OMEGA编辑系统被认为是CRISPR-Cas系统的祖先，因其较小的尺寸和RNA引导的DNA切割能力成为基因编辑工具研究的热点。本文详细介绍了OMEGA编辑系统的基本结构和功能，并综述了通过对OMEGA系统核酸酶进行优化设计和引导RNA工程化改造等策略来提高其编辑效率和特异性；或通过融合脱氨酶实现碱基编辑，拓展其应用范围，为新工具的开发和优化提供参考。

肉鸡胴体外观与肉质性状的遗传改良是当前肉鸡产业提质增效的关键研究方向。随着冰鲜鸡市场的快速发展和消费者对品质需求的提升，胴体外观(如皮肤色、毛孔密度、体尺)与肉质(如肉色、嫩度、肌内脂肪)成为影响市场竞争力的核心指标。本文系统综述了全基因组关联分析(GWAS)技术在家禽遗传育种中的应用进展，重点总结了近年来通过GWAS等组学技术筛选出的胴体外观与肉质性状相关候选基因，如影响体尺的LCORL、LDB2，调控皮肤色的BCO2、TYR，关联毛孔密度的Wnt3A，以及参与肉色形成的ATP5L、COL1A2等。此外，本文还讨论了肌内脂肪沉积基因(如FASN、PLA2G4F)和嫩度相关基因(如CAPN1、CAST)的功能及其育种价值。通过整合现有研究成果，本文旨在为肉鸡分子标记辅助育种提供理论依据，并为未来功能基因组学与精准育种研究指明方向。

胚胎植入前基因检查(preimplantation genetic testing，PGT)不仅在人类生殖医学上发挥着重要作用，还在畜牧业上有重要的应用。家畜良种繁育过程中，PGT可用于引入理想性状，增强遗传多样性，提高整体畜群质量。通过选择具有特定遗传特征的胚胎，可以提高诸如抗病性、生产力和寿命等性状，促进畜牧育种计划进步。基于基因组评估的胚胎选择通过增加选择强度，缩短世代间隔，从而增加遗传增益。然而，当前PGT主要采用有创检查，这会对胚胎结构完整性造成破坏。因此，最大程度地保存胚胎结构完整性能够更好地维持其活力，目前已开始探究采用无创检查(ni-PGT)来评估胚胎植入前的发育潜能，包括检测囊胚液和胚胎培养基中无细胞DNA(cell-free DNA，cfDNA)。本文概述了PGT和无创胚胎进行PGT方法，整理了现有PGT在畜牧业及人类辅助生殖方面的应用进展，以期为ni-PGT在畜牧领域广泛应用提供理论参考。

肠道菌群是宿主防御机制的重要组成部分，在动物健康及其宿主防御病原微生物感染中起着至关重要的作用，肠道菌群失衡会导致多种肠道疾病的发生。粪菌移植(fecal microbiota transplantation，FMT)是调节肠道微生物群、治疗肠道疾病最有效的方法之一。肠道菌群失衡引起的肠道功能障碍可以通过FMT得到改善。本文从仔猪肠道微生物屏障、化学屏障、物理屏障和免疫屏障的角度对FMT改善早期断奶仔猪肠道屏障功能的潜在机制及FMT的发展前景进行综述，以期为促进养猪生产上的FMT规范应用提供参考。

布鲁氏菌是引起人畜共患的布鲁氏菌病的病原菌，布鲁氏菌病是威胁我国公共卫生安全的重要疾病之一，我国每年因布鲁氏菌病造成的直接和间接经济损失高达数十亿美元。根据世界动物卫生组织和世界动物卫生信息系统统计的数据显示，除西欧、北美部分地区、澳大利亚之外，其他地区布鲁氏菌病流行情况仍然较为严峻。布鲁氏菌病的临床治疗一直以抗生素疗法为主，近年来的研究表明布鲁氏菌对临床常用的抗生素有明显的耐药趋势，给临床治疗带来了挑战。本文主要通过对2004—2024年进行的布鲁氏菌耐药性研究进行综述，分析布鲁氏菌的耐药现状和机制，为布鲁氏菌病的防控提供参考，减少因耐药导致慢性布病造成的直接和间接损失。

旨在通过对大白猪和长白猪的纵向采食数据进行分析，对不同的一般恢复力性状指标进行遗传参数估计和比较。本研究通过利用1 692头大白和长白育肥猪的自动饲喂测定站生长和采食记录数据分析平均日增重(average daily gain, ADG)、平均日采食量(average daily feed intake, ADFI)、平均日采食时间(average daily feeding duration, ADFD)、平均日访问次数(average daily visit times, ADVT)和8个一般恢复力性状。采食量日变化(Var_FI)、采食时间日变化(Var_FD)、访问次数日变化(Var_VT)、采食量变化方差的对数转换(LnVar_FI)、采食时间变化方差的对数转换(LnVar_FD)、访问次数变化方差的对数转换(LnVar_VT)、采食量对应的断饲天数(OFF_FI)、采食时间对应的断饲天数(OFF_FD)被作为一般恢复力性状进行计算。分别利用单性状和多性状模型计算上述性状的遗传力和遗传相关。结果表明，日增重、平均采食量、平均采食时间和平均日访问次数的遗传力分别为0.25、0.49、0.53和0.43。一般恢复力性状Var_FI、Var_FD、Var_VT、LnVar_FI、LnVar_FD、LnVar_VT、OFF_FI、OFF_FD的遗传力分别为0.33、0.26、0.38、0.39、0.29、0.37、0.14和0.16。日增重与平均采食量之间有较高的正遗传相关，为0.83。日增重与一般恢复力性状的遗传相关在-0.85~0.83之间。其中，Var_FI、LnVar_FI与ADG之间有较高的正相关(r_g=0.83)，OFF_FD与ADG之间有较高的负相关(r_g=-0.85)。LnVar_FD与ADVT之间以及LnVar_VT与ADG之间均具有较高的负相关，分别是-0.89和-0.76。本研究通过计算和比较不同一般恢复力指标的遗传参数，发现一般恢复力性状具有低到中等遗传力。其中，LnVar_FI和Var_FI具有较高的遗传力，且与生产性状具有较高的遗传相关，可考虑作为猪一般恢复力性状的评估指标用于个体选育。本研究结果为猪的一般抗病性或恢复力相关性状的选育提供重要理论依据。

旨在研究不同日龄宁乡猪肌肉的脂质与挥发性有机化合物(volatile organic compound, VOC)，比较不同日龄间的差异特性，并分析脂质与VOCs的相关性。本研究选取36头健康1日龄宁乡猪为试验对象，平均活重(0.98±0.09)kg，随机分成6组，每组6头，公母各半，各组分别饲养至60、120、180、240、300和360 d进行屠宰。屠宰后取左胴背最长肌样品，测定肌肉品质，运用高效液相色谱-质谱技术进行脂质组学分析，运用气相色谱-离子迁移谱联用(GC-IMS)技术进行风味组学分析。结果表明：宁乡猪60、120 d肌肉pH显著低于360 d(P < 0.05)；宁乡猪肉色L*值从240 d后显著减小(P < 0.05)，b*值从180 d后逐渐下降，60 d、120 d的a*值显著低于其它日龄(P < 0.05)；60 d剪切力显著低于其它日龄组(P < 0.05)，其它日龄组无显著差异(P>0.05)；滴水损失在240 d显著降低(P < 0.05)，随后日龄组无显著差异；肌内脂肪(IMF)含量随着日龄增长而增加，在240 d显著增加(P < 0.05)，随后IMF含量无显著差异。脂质组学鉴定到55个脂质亚类，共1 841个脂质分子；主成分分析(PCA)和偏最小二乘判别分析(PLS-DA)显示不同日龄组脂质可明显区分；生长期间，主要差异脂质甘油三酯(TG)、醚联磷脂酰胆碱(EtherPC)、醚联磷脂酰乙醇胺(EtherPE)、磷脂酰胆碱(PC)、甘油二酯(DG)、酰基肉碱(CAR)和鞘磷脂(SM)的百分含量峰值或谷值均在240 d；确定了50个潜在标志脂质(VIP>1, P < 0.05)，主要为PC、磷脂酰乙醇胺(PE)等磷脂，以及TG、脂肪酸(FA)、DG等亚类；富集到7条脂质代谢通路，其中甘油磷脂代谢通路最重要，其次为鞘脂代谢和醚脂代谢。60~360 d不同日龄组风味组学依次鉴定到24、31、34、57、37和36种已知VOCs，建立了不同日龄肌肉VOCs指纹图谱，不同日龄可明显区分，明确了癸醛、壬醛、己醛、1-戊烯-3-酮、1-辛烯-3-醇、乙酸乙酯和甲硫基丙醛等19种关键挥发性风味物质。脂质与VOCs相关性分析显示，磷脂、甘油酯与VOCs的相关性较强。宁乡猪随日龄增长，肉色越来越鲜红，从240 d开始肌肉持水性能更佳；TG、PC和PE可能是VOCs形成的关键脂质；确定240 d为肌肉风味品质的“窗口期”，本研究可为猪肉风味品质调控和优化屠宰日龄提供科学依据。

旨在从三维基因组层面探究猪白色与米色脂肪细胞的差异，并鉴定出两种脂肪细胞的特异性启动子-增强子互作(promoter-enhancer interactions，PEIs)，筛选出促进猪米色脂肪细胞分化的关键增强子。本研究分化了猪白色与米色脂肪细胞，利用高通量染色体构象捕获(high-throughput chromosome conformation capture, Hi-C)技术比对了两种脂肪细胞在染色质区室、拓扑关联结构域(TADs)以及染色质环(loops)的差异，对猪白色与米色脂肪细胞的三维基因组构象进行详细解析；结合全基因组H3K27ac与H3K4me3的ChIP-seq数据鉴定两种脂肪细胞的PEIs，筛选促进猪米色脂肪细胞分化的潜在增强子，构建双荧光素酶载体验证增强子活性。Hi-C数据展示了两种脂肪细胞的三维基因组结构差异，有5%的基因组区域存在染色质区室状态的不同，鉴定到白色脂肪细胞特异性TADs 1 923个，特异性loops 12 920个；米色脂肪细胞特异性TADs 2 010个，特异性loops 9 526个。ChIP-seq结果显示鉴定到白脂特异性PEIs 795个，米脂特异性PEIs 737个。结合转录组数据，筛选出在米脂中特异性高表达且存在特异性PEIs基因的增强子作为促进米色脂肪分化的关键增强子。进一步，构建了TMEM100基因525 bp与AMCF-Ⅱ基因200 bp潜在增强子片段的双荧光素酶报告质粒，荧光素酶活性检测结果显示，两个基因的潜在增强子片段对报告质粒荧光活性有显著上调作用(P < 0.05)。本研究构建了猪白色与米色脂肪细胞的三维基因组图谱，揭示了两种脂肪细胞间的染色质空间结构差异，初步验证了TMEM100与AMCF-Ⅱ基因的增强子活性，提示TMEM100与AMCF-Ⅱ基因的增强子可能通过PEIs调控进而促进猪米色脂肪细胞分化。

