非洲猪瘟病毒基因Ⅰ型的双重实时荧光定量PCR检测方法建立

doi:10.11843/j.issn.0366-6964.2023.10.039

畜牧兽医学报 ›› 2023, Vol. 54 ›› Issue (10): 4428-4432.doi: 10.11843/j.issn.0366-6964.2023.10.039

非洲猪瘟病毒基因Ⅰ型的双重实时荧光定量PCR检测方法建立

常昊^1,2,3, 邱英武^1,2,3, 彭杰^1,2,3, 高琦^1,3, 宋泽布^1,3,4, 陈洋^1,3,5, 李薇², 林丽苗², 曹雪珍², 周庆丰², 张桂红^1,3,4, 李群辉^2*, 郑泽中^1,3,4*

1. 华南农业大学兽医学院非洲猪瘟防控技术研究中心, 广州 510642;
2. 温氏食品集团股份有限公司广东省畜禽健康养殖与环境控制企业重点实验室, 云浮 527400;
3. 国家非洲猪瘟区域实验室(广州), 广州 510642;
4. 广东省动物源性人兽共患病预防与控制重点实验室, 广州 510642;
5. 岭南现代农业科学与技术广东省实验室茂名分中心, 茂名 525000

收稿日期:2022-11-14 出版日期:2023-10-23 发布日期:2023-10-26
通讯作者: 郑泽中,主要从事病毒诊断方法及病毒致病机理研究,E-mail:zezhong@scau.edu.cn;李群辉,主要从事畜禽疾病防控研究,E-mail:492992437@qq.com
作者简介:常昊(1997-),男,河南濮阳人,硕士,主要从事猪病检测及诊断、猪病流行病学及作用机制研究,E-mail:ch1212@stu.scau.edu.cn
基金资助:
广州市基础与应用基础研究项目（202201010490）；广州市重点领域研发计划（202206010036）；茂名实验室科研启动项目（2021TDQD002）；财政部和农业农村部：国家现代农业产业技术体系资助（CARS-35）

Establishment of a Dual Real-time Fluorescence Quantitative PCR Assay for Genotype I ASFV

CHANG Hao^1,2,3, QIU Yingwu^1,2,3, PENG Jie^1,2,3, GAO Qi^1,3, SONG Zebu^1,3,4, CHEN Yang^1,3,5, LI Wei², LIN Limiao², CAO Xuezhen², ZHOU Qingfeng², ZHANG Guihong^1,3,4, LI Qunhui^2*, ZHENG Zezhong^1,3,4*

1. African Swine Fever Prevention and Control Technology Research Center, College of Veterinary Medicine, South China Agricultural University, Guangzhou 510642, China;
2. Guangdong Provincial Key Laboratory of Livestock and Poultry Health Breeding and Environmental Control, Wens Food Group Co., Ltd., Yunfu 527400, China;
3. National African Swine Fever Regional Laboratory (Guangzhou), Guangzhou 510642, China;
4. Guangdong Provincial Key Laboratory of Prevention and Control of Zoonotic Diseases of Animal Origin, Guangzhou 510642, China;
5. Maoming Branch of Guangdong Laboratory of Lingnan Modern Agricultural Science and Technology, Maoming 525000, China

Received:2022-11-14 Online:2023-10-23 Published:2023-10-26

摘要/Abstract

摘要： 随着基因Ⅰ型非洲猪瘟（GenotypeⅠ ASFV）在我国开始流行，使我国对ASF的诊断、预防和控制更具挑战性。本研究使用中国动物疾病预防控制中心（CADC）推荐使用的B646L引物与探针，结合针对GenotypeⅠ ASFV EP402R基因保守特异性区域设计引物与探针，建立了一种在诊断ASF的同时可对ASFV进行GenotypeⅠ ASFV鉴别的快速检测方法，并对其灵敏性、特异性进行检测。结果显示，该方法具有良好的灵敏性以及特异性，可有效用于ASFV的临床诊断以及GenotypeⅠ ASFV的监测。

关键词: 非洲猪瘟, 基因Ⅰ型ASFV, 实时荧光定量PCR, EP402R, B646 L

Abstract: With the beginning of Genotype I African swine fever (Genotype I ASFV) epidemic in China, it makes the diagnosis, prevention and control of ASF in China more challenging. In this study, primers and probes of B646L recommended by China Animal Disease Control Center (CADC) was used, combined with primers and probes designed for the conserved specific region of GenotypeⅠ ASFV EP402R gene, to establish a rapid detection method that can identify GenotypeⅠ ASFV while diagnosing ASF, and its sensitivity and specificity were tested. The results show that the method has good sensitivity and specificity and can be effectively used for the clinical diagnosis of ASFV and the monitoring of GenotypeⅠ ASFV.

Key words: African swine fever, genotype I ASFV, real-time fluorescence quantitative PCR, EP402R, B646L

中图分类号:

S852.651

常昊, 邱英武, 彭杰, 高琦, 宋泽布, 陈洋, 李薇, 林丽苗, 曹雪珍, 周庆丰, 张桂红, 李群辉, 郑泽中. 非洲猪瘟病毒基因Ⅰ型的双重实时荧光定量PCR检测方法建立[J]. 畜牧兽医学报, 2023, 54(10): 4428-4432.

CHANG Hao, QIU Yingwu, PENG Jie, GAO Qi, SONG Zebu, CHEN Yang, LI Wei, LIN Limiao, CAO Xuezhen, ZHOU Qingfeng, ZHANG Guihong, LI Qunhui, ZHENG Zezhong. Establishment of a Dual Real-time Fluorescence Quantitative PCR Assay for Genotype I ASFV[J]. Acta Veterinaria et Zootechnica Sinica, 2023, 54(10): 4428-4432.

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