在哺乳动物的发情周期中有大量的卵泡被募集，每个发情周期单胎动物一般只有一个卵泡优势化排卵，而多胎动物也只有少数卵泡被优势化选择，剩余的大量卵泡发生闭锁。近些年来，围绕卵泡优势化选择的研究取得了一系列重要进展，但相关机理尚未完全揭示。胰岛素样生长因子1（insulin-like growth factor 1，IGF-1），被证实在卵泡发育过程中起到重要作用，本文综述了IGF-1在哺乳动物卵泡发育中的作用及机制，主要论述其在卵泡的优势化选择，促进卵泡生长发育，抑制颗粒细胞凋亡和维持雌性哺乳动物正常繁殖力方面的研究进展。

卵泡发育是雌性哺乳动物繁殖活动的基础，主要包括原始卵泡的形成、卵泡募集、优势卵泡选择、成熟卵泡排卵以及贯穿整个发育过程的卵泡闭锁。铁死亡作为一种新型的细胞程序性死亡方式，在卵泡发育，尤其是闭锁过程中发挥着关键作用。本文系统综述了铁死亡的作用机制，重点阐述铁死亡对卵泡闭锁、原始卵泡激活和卵母细胞成熟的影响，以及抗氧化剂对其的调控作用，以期为相关研究提供理论参考。

动物乳腺生物反应器是指利用哺乳动物特异性乳蛋白基因启动子调控元件，指导外源目的基因定位在动物乳腺中高效特异性表达，最终借助于哺乳动物乳腺的分泌作用而获得蛋白表达产物。本文着重探讨动物乳腺生物反应器的应用进展及研究前景，旨在为今后动物乳腺生物反应器的相关研究及产业化发展提供理论参考价值。通过文献资料检索和实践调研，从动物乳腺生物反应器的原理、特点、目标动物选择、应用领域、面临挑战与发展前景等几方面展开简要综述。不同动物乳腺生物反应器各自具有一定的优点和缺陷，可根据实际需求和生产实践合理选择目标动物。与其它传统表达系统相比，乳腺生物反应器是一种新型表达模式，具有产量高、易提纯、成本低、生物活性高和安全性高等优势，被广泛应用于改善动物乳品质、生产重组医药蛋白、制作抗体、合成基因工程疫苗等多个领域。虽然乳腺生物反应器的诸多影响因素尚未可知，存在一些问题亟待解决，也面临挑战，但是随着CRISPR/Cas9等基因编辑技术的兴起，只要不断加大技术创新力度和研发投入，其应用前景十分广阔。

四倍体补偿技术是家畜遗传育种和生物医学研究的重要工具，其应用潜力日益凸显。本文系统综述了家畜四倍体补偿技术在体外胚胎生产的关键技术、瓶颈问题及未来发展方向，重点探讨了猪、牛、羊主要家畜四倍体胚胎的诱导方法（如物理法、化学法、生物法）、体外培养体系优化及发育效率影响因素。通过对比不同物种四倍体胚胎的发育特性，揭示胚胎基因组激活异常、胎盘发育缺陷等核心限制因素。结合基因编辑、类胚胎培养等前沿技术，展望了该技术在高效育种、疾病模型构建及异种器官移植等领域的应用前景，以期为相关研究提供理论参考和技术指导。

绵羊尾部沉积大量脂肪将导致饲料利用率和繁殖率降低，进而增加养殖成本和减少农牧民的收入。但断尾并不能解决绵羊尾部脂肪沉积的现象，反而将更多的脂肪囤积在臀部肌肉中。因此，如何通过全基因组选择育种手段培育瘦尾羊已成为绵羊育种者关注的焦点，解决这一问题的关键是寻找到与绵羊尾部表型相关的基因。本文主要从脂肪沉积与尾椎骨长度两个方面，系统梳理了参与调控绵羊尾型关键基因的功能（如BMP2、PDGFD和TBXT）及其表观遗传调控机制，并探讨了脂尾羊作为特殊遗传资源的保护价值，为基于基因组选育特定尾型绵羊品种提供了理论依据。

蛋氨酸（Met）作为反刍动物的必需氨基酸，对生产性能、繁殖效率、免疫功能和瘤胃环境调控具有重要作用。但日粮Met易被瘤胃微生物降解，导致其小肠吸收不足，因此将蛋氨酸通过包被技术或化学修饰形成过瘤胃蛋氨酸（RPM）可降低瘤胃降解率，有效提高小肠利用率。补充RPM可提升反刍动物生产性能、优化瘤胃微生物区系、改善氮平衡、改善繁殖性能、调节免疫基因表达及增强抗氧化能力。本文系统综述了RPM的技术原理及其在反刍动物生产中的应用进展，为RPM的实际应用提供理论依据。

规模化与集约化养殖的快速发展导致畜禽热应激发生频率大幅提高，对畜禽的各项生产性能与机体健康等造成一系列严重危害。研究发现，热应激对畜禽机体的损伤程度与胃肠道中的细菌内毒素含量高度相关。热应激条件下，外周血量增加使胃肠道供血不足导致胃肠道致屏障功能受损，进而使得大量细菌内毒素经胃肠道上皮进入血液系统，最终造成机体各个脏器损伤。本文综述了热应激条件下畜禽体内内毒素产生途径及其对畜禽机体损伤和相关机制的研究进展，以期为缓解热应激下内毒素对畜禽的危害提供创新思路。

胆汁酸是由肝产生并运输到肠道的重要代谢物。在肠道中的胆汁酸经微生物的修饰和加工变为次级胆汁酸。传统上，胆汁酸被认为参与脂质和脂溶性维生素的吸收和代谢。越来越多的研究表明，胆汁酸可作为多项信号代谢物，通过调节胆汁酸相关受体以及微生物群的相互作用，对维持胆汁酸稳态、肠肝循环、代谢、肠屏障完整性和肠黏膜免疫稳态至关重要。独特的淋巴细胞群相互配合，共同维持着肠道免疫系统的稳定，其中促炎性的辅助性T细胞（T helper 17 cells，T_H17）与发挥抗炎作用的调节性T细胞（regulatory T cells，T_reg），二者间的平衡状态尤为关键，对肠道免疫稳态的维系起到了重要作用。本文将从胆汁酸与肠道微生物的相互作用、胆汁酸相关受体以及肠道T_H17/T_reg细胞间的平衡这三个方面的最新研究进展进行综述，以期揭示胆汁酸、肠道微生物和肠黏膜免疫之间的复杂互作关系，为进一步了解胆汁酸的生理功能及其在动物生产中的应用提供理论依据。

肠道作为生物体内进行食物消化与营养吸收的重要器官，其结构与功能的完整性对于维持机体健康具有重要意义。刷状缘是肠道中的重要组成结构，它通过高度有序排列的微绒毛极大地扩大了吸收表面积，在介导营养物质转运、维持上皮稳态及构建物理屏障防御中发挥着核心作用。清晰认识刷状缘的微观结构，对于肠道相关基础与临床研究具有重要价值。本文系统综述了刷状缘的结构组成与微绒毛的超微结构，重点介绍了微绒毛中的肌动蛋白核心束、结合蛋白（如Fimbrin、Villin与Espin-1）的交联作用、末端网状结构在多种蛋白（钙调蛋白、血影蛋白与肌球蛋白）参与下实现的机械稳定与动态调控以及微绒毛间黏附复合物在微绒毛有序聚合的调节作用。通过对肠道微绒毛结构与功能蛋白的系统综述，为深入理解小肠微绒毛的构建与调控机制及其在肠道疾病中的靶向调控提供了重要的理论依据。

双酚A（bisphenol A，BPA）是一种环境内分泌干扰化学物质，广泛应用于塑料生产。由于BPA的大量生产和使用，对人类和动物健康构成威胁。本文系统梳理了近些年国内外关于BPA毒性效应的研究成果，全面综述了BPA的暴露来源和途径、在动物体内的代谢转化以及对畜禽健康的毒性作用进展，有助于提高对BPA毒性的认识，以期为深入研究BPA的动物毒性机理，预防BPA在畜禽养殖中的危害提供有价值的参考资料。

铁死亡是一种具有重要生物学意义的细胞死亡方式，参与多种代谢病、中毒的病理过程。发生铁死亡会影响动物生产性能，甚至引发动物死亡，给养殖户带来经济损失。因此，寻找有效缓解/阻断铁死亡的功能性添加剂至关重要。植物提取物系指通过规范工艺从植物组织中分离获得的次生代谢产物，这类天然产物通常含有具备明确药理作用或调节功能的活性成分，包括生物碱、黄酮、多酚、多糖等，它们具有调节铁离子代谢和谷胱甘肽代谢以及抑制脂质过氧化等作用，可抑制铁死亡。本文总结了铁死亡的致病机理及植物提取物对铁死亡的调控作用，以期为功能性添加剂的研发提供新的思路。

随着全球人口增长与消费升级，畜牧业规模化扩张已成为不可逆转的趋势。然而，畜禽养殖产业的蓬勃发展在保障食品供给的同时，也衍生出严峻的生态环境问题。尤其值得关注的是，养殖系统已成为新污染物重要的“源”和“汇”：作为排放源，养殖过程持续释放抗生素、持久性有机污染物、内分泌干扰物、微塑料、农药等新污染物；作为汇集端，这些污染物会通过生物链富集在畜禽体内形成多级放大效应，最终对生态系统和人类健康构成重大威胁。本文综述了畜禽养殖中新污染物的主要种类和来源、赋存特征、环境行为，深入剖析了它们对环境和人类健康的潜在影响，探讨了“源头减量-过程阻断-末端净化”养殖面源新污染物治理思路，并总结了当前研究的不足，展望了未来研究的重点方向，以期为我国新污染物防控体系的构建与政策优化提供科学依据，促进畜禽养殖业健康可持续发展。

诺维梭菌（Clostridium novyi，C. novyi）是一种广泛存在于自然界中的条件性致病菌，主要感染牛、羊，引起传染性坏死性肝炎（黑疫）、败血症、气性坏疽等一系列急性病症，严重影响了全球畜牧养殖业的发展。本文对B型诺维梭菌（Clostridium novyi type B，C. novyi type B）致病机理和防治技术进行综述，并对其相关疫苗的原理及优劣进行比较分析，旨在为B型诺维俊菌的致病机制研究和防控实践提供基础支撑和思路启发。

