鹅乙酰辅酶A酰基转移酶2基因的克隆及其在鹅肥肝形成过程中的表达变化

doi:10.11843/j.issn.0366-6964.2016.04.009

摘要/Abstract

摘要：

为了探讨ACAA2基因与鹅（Anser anser）肝脂肪代谢的关系，本试验选取35只朗德鹅分为填饲组（15只）和对照组（20只），填饲组包括填饲7、14和19天3个阶段。运用RT-PCR方法克隆出朗德鹅ACAA2基因的完整编码序列并进行生物信息学分析，采用实时定量PCR技术测定了朗德鹅填饲不同阶段该基因在肝中的表达水平，并用葡萄糖、脂肪酸和胰岛素分别处理鹅原代肝细胞，观察这些因子对基因表达的影响。朗德鹅ACAA2基因完整CDS区长1 194 bp，编码 397个氨基酸；各阶段填饲组肝中该基因的表达量显著高于对照组（P<0.05），但随填饲时间的延长，表达水平呈下降趋势。另外，在培养的鹅原代肝细胞中，相较于对照组，0.5 mmol•L^-1的油酸能使ACAA2的表达量显著上调，而0.25 mmol•L^-1的棕榈酸和不同浓度的胰岛素能显著下调ACAA2的表达（P<0.05）。结果表明，ACAA2基因的表达与鹅肥肝的形成密切相关，为深入研究ACAA2基因在鹅肥肝形成过程中的作用奠定了基础。

关键词: 鹅, 乙酰辅酶A酰基转移酶2, 脂肪肝, 基因克隆

Abstract:

To explore the relationship between ACAA2 gene and liver fatty metabolism in goose，35 Landes geese were divided into overfeeding group(15) and control group(20)，the overfeeding group included 3 periods：overfeeding 7，14 and 19 days.The full coding sequence (CDS) of ACAA2 was cloned by RT-PCR and analyzed，its expression levels at different stages of overfeeding were determined in both normal and fatty liver by qRT-PCR in Landes geese.In addition，goose primary hepatocytes were treated with glucose，fatty acids or insulin to determine how its expression was regulated during fatty liver formation.Data indicated that the complete CDS of goose ACAA2 was 1 194 bp and encoded 397 amino acids.The ACAA2 expression level in the livers of the overfed geese was significantly higher (P<0.05) than the control at every stage，and presented a declining trend with the extension of overfeeding time.Moreover，compared to the control，the expression of ACAA2 gene was significantly increased in the goose primary hepatocytes treated with 0.5 mmol•L^-1 oleate，but was decreased in the primary hepatocytes treated with 0.25 mmol•L^-1 palmitate and insulin with different concentrations (P<0.05).The results suggeste that ACAA2 expression is closely related to the development of goose fatty liver，which will provide a basis for further study the role of ACAA2 gene in the formation of goose fatty liver.

Key words: goose, Acetyl-coenzyme A acyltransferase 2, fatty liver, gene cloning

中图分类号:

S835
S813.3

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