行深入研究。

旨在评估构树叶不同添加量和不同添加时间对黄羽肉鸡生产性能和肉品质的影响。选择1日龄黄羽肉鸡360只，随机分成4个处理组，每个处理组6个重复；4个处理组分别全期(1~63日龄)饲喂玉米豆粕型基础日粮(对照组)、全期饲喂5%构树叶日粮(全期5%组)和15%构树叶日粮(全期15%组)，以及后期(36~63日龄)饲喂15%构树叶日粮(后期15%组)。结果发现，与对照组相比，全期5%和15%组黄羽肉鸡的体重和日增重显著降低(P < 0.05)，料重比显著提高(P < 0.05)，而后期15%组黄羽肉鸡的生产性能与对照组差异不显著(P>0.05)；与对照组相比，三个构树叶处理组黄羽肉鸡胸肌和腿部皮肤的黄度值(b^*)显著提高(P < 0.05)，胸肌pH、滴水损失和剪切力无显著差异(P>0.05)；与对照组相比，构树叶处理组黄羽肉鸡胸肌中单不饱和脂肪酸的比例显著降低，多不饱和脂肪酸的比例显著提高(P < 0.05)，胸肌中的蛋白质和氨基酸含量无显著差异(P>0.05)；另外，全期和后期饲喂15%构树叶均显著提高了黄羽肉鸡胸肌中肌苷酸的含量(P < 0.05)。综上所述，后期饲喂15%构树叶对黄羽肉鸡的生产性能无显著影响，可提高黄羽肉鸡皮肤的黄度值，提高胸肌中多不饱和脂肪酸的比例和肌苷酸含量，对肌肉品质有一定的改善作用。

旨在测定不同来源的10种豆粕的化学成分含量及不同日龄(13日龄与28日龄)肉鸡对其的标准回肠氨基酸消化率(standardized ileal amino acid digestibility, SIAAD)，并建立预测方程。试验采用完全随机设计，将1日龄健康状况良好的雄性AA肉仔鸡990只按体重相近原则随机分为11个处理组，即1个无氮日粮组和10个豆粕处理组。试验分为10~13日龄(每个处理组6个重复，每个重复10只鸡)和25~28日龄(每个处理组6个重复，每个重复5只鸡)两个试验期，分别在13日龄和28日龄时收集回肠食糜以检测SIAAD。结果表明：不同来源的豆粕化学成分差异较大。除His的标准回肠消化率(standardized ileal digestibility, SID)之外，不同豆粕来源与日龄对肉鸡SIAAD有显著的互作效应(P < 0.05)，不同来源豆粕的肉鸡SIAAD差异显著(P < 0.05)，除豆粕中SID Lys和SID Met外，肉鸡日龄对豆粕的SIAAD有显著影响(P < 0.05)，豆粕的SIAAD在28日龄显著高于13日龄(P < 0.05)。分别成功构建了13和28日龄肉鸡豆粕SIAAD预测模型12和16个，其中拟合度最好的预测模型为：SID Arg=254.056-1.179CP+1.212EE-0.409ADF-0.586Ash-0.08TI+0.885PA-1.509NFE-3.265GE (13日龄，R²=0.999，P < 0.000 1)；SID Trp=-107.513+11.121GE(28日龄，R²=0.467，P=0.029 3)。综上，不同来源豆粕的化学成分之间差异较大，13日龄的预测模型拟合度相对高于28日龄，本研究中的预测模型对于豆粕的肉鸡SIAAD预测有较好的参考价值。

本研究旨在制备A型口蹄疫病毒(FMDV-A)多表位纳米融合蛋白并建立磁微粒CLIA抗体检测方法，为FMDV的临床监测和防控提供技术支撑。以表达的FMDV-A型多表位融合蛋白及其多克隆抗体为基础建立FMDV-A型磁微粒CLIA抗体检测方法，优化反应条件，并与商品化试剂盒同时进行临床样品的检测，比较两种方法的符合率。结果显示：本研究最终成功制备了高可溶性FMDV-A型多表位纳米融合蛋白及其特异性多克隆抗体，多克隆抗体效价为1∶5 120，并根据竞争法免疫原理建立了FMDV-A型磁微粒CLIA抗体检测方法。SA-Beads最佳浓度为0.5 mg·mL^-1，生物素标记的FMDV-A型重组蛋白抗原最佳工作浓度为5 μg·L^-1，AE标记的多克隆抗体最佳工作浓度为2 μg·L^-1；最佳上样体积为10 μL，最佳反应时间为15 min。敏感性试验结果表明，该方法的敏感性为97.47%，敏感性好。特异性试验结果表明，与其他相似病原没有交叉反应，特异性强。重复性试验结果说明变异系数CV值均小于5%，具有良好的稳定性和重复性。临床试验结果表明，与中国农科院兰州兽医研究所LPB-ELISA方法比较，总符合率为96.76%，为国内FMDV-A的研究与快速诊断建立了技术基础。本研究成功制备FMDV-A型毒株的VP1多表位融合纳米颗粒蛋白，并获得其高效价多克隆抗体，应用该蛋白和多克隆抗体建立了FMDV-A型磁微粒CLIA抗体检测方法。

