畜牧兽医学报 ›› 2015, Vol. 46 ›› Issue (12): 2169-2175.doi: 10.11843/j.issn.0366-6964.2015.12.007
李鹏飞1,孟金柱2,刘岩2,黄洋2,陈建伟2,姜晓龙2,曹霞2,姚晓磊2,赵妙妙2,吕丽华2*
LI Peng-fei1,MENG Jin-zhu2,LIU Yan2,HUANG Yang2,CHEN Jian-wei2,JIANG Xiao-long2,CAO Xia2,YAO Xiao-lei2,ZHAO Miao-miao2,LÜ Li-hua2*
摘要:
旨在研究牛卵泡发育过程中可卡因-苯丙胺调节转录肽(Cocaine-and amphetamine-regulated transcript,CART)相互作用蛋白(Protein-protein interaction,PPI)。选择4头10月龄同期发情的健康母牛,B超检测卵泡达8~12 mm,屠宰并采集、分离卵泡颗粒细胞(Granulosa cells,GCs)后,进行总蛋白提取,兔抗CART一抗沉淀CART及其相互作用蛋白,经Protein G-Agarose磁珠吸附分离,多次洗涤去除盐分和杂蛋白,洗脱蛋白复合体并酶解,LC-ESI-Q-TOF质谱分析(Mass spectrometry,MS)及数据库比对。结果显示:共鉴定蛋白质组分111个;经Cytoscape V3.1.0分析,有81个蛋白符合功能模块,并构建蛋白相互作用网络图;同时对相互作用蛋白进行功能富集性分析,共分为3大类34组:其中分子功能占11.73%,生物学过程占46.93%,细胞组分占41.34%。α2巨球蛋白(A2M)和波形蛋白(VIM)与CART相互作用的相关系数最大; CART与NALP1、 SERPINH1和PDIA6具有负调控应答的功能,提示可能参与牛卵泡发育过程的调控。
中图分类号: