摘要： 本研究旨在建立以PCV2 Cap蛋白为包被抗原的间接ELISA检测方法，构建猪圆环病毒2型（PCV2）ORF2基因原核表达质粒pET32aORF2并转化至Rosetta菌，在1.0 mmol·L-1 IPTG和37 ℃条件下诱导下，Cap蛋白获得高效表达，Western blot检测证实其具有免疫反应活性，以纯化的蛋白为抗原建立了检测猪圆环病毒2型抗体的间接ELISA方法。结果表明抗原最适包被浓度为2.16 μg·mL-1；血清最佳稀释度为1∶40；抗原最佳包被条件为4 ℃过夜；最佳封闭条件为 1%BSA 37 ℃ 1 h；血清反应时间为37 ℃ 30 min；酶标二抗最适作用时间为37 ℃ 45 min；底物最佳反应条件为37 ℃显色15 min。用该方法对四川省184份猪血清样品进行检测，总阳性率为80.98% (149/184)，与商品化的PCV2 ELISA试剂盒得到的结果基本一致。本试验成功建立了PCV2血清抗体间接ELISA方法，具有较高的敏感性和特异性，可用于大规模的血清学检测。

关键词: 圆环病毒2型, Cap蛋白, 间接ELISA