为了探讨猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus，PEDV)新型野毒株对初生仔猪肠道损伤及肠道细胞巨泡式死亡的影响，选取8头5日龄的健康仔猪，随机分为空白对照组(Mock组)和PEDV感染组，病毒感染后记录临床症状并在2 d后实施安乐死，之后分别采集十二指肠、空肠、回肠、盲肠、结肠和直肠的组织样品。采用苏木精-伊红(HE)染色、免疫组织化学(IHC)染色、RT-qPCR和Western blot技术检测PEDV感染仔猪后各肠段的组织病理学变化、病毒在肠道中的定位及对巨泡式死亡的影响。HE染色结果显示，PEDV对仔猪各肠段黏膜结构均有不同程度的损伤，其中对空肠的损伤最为严重。RT-qPCR结果证实PEDV感染仔猪后，空肠中病毒载量最高。IHC染色发现PEDV主要分布在小肠黏膜的上皮层中，其中在空肠中阳性信号最多，与RT-qPCR结果一致。深入研究揭示PEDV感染组的空肠组织中巨泡式死亡相关基因Rac1(Ras相关C3肉毒菌毒素底物1)、Rab7(Ras相关蛋白7)和LAMP1(溶酶体相关膜蛋白1)的表达量显著上调，Western blot试验也进一步证实了这一发现。以上结果表明，PEDV新型野毒株感染仔猪后主要定位于小肠，对空肠的损伤最严重，并使空肠发生巨泡式死亡。本研究可为深入理解PEDV的感染发病机制提供可靠的参考依据。

猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus, PRRSV)分为欧洲型和美洲型两个种，即PRRSV-1和PRRSV-2，病毒存在基因变异，严重危害世界养猪业健康发展。本研究采用猪肺泡巨噬细胞(porcine alveolar macrophages, PAMs)从贵州省某发病猪场发病仔猪的肺脏组织分离获得1株PRRSV-1 GZ0308。该病毒株基因组全长14 970 bp，与PRRSV-1毒株LV相似性为86.99%，与PRRSV-2 VR2332相似性为66.49%。基因进化树分析，GZ0308毒株位于PRRSV-1的亚型1的一个新的分支。与LV毒株基因比较，GZ0308 NSP2基因编码区含有43个不连续氨基酸缺失，ORF3和ORF4的重叠区域存在5个连续氨基酸的缺失。5周龄仔猪以10^5.5TCID₅₀·mL^-1的病毒滴度分别肌肉和滴鼻接种GZ0308毒株病毒液各2 mL，结果显示，与对照组相比，GZ0308攻毒组仔猪出现短时体温升高、精神萎靡、日增重显著减少、肺脏出现典型弥漫性间质性肺炎病变，证明该毒株对仔猪具有致病性，从而为我国PRRSV分子流行病学研究提供了新的数据。

为研究猪伪狂犬病病毒(pseudorabies virus，PRV)地方分离株的变异情况，本试验从烟台某猪场送检的病料中成功分离到一株PRV毒株，命名为JH2403。对其gB、gC、gD、TK基因进行遗传进化分析并研究其对小鼠及仔猪的致病性。结果显示：系统发育分析表明：该毒株gB、gC、gD、TK基因与疫苗株Bartha-K61相似性为99.9%~100%，3个位点AA发生突变。1×10³TCID₅₀·mL^-1病毒液0.2 mL·只^-1感染小鼠，第6天死亡率100%，小鼠脑膜充血且HE染色可见淋巴细胞浸润。仔猪致病性试验表明，高、低剂量攻毒组仔猪均出现发热、瘙痒等明显临床症状，但无死亡。综上，本研究成功分离到一株PRV毒株，与疫苗株Bartha-K61相似性最高，对小鼠的致病性较强，对仔猪致病性较低。本研究为山东省PRV遗传进化及流行病学研究提供一定参考。

鸡传染性支气管炎是由鸡传染性支气管炎病毒(IBV)感染引起的鸡的一种急性、高度传染性的病毒性呼吸道疾病。为建立一种适合现场化检测IBV的方法，本研究靶向IBV的保守基因M设计引物及探针，结合RPA与胶体金技术，创制了一种能在1 h内出结果的检测IBV的RPA-胶体金试纸条方法。特异性检测证明，该RPA-试纸条方法仅能检测出IBV，而不与禽流感病毒(AIV)、鸡传染性法氏囊病毒(IBDV)、新城疫病毒(NDV)、禽白血病病毒(ALV)和鹅星状病毒(GAstV)等反应。灵敏度检测证明，该RPA-试纸条方法的最低检测限为8.26 TCID₅₀·mL^-1。对31份临床样本的比对检测表明，本RPA-试纸条方法、qPCR以及常规PCR的检测阳性率分别为74.2%、64.5%与54.8%。综上，本研究建立的RPA-试纸条快速检测IBV的方法特异性强、敏感性高、操作便捷，为IBV高效诊断及其免疫防控提供了新方法。