旨在明确黑猪新品系“金乌猪”的脂肪沉积特性及脂质组成特点，为其进一步选育、推广奠定理论基础。本研究以7月龄“金乌猪”背部脂肪组织为研究对象，以出栏重相同((117±5) kg)的杜长大猪为对照，通过冰冻切片分析脂肪细胞大小与形态；采用非靶向脂质组学技术，结合Waters UPLC串联Q Exactive高分辨质谱仪检测脂质组成；通过Lipid Search软件注释数据，利用主成分分析PCA、偏最小二乘判别分析PLS-DA及变量投影重要度VIP值统计分析，以VIP值>1，FC>1.5或FC < 0.65，且P < 0.05为条件筛选差异脂质。切片分析结果发现“金乌猪”脂肪细胞直径((199±14) μm)显著大于杜长大猪((120±15) μm)(P < 0.05)。脂质组学分析发现“金乌猪”有95种脂质的丰度(34种上调，61种下调)与杜长大猪存在显著差异，主要集中于磷脂酰胆碱(PC)、磷脂酰乙醇胺(PE)、磷脂酰丝氨酸(PS)和甘油三酯(TG)。功能富集分析发现，差异脂质功能涉及到细胞膜组分、甘油磷酸胆碱(促进神经递质合成)、甘油磷脂(参与细胞膜结构及信号传递)、内质网和不饱和脂肪酸等。差异脂质与脂肪细胞直径关联分析表明，脂肪细胞直径与PC类脂质呈负相关，与TG类、PE类、PS类脂质呈正相关。综上，与杜长大猪相比，“金乌猪”背部脂肪组织中脂肪细胞体积大、脂质沉积多；其中TG、PE、PS等脂质丰度高，PC脂质丰度低。本研究从组学层面揭示了“金乌猪”的脂质组成特征，为黑猪品种特性解析提供了理论依据。

旨在利用Cas12i^HIFI基因编辑技术获得敲除XIST基因华西牛成纤维细胞系。本研究使用健康成年种公牛22284#的耳缘成纤维细胞作为供体，针对牛XIST基因设计多组sgRNA，验证效率后选取6对高效的sgRNA组成3个方案进行试验，每个方案收集15份九十六孔板细胞，通过电转染方式介导基因编辑，最后使用突变细胞验证出使用的sgRNA没有出现脱靶情况。结果表明，成功构建了XIST敲除的华西牛成纤维细胞模型。试验共获得5株纯合突变细胞系及1株杂合细胞系，验证了Cas12i在高GC含量重复序列中的高效编辑能力。该研究为解析牛XCI机制及提高克隆胚胎发育效率提供了重要的试验材料和理论依据。

旨在探究干扰MAPK6(细胞外信号调节激酶3，ERK3)基因对秦川牛成肌细胞分化的影响及其作用机理。本研究通过qRT-PCR技术检测MAPK6基因在秦川牛不同组织中的表达谱。采用siRNA技术干扰MAPK6基因在秦川牛成肌细胞中的表达，通过qRT-PCR和Western blot检测其干扰效率及肌管分化相关基因的表达水平，并观察肌管表型变化。随后对其进行转录组测序，筛选差异表达基因并进行GO功能注释和KEGG通路富集分析。此外，对成肌分化相关通路进行了初步验证。结果表明，MAPK6在秦川牛背最长肌组织中特异性高表达。干扰MAPK6极显著促进了秦川牛成肌细胞的肌管分化融合(P < 0.01)，极显著增加了成肌分化相关基因MEF2C、MYH7的表达(P < 0.01)及MEF2C、MYL2的蛋白表达(P < 0.01)，显著增加成肌MYH7的蛋白表达(P < 0.05)。转录组结果发现，与对照组相比，干扰MAPK6基因共有3 224个基因差异表达，其中上调1 707个，下调1 517个。KEGG富集结果显示，差异基因主要富集在PI3K-AKT、MAPK信号通路。MAPK6基因的干扰会显著降低MAPK信号通路中ERK1/2、p-ERK1/2蛋白的表达(P < 0.01)。本研究初步阐明了MAPK6基因在牛肌肉生成中的作用和机理，为提高牛肉品质和指导肉牛分子育种策略奠定基础。

旨在探究PFN1通过与PTEN互作对牛骨骼肌卫星细胞(bovine skeletal muscle satellite cells, BSMSCs)成肌分化的影响。本试验将小片段干扰RNA(si-RNA)与过表达质粒分别转染到胎牛腿肌剥离的原代骨骼肌卫星细胞中，每个处理设计3个生物学重复。利用光学显微镜观察经过不同处理细胞分化的情况，在分化期的特定时间点收取细胞RNA与蛋白样品，分别利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)以及蛋白免疫印迹(Western blot)进行分析。试验结果显示：通过光学显微镜观察发现，干扰PFN1后牛骨骼肌卫星细胞可以形成更多粗大的肌管；qRT-PCR和Western blot证实，细胞分化标志基因MyHC表达量显著增加；而过表达PFN1后牛骨骼肌卫星细胞形成的肌管较细、量少；qRT-PCR和Western blot证实，MyHC表达量显著降低。通过Co-IP试验证实PFN1可以与PTEN互作，过表达PFN1可显著提升PTEN蛋白水平。在光学显微镜下观察发现，干扰PTEN后牛骨骼肌卫星细胞形成的肌管很少；qRT-PCR和Western blot试验证实，MyHC、MyOG在mRNA水平表达量显著增加，MyHC在蛋白水平显著降低；PI3K/AKT/mTOR信号通路关键蛋白表达量显著下调但通路最终关键作用蛋白p-mTOR显著增加。干扰PFN1后PI3K/AKT/mTOR信号通路关键蛋白表达量都显著增加。过表达PFN1后PI3K/AKT/mTOR信号通路关键蛋白显著下调。PFN1通过与PTEN互作抑制PI3K/AKT/mTOR通路活性，进而负调控BSMSCs成肌分化。本研究为肌肉发育的分子调控网络提供了新见解。

旨在对自主研发奶牛13K和40K液相基因组SNP芯片的检出率、基因型检测一致性、填充准确性及基因组遗传评估准确性进行验证。本研究对203头验证群体进行13K、40K及已有商业化126K、150K芯片基因型检测并比较分析检出率与基因型一致性。基于中国荷斯坦牛基因组选择参考群体，采用Beagle软件将4款芯片的基因型数据分别填充至50K密度水平并采用GBLUP方法对验证群体的9个性状进行基因组遗传评估，比较其填充准确性及9个性状的基因组遗传评估准确性。结果表明，验证群体的13K和40K芯片检出率分别为97.70%和97.20%，126K和150K芯片检出率分别为99.30%和98.27%，13K和40K芯片与126K和150K芯片的共有位点数分别为11 331、11 125与42 504、40 881，共有位点基因型一致性分别为96.23%、96.50%与97.18%、97.43%；13K芯片填充准确性(MAF>0.01)为95.90%，略低于高密度商业化芯片，但高于国际通用Illumina 7K低密度芯片(填充准确性为94.30%)，40K芯片填充准确性(MAF>0.01)为99.07%，与126K(填充准确性为99.23%)和150K芯片(填充准确性为99.05%)基本一致；13K、40K、126K和150K芯片对验证群体产奶量、乳脂率、乳蛋白率、乳脂量、乳蛋白量、泌乳系统评分、体型总分、体细胞评分、肢蹄评分等9个性状基因组遗传评估准确性分别为0.619 0~0.735 2、0.642 0~0.758 7、0.620 8~0.742 8和0.633 4~0.751 4，无显著差异。研究结果表明，自主研发13K和40K液相芯片性能较好，可以用于荷斯坦奶牛早期遗传评估和优秀牛只选择。

为筛选豁眼鹅豁眼性状和深浅黄羽性状的分子标记，本研究首先利用1日龄雏鹅中不同表型个体(n=10，共40只，不分性别)的皮肤样检测候选基因(FREM1、SLC45A2、TYRP1和PTPRM)编码序列(CDS)中的核酸多态位点，再利用95只雏鹅的基因组DNA检测CDS上筛选到的关键多态位点，并与性状进行关联分析。本研究还对于候选基因PRLR基因的内含子序列进行了类似的分析。此外，为探究性状形成的分子基础，本研究通过对皮肤组织样的转录组测序分析，筛选出差异表达基因及其富集的通路。结果表明，在FREM1基因CDS上共筛选到15个单核苷酸多态(SNP)位点(SNP1-SNP15)，其中7个为错义突变，8个为同义突变，且SNP10、SNP14和SNP15位点与豁眼性状显著关联。在PTPRM基因CDS上共筛选到7个SNPs位点(SNP1-SNP7)，其中2个为错义突变，5个为同义突变，且SNP5在等位基因水平与豁眼性状显著关联。在SLC45A2基因CDS上共筛选到11个SNPs位点(SNP1-SNP11)，其中10个为错义突变，1个为同义突变，且无位点与深浅黄羽性状显著关联。在TYRP1基因CDS上共筛选到2个SNPs位点(SNP1和SNP2)，均为同义突变，且与深浅黄羽性状的关联在等位基因水平接近显著水平。在PRLR基因内含子中筛选到缺失或插入突变(INDEL)，即插入突变1(INS1)、插入突变2(INS2)和缺失突变(DEL)，且与深浅黄羽性状显著关联。转录组测序分析共筛选到与豁眼性状有关的差异表达基因131个(62上调和69下调)，主要富集于细胞外基质受体相互作用和细胞粘附分子通路，与羽色性状有关的差异表达基因1 280个(92上调和1 188下调)，主要富集于神经活性配体-受体相互作用、酪氨酸代谢、苯丙氨酸代谢和钙信号通路等通路。总之，关联分析结果不仅筛选到一些与豁眼性状和雏鹅深浅黄羽性状显著关联的分子标记，而且为支持FREM1、PTPRM、PRLR和TYRP1是这些性状的致因基因提供了更多的科学证据。此外，转录组测序分析表明细胞外基质受体相互作用、细胞粘附分子、神经活性配体-受体相互作用和酪氨酸代谢等通路参与这些性状的形成。

