Acta Veterinaria et Zootechnica Sinica ›› 2025, Vol. 56 ›› Issue (6): 2879-2892.doi: 10.11843/j.issn.0366-6964.2025.06.031
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GUO Qianqian1,2(), XUE Huiwen1,*(
), DU Pengfei2,*(
), YANG Chenghuai2, GOU Huitian1, CHEN Ling2, TIAN Ye2
Received:
2024-06-18
Online:
2025-06-23
Published:
2025-06-25
Contact:
XUE Huiwen, DU Pengfei
E-mail:2456457584@qq.com;xuehw@gsau.edu.cn;pengfeidu@live.cn
CLC Number:
GUO Qianqian, XUE Huiwen, DU Pengfei, YANG Chenghuai, GOU Huitian, CHEN Ling, TIAN Ye. Analysis of Current Development Status of Technology Patents Related to Listeria in China[J]. Acta Veterinaria et Zootechnica Sinica, 2025, 56(6): 2879-2892.
Table 1
Distribution of the top 10 patent fields related to Listeria in China"
国际专利分类 International Patent Classification (IPC) | 涉及技术描述 Technical description involved | 百分比 Percentage |
C12Q1/00 | 包含酶、核酸或微生物的测定或检验方法;其组合物及制备方法 | 45.84 |
C12R1/00 | 微生物 | 42.09 |
C12N15/00 | 突变或遗传工程;遗传工程涉及的DNA或RNA,载体(如质粒)或其分离、制备或纯化;所使用的宿主 | 41.55 |
C12N1/00 | 微生物本身,如原生动物;及其组合物;繁殖、维持或保藏微生物或其组合物的方法;制备或分离含有一种微生物的组合物的方法;及其培养基 | 24.66 |
G01N33/00 | 利用不包括在G01N1/00至G01N31/00组中的特殊方法来研究或分析材料 | 17.43 |
A61K39/00 | 含有抗原或抗体的医药配制品 | 16.62 |
A61P31/00 | 抗感染药,即抗生素、抗菌剂、化疗剂 | 14.21 |
A61P35/00 | 抗肿瘤药 | 12.33 |
A61K35/00 | 含有其有不明结构的原材料或其反应产物的医用配制品 | 10.46 |
C07K14/00 | 具有多于20个氨基酸的肽;促胃液素;生长激素释放抑制因子;促黑激素;其衍生物 | 8.58 |
Table 2
Classification of patented methods for detecting L. monocytogenes in China"
大类 Large category | 数量/件 Quantity | 占比/% Proportion | 分类 Classification | 数量/件 Quantity | 占比/% Proportion | 小类 Subclass | 数量/件 Quantity |
分子生物学检测技术 Molecular biology detection techniques | 159 | 95.21 | PCR检测方法 | 25 | 15.72 | 常规PCR | 15 |
实时荧光定量PCR | 8 | ||||||
数字PCR | 2 | ||||||
等温扩增技术 | 24 | 15.09 | 环介导等温扩增法 | 12 | |||
重组聚合酶扩增技术 | 11 | ||||||
新型核酸等温扩增技术 | 1 | ||||||
CRISPR/Cas系统 | 2 | 1.26 | - | ||||
基因芯片技术 | 2 | 1.26 | - | ||||
其他分子生物学检测技术 | 106 | 66.67 | 测序技术 | 1 | |||
质粒检测 | 2 | ||||||
免疫学检测技术 Immunological testing techniques | 8 | 4.79 | 免疫层析技术 | 7 | 87.50 | 以胶体金作为可视化标记材料的技术 | 2 |
以磁珠作为可视化标记材料的技术 | 5 | ||||||
化学发光免疫分析技术 | 1 | 12.50 | - |
Table 3
Analysis of patent status of molecular biology detection technology for L. monocytogenes"