禽流感(avian influenza，AI)是威胁我国养禽业健康发展的重要疫病，其感染传播迅速、范围广泛且具有跨物种传播特性，对动物和人类健康均构成严重威胁。尤其是人畜共患的流感病毒感染危害性更大，可能引发巨大的经济损失和社会影响。因此，快速、灵敏地检测常见禽流感病毒对于控制疾病的传播具有重要意义。本研究旨在建立一种高效、便捷的禽流感检测方法。根据禽流感病毒H5N1 HA和H9N2 HA保守序列设计引物和探针，结合重组酶介导等温扩增(recombinase-aid amplification，RAA)技术和侧向流试纸条(lateral flow dipstick，LFD)技术，建立了一种禽流感病毒的RT-RAA-LFD检测方法。能够在37 ℃下15 min完成检测。结果显示：AIV H5亚型和AIV H9亚型之间，以及与其他常见禽病的核酸均无交叉反应，特异性良好。RT-RAA-LFD检测灵敏度可达每个反应100个拷贝，比普通RT-PCR检测的灵敏度高约100倍。此外，在测试120份临床标本后，RT-RAA和商品化RT-qPCR以及RT-PCR检测之间达到了99%的一致性。综上，该方法能够快速、准确、简便、直观地检测出禽流感病毒H5和H9亚型，为禽流感的检测提供了一种直观有效的方法。

为了缩短J、K亚群禽白血病病毒(subgroup J/K avian leukosis virus, ALV-J/K)净化检测周期，加快禽白血病(avian leukosis，AL)净化进程，本研究建立了一种适用于ALV-J/K低流行率场景下的血液核酸快速筛查技术(ALV-J/K blood quantitative polymerase chain reaction, ALV-J/K-B-qPCR)。选取ALV-J、ALV-K保守区域设计特异性引物和TaqMan探针，并优化反应条件，建立了ALV-J/K TaqMan qPCR方法。以细胞病毒分离鉴定为ALV-J/K的阳性血液为实验材料，制备抗凝血DNA、血细胞DNA和血浆cDNA，进行ALV-J/K TaqMan qPCR检测，筛选最佳检测模板；使用血液室温裂解试剂盒和通用型柱式基因组DNA提取试剂盒提取核酸，筛选核酸提取方法；探索阳性样品不同稀释倍数对检测结果的影响，评估混合样本检测的可行性。运用ALV-J/K-B-qPCR进行预期流行率为1%~2%的血液核酸筛查模拟试验，并与病毒分离法比较。结果显示：ALV-J/K TaqMan qPCR特异性、灵敏性和重复性试验结果显示，该方法仅能特异性扩增ALV-J和ALV-K，对阳性标准品的检测下限分别为8.95×10¹ copies·μL^-1、8.16×10¹ copies·μL^-1，比普通PCR灵敏性高100倍，批内和批间变异系数均＜2%。96份临床样本检测结果显示，ALV-J/K TaqMan qPCR检出率为21.9%，高于普通PCR(15.6%)和ALV p27 ELISA(18.8%)。检测模板筛选试验中，抗凝血DNA为最佳检测模板。核酸提取方法筛选试验中，通用型柱式基因组DNA提取试剂盒提取核酸检测效果最好。混合样本检测可行性评估试验中，本研究建立的检测方法混合样本数量＜10时，可检测低病毒载量样本。预期流行率为1%~2%的血液核酸筛查模拟试验结果显示，ALV-J/K-B-qPCR检出率为4%，比病毒分离法高2.5%。本研究建立的ALV-J/K-B-qPCR技术具有同时检测并鉴别ALV-J和ALV-K、检测效率高和节约成本的优势，以期为种禽场AL净化提供新技术。

为了探究禽白血病病毒(ALV)的进化趋势和分子特征，本研究从上海市某鸡场采集了1 600份血液样品，接种鸡成纤维细胞系(DF-1)分离病毒，通过PCR扩增gp85基因序列进行亚群分型，进一步通过间接免疫荧光试验(IFA)和多步生长曲线对其生物学特性进行鉴定，并将分离株和ALV各亚群毒株的编码区和非编码区进行序列比对和分子构象分析。结果显示，通过PCR和IFA鉴定本研究共分离到了6株ALV-J亚群毒株，其中ALV-J-345株和ALV-J-480株序列存在明显差异，且ALV-J-480株在DF-1细胞上比ALV-J-345株具有更强的复制能力，进一步比对两株分离株和ALV-J其他毒株的序列发现，两株分离株的gp85和gp37蛋白之间共存在46个差异氨基酸位点，且ALV-J-480株和其他ALV-J毒株的相似性更低，除此之外ALV-J-480株pol基因在第866个氨基酸位置提前产生一个终止密码子，使其缩短了8个氨基酸，在非编码区位置上ALV-J-345株在3'UTR的E(XSR)元件区缺失了7个核苷酸，而ALV-J-480株在5'UTR的第358~376位置处多插入了19 nt的核苷酸，这些位置上的序列差异，可能是导致ALV-J-480株具有更强复制能力的原因，这使得其在鸡群中有成为新的流行毒株的竞争优势。因此本研究提供了关于ALV-J分子特征的最新数据，这将有助于揭示ALV-J的进化趋势，并为制定相关的防控措施提供参考。

旨在研究FCV NS2蛋白与宿主细胞之间的相互关系。本研究用FCV的NS2真核表达质粒转染CRFK细胞同时设立空载体转染对照组，每组各三个样本于转染后24 h收样进行转录组测序。结果显示：通过比较两组测序结果，发现转染NS2蛋白的试验组细胞存在218个差异表达基因，其中上调基因200个下调基因18个。通过GO富集分析和KEGG富集分析，发现显著差异基因主要集中病毒胞内入侵和免疫逃逸相关信号通路。本研究揭示NS2蛋白对CRFK细胞的内体转运、TGF-β和RIG-Ⅰ等多个信号通路在转录水平具有明显的调控作用，系统性揭示FCV NS2蛋白对宿主细胞整体转录调控模式，为后期研究FCV与宿主细胞互作提供了新的研究思路。