沙门菌是危害全球公共卫生及家禽养殖业的重要食源性病原体，抗生素耐药性问题加剧使其防控面临严峻挑战。噬菌体疗法凭借高度宿主特异性和自我扩增能力等优势，成为替代抗生素的新型生物防控策略。目前，多款靶向沙门菌的噬菌体产品已应用于家禽养殖环节及禽产品加工链。大量研究及田间试验证实，噬菌体能有效降低家禽体内沙门菌载量、减少死亡率并改善生产性能，同时在禽肉、禽蛋等产品上可显著减少沙门菌污染。尽管前景广阔，噬菌体疗法仍需更多规模化养殖环境下的田间试验和临床研究，以系统评估其临床效力、优化应用方案并推动规范化使用。

猪流行性腹泻病毒（PEDV）是引起仔猪腹泻的重要病原，自流行以来一直严重损害全球养殖业发展。生产中常存在多种病原体与PEDV的混合感染，导致其防治困难，这些共感染因素主要涉及各类病毒、细菌、寄生虫和毒素等，并引起猪产生更为严重的临床症状。为此，本文系统梳理了临床上常与PEDV发生共感染的因素及其对PEDV致病性的影响。结果表明，猪嵴病毒（PKV）、猪萨佩罗病毒（PSV）、猪丁型冠状病毒（PDCoV）、猪轮状病毒（PRoV）和猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）是最常与PEDV发生共感染的猪腹泻病毒，其中PKV和PSV正成为近年来新型混合感染趋势；大肠杆菌、产气荚膜梭菌和艰难梭菌是常与PEDV发生混合感染的细菌。猪阿米巴虫等寄生虫以及多种毒素亦被证实可与PEDV共同感染。在致病性方面，PEDV共感染可导致猪临床症状加重、肠道中PEDV载量升高、肠道屏障破坏更为显著以及更强烈的免疫反应，这些发现为PEDV混合感染机制的研究奠定了基础。此外，本文进一步分析了当前PEDV共感染防治策略的现状与存在的不足，以期引起养殖场对PEDV共感染问题的重视，推动科学、绿色防控措施的实施，从而促进猪群健康养殖，提升养殖效益。

奶牛乳腺炎是由病原微生物感染引发的乳腺组织炎症反应，严重影响奶牛生产性能和乳制品安全，给畜牧业带来重大经济损失，因此深入阐明其发病机制对预防和治疗具有重要意义。传统观点认为乳腺炎主要由外源细菌感染或物理损伤引起；最新研究发现，胃肠道微生物及其代谢产物可通过“肠-乳轴”对乳腺健康产生系统性影响，这为理解乳腺炎的发病机制提供了新视角。本文在前期研究基础上，系统综述了奶牛乳腺炎的发病机制，并指出传统抗生素治疗因耐药性加剧及乳腺菌群失调问题面临严峻挑战。与此同时，中草药凭借多组分、多靶点协同作用以及肠-乳轴调节功能，在乳腺炎防治中显示出独特优势，已成为当前研究热点。本文从病原微生物感染引发的炎症级联反应与免疫调控机制入手，重点探讨中草药通过作用于病原体、炎症反应及免疫系统等多途径治疗乳腺炎的效应机制，以期为奶牛乳腺炎的绿色防控提供新思路。

旨在探究6-磷酸果糖-2-激酶/果糖-2，6-二磷酸酶3（6-phosphofructo-2-kinase/fructose-2，6-bisphosphatase 3，PFKFB3）对猪肌内前体脂肪细胞增殖和成脂分化的调控作用，并筛选其互作蛋白，为解析其调控机制提供线索。本研究通过在猪肌内前体脂肪细胞中过表达/干扰PFKFB3，采用qRT-PCR检测增殖标志基因的表达变化，采用CCK-8、EdU试验检测活细胞及处于增殖期细胞数量的变化；诱导猪肌内前体脂肪细胞成脂分化后，通过qRT-PCR、油红O等技术，检测其对细胞成脂分化的调控作用；运用免疫共沉淀及液相色谱-质谱技术识别和筛选PFKFB3的互作蛋白。结果显示，过表达PFKFB3后EdU阳性细胞数量显著增加（P<0.01），细胞活力显著升高（P<0.01），且增殖相关基因CDK1、CCND1、PCNA、KI67表达显著上调（P<0.05）；干扰PFKFB3则显著抑制细胞增殖（P<0.05）。成脂分化方面，过表达PFKFB3 可显著增加脂滴数量（P<0.01）和甘油三酯含量（P<0.01），并显著上调成脂关键基因PPARγ、CEBPα、CEBPβ、LPL等的表达（P<0.05）；干扰PFKFB3显著抑制细胞的成脂分化（P<0.05）。此外，通过Flag标签免疫沉淀结合质谱分析共筛选到17个PFKFB3的特异性互作蛋白。GO分析表明这些蛋白主要参与ATP结合和RNA结合等过程；STRING蛋白互作网络预测显示PFKFB3与CHORDC1、ALAS1、ASCC3、KCNK2等蛋白存在相互作用。综上，PFKFB3可正向调控猪肌内前体脂肪细胞的增殖和成脂分化，并初步筛选出其潜在互作蛋白，为深入解析猪肌内脂肪沉积的分子机制及改善猪肉品质提供了新线索。

旨在开发整合基因组信息、表型信息和功能注释信息筛选遗传位点的不同方法，比较评估8种在复杂性状上的基因组选择（genomic selection，GS）方法的预测准确性。本研究将542只北京鸭和2 548只杜洛克猪基因型-表型数据通过3个维度，基于基因组信息（连锁不平衡结合主成分分析（linkage disequilibrium and principal component analysis，LD_PCA），结合其他主成分位点（LD and other principal component analysis，LD_outPCA），结合皮尔逊相关系数分析（LD and Pearson correlation coefficient，LD_PCC））、表型信息（连锁不平衡结合全基因组关联分析（LD and genome-wide association study，LD_GWAS），结合互作分析（LD and EPISNP，LD_EPI））和功能注释信息（权重分配法（weight distribution method，WDM）），共8种不同筛选方法处理构建基因型矩阵，比较不同方法的基因组育种值估计准确性。结果表明，比较发现LD_PCC结合6种GS方法（GBLUP、BayesA、BayesB、BayesC、Bayes LASSO和RRGBLUP），在鸭龙骨长、猪百千克日龄、猪背膘厚和乳头数表型获得最高平均预测准确性（对比初始基因型矩阵提高约4%~13.9%）分别达到了0.709 3、0.440 0、0.497 4和0.440 1；权重分配法（WDM）在猪背膘厚和乳头数表型对比未加权获得最高预测准确性（高约10%）。综上，本研究发现WDM和LD_PCC可以有效提升GS的预测准确性，为深入研究位点筛选方法影响GS准确性和在育种实践中的应用提供了方向和借鉴。

旨在探讨葡萄糖对体外培养燕山绒山羊次级毛乳头细胞（DPCs）增长、迁移、凋亡的影响。本研究选取6月龄左右健康雄性燕山绒山羊皮肤若干，完整分离次级毛囊后从中提取、纯化DPCs，细胞计数并绘制DPCs生长曲线。将纯化后的DPCs随机分为5组，每组6个重复，分别在培养基中添加0（对照组）、25、50、100和200 μg·mL^-1葡萄糖溶液，在培养2、12、24与48 h时，采用CCK-8法评估DPCs的增殖能力，细胞划痕试验测定DPCs迁移能力，并通过Annexin V-FITC/PI双染法结合流式细胞术分析其凋亡水平，采用实时荧光定量PCR检测葡萄糖对DPCs增殖相关基因（PCNA、CCND1）、凋亡相关基因（Bcl-2、Bax、Caspase-3、FGF21、FGF5、P53）mRNA表达水平和Western blot检测葡萄糖对DPCs增殖与抗凋亡相关蛋白（PCNA、CCND1、Bcl-2）以及促凋亡相关蛋白（Bax、Caspase-3）的表达水平。结果表明，在12 h时，100、200 μg·mL^-1葡萄糖组均可显著促进DPCs的增殖率与迁移率（P<0.05），抑制DPCs的凋亡（P<0.05）。进一步研究发现，100 μg·mL^-1、200 μg·mL^-1葡萄糖组显著上调增殖与抗凋亡相关基因（PCNA、CCND1、Bcl-2）mRNA表达水平（P<0.05），显著下调凋亡相关基因（Bax、Caspase-3、FGF21、FGF5、P53）mRNA表达水平（P<0.05）。其中，100 μg·mL^-1葡萄糖组的增殖与抗凋亡相关蛋白（PCNA、CCND1、Bcl-2）表达量显著上升，凋亡相关蛋白Bax表达量显著下降（P<0.05），200 μg·mL^-1葡萄糖组显著下调凋亡相关蛋白Caspase-3表达（P<0.05）。综上，100与200 μg·mL^-1葡萄糖通过上调增殖相关基因PCNA、CCND1和抗凋亡相关基因Bcl-2 mRNA及蛋白表达量，下调凋亡相关基因FGF21、FGF5、P53 mRNA以及Bax和Caspase-3 mRNA和蛋白表达量，促进绒山羊DPCs增殖、抑制其凋亡。