旨在通过分析2个种群鸽的全基因组SNPs位点及胸肌的转录组数据，鉴定与28日龄乳鸽胸肌率相关的候选基因。本研究选取M系和B系鸽各10只进行全基因组测序，提取并筛选SNPs位点后进行全基因组选择信号分析。选取两个种群中胸肌率存在显著差异的10只28日龄乳鸽，采集胸肌进行转录组测序，分析胸肌中基因表达水平以及差异表达基因，并结合选择信号分析筛选与28日龄乳鸽胸肌率相关的关键基因。利用实时荧光定量PCR对9个与肌肉发育有关的差异表达基因的表达水平进行检测，并与转录组数据进行比较分析。基于全基因组11 577 846个SNPs位点的PCA分析发现M系和B系鸽各自形成独立的一类，滑窗Fst和pFst分析筛选到29个与肌肉发育有关的基因。转录组分析筛选到28日龄乳鸽的胸肌差异表达基因共192个，包含68个上调基因和124个下调基因，差异表达基因主要富集在细胞核组分、细胞凋亡通路、Foxo信号通路、PI3K-Akt信号通路。全基因组和转录组联合分析共筛选到4个基因，其中LTBP1、DPP4和TNFSF10与肌肉发育有关，为解析乳鸽胸肌率差异提供了数据基础。9个差异表达基因的荧光定量PCR表达水平检测结果与转录组基因表达数据间的相关系数为0.50~0.95，表明有较高的相关性。本研究通过联合分析全基因组和转录组数据，揭示了与乳鸽胸肌率差异相关的候选基因，为研究鸽子胸肌发育的分子机制提供了新的视角。

为探究猪圆形精子的动态转录差异，本研究以成年关中黑猪(10~12月龄)为研究对象，基于睾丸组织10×单细胞转录组测序(single cell RNA sequencing，scRNA-seq)数据，对生殖细胞聚类及圆形精子重聚类进行分析，同时对圆形精子差异表达基因进行功能注释分析和富集分析，以期探究圆形精子的发育变化。结果鉴定出了5种猪圆形精子类型，绘制早期圆形精子发育至精子阶段的细胞轨迹，通过GO和KEGG富集分析发现圆形精子和精子中的差异表达基因与蛋白质结合和内质网活动过程有关，主要富集在精子发育等途径；组蛋白变体分析显示鱼精蛋白家族和转换蛋白家族可能在猪圆形精子发生过程中也发挥重要作用，并通过免疫组化试验对候选基因进行验证。根据结果推测，SUN5、SPATA3、APOC4可作为圆形精子发育的调控基因。本研究可为后续通过生物技术对卵胞质内圆形精子注射提供理论依据，同时为猪圆形精子单细胞组学提供参考信息。

旨在探讨L-苹果酸(L-malic acid，L-MA)对猪卵巢颗粒细胞(porcine ovary granulosa cells，PGCs)增殖的影响，并基于转录组学揭示其可能的作用机制。本研究以原代分离培养的猪卵巢颗粒细胞为研究对象，设置对照组和L-MA处理组(10、25、50、100、200 μmol·L^-1), 利用CCK-8法、实时荧光定量PCR、EdU染色法(5-ethynyl-2'-deoxyuridine)等技术检测细胞活力和细胞增殖的变化；利用转录组测序分析L-MA对PGCs基因转录谱的影响。结果发现，与对照组相比，25、50、100和200 μmol·L^-1的L-MA均显著提高了PGCs细胞活力(P < 0.05)，其中L-MA终浓度为50 μmol·L^-1时，PGCs细胞活力最高。50 μmol·L^-1 L-MA处理后，PGCs的增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen，PCNA)基因mRNA表达量显著增加(P < 0.01)；EdU阳性细胞比例显著增加。转录组分析显示，基于|FC|≥1.5且P < 0.05的筛选标准，L-MA处理后PGCs中169个基因显著上调，118个基因显著下调。GO功能富集显示，差异表达基因主要富集在编码细胞周期复合物以及核酸酶等细胞组分，以及遗传物质复制、表观遗传修饰、物质转运和代谢、细胞增殖和分化等分子功能和生物学过程；KEGG和GSEA富集显示，差异表达基因主要参与细胞免疫、遗传物质复制、物质代谢和生殖功能相关的信号通路。此外，通过对差异表达基因转录因子功能和靶基因预测，发现转录因子ELF3是最有可能受L-MA调控的转录因子，其与PCNA启动子区域存在可能的结合序列。综上所述，L-MA可以显著促进猪卵巢颗粒细胞增殖，这可能与L-MA调控细胞中编码细胞周期复合物以及核酸酶等组分的基因表达，增强与遗传物质复制、表观遗传修饰和物质转运等相关的分子功能和生物学过程，以及提升细胞健康水平等有关。本研究为应用L-苹果酸相关产品调控卵巢颗粒细胞增殖及卵巢功能提供了重要的科学依据。

旨在探究棉酚(gossypol)引起小鼠睾丸组织损伤和TM4细胞(小鼠睾丸支持细胞)凋亡的生殖毒性机理。本研究建立棉酚灌胃雄性ICR小鼠(improved castle road)模型(0、30 (mg·kg)·d^-1，连续30 d)和棉酚染毒TM4细胞模型(0、15、20、25 μmol·L^-1)，随后采用精子自动分析系统检测小鼠精子质量；HE染色法观察小鼠睾丸组织病理学变化；实时荧光定量PCR技术检测小鼠睾丸组织中凋亡、自噬、铁死亡、紧密连接和精子发生相关基因的表达量以及TM4细胞中凋亡相关基因的表达量，Western blot技术检测小鼠睾丸组织中凋亡相关蛋白表达情况。结果发现，棉酚可显著降低小鼠体重增长速率、精子活力和精子密度(P < 0.01)，并引发睾丸组织病理学改变(曲细精管皱缩，部分支持细胞被破坏，精子数量减少等)。睾丸组织中铁死亡、自噬和凋亡这3种死亡方式相关基因的表达趋势均有变化，且凋亡相关基因的表达趋势变化最明显，凋亡抑制基因Bcl-2显著下调(P < 0.05)，凋亡促进基因Bax、Tnf-α以及Bax/Bcl-2比值上调(P < 0.01，P < 0.05，P < 0.01)；睾丸组织中凋亡蛋白Bax、Tnf-α及Bax/Bcl-2比值显著升高(P < 0.05)；此外，睾丸组织中紧密连接和精子发生相关基因显著下调。在TM4细胞体外试验中，使用不同浓度棉酚染毒均能显著影响TM4细胞内凋亡相关基因的表达，凋亡促进基因Bax、Tnf-α及Bax/Bcl-2的表达量极显著上调(P < 0.01)，这与睾丸组织的定量结果一致。综上，棉酚染毒所导致的小鼠睾丸生精能力减弱与TM4细胞发生凋亡密切相关，这种凋亡与Bax、Tnf-α、Bax/Bcl-2表达升高有关。

旨在探讨不同短链脂肪酸对新生幼鼠生长发育、行为活动以及脑部和肝微观结构与炎症因子表达的影响。试验选取刚出生的C57BL/6J幼鼠56只(共7组，每组8只)，每个组别的幼鼠均来自于八窝不同的母鼠，连续28 d进行不同SCFAs浓度的灌胃处理。处理组包括：CTL(0.9%生理盐水)、SF-900组(900 mg·kg^-1 BW甲酸钠)、SF-1400组(1 400 mg·kg^-1 BW甲酸钠)、SP-2(20 mg·kg^-1 BW丙酸钠)、SP-200(200 mg·kg^-1 BW丙酸钠)、SV-5(5 mg·kg^-1 BW戊酸钠)和SV-20(20 mg·kg^-1 BW戊酸钠)。记录幼鼠的体重变化、脑指数和肝脏指数，并通过旷场试验评估其自发性活动。同时，检测脑组织和肝组织中相关基因的表达水平。结果表明，丙酸(SP-2)和戊酸(SV-5)显著促进幼鼠的体重增长，丙酸处理组(SP-2)体重增加最为显著，增长率达到12.83%。HE染色结果显示，各组幼鼠组织器官(脑、肝)微观结构均保持完整，未见显著组织学病理改变。行为学试验表明，甲酸处理组(SF-1400)和戊酸处理组(SV-5，SV-20)幼鼠表现出显著增强的自主活动性和探索行为，提示这些SCFAs可能通过中枢神经系统调节行为反应。此外，戊酸处理组(SV-5，SV-20)调节了脑组织中BDNF和TRKB等神经因子的表达，可能通过增强神经生长因子水平及其受体信号通路(如GPR41)促进神经元生存和突触可塑性。RT-qPCR检测结果揭示，丙酸处理显著上调了肝组织中抗炎因子IL-4和IL-10的表达，并下调了促炎因子IL-6、TNF-α和IFN-γ的表达，这表明丙酸对肝的免疫功能具有积极调节作用。综上所述，SCFAs特别是丙酸和戊酸，在调控免疫反应和神经发育相关通路方面，对新生幼鼠的生长发育和行为表现产生了积极影响。这些结果支持了SCFAs在改善免疫功能和促进神经发育中的潜在作用。