旨在从健康蛋鸡粪便样品中分离鉴定枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis, B.S)，并探究其对大肠杆菌(Escherichia coli, E.coli)诱导蛋雏鸡腹泻的保护作用。试验采用形态鉴定和16S rDNA测序法分离、筛选鉴定B.S，检测其对pH、胆盐和人工胃肠液的耐受性及溶血性。动物试验选取96只1日龄健康大午金凤蛋鸡，随机分为8组，每组12只鸡，分别为对照组(饲喂基础日粮，CON)、低剂量组(饲喂基础日粮的基础上，口服1 mL×10⁹ CFU的B.S JZH 9，LBS)、中剂量组(饲喂基础日粮的基础上，口服1 mL×10¹⁰ CFU的B.S JZH 9，MBS)、高剂量组(饲喂基础日粮的基础上，口服1 mL×10¹¹ CFU的B.S JZH 9，HBS)、模型组(饲喂基础日粮的基础上，口服1 mL×4.5×10¹² CFU的E.coli O78，Model)、低剂量预防组(LBS + E.coli)、中剂量预防组(MBS + E.coli)、高剂量预防组(HBS + E.coli)，研究口服B.S JZH 9对健康及E.coli O78攻毒下蛋雏鸡生长性能和肠道健康的影响，试验周期为21 d，1~18 d口服B.S JZH 9，19~21 d口服E.coli O78。结果表明：分离菌株为革兰阳性菌，结合16S rDNA鉴定确定为B.S，命名为B.S JZH 9，耐酸、耐胆盐，无溶血反应，对人工胃肠液具有耐受性。动物试验结果表明：与CON相比，无攻毒的LBS、MBS、HBS对1~21 d的平均日增重(average daily gain, ADG)、平均日采食量(average daily feed intake, ADFI)、饲料转化率(feed conversion rate, FCR)无显著影响；与Model相比，LBS + E.coli有降低1~21 d FCR的趋势；LBS + E.coli、MBS + E.coli、HBS + E.coli显著提高了十二指肠绒毛高度和绒隐比，MBS + E.coli组、HBS + E.coli组显著降低了十二指肠隐窝深度；与CON相比，Model空肠E.coli含量显著升高，饲喂不同浓度的B.S JZH 9不同程度地降低了E.coli的相对含量。综上所述，源自健康蛋鸡粪便的B.S JZH 9，通过促进雏鸡生长性能，增加小肠绒毛高度和绒隐比，降低隐窝深度，增大小肠的吸收面积，降低空肠E.coli的含量，从而调节肠道健康，减缓大肠杆菌对肠道造成的损伤。

旨在对1株分离出的变栖克雷伯菌噬菌体进行生物学特性及全基因组分析。使用双层平板法从四川省某奶牛场乳样中分离、纯化出1株裂解性噬菌体，测定其裂解谱、热稳定性、酸碱耐受度、最佳感染复数及一步生长曲线等生物学特性，并进行全基因组分析, 同时采用透射电镜观察噬菌体形态。结果显示，分离得到一株裂解性变栖克雷伯噬菌体vB-Kvc-Y10，噬菌斑透明且有晕环，透射电镜显示其有一丝状短尾。生物学研究结果表明，噬菌体Y10宿主特异性强，不耐高温，不耐酸，最佳感染复数为0.01。一步生长曲线结果显示：潜伏期为40 min，裂解量306。全基因组分析表明：噬菌体Y10属于自复制短尾噬菌体科，为dsDNA病毒。完整基因组大小为43 281 bp，GC含量为56.19%，51个ORFs中有29个具有可推定的功能，且具有明显的功能分区。在Y10基因组中，没有发现tRNA和毒力基因的存在。遗传进化树和ANI分析均表明，噬菌体Y10与噬菌体vB_Kpl_K59PH2(登录号：OY757063)的亲缘关系最近。综上，本研究分离的噬菌体vB-Kvc-Y10是一株高特异性的裂解性噬菌体，不具有毒力基因，具有防治细菌感染的潜力。

本研究聚焦于亚洲璃眼蜱(Hyalomma asiaticum)雌性成蜱，深入探究其在不同吸血阶段以及完全饱血状态下，体内部分器官的菌群构成情况。通过分析吸血期对菌群丰度差异的影响，旨在获取雌性亚洲璃眼蜱体内菌群变化的关键数据，为相关研究提供数据参考。本研究运用Illumina Novaseq测序平台，针对亚洲璃眼蜱雌性在不同吸血阶段以及完全饱血状态下的多个器官(包括中肠、马氏管、卵巢、唾液腺)，开展16S rRNA V3 - V4区的高通量测序工作。通过对比分析，揭示亚洲璃眼蜱雌性在不同阶段以及完全饱血状态下各器官菌群的动态变化规律。随着亚洲璃眼蜱吸血进程的推进，其菌群多样性Shannon指数呈现出显著降低的趋势，从饥饿期的4.2±0.3下降至饱血期的1.8±0.2 (P < 0.01)。在此过程中，变形菌门(Proteobacteria)逐渐成为绝对优势菌门，其相对丰度超过99%。对完全饱血器官的分析表明，弗朗西斯菌属(Francisella)在饱血卵巢中高度富集，相对丰度高达99.75%，且与中肠中的弗朗西斯菌属存在极显著差异(P < 0.01)。此外，该菌属的丰度随吸血时间呈现出先上升后下降的趋势，具体表现为在吸血24 h时丰度为12.3%，至96 h时达到峰值89.7%，而在完全饱血期则降至75.3%。本研究结果充分揭示了亚洲璃眼蜱雌性在不同吸血阶段以及完全饱血状态下内部器官中菌群的复杂性和多样性特征。这一发现不仅丰富了人们对亚洲璃眼蜱相关菌群的认知，还为进一步深入理解亚洲璃眼蜱体内菌群与宿主之间的互作关系提供了重要的数据基础。