旨在探讨不同性别、年龄及海拔因素对巴美牛血常规及血流变学指标的影响，为进一步了解巴美牛在不同环境下的生理适应机制提供依据。本研究选取林芝市不同海拔分布的166头健康巴美牛个体，对其21项血常规和13项血流变指标进行了测定。对各指标进行了描述性统计，性别、年龄和海拔等因素的方差分析，以及指标间相关性分析。结果表明，巴美牛的血常规各项指标均在参考范围之内，显示其血液生理指标处于正常状态。方差分析显示，性别、年龄和海拔因素对巴美牛血液生理指标具有显著影响。母牛在红细胞体积及血小板活性指标上显著高于公牛（P<0.05）；未成年牛在淋巴细胞计数、血小板数量等免疫与造血活性指标上显著高于成年牛（P<0.05），表明性别和年龄对血液构成与流变性能具有一定影响。海拔因素的影响尤为显著，随着海拔的升高，红细胞计数（red blood cell count，RBC）、血红蛋白（hemoglobin concentration，HGB）、红细胞压积（hematocrit，HCT）等携氧相关指标显著增加（P<0.05），表现出典型的高原造血适应趋势；同时，血浆黏度、聚集性指标及全血流阻均显著升高（P<0.05），提示血液在高原环境中更趋黏稠，流动性下降。进一步的相关性分析中，血常规和血流变各系统内部指标间呈显著正相关，如红细胞系统中的HGB与HCT、平均红细胞体积（mean corpuscular volume，MCV）与平均血红蛋白量（mean corpuscular hemoglobin，MCH）的相关系数均高达0.98；血流变中血浆黏度、纤维蛋白原与红细胞内黏度之间相关系数达1.00。这些相关性结果揭示了巴美牛血液生理指标之间内在的紧密联系和相互影响机制。研究结果表明，巴美牛具备通过增强红细胞生成、调节血液流变特性等方式来适应高原低氧环境的能力，为深入理解高原家畜低氧适应机制提供了重要的生理学依据。

旨在评估青年牛与成母牛繁殖性状的遗传参数，解析青年牛与成母牛及不同胎次间繁殖性状的遗传相关性。本研究收集江苏地区6个规模化牧场2020—2024年期间37 329头荷斯坦牛的产犊、配种和妊娠诊断等繁殖记录共84 061条，其中青年牛记录31 689条，成母牛记录52 372条。基于DMU软件中的平均信息约束估计最大似然法模块并配合动物模型与重复力模型进行遗传参数估计，采用双性状和多性状模型进行遗传相关分析。结果显示：青年牛繁殖性状遗传力估计值范围为0.04~0.52之间，其中初配日龄的遗传力最高为0.52±0.01，其余性状遗传力为0.04~0.22之间。青年牛的初配日龄、末配日龄和初产日龄之间遗传相关性较高为0.73~0.98；在成母牛中，空怀天数与配种次数及首末配种间隔之间的遗传相关性最高0.95~0.96。相邻胎次间繁殖性状的遗传相关性较高，青年牛与初产牛的相关性为0.62~0.68，但青年牛与经产牛之间的相关性较低为0.05~0.15，且不同胎次间表型相关性普遍较低为0.01~0.18。此外，配种次数和首末配种间隔与其他性状的遗传相关绝对值相对较高为0.28~0.97，可作为青年牛和成母牛繁殖力的重要指标。本研究系统地解析了江苏地区荷斯坦牛繁殖性状的遗传参数，为该地区荷斯坦牛繁殖性状遗传改良提供了理论依据。

旨在揭示宁夏地区荷斯坦牛繁殖性状的表型规律和遗传特征，为建立宁夏地区荷斯坦牛平衡育种方案提供理论依据。本研究收集宁夏地区15个牧场2005—2024年92 152头荷斯坦牛的216 787条繁殖记录，系统估计荷斯坦青年牛4个、成母牛9个繁殖性状（一胎次、二胎次、三胎次）的遗传参数。利用DMU软件的平均信息约束最大似然法（AI-REML）模块，采用单性状动物模型分胎次估计性状遗传力，双性状动物模型估计性状间遗传相关和表型相关。结果显示，青年牛繁殖性状的遗传力为0.097 0（0.008 0）~0.500 9（0.012 9），AFS最高，CR_h最低。成母牛不同胎次繁殖性状的遗传力分别为0.007 6（0.002 5）~0.150 8（0.011 6）、0.010 1（0.003 4）~0.149 9（0.010 2）和0.003 9（0.005 2）~0.137 6（0.013 3），同一性状在不同胎次间的差异较小，且低于青年牛。青年牛繁殖性状间的遗传相关和表型相关分别为-0.845 8~0.835 1和-0.550 7~0.908 4，CR_h与IFL_h呈现最强的负遗传相关（-0.845 8）。成母牛同一胎次内，不同性状之间的遗传和表型相关趋势一致，且表型相关低于遗传相关。随着胎次的增加，DO、IFL_c及CI三者间的遗传相关性越强，而BW、CS、CE、GL与其他繁殖性状的遗传相关较弱，可独立选择。成母牛相邻胎次同一繁殖性状表现出高的遗传相关，提示可能受相同基因的调控；表型相关则始终较低，说明繁殖性状易受环境影响。宁夏地区荷斯坦牛繁殖性状呈低至中等遗传力，青年牛遗传变异更大。CR_h与IFL_h强负相关，应作为青年牛繁殖指数的核心性状。DO、IFL_c、CI可联合选育。此外，成母牛繁殖性状可进行多胎次信息合并评估，以提高选择准确性。本研究为制定宁夏地区荷斯坦牛平衡育种方案提供了科学依据，有助于实现繁殖性状与其他生产性能的协同改良。

旨在通过对牦牛饲喂亚麻籽（Linum usitatissimum）与裂殖壶藻（Schizochytrium），分析其对瘤胃微生物和肉质脂肪酸的影响。本研究选用21头12月龄的雄性健康牦牛，体重在（95.00±5.20）kg，按照试验要求分为3组，每组重复7只，补饲组（S）作为对照组，2组试验组分别饲喂亚麻籽（Y）和裂殖壶藻（L），试验时间为210 d，结合16S rRNA测序和非靶向代谢组，解析其对舍饲牦牛瘤胃微生物群落结构以及差异代谢物的影响。结果显示，饲喂亚麻籽和裂殖壶藻显著影响牦牛生长性能、肌肉脂肪酸组成及瘤胃微生物。两处理组干物质采食量显著降低（P<0.05），但料重比显著下降（P<0.05）。裂殖壶藻组肌肉二十二碳六烯酸（DHA）含量显著提高（0.35% vs 补饲组0.04%，P<0.05），n-6/n-3比值降低（5.42 vs 补饲组36.28）；亚麻籽组总脂肪酸含量显著增加（1.44 g vs 补饲组0.85 g，P<0.05）。瘤胃微生物分析显示，亚麻籽组厚壁菌门丰度显著升高（69% vs 补饲组57%，P<0.05），拟杆菌门显著降低（21% vs 补饲组27%，P<0.05），裂殖壶藻组普雷沃菌属显著增加（7.5% vs 补饲组3.9%，P<0.05）。α多样性显示处理组菌群多样性低于补饲组，β多样性3组之间差异显著。肌肉代谢组分析表明，两处理组下调磷脂类和酰基肉碱代谢（P<0.05），上调脂肪酸衍生物。相关性分析显示瘤胃菌群与肌肉代谢显著关联（如候选菌门与丁二酸代谢正相关，P<0.05）。亚麻籽和裂殖壶藻通过影响瘤胃微生物及肌肉代谢促进牦牛脂质沉积。本研究为高寒地区牦牛舍饲方法提供了理论与技术支撑。

旨在筛选母猪妊娠相关差异甲基化基因，建立基于甲基化荧光探针早孕检测技术。本研究重点关注基因启动子和CpG岛差异甲基化区域，筛选潜在的猪妊娠靶标。首先利用甲基化特异性PCR（methylation-specific PCR，MSP）对基因差异甲基化区域进行初步验证，进一步设计靶标荧光探针，建立基于甲基化荧光探针（quantitative methylation-specific PCR，qMSP）早孕检测技术方法并进行验证。试验数据显示，发现相比于空怀母猪，妊娠25~30天母猪血液中VBP1和CpG_280呈现高甲基化状态，而CpG_1360表现为低甲基化，表明这些位点可能参与妊娠调控。以猪β-actin为内参探针，设计VBP1、CpG_280和CpG_1360甲基化探针，建立qMSP检测方法并初步应用。对靶标基因甲基化探针检测技术与B超检测符合率进行分析，VBP1、CpG_280和CpG_1360的受试者工作特征曲线（receiver operating characteristic curve，ROC）下的面积（area under curve，AUC）分别为0.713 8、0.608 0和0.746 6，均大于0.5，基于VBP1、CpG_280和CpG_1360的qMSP检测技术符合率分别为85.0%、78.75%和85.0%，AUC值大于0.5说明该检测技术具有诊断价值。本研究证实在母猪妊娠早期其血液中VBP1和CpG_280为高甲基化而CpG_1360为低甲基化，基于靶标基因的甲基化荧光探针检测技术可作为一种早期诊断猪妊娠的新方法。

为探究不同光周期对家禽下丘脑-垂体-性腺生殖轴（HPG轴）调控的影响，揭示光照调控母鸡卵泡发育和产蛋性能的机制，为研发调控母禽繁殖和促进种禽繁殖性能的技术提供理论依据。本试验选取860只290日龄处于产蛋期的健康杏花鸡，平均分为对照组和处理组。试验期为期61 d，对照组在试验期光照程序为16.5L：7.5D，处理组的光照程序在d1~d7为16.5L：7.5D，d8~d42为12L：12D，d43~d50为18L：6D，d51~d61为16.5L：7.5D。试验期记录产蛋数，并在d8、d43、d61检测卵巢发育、血液激素水平和生殖轴因子表达。结果显示，在16.5 h光照下，两组产蛋无明显差异，缩短光照至12 h会明显抑制产蛋，延长光照至18 h会快速拉升产蛋率，并在恢复16.5 h光照后保持比对照组高的产蛋率。与产蛋相一致，缩短光照明显减少卵巢中LYF和SYF数，延长光照会快速增加LYF数，光照变化对卵巢指数和LWF数无明显影响。缩短光照会显著降低处理组GnRH水平（P<0.05），延长光照会升高处理组各激素水平至与对照组相当，但差异均不显著（P>0.05）。缩短光照极显著降低下丘脑GnRH和TRH表达（P<0.01），延长光照会升高下丘脑GnIH、GnRH、VIP和TRH的表达，但差异不显著（P>0.05），GnRH蛋白表达水平与GnRH表达趋势一致。缩短光照会极显著降低垂体GnRHR、FSH和PRL的表达（P<0.01），一定程度降低垂体TSH和LH的表达；延长光照则使GnRHR、TSH、FSH和LH表达上升至与对照组相当水平。缩短光照使卵巢中LHR、FSHR、GnRHR和PRLR的表达下降，其中LHR 和GnRHR显著降低（P<0.05或P<0.01）；延长光照使以上因子表达上升至与对照组相当水平；FSHR、LHR 和 PRLR的蛋白表达水平与相关基因的表达趋势基本一致，均无显著差异（P>0.05）。结果表明，光周期会通过影响生殖轴主要因子的表达调控杏花鸡卵泡发育和产蛋性能，缩短光照会下调生殖轴促进生殖类因子和性腺上受体的表达，进而调控血清中各生殖激素的水平，从而抑制母鸡卵泡发育和产蛋；延长光照则升高生殖因子表达，促进卵泡发育和提高产蛋。