大类 Large category | 分类 Classification | 优点 Advantage | 缺点 Disadvantage |
PCR检测方法专利 Patents for PCR detection method | 常规PCR | 检测速度快、成本低廉、操作简单 | 需要依靠仪器,不适合现场检测,且易出现假阳性 |
实时荧光定量PCR | 特异性强,降低了常规PCR扩增的假阳性率,灵敏度、扩增效率相比较于常规PCR更高 | ||
数字PCR | 可检测单增李斯特菌活菌,不依赖于QPCR的标准曲线,定量结果更为精准 | ||
等温扩增技术专利 Isothermal amplification technology patents | 环介导等温扩增法 | 灵敏度高、特异性强、操作简单、适于现场检测 | 对操作及环境要求高,容易气溶胶污染、出现假阳性 |
重组聚合酶扩增技术 | 只需要恒温仪器,高灵敏度和高特异性,检测时间短,结果判定简单,操作便捷,成本低 | ||
新型核酸等温扩增技术 | 反应模拟DNA复制的自然过程,与常规PCR相比不再需要重复升降温过程,更快速灵敏 | ||
CRISPR/Cas系统专利 CRISPR/Cas system patents | - | 扩增体系与检测体系完全分离、避免交叉污染、结果可视化,灵敏度极高 | 反应体系复杂 |
基因芯片技术 Gene chip technology | - | 高通量检测、灵敏度高,稳定性好 | 成本高、分析范围狭窄、不适合现场检测 |
其他分子生物学检测技术专利 Other molecular biology detection technology patents | 测序技术 | 高通量检测、准确性好 | 成本较高、不适合现场检测 |
质粒检测 | 有助于PCR检测体系能够显示假阴性的发生,提高PCR检测的准确性 | 不适合现场检测,且易出现假阳性 |
Table 4
Analysis of patent status of immunological detection technology for L. monocytogenes"
大类 Large category | 分类 Classification | 专利号 Patent number | 专利名称 Patent name | 专利权人 Patentee | 原理 Principle | 优点 Advantage | 缺点 Disadvantage |
免疫层析技术专利(7件) Immunochrom-atographic technology patents (7 pieces) | 以胶体金作为可视化标记材料的技术专利(2件) | CN101609095A | 一种新的快速定量检测单增李斯特菌的胶体金免疫层析方法以及胶体金免疫检测试纸条 | 中国检验检疫科学研究院 | 基于单增李斯特菌P60抗体建立的胶体金标记和双抗体夹心免疫层析技术方法 | 能快速、灵敏、特异、准确地检测样品中的单增李斯特菌,并可实现半定量,适用于现场快速检测 | 不能实现定量检测 |
CN111505280A | 一种超灵敏检测单增李斯特菌的胶体金免疫层析试剂盒 | 南昌大学 | 试剂盒由采用双抗体夹心法的胶体金免疫层析试纸条和比色信号放大试剂组成 | 操作简单、灵敏度高、稳定性好、检测速度快、结果易读,可用于临床和突发事件的现场快速超灵敏检测以及大规模的流行病学调查 | |||
以磁珠作为可视化标记材料的技术专利(5件) | CN203337668U CN104374916A | 荧光定量检测单增李斯特菌免疫层析试剂盒 | 广州万孚生物技术股份有限公司 | 利用免疫磁珠富集浓缩样本中的单增李斯特菌,再通过荧光免疫层析技术进行定量检测 | 可定量分析,且与单纯的荧光定量层析检测试剂盒或者一般的胶体金检测方法等相比,检测效率高 | 需要专业荧光分析仪 | |
CN204044160U | 检测单增李斯特菌的侧向流免疫层析测定产品 | 深圳国际旅行卫生保健中心 | 通过磁性复合粒子定向共价化学偶联特异性抗体,获得功能性的磁性标记探针,优化双抗体夹心免疫反应后检测 | 灵敏度高、特异性强、快速、简便,可实现客观化测定 | 加样量影响准确度和敏感性 | ||
CN104237518A; CN104237518B | 检测单增李斯特菌的侧向流免疫层析测定产品及制备方法 | ||||||
CN102393462A | 快速检测单增李斯特菌的磁性免疫层析方法及检测试纸条的制备 | 上海海洋大学 | 将单克隆抗体通过化学结合方式偶联到磁性纳米材料的表面,作为磁珠标记抗体制备成免疫磁珠 | 快速定性或定量检测 | 需要磁信号检测仪 | ||
化学发光免疫分析技术专利(1件) Chemiluminescence immunoassay technology patent (1 piece) | - | CN114778621A | 一种基于纳米材料修饰电极快速定量检测单增李斯特菌的电化学发光检测方法 | 中国农业大学;河南牧业经济学院 | 基于ZnO-3DNGH复合材料,通过交流阻抗法和循环伏安法对修饰电极的电化学行为进行捕捉,实现信号输出 | 高灵敏度、高特异性,定量测定,成本低、线性范围广 | 需要专业仪器 |