旨在探究孟加拉虎体表不同饱血状态长角血蜱雌蜱中肠菌群结构的特点。本研究采集孟加拉虎体表饱血(fully engorged，FF)与半饱血(half engorged，HF)长角血蜱雌蜱，在无菌条件下收集各组蜱中肠内容物，提取各组样本细菌总DNA，PCR扩增16S rRNA V3-V4区，构建文库，Illumina NovaSeq平台双末端测序，测序数据经拼接、过滤、降噪后，进行Amplicon Sequence Variant(ASV)和多样性分析。结果显示，FF、HF获得的有效序列分别为100 021条和82 657条，聚类后FF、HF分别获得ASVs为259、541个，两组样品共有的ASVs为116个。在门水平上，两组样本均以变形菌门、厚壁菌门、拟杆菌门、放线菌门为优势菌门；变形菌门在FF中的含量大于HF，其它三个优势菌门反之。在属水平上，柯克斯氏体属、Muribaculaceae、棒状杆菌属、代尔夫特菌属、葡萄球菌属为FF和HF中的共有优势菌属，其中柯克斯氏体属在两组样本中含量均较高，且在FF中的含量高于HF；FF、HF中特有且相对丰度较高的菌属分别为Schlegelella、普雷沃氏菌属等。在种水平上，两组样本以柯克斯氏体属内共生体含量最高，其在FF和HF中的分布特点与柯克斯氏体属在两组样本中的分布特点相一致。综上，长角血蜱雌蜱中肠微生物菌群结构复杂，不同饱血状态雌蜱中肠菌群结构存在一定差异，且同一菌属相对丰度不同。

旨在利用网络药理学探讨玉屏风口服液、麻杏石甘口服液和双黄连口服液联合应用防治禽呼吸道疾病的作用机制，通过分子对接技术筛选潜在抗IBV感染的活性成分，并验证木犀草素的抗病毒活性。在TCMSP和Uniprot数据库检索3种中药复方的入血成分和潜在作用靶点。在DrugBank, GeneCards, OMIM和PharmGkb数据库搜索疾病(呼吸道感染)的相关靶点。利用DAVID数据库对核心靶点进行GO富集和KEGG通路注释分析。利用PDBQT和AutoDock vina软件将主要活性成分与IBV-nsp9、S1及主要蛋白酶(M^pro)进行对接，细胞试验验证木犀草素的抗IBV活性。结果发现，三种中药复方中的活性成分黄芩素、连翘脂素、木犀草素、刺芒柄花素、山奈酚和槲皮素等活性成分可能通过FN1、IL-6、PTGS2等关键靶点发挥治疗禽呼吸道感染的作用。分子对接结果显示连翘脂素、山奈酚、甘草酸、木犀草素、槲皮素和异牡荆素均与IBV-nsp9、S1及M^pro具有较高的结合活性，通过细胞试验证实木犀草素能够抑制IBV在细胞中的复制和病毒空斑形成数量。本研究初步揭示了3种中药复方联合治疗禽呼吸道感染的基本药理作用机制，证实了木犀草素的体外抗IBV活性。

旨在评估姜黄素(curcumin, Cur)对热应激(heat stress, HS)诱导的奶牛乳腺上皮细胞氧化应激和凋亡的保护作用，并探讨其通过Nrf2信号通路调节相关基因表达的潜在机制。首先，通过不同浓度姜黄素(0、5、10、20、50 nmol·L^-1)处理, 筛选对细胞无毒性作用的浓度；其次，在热应激条件下，筛选细胞活力恢复最显著的浓度作为后续处理浓度。将奶牛乳腺上皮细胞分为对照组(NC)、姜黄素处理组(Cur)、热应激组(HS)和姜黄素处理的热应激组(HS+Cur), 采用免疫荧光、Western blot和RT-qPCR等方法检测氧化应激反应、凋亡情况及泌乳相关基因表达。结果表明，姜黄素在5和10 nmol·L^-1浓度下对奶牛乳腺上皮细胞活力无显著影响(P>0.05)，但在10 nmol·L^-1浓度下显著提高了热应激条件下的细胞活力(P < 0.001)。姜黄素通过上调线粒体膜电位、降低ROS和H₂O₂水平、显著提高抗氧化酶(SOD、GSH)活性，减少丙二醛(MDA)含量，显著抑制Bax/Bcl-2比值(P < 0.05)，从而减少细胞凋亡。Western blot结果表明，姜黄素通过降低Keap1的表达并上调Nrf2、HO-1(P < 0.01)和NQO1(P < 0.05)等下游抗氧化基因的表达。RT-qPCR结果显示，姜黄素显著恢复了热应激条件下泌乳相关基因(如CSN1S1、CSN1S2、CSN2等)的表达(P < 0.05)。综上，姜黄素通过调控Nrf2信号通路，缓解热应激对牛乳腺上皮细胞的氧化应激和凋亡损伤，恢复细胞活力并上调泌乳相关基因的表达，为姜黄素在缓解奶牛热应激中的应用提供了理论依据。