为进一步了解荷斯坦奶牛卵泡发育不同阶段类固醇激素及其相关物质的变化，同时为探究奶牛卵泡发育进程以及机制提供理论基础。本研究基于液相色谱串联质谱（liquid chromatography-tandem mass spectrometry， LC-MS/MS）技术以荷斯坦奶牛为研究对象（n=18），对其不同发育阶段的3种大小的卵泡进行了靶向类固醇代谢组学分析，通过对小卵泡（small follicle， SF， <5 mm， n=6）、中卵泡（medium follicle， MF， 5-8 mm， n=6）、大卵泡（large follicle， LF， >8 mm， n=6）3种尺寸卵泡的探查以及分组比较。共鉴定出24种类固醇物质，其中，在SF与MF的比对中发现8种差异代谢物（6种下调，2种上调），在MF与LF的比对中发现6种差异代谢物（2种下调，4种上调），在SF与LF的比对中发现6种差异代谢物（4种下调，2种上调）。而后基于KEGG数据库分析差异代谢物，发现SF与MF中，内分泌抵抗通路（P=0.04）与前列腺癌通路（P=0.03）存在显著富集。综上所述，本研究确定了在荷斯坦奶牛卵泡发育过程中存在着显著的类固醇激素及其相关物质的改变，为深入了解奶牛生殖系统变化提供了理论依据。

旨在探讨长毛兔在春季、夏季和秋季附睾组织学特性和基因表达谱的差异。本研究选取健康且繁殖功能正常的1岁雄性长毛兔12只，分别在春季（无热应激）、夏季（强热应激）和秋季（无热应激）各采集4只长毛兔附睾组织。通过HE染色，比较不同季节附睾组织学差异，并利用RNA-Seq技术对不同季节附睾组织的转录组谱进行分析。组织学分析显示，与春季相比，夏季热应激导致附睾管萎缩、上皮细胞排列紊乱以及精子缺失，而秋季附睾形态恢复与春季相似，且有丰富的精子。转录组分析显示，春夏季附睾组织共检测到1 133个差异表达基因，夏秋季共检测到910个差异表达基因，而秋春季仅检测36个差异基因。其中，535个差异基因在春夏季和夏秋季的表达趋势相反，其表达水平在秋季恢复与春季相似，这一结果与附睾组织形态学结果一致。GO富集分析显示，春夏季附睾组织差异基因主要富集到免疫反应、对外部刺激的反应、精子能动性、鞭毛精子运动性、上皮细胞凋亡过程、细胞程序性死亡及细胞因子-细胞因子受体相互作用等通路。夏季和秋季附睾组织差异表达基因显著富集到了免疫反应、对外界刺激的反应、鞭毛精子运动的正向调节、精子能动性以及细胞死亡负调控和TNF、Th1和Th2细胞分化、Th17细胞分化、细胞因子-细胞因子受体相互作用等通路。基因表达趋势分析表明，夏季高表达基因包括449个在春夏季和夏秋季表达趋势相反的差异基因主要富集到免疫反应、对外部刺激的反应、程序性细胞死亡调控和凋亡调控，夏季低表达基因主要富集到胶原纤维组织和氨基酸转运等过程。综上，夏季热应激可导致长毛兔附睾组织结构损伤，繁殖、免疫和凋亡等相关基因表达谱发生变化，且这些损伤及表达谱的改变在秋季恢复。本研究为深入理解家兔“夏季不育”的分子机制提供重要理论依据。

旨在探究叶酸（FA）对奶牛体外瘤胃发酵参数、抗氧化指标和菌群数量的影响。采用单因素试验设计，以4头泌乳早期荷斯坦奶牛作为瘤胃液供体，奶牛全混合日粮为发酵底物，分别添加FA 0、1.5、3.0、4.5、6.0、7.5和9.0 mg·kg^-1干物质（DM），39 ℃条件下体外培养24 h。测定发酵液DM降解率（DMD）、产气量（GP）、FA含量、抗氧化指标、发酵参数、酶活和微生物数量。结果显示：1）1.5、3.0和4.5 mg·kg^-1 DM FA组DMD和1.5、3.0、4.5和6.0 mg·kg^-1 DM FA组24 h GP和理论最大GP显著高于其余各组（P<0.05）。2）各FA添加组发酵液中FA含量显著高于对照组（P<0.05），丙二醛含量显著低于对照组（P<0.05）。1.5、3.0、4.5和6.0 mg·kg^-1 DM FA组超氧化物歧化酶活性显著高于其余各组（P<0.05）。3.0、4.5、6.0和7.5 mg·kg^-1 DM FA组谷胱甘肽过氧化物酶活性显著高于对照和1.5 mg·kg^-1 DM FA组（P<0.05）。1.5、3.0、4.5、6.0和7.5 mg·kg^-1 DM FA组总抗氧化能力活性显著高于对照组（P<0.05）。3）各FA添加组总挥发性脂肪酸和乙酸产量均显著高于对照组（P<0.05），且3.0和4.5 mg·kg^-1 DM FA组显著高于7.5和9.0 mg·kg^-1 DM FA组（P<0.05）。4）各FA添加组纤维二糖酶和木聚糖酶活性均显著高于对照组（P<0.05），且3.0、4.5和6.0 mg·kg^-1 DM FA组纤维二糖酶活性显著高于1.5和7.5 mg·kg^-1 DM FA组（P<0.05），1.5、3.0和4.5 mg·kg^-1 DM FA组木聚糖酶活性显著高于7.5和9.0 mg·kg^-1 DM FA组（P<0.05）。5）各FA添加组总细菌、原虫和黄色瘤胃球菌数量显著高于对照组（P<0.05），其中4.5、6.0和7.5 mg·kg^-1 DM FA组总细菌数量显著高于1.5和9.0 mg·kg^-1 DM FA组（P<0.05），1.5、3.0和4.5 mg·kg^-1 DM FA组黄色瘤胃球菌数量显著高于7.5和9.0 mg·kg^-1 DM FA组（P<0.05）。3.0、4.5、6.0和7.5 mg·kg^-1 DM FA组总真菌数量显著高于对照、1.5和9.0 mg·kg^-1 DM FA组（P<0.05）。1.5、3.0、4.5和6.0 mg·kg^-1 DM FA组白色瘤胃球菌数量显著高于对照、7.5和9.0 mg·kg^-1 DM FA组（P<0.05）。4.5、6.0、7.5和9.0 mg·kg^-1 DM FA组产琥珀酸丝状杆菌数量显著高于对照和1.5 mg·kg^-1 DM FA组（P<0.05）。综上表明，补充FA改善了瘤胃抗氧化状态，促进了纤维分解菌生长，进而提高了DMD和TVFA产量；本试验条件下，瘤胃较适FA添加水平为1.5~3.0 mg·kg^-1 DM。

旨在探究饲粮中添加甘草多糖（Glycyrrhiza polysaccharides，GCPs）对育肥肉牛生长性能、血清指标、养分表观消化率、瘤胃发酵参数及瘤胃微生物的影响。本研究选取40头生长发育状况良好、体重（617.70±18.85） kg的西门塔尔育肥公牛为试验动物，随机分为4组，各试验组在基础日粮中分别添加0 mg·kg^-1 BW（对照组，G0组）、15 mg·kg^-1 BW（低剂量组，G15组）、30 mg·kg^-1 BW（中剂量组，G30组）、45 mg·kg^-1 BW（高剂量组，G45组）GCPs，预饲期10 d，正饲期90 d。测定每头牛正饲0、45、90 d的体重，计算平均日增重；记录每天采食量，计算平均干物质采食量及料重比；正饲45、90 d每头牛采集10 mL血液，测定血清生化指标、抗氧化指标及免疫指标；试验结束后，每头牛采集300 g粪便测定养分表观消化率，采集50 mL瘤胃液测定瘤胃发酵参数及瘤胃微生物相关指标。结果显示：与G0组相比：1）0~45 d及0~90 d阶段，G30、G45组平均日增重及干物质采食量显著增加（P<0.05）；0~90 d阶段，G30、G45组料重比显著下降（P<0.05），粗脂肪消化率显著提高（P<0.05）；2）G30组血清谷草转氨酶水平、谷丙转氨酶水平显著下降（P<0.05）；45 d试验组血清超氧化物歧化酶与白细胞介素10水平显著提高（P<0.05）；3）G15、G30组乙酸比例显著下降（P<0.05），G30组丁酸比例显著提高（P<0.05）；4）G30组瘤胃微生物群落Chao1丰富度指数显著提高（P<0.05），且瘤胃微生物结构发生变化；G30组育肥肉牛瘤胃拟杆菌门（Bacteroidota）、假单胞菌门（Pseudomonadota）、纤维杆菌门（Fibrobacterota）、普雷沃氏菌属（Prevotella）及纤维杆菌属（Fibrobacter）相对丰度呈现显著上升趋势，而厚壁菌门（Bacillota）相对丰度呈显著下降趋势（P<0.05）；G15组瘤胃微生物差异代谢通路主要集中在酮体合成与降解、硝基甲苯降解；G30组瘤胃微生物差异代谢通路主要集中在氨基酸代谢、脂肪酸生物合成；G45组瘤胃微生物差异代谢通路主要集中在C5-支链二元酸代谢。综上，日粮中添加甘草多糖提高了西门塔尔育肥肉牛的生长性能、抗氧化能力、免疫能力、养分消化率，改善了瘤胃发酵模式，促进瘤胃有益菌丰度增加。在本试验研究条件下，甘草多糖最适添加量为30 mg·kg^-1 BW。