Table 5
Summary of authorized patent information for the detection method of L. monocytogenes serotype"
专利号 Patent number | 专利名称 Patent name | 专利权人 Patentee | 原理 Principle | 优点 Advantage |
CN110218805A; CN110218805B | 单核细胞增生李斯特菌血清型4h多重PCR检测试剂盒 | 扬州大学 | 利用两对引物包括基因lmo1210检测引物以及基因xysn_1693检测引物快速检测单核细胞增生李斯特菌血清型4h的多重PCR方法 | 特异性好,灵敏度高,检测速度快,易于操作和结果判定,适用于多种来源样品的检测 |
CN112980713A; CN112980713B | 单核细胞增生李斯特菌血清型4h的血清诊断试剂盒的制备及应用 | 扬州大学 | 采用单核细胞增生李斯特菌XYSN可以制备多克隆抗体 | 用于鉴别或者免疫荧光标记血清型4h的单核细胞增生李斯特菌 |
CN107746890A; CN107746890B | 鉴定单增李斯特菌血清型的多重PCR检测引物及方法 | 南京农业大学 | 采用单增李斯特菌种上下游引物、1/2a血清型上下游引物、1/2b血清型上下游引物、1/2c血清型上下游引物和4b血清型上下游引物共5对引物,通过单次PCR扩增反应即可鉴定单增李斯特菌4种主要血清型 | 仅需要常规仪器、单次PCR扩增反应即可鉴定单增李斯特菌4种主要血清型,特异性强、检测灵敏度高、抗干扰性强 |
CN107723348A; CN107723348B | 鉴定单增李斯特菌1/2c血清型的NASBA检测方法 | 南京农业大学 | 采用单增李斯特菌1/2c血清型检测用分子信标探针,通过单增李斯特菌RNA提取、实时NASBA反应进行定性分析 | 对单增李斯特菌1/2c血清型菌株的鉴定具有特异性和灵敏度,操作步骤简单,检测时间短,可实时定性分析,可有效区分活菌和死菌 |
CN110423833A; CN110423833B | 一种基于特异性靶标鉴定单增李斯特菌血清型的多重PCR方法 | 华南理工大学 | 针对新挖掘到的单增李斯特菌血清型的特异性靶标lmo2644、LMOf2365_0118、lmo1119、lmo0733基因设计特异性引物,并建立单增李斯特菌血清型的PCR鉴定方法 | 准确度高、特异性好、鉴定速度快、成本低廉及操作简单 |
CN110890129A; CN110890129B | 单增李斯特菌血清型特异性SNP的挖掘方法及其应用 | 华南理工大学 | 将不同血清型特异性SNP组合使用,通过将血清型特异性SNP置于引物的3′末端,使某种血清型高效扩增,而其他血清型扩增效率极低,达到区分出主要血清型的目的 | 可有效鉴定单增李斯特菌主要血清型,比现有的多重PCR方法所需引物用量少,准确率高 |
CN103602739A | 单增李斯特菌主要血清型快速分型试剂盒及应用 | 浙江省水产技术推广总站 | 所述试剂盒包括冻存管和PCR反应管,通过试剂盒对单增李斯特菌主要血清型进行快速分型 | 价格低廉,操作简便,特异性好,灵敏性达102CFU/mL,无交叉反应,适用于大通量的分型操作 |
CN111118182A; CN111118182B | 血清型单核增生李斯特菌特异性新分子靶标及其快速检测方法 | 广东省微生物研究所(广东省微生物分析检测中心); 广东环凯生物科技有限公司 | 一组用于鉴别常见血清型单核增生李斯特菌特异性新分子检测靶标 | 能鉴别多种型别的单核增生李斯特菌,例如谱系型Ⅰ、谱系型Ⅱ、血清组Ⅰ.1、血清组Ⅱ.1、血清型4a、血清型4c等 |
CN112763640A | 单增李斯特菌四种血清型差异代谢物鉴别新方法 | 中国检验检疫科学研究院 | 涉及共计23个用于鉴别1/2a、1/2b、1/2c和4b四种血清型单增李斯特菌的差异代谢物,还涉及针对四组血清型别的Lm两两之间的多元统计分析方法 | 过程操作简单便捷,鉴别效率高,灵敏度高,重现性好,可实现对4种血清型单增李斯特菌的高效、准确的鉴别 |
CN111206108A | 单增李斯特菌的PCR检测试剂盒及检测方法 | 福建省疾病预防控制中心(福建省健康教育促进中心、福建省卫生检验检测中心); 深圳华因生物科技有限公司 | 运用荧光定量PCR分型检测试剂盒检测单增李斯特菌的血清型,检测试剂盒包括基因ORF2819、基因ORF2110、基因1mo0737、基因1mo1118和基因plcA五种基因的正向引物、反向引物和探针 | 与传统的免疫血清方法相比具有方便、快速、准确、灵敏、安全等优点,可应用于单增李斯特菌的早期快速分型诊断 |
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