旨在以Hippo-YAP/TAZ通路为切入点，揭示并验证白果内酯(bilobalide，BB)改善前十字韧带切断(anterior cruciate ligament transection，ACLT)构建的大鼠骨关节炎(Osteoarthritis，OA)模型软骨退变的作用机制。选取45只雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分为对照组、模型组(OA组)和药物干预组(BB组)。除对照组外，采用ACLT方法构建大鼠OA模型。BB组大鼠每天灌胃10 mg·kg^-1 BB，连续给药6周后取膝关节和软骨组织样本。手术造模后每周对每组大鼠进行一次关节肿胀检测。通过大体观察及Pelletier评分和组织学观察及OARSI评分评估大鼠软骨退变程度，Micro-CT观测软骨下骨损伤程度，免疫印迹法检测Hippo-YAP/TAZ通路相关蛋白MST1、LATS1、YAP和TAZ水平，以及软骨细胞外基质(cartilage extracellular matrix，ECM)降解蛋白MMP-3变化。计算机分子对接预测BB与潜在靶点的结合力。结果显示，在ACLT诱导的大鼠OA模型中，BB能够抑制大鼠关节肿胀，抑制软骨病理特征并极显著降低OARSI评分(P < 0.01)，以及软骨下骨骨小梁结构的破坏，改善OA软骨退变。在机制上，BB极显著增加大鼠软骨Hippo-YAP/TAZ通路中MST1和LATS1水平(P < 0.01)，抑制核内YAP和TAZ表达(P < 0.01)，并且降低MMP-3表达(P < 0.01)，发挥抗ECM降解作用。此外，分子对接显示BB与YAP和TAZ均具有较好的亲和性(结合能＜-20.92 kJ·mol^-1)。结果提示，BB通过Hippo-YAP/TAZ通路抑制大鼠软骨ECM降解，缓解关节肿胀并抑制软骨退变，发挥改善OA的作用。

旨在研究未发酵黄芪和发酵黄芪对断奶仔猪生长、血清生化、抗氧化及免疫指标的影响。选取100头体重相近(8.77±0.68 kg)的28日龄健康“长×大”断奶仔猪，随机分为4个组，每组5个重复，每个重复5头猪。试验仔猪分别饲喂基础日粮(对照组)，基础日粮+阿莫西林800 mg·kg^-1(抗生素组)、基础日粮+未发酵黄芪1 g·kg^-1(黄芪组)以及基础日粮+发酵黄芪1 g·kg^-1(发酵黄芪组)，试验期42 d。结果表明：1)发酵黄芪组与对照组相比，显著提高了断奶仔猪平均日增重和末重(P < 0.05，P < 0.01)。相比于黄芪组和抗生素组，发酵黄芪组断奶仔猪末重显著提高(P < 0.05，P < 0.01)。2)与对照组相比，日粮中添加发酵黄芪可以显著提高断奶仔猪干物质、有机物、粗蛋白质和磷的表观消化率(P < 0.01或P < 0.05)，添加黄芪可以显著提高粗蛋白质和磷的表观消化率(P < 0.05，P < 0.01)。3)发酵黄芪组断奶仔猪血清中总蛋白和白蛋白含量显著高于对照组(P < 0.05)，且总蛋白含量显著高于抗生素组和黄芪组(P < 0.05)。4)相比于对照组，日粮中添加发酵黄芪可以显著提高断奶仔猪血清中总抗氧化能力和过氧化氢酶活性(P < 0.05)。5)发酵黄芪组断奶仔猪血清中免疫球蛋白G含量显著高于对照组和抗生素组(P < 0.05)，白介素1β和白介素6含量显著低于对照组(P < 0.05)。综上所述，本试验条件下，日粮中添加发酵黄芪的效果优于未发酵黄芪，添加发酵黄芪能够提高营养物质的表观消化率，改善断奶仔猪血清中抗氧化、免疫与生化相关指标，从而促进断奶仔猪生长性能和健康状况。

旨在构建稳定过表达鸡mmp7基因的DF-1细胞系，为细胞水平研究mmp7基因在相关疾病中的功能奠定基础。合成鸡mmp7基因序列，构建重组慢病毒质粒pLVX-MMP7-IRES-puro，利用三质粒慢病毒包装系统，将pLVX-MMP7-puro与辅助质粒pCMV-VSV-G、psPAX2共转染至对数生长期的293T细胞，获得携带mmp7基因序列的重组慢病毒，重组慢病毒感染DF-1细胞72 h后, 使用含1.5 μg·mL^-1嘌呤霉素的筛选，通过PCR验证mmp7基因在DF-1细胞基因组中的整合情况，RT-PCR检测mmp7基因的转录水平，以及Western blot分析MMP7蛋白的表达水平，以鉴定是否成功获得稳定过表达鸡MMP7的DF-1细胞系，并使用CCK-8试验评估过表达MMP7对DF-1细胞增殖的影响。本研究成功构建了稳定过表达鸡MMP7的DF-1细胞系，过表达MMP7在24~48 h对细胞活力无明显影响，但120~144 h后细胞活力显著降低(P < 0.05)。该细胞系的构建为后续深入探究MMP7的生物学功能提供了重要工具。