旨在探究枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis，BS）和壳寡糖（Chitosan oligosaccharides，COS）对AA肉鸡生长性能、营养物质利用率、屠宰性能、肉品质及盲肠菌群多样性的影响。选取体重相近（46±0.64 g）的1日龄肉仔鸡288只，随机分为6个处理组，每个处理6个重复，每个重复8只鸡（公母各半）。其中对照组（CON）饲喂基础日粮，试验组分别在饲喂基础饲粮的基础上添加5×10⁹ CFU·kg^-1枯草芽孢杆菌（BS1组）、6×10⁹ CFU·kg^-1枯草芽孢杆菌（BS2组）、125 mg·kg^-1壳寡糖（COS组）、5×10⁹ CFU·kg^-1枯草芽孢杆菌+125 mg·kg^-1壳寡糖（MIX Ⅰ组）、6×10⁹ CFU·kg^-1枯草芽孢杆菌+125 mg·kg^-1壳寡糖（MIX Ⅱ组）。试验期42d。结果表明：1）1~21日龄，与CON相比，MIX Ⅱ组ADG极显著提高（P<0.01），同时MIX Ⅱ组FCR极显著提高（P <0.01）。22~42日龄，与CON相比，MIX Ⅰ组和MIX Ⅱ组ADG极显著提高（P<0.01）。1~42日龄，与CON相比，MIX Ⅰ组和MIX Ⅱ组的ADG极显著提高（P<0.01），且MIX Ⅱ组的FCR极显著提高（P=0.01）。2）与CON相比，BS2组半净膛率、全净膛率显著提高（P<0.05）。3）与CON相比，MIX Ⅰ组肉鸡的粗蛋白利用率显著提高（P<0.05）。4）与CON相比，pH_{45 min}、pH_{24 h}、剪切力、失水率、L^*、a^*、b^*各组之间均无显著差异（P>0.05），MIX Ⅰ组胸肌滴水损失极显著增加（P<0.01），而其腿肌滴水损失虽呈下降趋势，但差异未达显著水平（P>0.05）。5）与CON相比，COS组盲肠菌群Chao1、ACE和Shannon指数分别提高了0.13%、0.52%和1.56%，但差异未达显著水平（P>0.05），COS组盲肠菌群Simpson指数降低了5.2%，但整体差异性不显著（P>0.05）。BS2组在PC1轴上显著偏离其他处理组。BS1组、COS组、MIX Ⅰ组与MIX Ⅱ组距离接近且倾向于聚集，重叠部分较多，表明盲肠菌群组成结构相似。在门水平上，与CON相比，MIX Ⅱ组肉鸡盲肠菌群中拟杆菌门（Bacteroidetes）和疣微菌门（Verrucomicrobia）的相对丰度提高，BS1组肉鸡盲肠菌群中变形菌门（Proteobacteria）的相对丰度提高；在属水平上，与CON相比，MIX Ⅱ组肉鸡盲肠菌群中拟杆菌属（Bacteroides）和阿克曼菌属（Akkermansia）的相对丰度提高。综上所述，饲粮单独添加枯草芽孢杆菌或壳寡糖及二者联合添加在一定程度上可以促进肉鸡生长性能、改善肉品质，增强盲肠内菌群多样性和丰富度，保证肉鸡的健康生长。

旨在通过对餐桌剩余食物与玉米胚芽粕混合固态发酵技术的研究，为餐桌剩余食物饲料化利用提供解决方案。以干物质消失率、还原糖含量为检测指标，采用单因素和响应面等试验方法对餐桌剩余食物-玉米胚芽粕酶、菌协同固态发酵工艺参数进行优化，基于初始发酵条件，采用单因素法分别研究纤维素酶添加量、酶制剂X1添加量对固态发酵产物干物质消失率还原糖含量的影响。采用响应面法优化获得固态发酵纤维素酶和酶制剂X1的最适添加量和发酵时间。选择24只体重相近、健康的22日龄爱拔益加（AA）肉公鸡随机分为3组分别饲喂基础日粮和两种试验日粮，对代谢能值进行测定。结果表明，随纤维素酶添加量提高，还原糖含量和干物质降解率呈上升趋势。当添加量为10.5 g·kg^-1时，干物质消失率提升幅度减缓（P>0.05），当添加量为13.5 g·kg^-1时，还原糖提高幅度减缓。随着酶制剂X1添加量的提高，还原糖含量和干物质消失率总体呈现上升趋势。在6.0 g·kg^-1时，还原糖含量与干物质消失率均有下降趋势。以干物质消失率R1为响应值，响应面推荐最佳发酵条件为纤维素酶：10.154 g·kg^-1；酶制剂X1：9.0 g·kg^-1，乳酸菌固态发酵时间为96 h。以还原性糖R2为响应值，响应面推荐最佳发酵条件为纤维素酶：7.842 g·kg^-1；酶制剂X1：9.0 g·kg^-1，发酵时间为96 h。餐桌剩余食物和玉米胚芽粕混合固态发酵，在含水率55%，37 ℃下发酵72 h，与对照组相比，发酵处理后干物质降解率提高了19.84%，还原糖含量提高了162.44 mg·g^-1，代谢能值提高 17.8%。结果提示，利用酶、菌协同固态发酵技术既解决了高水分餐桌剩余食物烘干难的问题，也大幅提升了其营养价值，为其饲料化资源利用提供科学依据。

盖塔病毒（GETV）是一种虫媒病毒，可导致妊娠母猪繁殖障碍、仔猪神经症状，严重者发生死亡，对养猪生产造成威胁。本研究旨在分析一株从发病猪场死亡仔猪分离的GETV的全基因组序列及其演化特征。采用宏转录组学测序分析死亡仔猪脑和肺组织样本中的病原；用Vero CCL81细胞分离GETV，经细胞病变（CPE）观察、蚀斑纯化、RT-PCR检测、IFA鉴定与透射电镜观察鉴定分离毒株；采用Sanger法测定分离毒株的全基因组序列。结果表明，病料组织中所含致病病原为GETV，分离毒株命名为NM2022；不包含poly（A）尾，其基因组全长为11 689 nt；分离毒株归属于GETV演化分支的三群（Group Ⅲ），与GenBank数据库中的135株GETV的核苷酸相似性为93.98%~99.86%；其E2蛋白氨基酸序列与猪源HNzmd-XP2、JS201809-2毒株及蚊源NMDK1813-1毒株等21株毒株高度保守，仅380位的氨基酸由丝氨酸突变为丙氨酸。研究结果为深入研究GETV的遗传演化规律和致病机制奠定了基础。

旨在建立检测猪瘟病毒E2蛋白抗体的双抗原夹心ELISA方法。利用BioEdit软件对比猪瘟病毒与牛病毒性腹泻病毒E2蛋白完整序列，筛选猪瘟病毒E2蛋白特异性序列，构建pCDNA3.1-2×rE2-His重组表达载体，通过CHO细胞表达2×rE2-His蛋白，采用凝血酶切除蛋白His标签，将切除His标签的2×rE2蛋白作为包被抗原，辣根过氧化物酶标记的2×rE2-His蛋白作为检测抗原，经过一系列的反应条件优化，建立了双抗原夹心ELISA方法，对其特异性、敏感性、重复性进行评估，并比较与商品化试剂盒的符合率。结果表明，该方法的抗原包被浓度为0.5 μg·mL^-1，血清稀释度为1∶4，酶标抗原稀释度为1∶40 000；该方法与其他常见猪病（塞内卡病毒、猪伪狂犬病病毒、猪流行性腹泻病毒、口蹄疫病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒）阳性血清无交叉反应、与血清学检测中易发生交叉反应的牛病毒性腹泻病毒阳性血清不反应，具有良好的特异性；可检测抗体阳性血清的最大稀释比例达1∶2 048；批内、批间变异系数均小于10%，具有良好的重复性；与IDEXX猪瘟抗体检测试剂盒的检测结果符合率为97.1%。本研究建立的双抗原夹心ELISA检测方法和IDEXX猪瘟抗体检测试剂盒同时评价猪瘟活疫苗（C株）联合E2亚单位疫苗免疫的2只健康猪抗体消长规律，本方法可提前6 d检出抗体应答，两种方法均显示抗体水平在免疫后37 d达到高峰，随后趋于稳定。本研究建立的猪瘟病毒双抗原夹心ELISA抗体检测方法特异性强、敏感性高、重复性好，适用于猪瘟的临床诊断与免疫效果评估。

本研究的目的是分离鉴定G8P［11］型牛-牦牛源A群牛轮状病毒，并分析其基因组的遗传进化特征。检测江苏泗洪一奶牛场腹泻犊牛粪样中的6种腹泻相关病毒，分离轮状病毒（RV）阳性株并通过RT-PCR、IFA、dsRNA-PAGE和电镜鉴定，测定生长曲线及细胞嗜性，评估跨种传播潜力。同时，对分离株进行全基因组测序后构建系统进化树，确定其G/P基因型。结果表明，成功分离出一株牛轮状病毒，病毒接种MA104细胞出现典型轮状病毒病变；病毒能够与VP6特异性单克隆抗体发生反应，病毒基因组电泳图谱为4∶2∶3∶2；病毒粒子呈典型车轮状、粒径约70 nm，并将其命名为JSSH2024株。一步生长曲线表明，该毒株接种MA104细胞18 h后滴度达峰值（10^5.75TCID₅₀·mL^-1）。跨种感染试验证实其可在MA104、IPEC-J2、HT-29及HCT-8细胞中增殖。全基因组分析显示其基因型为G8-P［11］-I2-R2-C2-M2-A13-N2-T6-E2-H3，其中8个基因片段与牛源毒株亲缘性近，3个片段与牦牛源毒株相近，提示其为牛-牦牛重配株。本研究首次在国内报道G8P［11］型牛-牦牛重配BoRV，为牛轮状病毒流行病学监测及疫苗研发提供了重要依据。