旨在探究饲粮中添加槲皮万寿菊素(quercetagetin, QG)对过氧化氢(hydrogen peroxide, H₂O₂)攻毒肉鸡的屠宰性能、肉品质、血清抗氧化与免疫功能及肠道菌群的影响。试验采用单因素完全随机设计，选取240只1日龄科宝(Cobb)肉鸡，随机分为3组：对照组(饲喂基础饲粮+37日龄腹腔注射1.0 mL·kg^-1 BW生理盐水)，H₂O₂组(饲喂基础饲粮+37日龄腹腔注射1.0 mL·kg^-1 BW的10% H₂O₂溶液)，QG组(饲喂添加100 mg·kg^-1 QG的基础饲粮+37日龄腹腔注射1.0 mL·kg^-1 BW的10% H₂O₂溶液)，每组8个重复，每个重复10只鸡。试验期总计42 d。结果表明：1)与对照组相比，H₂O₂组肉鸡的屠宰率、腿肌率显著降低(P < 0.05)；饲粮添加QG使肉鸡的屠宰率、腿肌率与对照组相比均无显著差异(P>0.05)。2)与对照组相比，H₂O₂组腿肌的红度a^*显著降低(P < 0.05)，蒸煮损失显著提高(P < 0.05)；饲粮添加QG使腿肌的a^*和蒸煮损失与对照组相比均无显著差异(P>0.05)。3)与对照组相比，H₂O₂组肉鸡血清中SOD、GSH-Px、T-AOC、CAT活性和IgA、IgG、C3含量显著降低(P < 0.05)，MDA水平和IgM和TNF-α含量显著提高(P < 0.05)；但与H₂O₂组相比，饲粮中添加QG后可显著提高肉鸡血清中SOD、GSH-Px、T-AOC、CAT活性和IgA、C3含量(P < 0.05)，并显著降低MDA水平(P < 0.05)。4)厚壁菌门(Firmicutes)、拟杆菌门(Bacteroidota)是肉鸡盲肠门水平的优势门。与对照组相比，H₂O₂组的厚壁菌门(Firmicutes)相对丰度显著降低(P < 0.05)，QG组的拟杆菌属(Bacteroides)相对丰度显著升高(P < 0.05)。综上所述：饲粮添加100 mg·kg^-1 QG可以通过提高抗氧化和免疫功能，优化盲肠菌群结构，缓解H₂O₂诱导的氧化应激对肉鸡屠宰性能和肉品质的不利影响，为QG在肉鸡健康养殖中的科学应用提供理论依据。

本研究旨在探讨低蛋白日粮条件下沃德188肉鸡1~14日龄的精氨酸(Arg)需要量模型。试验选取1日龄沃德188(WOD 188)肉鸡共600只，公母各半并分别饲养，每种性别随机分为5个处理，设置1个正常蛋白水平对照组和4个Arg水平的低蛋白日粮组(降低1.5个百分点的粗蛋白)，标准回肠可消化Arg(SID Arg)与SID赖氨酸(Lys)水平的比例(SID Arg/SID Lys)分别为92%(LP92)、104%(LP104)、113%(LP113)和124%(LP124)，每个处理6个重复，每个重复10只鸡。结果表明：1)根据体增重(BWG)与低蛋白日粮SID Arg/SID Lys水平的比例模式拟合得出1~14日龄沃德188肉鸡Arg需要量的二次回归模型(母鸡：BWG/g=-0.041X²+9.197X-140.429，R²=0.998；公鸡：BWG/g=-0.067X²+14.87X-399.52，R²=0.910)；以代谢体重(BW^0.70)和BWG为自变量、SID Arg摄入量(Y)为因变量得出Arg动态需要量模型(母鸡：Y=1.772*BW^0.70+2.699*BWG；公鸡：Y=23.243*BW^0.70+24.067*BWG)。当低蛋白日粮中SID Arg/SID Lys为111%~112%时，可实现母鸡的最佳生产性能；当日粮中SID Arg/SID Lys为108% ~112%时，可实现公鸡的最佳生产性能。2)对于母鸡而言，与对照组相比，低蛋白日粮组补充Arg显著降低法氏囊指数，LP92、LP104、LP113以及LP124组的法氏囊指数分别降低了39%、28%、33%、28%(P < 0.05)；对于公鸡而言，与常规日粮组相比，LP92、LP104、LP113以及LP124组的脾脏指数分别降低了20%、10%、30%、20%(P < 0.05)。3)与对照组相比，低蛋白日粮组的粪便氮含量显著减少。母鸡LP92、LP104、LP113以及LP124组的粪便氮含量分别降低了8.3%、8.8%、10.2%、10.7%(P < 0.01)，各组氮存留率没有显著性差异(P>0.05)；公鸡LP92、LP104、LP113以及LP124组的粪便氮含量分别降低了8.8%、8.8%、7.2%、12.3%(P < 0.01)，LP92组的低蛋白日粮组的氮存留率降低4.9%(P < 0.05)。4)LP92组的血清TP、ALB含量显著低于其他组(P < 0.01)，其他低蛋白日粮组与对照组无显著差异。总之，本研究建立了低蛋白日粮条件下1~14日龄WOD 188肉鸡Arg需要量模型，在低蛋白日粮中添加适量Arg可以提高沃德188肉鸡生长性能，降低氮排放。

哺乳早期仔猪的肠道发育和健康对其未来生长至关重要，因为这一阶段肠道生理功能的完善，不仅能适应当前的营养需求，更能为后续的快速生长奠定坚实基础。本试验旨在探究哺乳期补充等渗蛋白溶液对哺乳仔猪的生长性能、肠道形态及空肠转录组的影响。试验选取12窝刚出生体重相近(1.48±0.22 kg)、母猪胎次相同的“杜×(长×大)”三元杂交哺乳仔猪120头。根据体重相近的原则，随机将其分为对照组(Con组)和试验组(Px组)，每组6窝。在仔猪出生后2~8天，Con组仔猪每窝每天补充500 mL纯净水，Px组仔猪每窝每天补充500 mL 3%的等渗蛋白溶液。在断奶前3天，两组仔猪每天均接受250 g教槽料糊状混合物的补充，其中Con组混合物使用纯净水配制，Px组混合物则使用3% Px溶液配制。整个试验期24 d。结果表明，哺乳期补充等渗蛋白溶液分别提高了仔猪的断奶体重、1~24 d及16~24 d日增重，并改善了空肠绒毛高度(P＜0.05)。对空肠组织进行转录组测序和生物信息学分析后，共筛选出163个差异显著基因，其中105个基因表达上调，58个基因表达下调。GO功能注释和KEGG富集分析显示，这些差异基因主要参与多个关键的生物学过程和信号通路，包括离子运输(如SLC46A1、SLC40A1、SLC26A6)、矿物质吸收(如S100G)、铁死亡调控、氨基酸代谢以及维生素消化等，具体基因还包括ICA和TRPM6。本研究表明，在哺乳期补充等渗蛋白溶液，可以提高哺乳仔猪的生长性能，促进肠道发育。潜在的调控机制可能涉及空肠中矿物质和维生素物质吸收和转运相关基因的改变，影响了肠道的发育和营养物质的吸收能力。

巴贝斯虫是一类由蜱传播的寄生于人或其他动物红细胞内的人兽共患病病原。感染后可引起宿主发热、贫血及血红蛋白尿等临床症状，甚至可导致死亡，严重威胁着人类尤其是无脾、恶性肿瘤、免疫抑制患者的健康。前期的流行病调查发现巴贝斯虫在不同家养动物中的感染率存在明显差异，但是其具体致病机制尚不十分明确。本研究以田鼠巴贝斯虫为研究对象，比较其在常见不同实验动物中的感染能力、血液指数变化和免疫反应，为进一步揭示其致病机制提供依据。以鼠、兔和羊等动物为感染模型，经人工接种田鼠巴贝斯虫后，对0~36 d感染期的染虫率、血液指标及血清中特异性抗体水平进行动态监测。结果表明，小鼠感染后第4天时染虫率达到峰值(62.9%)，拷贝数达6.05×10⁷ copies·μL^-1，而新西兰兔和羊红细胞染虫率接近于0。血液学监测显示，感染早中期(0~20 d)，小鼠血液中红细胞数(RBC)、血红蛋白浓度(HGB)、红细胞压积(HCT)等显著降低。感染早期(0~8 d)，血小板数目(PLT)和血小板压积(PCT)较对照组明显降低，此后逐渐恢复正常值。ELISA检测显示，小鼠感染后抗田鼠巴贝斯虫分泌抗原1(BmSA1)抗体持续上升，到第16天达平台期并在后期维持较高水平，而新西兰兔在接种后抗体水平迅速上升，第8天达到平台期并维持较高水平，但绵羊的抗体水平较低。上述结果表明，鼠易感田鼠巴贝斯虫，且血液参数明显异常，而兔和羊不易感，这种特异性可能与寄生虫对宿主细胞识别位点的遗传多样性有关。兔和羊两种非易感动物的抗体水平的差异可能暗示两个物种在抗巴贝斯虫的机制上有本质的区别。本研究为进一步研究巴贝斯虫与宿主的互作机制及致病机理、疫苗与药物筛选奠定了良好的基础。

旨在探究重组柔嫩艾美耳球虫RON2_L2ecto蛋白对雏鸡的免疫保护作用。本试验通过柔嫩艾美耳球虫cDNA扩增编码EtRON2_L2蛋白的全长序列，并原核重组表达EtRON2_L2的胞外域部分；选取体重相近的7日龄健康罗曼灰蛋公雏120只(前期饲喂无抗球虫药物和无抗生素的雏鸡饲料，饲养于干净无球虫环境)，随机分为5组，分别为不免疫不攻虫组、不免疫攻虫组、50 μg重组蛋白免疫攻虫组、100 μg重组蛋白免疫攻虫组、200 μg重组蛋白免疫攻虫组，将重组蛋白与弗氏佐剂混合作为亚单位疫苗免疫三组重组蛋免疫攻虫组雏鸡，通过评估鸡只的体增重、盲肠病变评分、克粪便卵囊数(OPG)，计算抗球虫指数，观察盲肠病理组织学变化以及测定血清细胞因子(IL-2、IL-10、IFN-γ)、血清IgG和盲肠黏膜分泌物sIgA的水平，对重组蛋白的免疫效果进行评价。结果显示，成功表达了EtRON2_L2的胞外域部分，大小为107 ku。免疫保护试验表明，与不免疫攻虫组相比，100 μg蛋白免疫组和200 μg蛋白免疫组的平均体增重显著增加(P＜0.05)，OPG显著下降(P＜0.05)，3个剂量免疫组的盲肠病变评分均出现了显著下降(P＜0.05)，病理组织学观察发现盲肠病变程度有一定缓解，其中100 μg蛋白免疫组和200 μg蛋白免疫组的抗球虫指数大于160，具有中等抗球虫作用。3个剂量蛋白免疫组的脾脏指数均显著高于不免疫攻虫组(P＜0.05)。28日龄(攻虫后第7天)时，蛋白免疫组的血清细胞因子IL-2、IFN-γ、IL-10均极显著(P＜0.01)高于2个不免疫组，血清IgG水平显著高于不免疫攻虫组(P＜0.05)，50 μg蛋白免疫组sIgA分泌水平显著高于(P＜0.05)其他免疫组和2个不免疫组。以上结果表明，RON2_L2胞外域对雏鸡感染柔嫩艾美耳球虫有免疫保护作用。