为了系统评估海藻糖比伯斯坦杆菌(Bibersteinia trehalosi，B. trehalosi)对实验动物小鼠和靶动物绵羊的致病特征，本研究将分离自因肺炎死亡绵羊的B. trehalosi GD01菌株以不同剂量进行接种小鼠与绵羊，并确定动物接种后的临床表现、病理变化与病原载量等关键指标。结果表明：在小鼠的试验中，通过腹腔接种该菌后，表现出剂量依赖性致死效应，随着剂量的增加，死亡率逐渐上升，并伴随着严重的肺部病变和细菌载量的显著升高。在绵羊的试验中，将该菌以不同剂量经气管内接种绵羊后，可诱发急性发热、咳嗽、流涕和食欲减退等症状，且随着接种剂量的增加，症状表现逐渐加重。剖检结果显示，绵羊肺脏呈现不同程度的淤血、实变、纤维素渗出、胸肺黏连及化脓等大体病变，病理变化呈现典型的纤维素性肺炎与胸膜肺炎，病变程度与感染剂量呈正相关；组织病理学观察可见纤维细胞增生和炎症性细胞浸润等病理变化，且免疫组化显示肺泡内病原明显聚集。qPCR检测绵羊感染后能够通过鼻腔持续排菌，且肺脏中检测到高细菌载量，表明该菌能够在绵羊肺脏中成功定植并引发疾病。综上所述，本研究对B. trehalosi感染小鼠和绵羊后的临床症状、病理变化与病原载量等方面进行了详细表征，确定了B. trehalosi能够以剂量依赖性的方式诱发小鼠和绵羊的致病反应，这些结果将为进一步了解该菌致病机制、建立动物感染模型、以及防控技术的开发提供了重要实验依据。

本试验旨在研究黄芩素(baicalein，Bai)对溃疡性结肠炎(ulcerative colitis，UC)小鼠的炎症、肠道屏障以及肠道菌群的影响。将60只5周龄的BALB/c雄性小鼠适应性饲养7 d后，每组10只随机分为6组，分别为空白组(NC组)，葡聚糖硫酸钠组(DSS组)，混合抗生素+葡聚糖硫酸钠组(ABX+DSS组)，葡聚糖硫酸钠+黄芩素组(DSS+Bai组)，混合抗生素+葡聚糖硫酸钠+肠道菌群移植组(ABX+DSS+FMT组，ADF组)和黄芩素单独给药组(Bai组)。在饮用水中添加3%的葡聚糖硫酸钠(dextran sulfate sodium，DSS)复制急性溃疡性结肠炎动物模型，观察黄芩素在炎症性肠病中的治疗作用，分析黄芩素对炎症状态下肠道菌群的影响，初步探究黄芩素治疗炎症性肠病的作用机制。结果表明，黄芩素可以通过PPAR-γ/NF-κB通路帮助结肠炎小鼠缓解肠道炎症，显著下调DSS组IL-1β和TNF-α的表达(P＜0.05)，上调了IL-10和结肠蛋白的表达(P＜0.05)。组织病理切片显示, DSS组结肠上皮细胞大量脱落，坏死崩解，肠绒毛结构模糊，隐窝缺失，黏膜层及黏膜下层有大量炎性细胞浸润，黏膜下层出现纤维化结构，黏膜层的腺体结构破坏，杯状细胞大量减少。黄芩素治疗组结肠结构完整，黏膜层及黏膜下层有炎性细胞，肠上皮脱落程度比DSS组明显减少。对肠道菌群的进一步评估发现，与DSS组相比黄芩素可以调节肠道菌群，以厚壁菌门、变形菌门为主，黄芩素给药组均能显著增加厚壁菌门的丰度，降低变形菌门丰度，促进肠道益生菌的生长，抑制致病菌，从而达到结肠炎的治疗效果。综上，黄芩素可以缓解葡聚糖硫酸钠诱导的结肠炎，通过PPAR-γ/NF-κB通路并调节肠道菌群，发挥治疗效果。

玉米赤霉烯酮(zearalenone，ZEA)是一种常见的霉菌毒素，对人和动物有严重的生殖毒性。本团队前期研究发现绿原酸(chlorogenic acid)可缓解ZEA诱导的卵巢颗粒细胞毒性，然而其作用机制并不清楚。本试验旨在通过蛋白质组学技术解析绿原酸拮抗ZEA诱导小鼠卵泡颗粒细胞死亡的分子机制。将原代分离培养的小鼠卵巢颗粒细胞分为两组：ZEA组和绿原酸干预组，处理24 h后，采用定量蛋白质组学技术，结合生物信息学分析和RT-qPCR验证，解析绿原酸的调控网络。结果表明，绿原酸干预组与ZEA处理组相比，共鉴定出32个差异表达蛋白(differentially expressed proteins，DEPs)，其中15个显著上调，17个显著下调。通过GO功能注释和KEGG通路富集分析，发现DEPs主要参与有丝分裂调控、细胞骨架重构等生物学过程，并显著富集于凋亡、黏着斑、Toll样受体信号通路和NF-κB信号通路等关键调控途径。进一步通过RT-qPCR验证关键调控因子RIPK1的表达变化，发现ZEA处理显著抑制RIPK1表达(P < 0.001)，而绿原酸干预可部分恢复其表达水平(P < 0.01)。绿原酸通过调控细胞周期进程和凋亡、维持细胞结构稳态等多靶点多通路协同作用，从而拮抗ZEA诱导的生殖细胞毒性。此外，RIPK1作为RIPK1作为细胞生存和死亡的关键调控开关可能发挥关键作用。本研究从蛋白层面揭示绿原酸拮抗ZEA生殖毒性的作用机制，为开发基于绿原酸的ZEA解毒剂或功能性饲料添加剂提供了新的分子靶点和理论依据。