为研究牛结节性皮肤病病毒（lumpy skin disease virus，LSDV）ORF132蛋白原核表达并评估其免疫效果。本研究将LSDV ORF132基因在大肠杆菌BL21（DE3）中表达，纯化。与弗式佐剂乳化耦合，最终接种小鼠蛋白剂量为100 µg·只^-1，评估其ELISA定量的抗体滴度，细胞免疫反应及淋巴细胞增殖水平。结果显示，ORF132蛋白免疫组总IgG抗体滴度较高，IFNγ分泌水平极显著高于PBS组。淋巴细胞增殖试验显示，ORF132组能刺激小鼠淋巴细胞显著增殖且中和抗体效价较高。本研究通过小鼠免疫试验证明ORF132可以诱导较好的体液免疫和细胞免疫，是具有免疫原性的优势候选抗原，为后续开展多个抗原的联合免疫和牛体试验提供了素材。

旨在构建一种安全、有效的新城疫病毒（Newcastle disease virus，NDV）假病毒，用于NDV核酸检测的质量控制。通过RT-PCR扩增NDV P基因，连接至慢病毒表达载体PLV-Puro，构建了Puro-NDV/P。提取Puro-NDV/P质粒及2个辅助质粒，共转染293T细胞，成功构建了含有NDV P基因的假病毒颗粒。将构建的假病毒颗粒适当稀释后冻干，制备为RNA阳性质控品，并进行标定、均一性及稳定性检验。通过构建成功的NDV P基因假病毒建立Taqman荧光定量PCR检测方法。结果显示，随机抽取15份阳性质控品进行荧光RT-PCR检测，Ct值变异系数（CV）为0.90%，均一性良好；对制备好的阳性质控品测定其拷贝数为6.58×10² copies·μL^-1。将质控品置于4 ℃、25 ℃短期保存（1周）、-20 ℃长期保存（6个月），经荧光RT-PCR检测Ct值无显著变化，稳定性良好。建立了基于NDV P基因假病毒的实时荧光RT-PCR检测方法。该试验所制备的NDV假病毒具有均一性好、稳定性强等优点，可用于NDV核酸检测试剂盒研发、评估和质控，为NDV标准化检测提供了可靠工具。

噬菌体治疗是一种新型的抗菌治疗策略，为了给防治大肠杆菌感染提供新的理论技术支持，本研究从腹泻山羊的粪便中分离出了大肠杆菌E6和一株广谱的大肠杆菌噬菌体，命名为vB_EcoM_E6，通过观察噬菌斑，测定噬菌体的效价、pH稳定性、热稳定性、裂解谱、一步生长曲线等生物学特性，进行全基因组序列分析，并通过动物模型试验对该噬菌体进行评估。结果表明，在研究中该噬菌体的裂解率高达70.6%，在50 ℃和pH 3~10范围下比较稳定，透射电镜观察结果表明，该噬菌体属于肌尾噬菌体。全基因组分析结果显示，该噬菌体全长为137 974 bp，CG含量为39.13%，编码序列（coding sequences，CDS）有247个。小鼠模型试验结果显示，该噬菌体对于被大肠杆菌感染的小鼠有着良好的保护作用。本研究为进一步研究大肠杆菌抗菌剂提供了良好的材料。

旨在调查广东省某大型肉鸡屠宰场沙门菌流行特征，揭示优势血清型婴儿血清型沙门菌的基因组特征及潜在传播风险，为污染防控提供科学依据。对该屠宰场全环节采样分离沙门菌，采用琼脂稀释法检测12种抗生素耐药性。筛选34株代表性菌株进行全基因组测序（WGS），解析其血清型、多位点序列分型（MLST）、质粒和抗性基因分布，构建单核苷酸多态性（SNP）系统发育树。结合NCBI数据库10 389株全球婴儿血清型沙门菌全基因组序列，通过全基因组多位点序列分型（cgMLST）和SNP成对距离矩阵阐明婴儿血清型沙门菌潜在传播风险。结果显示：共分离到96株沙门菌，分离率55.49%（96/173），掏膛环节最高（79.25%）。所有分离株均呈多重耐药（MDR），耐药谱相似度高，对氨苄西林、头孢噻呋、萘啶酸、氟苯尼考和磺胺甲噁唑耐药率达100.00%，对氯霉素、四环素等的耐药率超过90%。WGS结果显示，婴儿血清型为优势血清型（32/34），以ST32为主（30/32）。婴儿血清型沙门菌均含pESI巨质粒IncFIB，且携带丰富耐药基因、毒力基因、金属和消毒剂抗性基因。与全球菌株比对发现，屠宰场分离株与15株外国菌株关系密切，其中12株来源于人。该屠宰场不同环节间存在明显沙门菌交叉污染现象，分离所得MDR婴儿血清型克隆支系携带大量抗性基因，具备强大传播潜力和公共卫生风险。未来应加强针对MDR婴儿血清型沙门菌的监测与防控，尤其是屠宰环节，保障食品安全与公共健康。

宿主活化T细胞核因子1（nuclear factors of activated T cells，NFAT1）作为调控T细胞功能的关键转录因子，可能通过介导免疫耗竭参与疟疾病理进程。本文旨在研究NFAT1在伯氏疟原虫ANKA株感染进程中的调控作用，通过抑制NFAT1的活性评估其对感染疟原虫小鼠外周血及脾脏中免疫检查点分子T细胞免疫球蛋白黏蛋白-3 （T cell immunoglobulin domain and mucin domain-3，Tim-3）、细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4（cytotoxic T lymphocyte-associated antigen-4，CTLA-4）和程序性死亡受体1（programmed cell death-1，PD-1）的表达的影响，以探索靶向NFAT1治疗疟疾的潜在价值。首先，建立C57BL/6小鼠感染模型，监测不同时间点（0、4、7 d）血清乳酸水平及外周血NFAT1蛋白表达（Western blot）。流式细胞术检测感染不同阶段（0、4、6、8 d）外周血及脾脏CD8⁺ T细胞、NK细胞Tim-3、PD-1、CTLA-4表达水平。进一步构建干预模型，于干预后48 h采集样本进行免疫表型分析。结果表明，感染组血清乳酸水平在4 d（P<0.01）和7 d（P<0.001）显著高于对照组。NFAT1蛋白表达在感染7 d后显著上调（P<0.01）。流式分析显示，感染6~8 d后，小鼠脾脏和外周血CD8⁺ T细胞/NK细胞的Tim-3⁺、CTLA-4⁺、PD-1⁺亚群比例均显著增加（P<0.01）；NFAT1抑制剂干预后，外周血Tim-3⁺ CD8⁺ T/NK细胞比例显著降低（P<0.01），脾脏CTLA-4⁺、Tim-3⁺ CD8⁺ T细胞及Tim-3⁺、PD-1⁺ NK细胞比例显著下降（P<0.01）。值得注意的是，抑制剂处理导致外周血CTLA-4⁺ NK细胞比例异常升高（P<0.001）。综上，NFAT1抑制可部分下调CD8⁺ T/NK细胞的免疫检查点分子表达，但伴随CTLA-4在NK细胞的代偿性高表达，这可能削弱其治疗效果。本研究提示，NFAT1靶向治疗需结合免疫检查点动态调控机制进行优化，为疟疾免疫治疗策略提供了新的研究方向。

旨在探究宏转录组测序技术在猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）混合感染诊断中的应用价值。采集广西壮族自治区某猪场1份PRRSV阳性血清样品，通过宏转录组测序技术获得病毒全基因组序列，并进一步进行遗传进化与重组分析。结果显示，通过该方法成功获取欧洲型PRRSV1-GXHZ-202408毒株和美洲型PRRSV2-GXHZ-202408毒株的全基因组，长度分别为15 076 bp和14 989 bp。进化分析表明，PRRSV1-GXHZ-202408与欧洲型毒株SC-2020-1（MW115431）位于同一个新亚群分支，两者的核苷酸相似度为90.45%。PRRSV2-GXHZ-202408属于NADC30-like（美洲型毒株，谱系1.8），与该谱系代表毒株NADC30（MH500776）的相似度为88.63%。重组分析发现，PRRSV1-GXHZ-202408毒株可能是以SC-2020-1毒株为病毒骨架与LV4.2.1毒株（AY588319）和HKEU16毒株（EU076704）重组而成，重组区间分别为650~2 050 nt（NSP1-NSP2）和14 131~14 570 nt（ORF6）；PRRSV2-GXHZ-202408则以NADC30（MH500776）为主要亲本毒株，以JXA1（EF112445）为次要亲本毒株，其区间为5 331-8 081 nt（NSP3-NSP9）。本研究运用宏转录组测序技术不仅明确鉴定出猪场美洲型和欧洲型PRRSV混合感染，还获取了毒株的全基因组并精准解析流行毒株的遗传特征，清晰地还原了该猪场PRRS的流行情况，证实宏转录组测序技术为PRRS的精准防控提供了强有力工具。