本研究旨在建立一种检测胞内劳森菌(Lawsonia intracellularis)抗体的阻断ELISA方法。采用原核表达的胞内劳森菌重组MltA蛋白免疫小鼠，制备获得单克隆抗体，通过Western blot和间接免疫荧光(IFA)鉴定了单克隆抗体的特异性。以重组蛋白MltA为包被抗原，待检血清为一抗，建立了检测胞内劳森菌抗体的阻断ELISA方法。确定了阻断ELISA方法最佳反应条件，并对方法的灵敏度、特异性、重复性及符合率进行分析。结果显示: 所建立方法的灵敏度和特异性分析显示在胞内劳森菌阳性血清稀释度为1∶4时仍可稳定检出阳性，且与猪流行性腹泻病毒、伪狂犬病病毒及大肠杆菌阳性血清无交叉反应；重复性试验结果显示，批内重复试验的变异系数为1.4%~9.3%，批间重复试验的变异系数为1.0%~9.6%；与IFA结果对比，本研究所建立方法的敏感性为95.91%，特异性为80.65%，总符合率为85.92%。本研究对胞内劳森菌外膜蛋白MltA进行原核表达和纯化，制备了针对MltA的单克隆抗体，建立了一种检测胞内劳森菌抗体的阻断ELISA方法，可用于猪增生性肠病的临床诊断。

金黄色葡萄球菌是禽养殖业常见的病原菌，因其携带多种毒力因子及多重耐药性，对禽养殖业造成严重的经济损失。为探究辽宁沈阳地区鸡关节炎源金黄色葡萄球菌的流行特征，对2023—2024年分离的78株鸡关节炎性金黄色葡萄球菌进行毒力基因与耐药基因的分析。通过聚合酶链式反应(PCR)对毒力基因分布、耐药基因进行检测，采用K-B法检测其耐药性，通过结晶紫染色法对生物被膜形成能力进行检测。通过对15种毒力基因进行检测，黏附基因clfA检出率最高为100%，随后依次为黏附基因clfB(98.7%)和溶血素基因hlA(82%)，而中毒性休克综合征毒素基因tssT(12.8%)、肠毒素基因seA(3.8%)和剥脱毒素基因etA(1.3%)的检出率低。对10种抗生素耐药性检测显示，78株金黄色葡萄球菌均呈现不同程度的耐药，对四环素(100%)、青霉素G(98.7%)、诺氟沙星(96.2%)、克林霉素(89.7%)、复方新诺明(84.6%)、庆大霉素(82.1%)、红霉素(79.5%)的耐药率较高，但对头孢西丁和利福平(97.4%)敏感。对15种耐药基因进行检测，显示分离菌携带多种耐药基因，氨基糖苷类耐药基因aac(6')/aph(2')和ant(4')的检出率分别为92.3%和80.8%，大环内酯类耐药基因ermC和ermB检出率分别为53.8%和50.0%，但四环素类耐药基因tetM检出率仅为19.2%。对分离菌株生物被膜形成能力检测表明，有73株金黄色葡萄球菌具有生物被膜形成能力，占比为93.6%。对耐药基因与耐药表型的相关性分析结果显示，氨基糖苷类耐药基因aac(6')/aph(2″)和ant(4')、大环内酯类耐药基因ermB和ermC及多重耐药基因cfr分别与庆大霉素耐药菌株、红霉素耐药菌株、红霉素和青霉素G耐药菌株有显著相关性(P < 0.05)。对生物被膜表型与耐药表型进行相关性分析，结果显示红霉素及氯霉素耐药株的产生与生物被膜的形成具有显著相关性(P < 0.05)。78株鸡关节炎源金黄色葡萄球菌的耐药性强，易形成生物被膜，可为该地区金黄色葡萄球菌引起的鸡关节炎防控提供了参考。

旨在通过网络药理学、分子对接及试验验证相结合共同探究鬼针草对鸡细菌性腹泻的治疗作用机制。本研究利用中药系统药理学分析平台(TCMSP)检索鬼针草药理成分和靶点，GeneCards、OMIM、DisgeNET数据库分析细菌性腹泻相关靶点基因并利用Venny数据库确定交集靶点。Cytoscape 3.10.2软件绘制“鬼针草-成分-靶点-腹泻网络图”；利用STRING数据库构建蛋白互作网络(PPI)，并鉴定核心基因；利用DAVID数据库进行GO富集和KEGG通路富集分析；采用AutoDock用于分子对接验证；建立鸡大肠杆菌腹泻模型，观察其肠道组织形态影响及ELISA验证靶蛋白含量。鬼针草治疗鸡细菌腹泻的主要活性成分为：木犀草素、金鸡菊甙、6, 7-二羟基苯并呋喃和槲皮素，对应215个靶点基因；去除重复后与疾病共交集82个靶点，以白细胞介素-6 (interleukin-6, IL-6)、白细胞介素-1β (Interleukin-1 beta，IL-1β)、胱天蛋白酶3 (Caspase-3，CASP3)、基质金属蛋白酶(Matrix metalloproteinase-9，MMP9)和缺氧诱导因子1亚基α (Hypoxia-inducible factor 1-alpha, HIF-1α)为关键核心靶点；GO功能富集分析显示鬼针草主要作用靶点涉及凋亡过程、炎症反应等；KEGG通路富集分析显示鬼针草主要作用靶点富集在HIF-1α、C型凝集素受体、IL-17、TNF等信号通路；分子对接结果表明鬼针草主要活性成分与关键靶点具有良好的连接活性。组织切片和ELISA结果显示，鬼针草显著缓解了肠道组织损伤，并显著降低了空肠中IL-6、IL-1β、CASP3、MMP9和HIF-1α蛋白水平(P < 0.05、P < 0.01或P < 0.000 1)。通过网络药理学和试验验证发现，鬼针草可能通过调节IL-6、IL-1β、CASP3、MMP9和HIF-1α表达量来调控肠道炎症的发生发展，进而影响HIF-1α、IL-17、TNF等信号通路，为深入进行鬼针草治疗鸡细菌性腹泻的作用机制研究提供新思路与新方法。

旨在研究布鲁氏菌抗原btpA的免疫原性和对小鼠的免疫保护效果。试验通过PCR扩增布鲁氏菌btpA基因，克隆到pET-22b原核表达载体中，获得重组质粒pET-22b-BtpA，双酶切鉴定后在E.coli BL21(DE3)中用IPTG诱导目的蛋白表达并纯化后通过SDS-PAGE与Western blot鉴定。腹腔注射100 μg·只^-1 rbtpA蛋白到6周龄SPF级BALB/c小鼠中，14 d以50 μg·只^-1加强免疫。分别在7 d、14 d、21 d和28 d对小鼠尾部静脉采血。对小鼠血清中的布鲁氏菌特异性IgG抗体和抗体亚型(IgG1和IgG2a)使用间接ELISA进行检测。使用ELISpot方法检测在小鼠脾中释放IFN-γ的淋巴细胞数量。免疫28 d攻毒布鲁氏菌流行株(含2×10⁵ CFU·只^-1)，15 d后剖检，根据小鼠脾中的布鲁氏菌载菌量评价亚单位疫苗的保护效力。结果表明，获得30 ku纯化的重组BtpA蛋白(rBtpA)；rBtpA免疫7 d后小鼠产生布鲁氏菌特异性抗体，28 d水平最高，而PBS组未检测到特异性抗体；rBtpA免疫小鼠14 d和28 d后IgG2a/IgG1值都大于1，28 d更加显著，说明rBtpA诱导小鼠产生Th1偏向型的免疫应答反应。28 d内，小鼠释放IFN-γ的脾淋巴细胞数量明显超过PBS对照组，表明在rBtpA免疫后小鼠可以产生较高水平的Th1型细胞免疫应答反应。rBtpA组小鼠脾指数SI显著低于PBS组(P < 0.001)，脾载菌量也显著低于PBS组(P < 0.01)，表明rBtpA亚单位疫苗组的小鼠脾脏指数和脾载菌量更低。上述研究证明，rBtpA亚单位疫苗有作为布鲁氏菌病候选疫苗的潜质，本试验位研发布鲁氏菌rBtpA亚单位疫苗奠定了基础。

旨在研究重组克柔念珠菌14-3-3(rCK14-3-3)蛋白诱导奶牛乳腺上皮细胞(MAC-T)铁死亡的特征，为揭示克柔念珠菌毒力因子损伤奶牛乳腺上皮细胞的机制提供理论依据。采用CCK-8法筛选rCK14-3-3蛋白对MAC-T的最适作用浓度和时间；将奶牛乳腺上皮细胞分为空白对照组、阳性对照组(10 μmol·L^-1 Erastin)、试验组Ⅰ(不同浓度rCK14-3-3蛋白(25、50、75 μg·mL^-1))、试验组Ⅱ(不同浓度rCK14-3-3蛋白(25、50、75 μg·mL^-1)+铁死亡抑制剂Ferrostatin-1(20 μmol·L^-1))、试验组Ⅲ(不同浓度rCK14-3-3蛋白(25、50、75 μg·mL^-1)+Nrf2特异性抑制剂ML385(25 μmol·L^-1))，透射电镜检测细胞铁死亡形态学特征；Western blot检测rCK14-3-3诱导MAC-T铁死亡Nrf2-SLC7A11/GPX4信号通路蛋白表达水平；免疫荧光法检测谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、活性氧(ROS)及线粒体膜电位(JC-1)的表达水平；比色法检测MAC-T中乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)和亚铁离子(Fe²⁺)的含量。结果发现，与空白对照组相比，阳性对照组、试验组Ⅰ出现明显铁死亡特征；阳性对照组、试验组Ⅰ Nrf2、GPX4、SLC7A11蛋白表达水平及GSH含量显著下降(P < 0.05)，ROS、MDA、Fe²⁺含量显著上升，JC-1含量显著下降(P < 0.05)，而与试验组Ⅰ相比，试验组Ⅱ Nrf2、GPX4、SLC7A11蛋白表达水平及GSH含量显著上升(P < 0.05)，ROS、MDA、Fe²⁺含量显著下降，JC-1含量显著上升(P < 0.05)；试验组Ⅲ Nrf2、GPX4、SLC7A11蛋白表达水平及GSH含量显著下调(P < 0.05)，ROS、MDA、Fe²⁺含量显著上升，JC-1含量显著下降(P < 0.05)。本研究表明，rCK14-3-3蛋白可通过Nrf2-SLC7A11/GPX4信号通路诱导MAC-T发生铁死亡，为今后靶向干预铁死亡防治念珠菌性奶牛乳房炎提供了数据支持。

