基于多酶恒温快速扩增检测猪链球菌及其3种主要血清型方法的建立及应用

doi:10.11843/j.issn.0366-6964.2026.01.049

摘要/Abstract

摘要：

猪链球菌（Streptococcus suis，SS）影响养猪业的重要病原菌之一。本文基于多酶恒温快速扩增（multienzyme isothermal rapid amplification，MIRA）技术建立快速检测SS及其血清2、7、9型3种主要临床血清型的新方法，该方法可在20~41 ℃温度下5~30 min内完成扩增，具有良好的特异性和敏感性；应用MIRA方法能够快速检测临床分离菌株中相应血清型，且与PCR方法的符合率为100%。上述结果表明，本研究所建立的MIRA方法可为临床诊断猪链球菌感染提供简便快捷的方法。

关键词: 猪链球菌, 血清型, 多酶恒温快速扩增技术, 快速检测

Abstract:

Streptococcus suis （SS） is one of the important pathogens causing serious economic losses in the pig farming industry. Here， we developed a novel rapid detection method for detecting SS and serovars 2， 7 and 9 based on multienzyme isothermal rapid amplification （MIRA） technology. The MIRA assays were validated for detection of SS and it serovars within 5 to 30 min at 20-41 ℃， with relative higher specificity and sensitivity. There are 100% agreement between our MIRA and PCR methods in the detection of clinical samples. Our results showed that the MIRA was a useful diagnostic method for rapid diagnosis of SS infection.

Key words: Streptococcus suis, serovars, MIRA, rapid detection

中图分类号:

S852.611

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图/表 3

表1

图1

表2

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SS及其血清型 SS and serovars	名称 Name of primer	引物序列（5′→3′） Primer sequence	片段长度/bp Length
SS	SS-F1/R1	CAGAAACTGTCTTTATGCGATTGATT AGTCATTAAATTGTGGACGAGAGAGCT	427
	SS-F2/R2	GTAGGCTAACTAAAGCGGGCGATTGG ATTACGGGGTCATTTTGCCGAGTTCC	262
	SS-F3/R3	CCCATCCACCGTAAGACTAAGGTTTC CTTAGTTAGCCTACTGCGTCCCTCCA	156
SS2	SS2-F1/R1	GGGGTTCGTATTAACTTACTTGGCGTA TTAAGGGCATTTCAAGCGTTCCATTC	433
	SS2-F2/R2	ACTTTAGACTATGCTATAAGGGTTAGACGC TTCTACTGTTGCAGATAGGACTACAATGAT	222
	SS2-F3/R3	TTTAGGTTGGAATGGAACGCTTGAAATG CTCTACTGTTGCAGATAGGACTACAATG	188
SS7	SS7-F1/R1	TAGAGGTAGGTGGATTGCGTTCTTG AACACCCTGGATAGCCGTAATTGTA	215
	SS7-F2/R2	TAATAATGCCCTCGTGGAATACAGCTAAGT GGTGCCATAAATCATCTGAATCCAAGAACG	267
	SS7-F3/R3	TAGAGGTAGGTGGATTGCGTTCTTGG ATTCAAACACCCTGGATAGCCGTAATT	218
	SS7-F4/R4	TTAGTAGTAGGTGCTGGAGATGGTGGG ATGTTACCCGCCATAATGTCTTCAATGC	310
SS9	SS9-F1/R1	TATCAGACTGCATACAGGGCAGAAG ATCACAAGCAACCTGGGCAACAAAA	282
	SS9-F2/R2	TTGTCTCTCAAAATAAATCTAATCAGGGGC GAATTGTGAAACGACTTGCTACTAGAGGAT	490
	SS9-F3/R3	GGAAGTATTGGCAACGAAGAAGGGA CACATCATCAACAGCCTCTATATCCGC	177