目前，病毒感染对宿主代谢的重塑已在多种病毒中得到研究，猪流行性腹泻病毒（PEDV）作为一种猪肠道致病性冠状病毒，其与宿主代谢系统之间的相互作用尚未见报道。有研究表明血管紧张素转化酶2（ACE2）参与机体病理生理状态下的糖代谢调控，且在抗PEDV感染中发挥作用。作者拟探究PEDV感染对仔猪肠道葡萄糖代谢的调节作用以及ACE2在其中的可能作用，明确ACE2、PEDV感染与仔猪肠道葡萄糖代谢的相互关系。本试验以健康及PED仔猪为研究对象，通过收集血液，分离截取十二指肠、空肠和回肠组织样品，进行如下试验：1）检测小肠各段组织中PEDV M基因及N基因和蛋白表达；2）血液中葡萄糖和乳酸等含量的检测；Western blot检测葡萄糖转运载体SGLT-1和GLUT-2蛋白表达变化；3）RT-qPCR检测小肠各段组织中糖酵解及TCA循环途径关键酶的基因转录变化；4）ELISA和Western blot分析小肠各段组织中Ang1-7、AngII的含量及ACE2、MasR的蛋白表达；5）Spearman法分析ACE2与PEDV感染及糖代谢相关酶表达变化间的相关性。结果表明：1）腹泻仔猪空肠组织中存在M基因表达，在500~600 bp之间出现了预期的阳性条带；PEDV-N蛋白在仔猪十二指肠、空肠和回肠组织中均有表达，以空肠组织中表达最高（P<0.01）；2）与正常健康组相比，PEDV感染仔猪血液中葡萄糖（P<0.05）和乳酸（P<0.01）含量显著或极显著升高；PEDV感染显著或极显著上调了十二指肠和空肠组织中SGLT-1和GLUT-2的蛋白表达（P<0.05&P<0.01）；3）PEDV感染仔猪小肠组织中糖酵解关键酶HK2、PFK、PKM和LDHA基因转录水平显著升高（P<0.01），而TCA循环途径关键酶CS、OGDH、IDH的基因转录水平显著降低（P<0.05 & P<0.01）；4）PEDV感染仔猪小肠组织中ACE2和MasR蛋白表达极显著下调（P<0.01）；Ang1-7含量极显著降低（P<0.01），AngII含量极显著升高（P<0.01）；5）PEDV感染与仔猪小肠组织中的SGLT-1、GLUT-2、HK2、PKM、PFK均呈正相关关，与ACE2-Ang1-7-MasR轴呈负相关关系。结果提示：PEDV感染肠道组织中糖酵解途径被激活，TCA循环途径被抑制，同时弱化了ACE2介导的ACE2-Ang1-7-MasR通路。表现出以葡萄糖摄入和乳酸生成增加为特征的Warburg效应，且PEDV感染诱导的仔猪肠道葡萄糖代谢重塑与ACE2的表达呈负相关关系。

系统分析源自新疆羊肉源非典型肠致病性大肠杆菌ZX185（aEPEC ZX185）的致病性与耐药特征，评估其食源性传播风险。本研究采用微量肉汤稀释法测定抗生素敏感性，利用Illumina HiSeq平台进行全基因组测序，并结合生物信息学分析其基因组特性。采用核心基因组单核苷酸多态性（cgSNP）分析构建系统发育树，并结合比较基因组学分析毒力基因差异。结果表明，菌株ZX185的血清型为O85：H4，序列型为ST642。尽管其对28种抗生素均呈表型敏感，但其基因组中仍携带43个耐药基因及IncFIB型质粒复制子，表明其具备多重耐药潜力。此外，该菌株携带91个毒力基因（包括黏附因子、III/VI型分泌系统效应蛋白等），并在pH≥3.5的模拟胃液处理3 h后存活率仍高于11%，表现出显著的胃酸耐受性，表明其具有较强的肠道定植与致病潜力。cgSNP的系统发育分析表明，aEPEC ZX185与人源美国菌株MOD1-EC6173（O85：H4，ST642）遗传关系密切（仅26个SNPs差异），但ZX185菌株携带了35个MOD1-EC6173菌株所不具备的毒力基因，主要涉及黏附、T3SS/T6SS及毒素合成等相关功能。综上，新疆羊肉源aEPEC ZX185菌株虽表型敏感，但兼具多重耐药基因与强毒力特征，且与人源菌株高度同源，存在潜在跨宿主传播风险。本研究为aEPEC的致病机制解析、耐药性演化追踪及食源性防控提供了重要分子依据。

本试验旨在研究多肽gCK-16联合鸡传染性法氏囊病（infectious bursal diease，IBD）弱毒疫苗的免疫增强效果，并在鸡上进行攻毒保护试验的评价。通过将不同浓度的多肽gCK-16体外刺激细胞以及联合IBD弱毒疫苗免疫14日龄SPF鸡后，检测多肽的毒性、疫苗免疫效果以及血清中细胞因子（IFN-γ、IL-4和IL-6）水平。同时，进行传染性法氏囊病病毒（IBDV）攻毒保护试验，检测存活率、囊重指数、脾淋巴细胞活性、法氏囊中免疫球蛋白（IgM和IgA）水平、血清中免疫球蛋白（IgY）水平、组织病理学变化以及凋亡相关蛋白表达水平。结果表明，多肽gCK-16在体内和体外没有明显的毒性，多肽gCK-16联合IBDV弱毒疫苗可以显著增加IBDV弱毒疫苗免疫鸡后血清中IBDV抗体水平和血清中细胞因子（IFN-γ、IL-4和IL-6）的表达水平。另外，多肽gCK-16能显著促进LPS、ConA和IBDV对PBMCs的刺激指数。IBDV攻毒试验也表明，多肽gCK-16能明显提高IBDV感染鸡后的存活率和囊重比，降低法氏囊组织病理学变化，而促凋亡蛋白Bax、Caspase-3和Caspase-9表达水平显著降低，抗凋亡相关蛋白Bcl-2表达水平显著升高。本研究发现多肽gCK-16能显著增强IBDV弱毒疫苗的体液免疫和细胞免疫应答，对感染IBDV的鸡可以起到有效的免疫保护效果，为该多肽作为IBDV弱毒疫苗免疫增强剂的应用提供了理论参考和数据支撑。

旨在评价枯草芽孢杆菌（KC）与不同乳酸菌联合使用对黄芪酵素质量和活性的影响，不同乳酸菌包括嗜酸乳杆菌（SS）、罗伊氏乳杆菌（LY）、植物乳杆菌（ZW）和非解乳糖链球菌（FGM）。分别按照工艺制备以SS+KC、LY+KC、ZW+KC、FGM+KC为混合菌种的4种黄芪酵素，以不加混合菌的含黄芪药性的发酵培养基为阴性对照组（UNF），分别通过测定一般理化指标（pH、乙醇含量）、特征性理化指标（总酸、有机酸、粗多糖含量）、总黄酮、总皂苷、总多酚、黄曲霉毒素B₁（AFB₁）、呕吐毒素（DON）的含量，评价黄芪酵素质量；分别用不同浓度的4种黄芪酵素、UNF样本刺激HD11细胞，采用CCK8法测定细胞增殖活力，采用免疫荧光法、ELISA方法测定黄芪酵素对HD11细胞吞噬能力、细胞因子表达的影响。结果发现，4种黄芪酵素中LY+KC组、FGM+KC组、ZW+KC组的一般理化指标和特征性理化指标均符合植物酵素（QB/T 5323—2018）要求；与UNF组相比，LY+KC组的总皂苷含量显著降低（P<0.05），FGM+KC组和ZW+KC组的总黄酮、总皂苷含量均显著升高（P<0.05）；与UNF组相比，FGM+KC组、ZW+KC组、LY+KC组的AFB₁和DON均显著降低（P<0.05）；4种黄芪酵素在10 µg·mL^-1时均可促进HD11细胞活力，确定为后续工作浓度，经ZW+KC、FGM+KC黄芪酵素处理后，HD11细胞的吞噬能力、促炎因子（IL-1β、IL-12）表达量均显著高于CON组、UNF组、SS+KC组和LY+KC组（P<0.05）。综上所述，发酵菌种选择与黄芪酵素质量、活性作用均密切相关，其中以枯草芽孢杆菌联合植物乳杆菌或非解乳糖链球菌为混合发酵菌种的黄芪酵素质量较优，可促进总黄酮、总皂苷含量提升，降解AFB₁、DON，提高HD11细胞功能。

本研究基于网络药理学、分子对接和体外试验，开展酸枣仁抑制脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）诱导奶牛乳房炎的机制。通过TCMSP和Swiss Target Prediction Pharm Mapper筛选酸枣仁核心成分和潜在靶点，结合DisGeNET、OMIM和GeneCards等数据库检索获得奶牛乳房炎相关靶点；利用Venny、STRING数据库和Cytoscape 3.8.0软件进行拓扑分析，构建药物靶点和疾病靶点互作网络图，筛选治疗奶牛乳房炎核心靶点，再对核心靶点进行GO功能和KEGG通路富集分析，采用AutoDock对核心靶点和活性成分进行分子对接和可视化分析。构建LPS诱导奶牛乳腺上皮细胞（bMECs）炎症模型，CCK-8、qRT-PCR、Western blot、ELISA分析酸枣仁对bMECs炎症因子（IL-1β、IL-6、TNF-α）和核心靶点mRNA及蛋白表达的影响。结果表明：筛选出酸枣仁有效活性成分9个，治疗奶牛乳房炎潜在靶点235个。PPI网络图获得表皮生长因子受体（EGFR）、雌激素受体1（ESR1）、过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARG）和磷脂酰肌醇-4，5-二磷酸3-激酶催化亚基α受体（PIK3CA）核心靶点4个。GO和KEGG富集分析显示，主要参与细胞质钙信号系统上调，受体复合和类固醇结合等生物过程，涉及肿瘤中的中心碳代谢、内分泌耐药、胰岛素耐药及表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂耐药等信号通路。分子对接显示，酸枣仁核心成分白桦脂酸和胡萝卜苷与ESR1有较好的结合性。体外试验结果显示，酸枣仁醇提物可显著抑制LPS诱导bMECs的IL-1β、IL-6、TNF-α和ESR1、PI3KCA、PPARG mRNA及ESR1蛋白表达。综上所述，酸枣仁可通过白桦脂酸等活性成分调控核心靶点ESR1等发挥治疗奶牛乳房炎的作用。