近年来牛呼吸道疾病常被报道，牛呼吸道疾病对牛业有着严重危害，牛呼吸道疾病的大肆流行会为养殖场带来不可逆转的损失。为揭示近年来宁夏回族自治区犊牛呼吸道主要病原体牛支原体(Mycoplasma bovis, M. bovis)、溶血性曼氏杆菌(Mannheimia hyopneumoniae, Mh)、多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida, Pm)、肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumonia, K.pn)的流行情况，本研究采用形态观察结合分子生物学检测方法，对2022—2024年间采集自宁夏地区不同县/区的457份牛鼻拭子及组织样品进行了病原分离及分子生物学检测鉴定病原体。系统分析了宁夏不同年份、不同地区、不同季节、不同生长阶段肉牛感染M. bovis、Mh、Pm、K.pn的情况。结果显示，Pm在四种病原体中检出率最高(38.73%)，极显著高于其他三种病原体(P < 0.001)；中部干旱带M. bovis检出率极显著高于引黄灌区(P < 0.01)和南部山区(P < 0.001)；冬季M. bovis(50%)和K.pn(70.5%)检出率均为最高且极显著高于夏秋季(P<0.001)；Pm秋季检出率最高(45.3%)，极显著高于冬季(P < 0.01)和春季(P < 0.001)；育成期牛Pm检出率极显著高于哺乳期和成熟期(P < 0.001)；单一Pm检出率最高(16.85%)，显著高于混合感染检出率(P < 0.01)；Mh+Pm(7.22%)混合感染率最高。本研究从多个角度调查及分析了宁夏地区牛支原体、溶血性曼氏杆菌、多杀性巴氏杆菌和肺炎克雷伯菌的发生规律，总结不同时间、地区、生长阶段等因素对牛呼吸系统疾病检出率的影响，为宁夏地区牛呼吸道主要细菌感染防治提供了科学依据。

滑液囊支原体(Mycoplasma synoviae, MS) 是一种重要的禽类病原体，其丝状温度敏感蛋白FtsZ (filamentous temperature-sensitive protein Z) 具有良好的免疫原性。本研究旨在基于MS-FJ01株的FtsZ基因，建立一种特异性高、重复性好的间接ELISA抗体检测方法。根据GenBank中MS-FJ01菌株的FtsZ基因序列设计特异性引物，构建重组表达质粒pET-28a-FtsZ，利用大肠杆菌原核表达系统表达并纯化FtsZ蛋白。以20 μg·mL^-1的纯化蛋白作为包被抗原，通过优化反应条件和检测步骤，建立基于FtsZ蛋白的MS间接ELISA抗体检测方法，评价其特异性、重复性及临床适用性。结果显示，该方法表现出良好的特异性，仅与MS阳性血清发生特异性反应，对鸡毒支原体(Mycoplasma gallisepticum, MG)、新城疫病毒(Newcastle disease virus, NDV)、禽流感病毒(avian flu virus, AIV)H9亚型、大肠杆菌及沙门菌阳性血清均无交叉反应。阴阳性临界值设定为S/P≥0.498(${\bar x}$+3*s，${\bar x}$=0.132，s=0.122)。批内和批间变异系数为1.32%~4.78%和2.81%~4.72%，表明重复性良好；与IDEXX试剂盒相比，阳性符合率为82.1%，阴性符合率为95.8%，总符合率为82%。本研究成功建立了一种基于FtsZ蛋白的间接ELISA抗体检测方法，具有高特异性、稳定性及操作简便的特点，为MS感染的快速诊断和流行病学监测提供了高效、经济的技术手段。

2018年秋冬季以来，我国蛋鸡养殖地区新发了一种以开产蛋鸡产蛋下降和腹泻为主要特征的传染病，为查明该病的病因，作者进行了本试验。采集发病鸡肠道组织，在SPF鸡胚上连续盲传10代分离病原物；对分离毒株进行理化特性和血凝特性测定；利用设计的疑似病毒特异性引物，对提取的病毒核酸进行PCR检测、基因测序以及核苷酸同源性比对，根据比对结果设计引物获得病毒的全基因组核苷酸序列；以新型禽冠状病毒AvCoV/CH/SD/24株对SPF鸡、AA+白羽肉鸡和海兰蛋鸡进行攻毒，对发病SPF鸡肠道进行病理切片并用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定攻毒后不同鸡血清中传染性支气管炎病毒抗体滴度。结果显示：成功分离获得4株新型禽冠状病毒AvCoV/CH/BZ/24、AvCoV/CH/JS/24、AvCoV/CH/SD/24、AvCoV/CH/HB/24，病毒无血凝活性。核酸检测结果显示，有4份样品鸡传染性支气管炎病毒N和S1基因阳性，且N基因序列与数据库中鸡传染性支气管病毒相似性最高，S1基因序列与数据库中已有禽冠状病毒AvCoV/TZ/CA127/19株序列的相似性最高。全基因组扩增和测序结果显示，4株新型禽冠状病毒与2016年中国安徽省和2019年坦桑尼亚阿鲁沙发现并报道的两株禽冠状病毒全基因组核苷酸相似性高达97.1%~98.6%。系统发育分析表明，新型禽冠状病毒的S基因与类火鸡冠状病毒亲缘关系较近，处于同一进化分支的不同亚分支，而其它基因与GⅠ-19谱系传染性支气管炎病毒处于同一进化分支。动物实验表明，AvCoV/CH/SD/24株病毒能够引起SPF鸡腹泻，十二指肠绒毛脱落，绒毛顶端和黏膜固有层充血、出血，肾小管上皮细胞颗粒变性，间质充血，病毒主要通过泄殖腔排出体外，各脏器中以肠道和法氏囊的病毒载量最高，病毒不影响鸡的增重率；ELISA结果显示重组新型禽冠状病毒与鸡传染性支气管炎病毒具有血清学交叉反应；开产蛋鸡感染病毒后出现产蛋下降和腹泻，与临床发病一致。从蛋鸡产蛋下降和腹泻病例的肠道中分离获得的4株新型禽冠状病毒是类火鸡冠状病毒S基因与GⅠ-19谱系鸡传染性支气管炎病毒的重组病毒，能够引起鸡发生产蛋下降和腹泻。

为构建禽传染性支气管炎病毒(IBV)S1蛋白的免疫原，本研究通过比对已公布的S1中和表位和当前我国流行的GI-19型代表毒株ck/CH/LDL/091022(LDL091022)S1蛋白氨基酸序列，鉴定第22—100和410—492位氨基酸区域为中和表位优势区，分别命名为B1和B2。构建表达LDL091022 B1和B2的质粒以及在C端融合鸡IgY Fc片段的质粒，通过Western blot和IFA检测发现融合IgY Fc片段后能够显著提高蛋白的表达量。转染Expi 293F细胞表达并纯化获得了融合IgY Fc片段的重组蛋白B1-Fc和B2-Fc。通过Western blot和ELISA鉴定B1-Fc和B2-Fc与LDL091022血清的反应性，结果发现B2-Fc与血清的反应性明显优于B1-Fc。将质粒pCAGGS-B2-Fc和重组蛋白B2-Fc免疫SPF鸡，通过ELISA和IFA检测血清中的抗体水平，结果显示B2-Fc加强免疫后能够有效诱导针对B2表位的抗体，且IFA结果显示血清能与LDL091022-S1蛋白和B2-Fc发生特异性反应。进一步利用中和试验检测血清中和效价为16。上述结果表明，本研究制备的IBV S1蛋白中和表位-Fc融合蛋白具有良好的表达水平和免疫原性，能够诱导机体产生一定水平的中和抗体，为进一步研发新型IBV亚单位疫苗提供了借鉴。

旨在研制可应用于传染性支气管炎病毒(Infectious bronchitis virus, IBV)核酸检测的质控品。本研究选取IBV较为保守的N蛋白基因作为目标靶序列，将其与MS2噬菌体衣壳蛋白基因、包装位点序列等克隆到载体pET-28a(+)中，经诱导表达和纯化，获得内部包含有IBV的N蛋白基因序列RNA的类病毒颗粒，用电镜观察其物理特征，数字PCR对拷贝数进行精确定量，使用现行国家标准GB/T23197—2022中的实时荧光定量RT-PCR方法对纯化后的装甲RNA进行了检测验证，对RNase酶抵御能力以及保存稳定性也进行了检验。综上，本研究成功构建、表达组装出了包含IBV N基因的装甲RNA，耐RNase酶的降解，可在37℃下可稳定保存15 d以上。制备的装甲RNA具备成为IBV阳性质控品的潜力，可实现对该RNA病毒检测全过程的质控。

为构建表达猪圆环病毒3型(PCV3)Cap蛋白的重组病毒载体疫苗，以猪伪狂犬病病毒(PRV)SX1910毒株为亲本毒株，利用CRISPR/Cas9和同源重组技术构建了缺失gE和gI基因并携带LoxP位点和GFP荧光标记的重组病毒SX1910-ΔgE/gI-GFP。然后利用Cre酶将SX1910-ΔgE/gI-GFP的GFP表达盒置换为双拷贝的Cap基因表达盒，获得重组病毒rSX1910-ΔgE/gI-2Cap_PCV3，并对其进行体外生物学特性和免疫效果分析。结果表明，rSX1910-ΔgE/gI-2Cap_PCV3体外增殖能力和噬斑大小显著小于亲本毒株SX1910。将rSX1910-ΔgE/gI-2Cap_PCV3免疫接种至6周龄雌性BALB/c小鼠进行免疫效果初步评价，结果显示，rSX1910-ΔgE/gI-2Cap_PCV3可有效刺激小鼠产生Cap蛋白的抗体，有效减轻PCV3感染对肺部组织的损伤，显著降低组织病毒载量。以上数据表明，rSX1910-ΔgE/gI-2Cap_PCV3可对小鼠产生良好的免疫效果，并为PCV3新型疫苗的研究奠定了科学基础。