本试验旨在研究四君子散对产后奶牛瘤胃菌群及其发酵能力的调节作用，以揭示其健脾效应的作用机制。试验将16头体重(600 kg±30 kg)、体况(3.0~3.5)、胎次相近的待产荷斯坦奶牛随机均分为试验组和对照组。试验组奶牛待分娩后于每天晨饲前灌服300 g四君子散，对照组奶牛灌服等体积干净饮用水，连续灌服7 d。在第8天晨饲前采集两组奶牛瘤胃液，采用ELISA法检测瘤胃发酵参数，气相色谱法测定瘤胃挥发性脂肪酸含量，16S rRNA高通量测序技术分析瘤胃菌群数量和结构变化。结果表明：灌服四君子散后，瘤胃pH无显著性变化(P＞0.05)，氨态氮(NH3-N)、微生物蛋白(MCP)、纤维素酶和α-淀粉酶含量增加(P＜0.01)，脲酶活性升高(P < 0.05)；瘤胃丙酸和异丁酸的含量降低(P < 0.05)，正丁酸的含量增高(P＜0.01)；瘤胃优势菌群在门水平无显著变化(P＞0.05)，仍为拟杆菌门(Bacteroidota)和厚壁菌门(Firmicutes)，但在属水平上，普雷沃氏菌属、理研菌科RC9菌属增多，Muribaculaceae菌属减少，另外10种非优势菌群在丰度上也发生了显著改变，6种有益菌属显著上调(P＜0.05)，包括[Eubacterium]_ruminantium_group、Rothia、Bacteroidales_RF16_group、Limnohabitans、hgcI_clade和Escherichia-Shigella，4种有害菌属显著下调(P＜0.05)，包括UCG-001、Clostridium_sensu_stricto_1、Dubosiella和Parvimonas。相关性分析显示，Rothia与α-淀粉酶、丙酸和异丁酸呈正相关(P＜0.05)；Limnohabitans与脲酶、纤维素酶、α-淀粉酶、NH3-N、MCP、丙酸、异丁酸含量呈正相关(P＜0.05)，与pH呈负相关(P＜0.001)；HgcI_clade与NH3-N呈正相关(P＜0.05)；Clostridium_sensu_stricto_1与pH呈负相关(P＜0.001)；Dubosiella与MCP、NH3-N和丙酸呈负相关(P＜0.05)；Parvimonas与MCP和NH3-N呈负相关(P＜0.05)。结果提示，四君子散健脾效应可能与调节瘤胃菌群丰度和增强瘤胃内消化酶活性密切相关。

旨在探究绿原酸(CGA)对慢性应激致大鼠肠道损伤的保护作用及其对核因子-κB/NOD样受体蛋白3(NF-κB/NLRP3)通路介导的细胞焦亡的调控作用，为防治畜牧业应激性肠道疾病提供新策略。本试验选用32只初始体重为(200±20)g的SD大鼠，随机分为对照组(CON组)、绿原酸组(CGA组)、慢性束缚应激组(CRS组)和绿原酸组干预组(CRS+CGA组)。CON组未作干预。CGA组按100 mg·kg^-1剂量灌胃CGA。CRS组每天束缚6 h，连续束缚21 d。CRS+CGA组先灌胃同等剂量CGA后实施与CRS组相同的束缚操作。第22天进行旷场试验以评估模型构建是否成功，第23天处死大鼠并采集血液和回肠样本。测定血清皮质酮(CORT)水平，苏木精-伊红(HE)染色观察回肠病理变化，酶联免疫吸附法(ELISA)测定回肠炎症因子水平，免疫组织化学法(IHC)和实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测紧密连接(TJs)相关蛋白及基因表达水平，蛋白免疫印迹法(Western blot)检测细胞焦亡相关蛋白表达情况。结果显示，慢性应激模型构建成功。CGA干预显著促进慢性应激大鼠的日均体重增长(P < 0.01)，减轻回肠结构损伤，降低炎症因子水平(P < 0.01)，上调TJs相关蛋白及基因咬合蛋白(Occludin)、闭合蛋白3(Claudin3)和闭锁小带蛋白-1(ZO-1)的表达(P < 0.01)，抑制细胞焦亡相关蛋白核因子-κB p65(NF-κB p65)、NLRP3、胱天蛋白酶-1 p20(Caspase-1 p20)和N-消皮素D(N-GSDMD)的表达(P < 0.01)。综上表明，CGA缓解慢性应激诱导的大鼠回肠损伤，其机制可能与抑制NF-κB/NLRP3通路，减轻细胞焦亡，降低炎症因子水平，进而增强肠道屏障功能有关。