本文旨在通过网络药理学、分子对接及动物试验探讨板连紫金散防治热应激肉鸡的作用机制。使用TCMSP平台筛选板连紫金散活性成分及作用靶点，GeneCards数据库分析热应激疾病相关靶点，通过Venny与Cytoscape3.7.2软件绘制板连紫金散与热应激疾病交集靶点图，利用STRING数据库建立蛋白相互作用网络，在DAVID数据库、meatscape数据库中进行靶点GO功能富集与KEGG通路富集分析。动物试验将300只1日龄肉鸡，随机均分为5组，除空白组外，其余组均以环境温度37 ℃±2 ℃热应激处理42 d，其中3个给药组分别在基础日粮中添加0.5%、1%、2%的中药复方，模型组与空白组饲喂基础日粮。试验期间，记录肉鸡直肠温度，检测肉鸡血清炎症因子（IL-6、TNF-α及IL-10）、肝脏组织损伤相关分子模式因子（HSP70、HSP90）及肝脏炎症因子（IL-6、TNF-α及 IL-10）水平，并观察肉鸡肝脏病理组织损伤情况。结果表明，板连紫金散和热应激交集靶点122个，脂质与动脉粥样硬化与癌症通路是富集基因数和显著性较高的通路，分子对接结果显示板连紫金散潜在靶点较多的成分与热应激疾病核心靶点结合较好；板连紫金散能显著降低热应激第14、28、42天肉鸡血清中IL-6、TNF-α含量（P<0.05），显著升高IL-10含量（P<0.05），显著降低肝脏组织中HSP70、HSP90、IL-6、TNF-α含量（P<0.05），显著升高IL-10含量（P<0.05）；热应激第14天，肉鸡肝脏组织轻度损伤，板连紫金散组肝脏组织未见明显异常，热应激第28、42天，肉鸡肝脏组织损伤程度逐渐加重，板连紫金散组未见明显损伤。综上，板连紫金散能缓解热应激导致的肉鸡生长性能、肝脏功能损伤，多种活性成分可通过IL-6、IL-10、TNF-α、HSP70等关键靶点，调节多条信号通路以缓解肉鸡热应激损伤。

旨在测定产后健康奶牛与亚临床型酮病奶牛血液糖与脂代谢、免疫及氧化抗氧化相关指标的昼夜变化规律及其差异，从昼夜节律生物钟的角度评估酮病对奶牛能量代谢、免疫及氧化应激等相关机能昼夜变化生理稳态的影响。试验采集不同时间点（09：00、17：00和01：00）产后健康组（产后3~21 d，血液BHBA<1.2 mmol·L^-1，n=10）和亚临床型酮病组奶牛（产后3~21 d，1.2 mmol·L^-1<血液BHBA<3.0 mmol·L^-1，n=10）的血液样品，使用血酮血糖测定仪、胆固醇测定试剂盒测定各组奶牛糖与脂代谢指标的昼夜变化，分离血液中的白细胞并提取RNA，借助实时荧光定量PCR技术检测血液白细胞中炎症相关基因和生物钟基因的昼夜变化规律，使用ELISA试剂盒检测血液氧化应激指标变化。结果发现，与健康组相比，亚临床型酮病组奶牛血液β-羟基丁酸（BHBA）含量显著升高（P<0.000 1），血液葡萄糖浓度（P<0.01）和血浆胆固醇含量（P<0.000 1）显著下降，且亚临床型酮病组奶牛血液葡萄糖含量（P<0.05）具有显著的昼夜差异；健康组奶牛血浆中过氧化氢（H₂O₂）（P<0.05）、过氧化氢酶（CAT）（P<0.05）、超氧化物歧化酶（SOD）（P<0.05）与β-N-乙酰胺葡萄糖苷酶（NAG）（P<0.05）等指标变化均具有显著的昼夜差异；亚临床型酮病组血浆H₂O₂（P<0.05）与CAT（P<0.01）指标变化具有显著昼夜差异；与健康组相比，亚临床型酮病组奶牛血浆中H₂O₂（P<0.01）和丙二醛（MDA）（P<0.000 1）含量、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）（P<0.05）与NAG（P<0.000 1）活性均显著升高。qPCR结果显示，健康组奶牛血液白细胞中生物钟基因BMAL1（P<0.01）、RORα（P<0.05）和PER2（P<0.01）mRNA的表达均具有显著的昼夜差异，亚临床型酮病组奶牛血液白细胞中生物钟基因BMAL1（P<0.05）、NR1D1（P<0.05）、RORα（P<0.01）与PER2（P<0.05）mRNA的表达均具有显著的昼夜差异；与健康组相比，亚临床型酮病组奶牛血液白细胞中BMAL1（P<0.05）、RORα（P<0.01）与PER2（P<0.01）mRNA的昼夜表达模式发生显著改变；健康组奶牛血液白细胞中炎性因子白细胞介素-6（IL-6）（P<0.000 1）、白细胞介素-8（IL-8）（P<0.05）、白细胞介素-10（IL-10）（P<0.05）、白细胞介素-1β（IL-1β）（P<0.01）和趋化因子配体5（CCL5）（P<0.01）mRNA的表达均具有显著的昼夜差异，亚临床型酮病组奶牛血液白细胞中的IL-6（P<0.01）、IL-10（P<0.01）、IL-1β（P<0.000 1）mRNA的表达具有显著昼夜差异；与健康组相比，亚临床型酮病组奶牛血液白细胞中IL-6、IL-10、IL-1β mRNA的昼夜表达模式发生改变，IL-8和CCL5 mRNA表达的昼夜差异消失。综上所述，健康奶牛与亚临床型酮病奶牛部分血液糖脂代谢指标、氧化应激指标、血液白细胞生物钟基因和炎症因子基因表达具有昼夜节律差异，但亚临床型酮病奶牛部分血液糖脂代谢指标、氧化应激指标、血液白细胞生物钟基因和炎症因子基因表达昼夜变化规律显著改变，血浆氧化与抗氧化系统的昼夜变化稳态失常，血液白细胞中生物钟基因和炎症相关基因表达的昼夜变化规律异常，酮病伴随的机体抵抗力下降可能与奶牛外周血白细胞中炎症因子表达的昼夜变化节律异常有关。上述研究从昼夜节律生物钟角度初步解析了酮病奶牛血液指标的特征性变化，为奶牛酮病的精准防控与精准诊断提供了研究基础和理论依据。

旨在了解我国当前猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）流行毒株的病原特征与致病性，探究其重组等变异情况。采集处理病料后使用Marc-145细胞和PAM细胞连续盲传三代，IFA检测后空斑纯化，测序分析分离毒株的全基因组序列，仔猪感染试验系统评估分离毒株的致病性。结果显示：本研究分离出6株2型PRRSV毒株，命名为WH-2021A、GZ-2021W、SX-2022M、HB-2021A、H-1和C-1。WH-2021A、GZ-2021W、SX-2022M属于L1.8的NADC30-like毒株，其中GZ-2021W是以NADC30为主要亲本，高致病毒株HuN4为次要亲本的重组毒株，SX-2022M是以NADC30为主要亲本，经典毒株CH-1a为次要亲本的重组毒株。HB-2021A属于L3.5 QYYZ分支，H-1和C-1分别属于L8.7高致病性毒株和L5.1经典毒株。仔猪感染试验发现，WH-2021A致病性最强，仔猪死亡率达100%，其次是H-1，死亡率达80%，GZ-2021W和SX-2022M两株重组毒株可引起一系列临床病变，但无仔猪死亡。病理剖检发现感染组猪肺、淋巴结及扁桃体病变均明显。本研究分离到6株2型PRRSV毒株，探究了其基因组特征和致病性，为PRRS免疫防控提供早期预警以及为PRRSV-2的重组进化分析提供重要的数据支撑。

本研究旨在利用MS2噬菌体外壳蛋白自组装并包封外源核酸的特性，制备用于猪繁殖与呼吸综合征病毒基因2型（porcine reproductive and respiratory syndrome virus genotype 2， PRRSV-2） RT-qPCR 检测阳性质控品，并探究其稳定性及耐RNase特性。选取PRRSV-2的特异性靶基因（ORF7保守区），插入pET28a（+）/CP-A重组质粒PAC位点下游构建重组载体，经原核表达、硫酸铵沉淀及凝胶过滤层析纯化，获得20~28 nm均一的MS2病毒样颗粒；通过全能核酸酶消化及RT-qPCR，验证其热稳定性和抗RNase能力。结果显示：成功构建含MS2噬菌体外壳蛋白、PAC位点和PRRSV-2靶基因的重组载体，纯化后形成包封靶基因的盔甲RNA，可耐受RNase降解，37 ℃无菌条件下稳定存在7 d。该盔甲RNA可作为PRRSV-2 RT-qPCR阳性质控品，相比传统合成核酸，优势在于：1）模拟真实病毒核酸状态，监控全检测流程；2）耐RNase能力强；3）3批次批内及批间变异系数均<2%；4）37 ℃稳定保存7 d，为PRRSV-2检测提供可靠质控工具。

旨在建立一种快速有效的检测产单核细胞李氏杆菌（LM）感染样品的间接ELISA方法。本研究采用原核表达系统体外诱导表达InlB蛋白，通过优化并确定间接ELISA方法的最佳参数，建立间接ELISA方法。本研究发现，利用pColdⅡ-10×His载体能够可溶性表达InlB蛋白；棋盘法优化后的条件为InlB蛋白包被浓度为4 μg·mL^-1，10%脱脂奶粉室温封闭2 h，血清最适稀释倍数为1∶400，37 ℃孵育1 h，酶标二抗最佳稀释度为1∶2 500，37 ℃避光显色8 min，阴阳性临界值为0.37。本研究建立的间接ELISA方法仅与产单核细胞李氏杆菌阳性血清反应，当血清稀释度为1∶800时检测仍为阳性；批内重复变异系数为2.79%~6.64%，批间重复的变异系数为2.61%~7.75%，重复性好；与商品化试剂盒相比，整体符合率为95.83%。本研究建立的LM感染样品的间接ELISA检测方法特异性强，敏感性高，可用于产单核细胞李氏杆菌感染样品的快速检测，为李斯特菌病的监测提供参考。

旨在对沈阳某警犬基地患上呼吸道感染犬分离到的3株菌株进行鉴定和致病性分析。通过16S rRNA基因检测，系统进化树分析对分离菌株进行种属鉴定。通过毒力基因检测，药敏试验和犬攻毒试验进行致病性分析。结果显示：本试验分离到的3株菌株为支气管败血波氏杆菌（Bordetella bronchiseptica，Bb），分别命名为SY-202401、SY-202402和SY-202403；菌株对阿莫西林、氨苄西林、土霉素等9种抗生素耐药，对恩诺沙星、阿米卡星、链霉素等6种抗生素敏感；SY-202402株攻毒后，犬出现咳嗽、干呕、体温升高和眼鼻分泌物增多等症状，1头犬死亡。综上，本研究分离到的犬支气管败血波氏杆菌耐药性较高，对犬的致病性较强。