旨在建立一种快速简便、可同时检测猪圆环病毒(porcine circovirus, PCV)2型、3型和4型三种病原的三重荧光定量PCR检测方法，并应用建立的方法对临床疑似感染PCV的样本进行PCV2、PCV3及PCV4的检测和分子流行病学分析。根据PCV2及PCV3的Rep蛋白(replicase protein, Rep)基因序列、PCV4的Cap蛋白(capsid protein, Cap)基因序列，设计合成3对特异性引物和3种不同荧光基团标记的TaqMan探针，进行反应体系和反应条件的优化，构建阳性质粒及标准曲线，评价方法的特异性、敏感性和重复性。结果表明，建立的PCV三重荧光定量PCR检测方法特异性强，不同亚型PCV和常见猪病原体均无交叉反应；检测下限均为1.0×10² copies·μL^-1，批内和批间变异系数均小于2.0%，重复性良好。对检测为阳性的样品进行Cap蛋白基因序列扩增、克隆和测序，获得41条序列，其中11条PCV2a，8条PCV2b，15条PCV2d及7条PCV3a。34条PCV2 Cap蛋白相似性为96.7%~99.7%，7条PCV3 Cap蛋白相似性为97.2%~99.9%。本试验成功建立了一种PCV三重荧光定量PCR，且可检测出不同基因型的猪圆环病毒的混合感染，PCV2d、PCV3a当前依然为国内优势基因型，为临床PCV的准确诊断提供了更快速更精准的检测方法。

本研究旨在系统评价和分析猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)在我国长三角地区的感染状况，为有效防控PRRSV感染提供科学依据。通过检索中国知网(CNKI)、万方数据知识服务平台、维普中文科技期刊数据库、PubMed和Science Direct等5个主要数据库，收集自1995年PRRSV在中国爆发以来关于长三角区域猪群PRRSV流行情况的文献，并进行系统评价和Meta分析。经过筛选，共纳入36篇文献，样本总数为28 767头猪，其中8 277头为PRRSV阳性。Meta分析结果显示，长三角地区猪群中PRRSV的整体流行率为35.8%(95% CI：0.266, 0.456)。安徽省流行率最高，为51.5%(95%CI：0.321, 0.706)，其次为江苏省45.0%(95%CI：0.315, 0.589)和上海市41.2%(95%CI：0.211, 0.629)，而浙江省的流行率最低，为31.0%(95%CI：0.213, 0.416)。哺乳仔猪的流行率最高，为34.1%(95%CI: 0.181, 0.521)，保育猪为30.4% (95%CI: 0.077, 0.598)，育肥猪则最低，为21.5%(95%CI: 0.115, 0.333)。亚组分析和Meta回归分析表明，文献的异质性来源不包括采样地点、采样时间、诊断方法、临床症状、猪的发育阶段和文献质量(P>0.05)，而样本类型、饲养模式和健康状况等因素均为影响PRRSV流行率的因素(P < 0.05)。我国长三角地区猪群中PRRSV流行率较高，需持续监测其感染情况，特别是对散养猪群和哺乳仔猪的管理和监测，同时制定针对性的防控措施，降低病毒传播风险。

本研究旨在建立一种基于牛结节性皮肤病病毒(LSDV)ORF002蛋白的间接ELISA抗体检测方法。通过构建重组质粒pET-30a(+)-ORF002并诱导表达，获得相对分子质量约为13 ku的蛋白，以SDS-PAGE和Western blot验证后的ORF002蛋白为包被抗原，建立LSDV间接ELISA抗体检测方法并进行条件优化。优化后的间接ELISA条件为：抗原包被浓度2.5 μg·mL^-1，血清稀释度1∶100，二抗稀释度1∶120 000。结果判定标准为待检样品OD_{450 nm}值≥标准阳性值×20.34%为阳性，反之为阴性。重复性试验变异系数 < 10%，与多种病毒阳性血清无交叉反应。该方法具有良好的敏感性、特异性及重复性，适用于LSD感染临床血清样品检测和疫苗免疫效果评价。

旨在探究鬼针草(Bidens pilosa L.，B.pilosa)对感染柔嫩艾美耳球虫(E. tenella)雏鸡的盲肠损伤、免疫功能和氧化应激的影响。采用醇提取法制备鬼针草甲醇提取液(BP)。200只1日龄健康雄性雏鸡，常规饲养至10日龄时，挑选108只体重相近的雏鸡随机分为阴性对照(Control)组、阳性对照(Et)组、鸡球虫散(Chicken Coccidiosis Powder，CCP)组、1 mL·kg^-1 BP组、5 mL·kg^-1 BP组、10 mL·kg^-1 BP组。雏鸡14日龄时，除阴性对照组外其余5组每只鸡经口感染5×10⁴个E. tenella孢子化卵囊，按分组剂量进行治疗给药。21日龄时剖杀所有鸡只，采取盲肠组织制作病理组织切片；检测盲肠菌群、肠道屏障相关基因mRNA转录水平、免疫指标及氧化应激相关因子的变化。结果显示，与阳性对照组相比，10 mL·kg^-1 BP减少了盲肠寄生卵囊的数量、减轻盲肠病变及损伤；提高了盲肠乳酸杆菌的数量，显著降低了梭状芽胞杆菌和沙门菌的数量并恢复了盲肠菌群数量；显著升高了紧密连接蛋白1(ZO-1)、闭锁蛋白(Occludin)、闭合蛋白1(Claudin-1)、黏蛋白2(MUC-2)的mRNA转录水平以及血清中白细胞介素10(IL-10)、免疫球蛋白G(IgG)的含量和过氧化氢酶(CAT)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活力，显著降低了白细胞介素2(IL-2)、白细胞介素6(IL-6)和丙二醛(MDA)的含量。结果提示，该试验中10 mL·kg^-1 BP可以修复被E. tenella感染破坏的盲肠菌群多样性，提高感染雏鸡的免疫功能，减轻肠道损伤和氧化应激。

本研究旨在通过构建稳定表达的猪瘟病毒(classical swine fever virus, CSFV)NS3-NS4A和NS3^pro-NS4A蛋白巨噬细胞系，以期更好地探索宿主天然免疫与CSFV的相互作用关系。利用琼脂糖凝胶电泳、连接与转化和提取质粒等方法对重组表达载体进行构建，将构建好的pCMV-CBH-GFP-2A-Puro-CSFV NS3^pro-NS4A、pCMV-CBH-GFP-2A-Puro-CSFV NS3-NS4A和pCMV-CBH-GFP-2A-Puro重组表达载体分别感染HEK-293T细胞包装出慢病毒。然后利用包装成功的慢病毒感染猪肺泡巨噬细胞(3D4/21)，对感染细胞进行单克隆筛选得到稳定转染细胞系，最后用Western blot方法验证稳定细胞系蛋白表达。对其进行蛋白组学分析，筛选出MAPK、PI3K通路的相互作用蛋白，并进行功能分析，利用Western blot检测CDK4、CDC37、CASP3、IKBKG、NFκB1蛋白表达量。结果表明，经MegAlign分析构建的过表达CSFV非结构蛋白NS3-NS4A以及NS3^pro-NS4A慢病毒载体氨基酸序列全部正确，无移码；重组表达载体感染293T细胞24 h后，感染效率可达90%以上，慢病毒包装成功；Western blot分析成功获得稳定表达CSFV NS3-NS4A、NS3^pro-NS4A巨噬细胞系；通过蛋白组学分析，筛选出NS3-NS4A/mock组中MAPK与PI3K通路中上调蛋白11个，下调蛋白24个；经Western blot检测CSFV NS3-NS4A显著降低了MAPK通路中CASP3、NFκB1、IKBKG的表达，PI3K通路中CDK4、CDC37的表达。本研究成功构建了稳定表达NS3-NS4A、NS3^pro-NS4A蛋白的3D4/21细胞系，并对蛋白组学筛选的关键蛋白进行功能分析，为研究CSFV NS3-NS4A调控宿主天然免疫应答的机制提供物质基础。

本文旨在探究猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus，PEDV)感染后是否引起铁死亡及对其复制水平的影响。首先通过PEDV感染IPEC-J2(porcine intestinal epithelial cells, IPEC-J2)细胞后的蛋白组学差异蛋白、GO和KEGG富集分析推测IPEC-J2细胞在感染PEDV后会发生铁死亡，通过测定细胞中MDA、GSH含量，铁死亡关键蛋白TFRC、xCT、GPX4、ACSL4、LPCAT3和Ferritin蛋白水平及倒置荧光显微镜观察Fe²⁺、脂质ROS和线粒体膜电位荧光强度变化确定了会发生铁死亡。进一步通过添加铁死亡抑制剂Fer-1(ferrostatin-1)探讨了PEDV感染IPEC-J2细胞后引起的铁死亡在其感染过程中N蛋白的表达变化和病毒滴度的变化。蛋白组学的筛选结果：PEDV感染组Ferritin下调最显著；GO和KEGG富集分析结果均显示，铁代谢紊乱和脂代谢失调途径最显著，推测PEDV感染IPEC-J2后可能引起了铁死亡；感染细胞中MDA含量极显著升高，GSH含量极显著降低(P < 0.01)；Ferritin、GPX4、ACSL4和LPCAT3蛋白水平均极显著下调(P < 0.01)，并且TFRC蛋白水平极显著上调(P < 0.01)；荧光结果显示，Fe²⁺相对荧光强度极显著增强、氧化型脂质ROS荧光强度极显著增强及线粒体膜电位极显著降低(P < 0.01)。在添加Fer-1后PEDV的N蛋白水平和基因水平均极显著下调(P < 0.01)，并且Fer-1处理后病毒滴度也极显著下降(P < 0.01)。PEDV感染IPEC-J2细胞可以引起细胞发生铁死亡，这可能是促进其复制的机制之一。

本研究旨在表达鉴定重组猪源细胞因子CCL25蛋白功能及制备针对CCL25的兔源多克隆抗体。获取去除跨膜区的CCL25氨基酸序列，构建重组载体并在大肠杆菌表达系统中表达，镍柱纯化后利用SDS-PAGE、Western blot及ELISA鉴定蛋白表达；利用细胞增殖、划痕试验、Transwell培养等试验，通过流式细胞术、实时荧光定量等技术验证蛋白生物活性。蛋白采用皮下多点注射方法免疫新西兰大白兔，制备兔多克隆抗体。通过间接ELISA、共聚焦及Western blot验证多克隆抗体的功能与效价。结果显示：SDS-PAGE、Western blot证实蛋白可溶性表达，细胞增殖、划痕试验、Transwell培养等试验结果显示，CCL25促进IPEC-J2细胞生长，使其向空白区域迁移，上调细胞AKT和p-AKT₄₇₃表达量，并明显促进猪外周血淋巴细胞的细胞趋化。同时，CCL25抑制LPS诱导的IL-8、caspase-3表达以及7-AAD⁺死亡细胞比例。除此之外，本研究成功制备出效价高、特异性良好的多克隆抗体。原核表达纯化获得CCL25蛋白并初步鉴定CCL25蛋白具有促进细胞增殖、迁移、趋化以及抗炎抗凋亡等生物学功能，为CCL25的后续功能研究提供了有效的实验工具和基础数据。

长链非编码RNA(long non-coding RNA，lncRNA)在奶牛乳腺炎中存在差异表达，但其调控奶牛乳腺炎的分子机制尚不清楚。本研究旨在探究新发现的差异表达lncRNA TCONS_00062289在奶牛乳腺上皮细胞(bovine mammary epithelial cells，bMECs)炎症反应中的作用。因该lncRNA的序列与肌动蛋白单体结合蛋白反义链(profilin1 antisense，PFN1-AS1)相同，将其命名为lncRNA PFN1-AS1。采用RT-PCR技术克隆lncRNA PFN1-AS1，预测lncRNA PFN1-AS1的功能。采用脂多糖(lipopolysaccharides，LPS)诱导bMECs建立炎症细胞模型，探究在炎症模型中干扰lncRNA PFN1-AS1对细胞炎症、增殖和凋亡的影响。结果显示：lncRNA PFN1-AS1长度为811 bp，可能参与调控细胞凋亡和炎症过程。lncRNA PFN1-AS1主要分布于细胞质中。在LPS诱导的bMECs炎症模型中，lncRNA PFN1-AS1表达水平显著下降(P < 0.05)；干扰lncRNA PFN1-AS1后，促炎细胞因子白介素(interleukin，IL)6、IL-8和IL-1β的转录和分泌水平均显著增加(P < 0.05)。增殖基因细胞周期蛋白依赖激酶(cyclin dependent kinase，CDK)2、CDK4和增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen，PCNA)表达水平显著下降(P < 0.05)，细胞活力值和增殖率显著下降(P < 0.05)；凋亡基因半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(cysteinyl aspartate specific proteinase，CASP)3、CASP8和Bcl-2相关X蛋白(bcl-2-associated X protein，BAX)的表达水平显著升高(P < 0.05)，细胞凋亡率极显著增加(P < 0.01)。干扰lncRNA PFN1-AS1后促进了IL-6、IL-8和IL-1β的转录和蛋白分泌，促进了细胞凋亡水平，同时降低了细胞活力和增殖能力，这些结果揭示了lncRNA PFN1-AS1在bMECs炎症中的作用，为进一步探究其在奶牛乳腺炎中的作用提供了科学依据。

肺神经内分泌细胞(PNEC)位于气道上皮层内，可分泌活性胺和肽类物质，兼有神经细胞及内分泌细胞的特征，与陆生哺乳动物肺脏发育和适应外界环境功能密切相关。为探究PNEC在不同年龄牦牛肺脏中的分布和低氧适应性结构形成过程中的可能作用，本研究选取初生(1~6日龄)、幼年(1~3岁)、成年(4~6岁)及老年(7~10岁)牦牛各6头，利用Grimelius嗜银染色、免疫组织化学染色、免疫荧光染色对PNEC及其相关因子嗜铬粒蛋白A(CGA)、S100蛋白(S100 A1)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)和神经源性分化因子(NEUROD1)的分布特征进行研究，同时采用Western blot和qRT-PCR检测这些相关因子在蛋白水平的表达及基因水平的转录。结果显示，牦牛肺脏气道上皮中PNEC数量以初生组最多；PNEC相关因子主要分布于气道上皮细胞、Ⅱ型肺泡上皮细胞、肺动脉内皮细胞及气管腺腺上皮细胞；CGA、S100A1和NEUROD1的表达趋势基本一致，均在初生组牦牛肺脏中表达最高，之后呈递减趋势，蛋白水平上的表达各组差异均显著(P < 0.05)。基因水平上的转录各组趋势虽然一致，但4种因子组间差异较大，NSE在成年组牦牛肺脏中表达最高，且显著高于初生组、幼年组、老年组牦牛，呈现先递增再递减的趋势。本研究表明PNEC及其相关因子通过动态表达调控可能参与了牦牛肺脏对低氧环境的适应性调节，同时为牦牛生存繁衍提供关键能量支持，也为进一步研究牦牛肺脏低氧适应机制提供了资料。

本研究旨在探究艾叶精油(Artemisia argyi essential oil，AAEO)对鸡马立克病病毒(Marek’s disease virus，MDV)体外增殖的影响及潜在分子机制。通过CCK-8法测定AAEO对鸡胚成纤维(chicken embryo fibroblast，CEF)细胞的毒性作用，筛选AAEO的最佳作用浓度范围；根据筛选出的最佳作用浓度处理细胞收集样品。通过蚀斑分析和病毒滴度测定，检测AAEO对MDV体外增殖的影响。通过RT-qPCR和Western blot从分子水平上解析AAEO抑制MDV增殖的机制。结果表明，AAEO作用浓度为60~360 μg·mL^-1对CEF无细胞毒作用。AAEO处理组的病毒蚀斑明显减小且变少，病毒滴度下降，病毒在基因水平和蛋白水平的表达上均有下降，说明AAEO可抑制MDV的复制，且具有剂量依赖性。通过对AAEO作用的细胞内信号通路筛选发现，AAEO可下调磷酸化ERK和STAT3蛋白表达水平，下调IL-6 mRNA表达水平。使用ERK抑制剂U0126处理细胞，当细胞内ERK通路被抑制时，病毒复制减少。AAEO可抑制鸡MDV体外增殖，其抗病毒作用可能与AAEO抑制IL-6/STAT3和ERK通路激活有关。艾叶精油具有较好的抗MDV活性，研究结果可为抗疱疹病毒药物的研发提供新的依据。

本研究旨在探讨外源性褪黑素(melatonin, Mel)对慢性热应激下肉鸡皮质酮合成分泌的机制，为褪黑素缓解慢性热应激提供理论依据。将90只2周龄的肉鸡随机分为6组：正常对照组(CON)，慢性热应激(HS)组，褪黑素干预组：CONH(2.0 mg·kg^-1)组、HSL(0.5 mg·kg^-1)组、HSM(1.0 mg·kg^-1)组、HSH(2.0 mg·kg^-1)组。试验持续21 d。结果表明, 慢性热应激导致肉鸡生产性能下降和血清中皮质酮含量明显升高，而0.5 mg·kg^-1 Mel处理的肉鸡生产性能显著改善(P＜0.001)，HSH组的肉鸡料重比显著下降(P＜0.05)。日粮中补充0.5~2.0 mg·kg^-1 Mel显著降低了慢性热应激下肉鸡血清中皮质酮含量(P＜0.000 1)。此外，Mel能有效改善慢性热应激造成的还原型谷胱甘肽(GSH)含量下降，超氧化物歧化酶(SOD)活性和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性下降。根据网络药理学分析，Mel干预慢性热应激，富集到cAMP信号通路，检测到Mel的作用机制与褪黑素受体MT1有关，并通过抑制cAMP/PKA/CREB信号通路，减弱肾上腺皮质酮的合成分泌，减轻应激反应。

旨在研究天然植物精油的抑菌活性及其与过硫酸氢钾复合盐的协同抑菌效果。采用微量肉汤稀释法检测8种植物精油和过硫酸氢钾复合盐对金黄色葡萄球菌ATCC 29740和大肠杆菌CVCC 1450的最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)，并使用药敏片法检测体外抑菌活性。通过时间-抑菌曲线分析不同精油浓度对细菌生长的动态抑制作用。采用棋盘法结合FIC指数研究精油与过硫酸氢钾复合盐的协同抗菌效果。结果显示，在8种植物精油中，国产薰衣草和澳洲薰衣草精油对金黄色葡萄球菌的MIC最低，为1.95 μg·mL^-1，国产洋甘菊和国产薰衣草精油对大肠杆菌的MIC最低，为15.63 μg·mL^-1。联合抑菌结果表明，国产洋甘菊精油与过硫酸氢钾复合盐的协同抑菌效果最佳，FIC指数为0.5。本研究筛选出的4种高抑菌性植物精油对动物常见病原菌具有良好的抑制活性，复配过硫酸氢钾复合盐可有效降低对金黄色葡萄球菌ATCC 29740和大肠杆菌CVCC 1450的MIC；国产洋甘菊精油-过硫酸氢钾复合盐组合具有协同抑菌作用，可为天然安全消毒制剂的开发提供参考。

本研究旨在建立一种可快速同时诊断猪支气管败血波氏杆菌(Bordetela bronchiseptica，Bb)、副猪格拉瑟菌(Glaesserella parasuis，GPS)和猪链球菌(Streptococcus suis，SS)的多重荧光定量PCR方法。根据Bb的fla基因，GPS的infB基因，SS的gdh基因保守序列设计特异性引物和探针，经过反应条件优化后，建立一种检测三种病原的TaqMan多重荧光定量PCR方法。结果表明，该方法对胸膜肺炎放线杆菌、多杀性巴氏杆菌、伪狂犬病病毒、猪源肺炎克雷伯菌、猪肺源大肠杆菌等病原核酸检测未出现阳性，具有良好的特异性；对三种标准质粒品的最低检测下限分别为8.06、7.11和7.15 copies·μL^-1，具有较高敏感性；组内和组间变异系数均小于2%，具有良好的稳定性。对2023—2025年收集的513份临床猪肺脏样品进行检测，结果显示，Bb与GPS混合感染的比例为6.63%；Bb与SS混合感染的比例为8.11%；GPS与SS混合感染比例为12.47%；三种病原混合感染的比例为5.46%；所有混合感染的总比例为16.57%。所建立的多重荧光定量PCR方法具有较好的特异性、敏感性和稳定性，可作为临床上三种病原的快速诊断工具。