兔出血症病毒胶体金免疫层析试纸条诊断方法的建立及初步应用

畜牧兽医学报

兔出血症病毒胶体金免疫层析试纸条诊断方法的建立及初步应用

蔡少平^{1, 2}，王芳^1*，贾华敏³，张海彬²，李超美⁴，范志宇¹，胡波¹，熊富强²，魏后军¹

(1. 江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心,南京 210014； 2.南京农业大学动物医学院，南京 210095； 3.镇江新区兽医卫生监督所，镇江 212132； 4.南京出入境检验检疫局，南京 210001)

收稿日期:2012-04-09 出版日期:2012-11-26 发布日期:2012-11-26
通讯作者: 王芳，E-mail: rwangfang@126.com
作者简介:蔡少平(1978-)，女，湖北黄冈人，硕士生，主要从事畜禽传染病防控研究, E-mail：457460103@qq.com
基金资助:
现代农业产业技术体系建设专项资金资助（CARS-44）；江苏省农业科技自主创新资金［CX（10）214］

Development and Primary Application of an Immunochromatographic Colloidal Gold Test Strip for Rabbit Hemorrhagic Disease Virus

CAI Shao-ping^1,2, WANG Fang^1*, JIA Hua-min³, ZHANG Hai-bin², LI Chao-mei⁴, FAN Zhi-yu¹, HU Bo¹, XIONG Fu-qiang², WEI Hou-Jun¹

（1. Institute of Veterinary Medicine, Jiangsu Academy of Agricultural Sciences·Key Laboratory of Veterinary Biologicals Engineering and Technology of Ministry of Agriculture·National Center for Engineering Research of Veterinary Bioproducts, Nanjing 210014, China; 2. College of Veterinary Medicine, Nanjing Agriculture University, Nanjing 210095, China; 3. Zhenjiang New Area Animal Health Inspection Institute, Zhenjiang 212132,China; 4. Nanjing Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau, Nanjing 210001, China)

Received:2012-04-09 Online:2012-11-26 Published:2012-11-26

摘要/Abstract

摘要：

为了建立一种快速、简便的兔出血症病毒(RHDV)的检测方法，用胶体金标记纯化的RHDV多克隆抗体，以杆状病毒表达系统表达的重组RHDV VP60蛋白为免疫原制备RHDV的单克隆抗体(McAb，简称单抗) A3C，将RHDV McAb 和羊抗兔IgG抗体包被在硝酸纤维素膜上，分别作为检测线和质控线，经条件优化研制成RHDV免疫胶体金试纸条。该试纸条可以检出红细胞凝集试验（HA）效价为1∶10的RHDV悬液，即HA检测为阴性的样品，该试纸条检测为阳性，其敏感性高于HA ；特异性试验结果显示，该试纸条不与家兔其他常见病菌发生交叉反应。应用该试纸条对127份疑似兔出血症家兔肝脏样品进行初步检测，同时用HA做平行试验，阳性符合率为100％。因此，该试纸条是一种快速、灵敏、特异的兔出血症病毒检测方法，为兔出血症的现场诊断提供了有效的方法，显示出很好的临床应用前景。

Abstract:

To establish a rapid, simple assay for rabbit hemorrhagic disease virus (RHDV), purified polyclone antibody against RHDV was labeled with colloidal gold particle. Monoclonal antibody (McAb) A3C against RHDV was prepared with recombinant RHDV VP60 protein expressed by baculovirus expression system. The detection zone and quality control zone of the nitrocellulose membrane was made by A3C and goat anti-rabbit IgG. The immune colloidal gold test strip was developed by optimizing the experiment conditions. The sensitive test showed that the test strip can detect the RHDV which erythrocyte agglutination test (HA) titer was 1∶10, which is negative result if the RHDV was detected by HA. It means that the test strip is more sensitive than erythrocyte agglutination test. The crossing test showed that the test strip could not react with other rabbit common pathogens. 127 clinical liver samples of rabbit were detected by the test strip, while a parallel experiment was conducted using HA, and the positive consistent rate of both was 100%. All of the results showed that the test strip is a rapid, sensitive and specific method for detecting RHDV infection. The method has provided a effective tool for diagnosing RHDV, particularly in clinical diagnosis.

中图分类号:

S855.3

蔡少平，王芳，贾华敏，张海彬，李超美，范志宇，胡波，熊富强，魏后军. 兔出血症病毒胶体金免疫层析试纸条诊断方法的建立及初步应用[J]. 畜牧兽医学报, doi: .

CAI Shao-ping, WANG Fang, JIA Hua-min, ZHANG Hai-bin, LI Chao-mei, FAN Zhi-yu, HU Bo, XIONG Fu-qiang, WEI Hou-Jun. Development and Primary Application of an Immunochromatographic Colloidal Gold Test Strip for Rabbit Hemorrhagic Disease Virus[J]. ACTA VETERINARIA ET ZOOTECHNICA SINICA, doi: .

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