H9N2亚型禽流感病毒血凝素蛋白分子特征分析及其对小鼠致病力的研究

doi:10.11843/j.issn.0366-6964.2014.03.014

畜牧兽医学报 ›› 2014, Vol. 45 ›› Issue (3): 443-450.doi: 10.11843/j.issn.0366-6964.2014.03.014

H9N2亚型禽流感病毒血凝素蛋白分子特征分析及其对小鼠致病力的研究

黄蓉^#，梁威^#，刘纪园，王爱荣，柴同杰^*

（山东农业大学动物科技学院，山东省中德疫源人兽共患病研究中心，泰安 271018）

收稿日期:2013-09-24 出版日期:2014-03-23 发布日期:2014-03-23
通讯作者: 柴同杰，教授，E-mail：chaitj117@163.com
作者简介:黄蓉（1987-），女，山东泰安人，博士生，主要从事环境微生物的研究，E-mail：huangrongonly@163.com；梁威（1989-），男，山东枣庄人，硕士生，主要从事环境微生物的研究，E-mail：everytortoise@126.com。# 二人对本文同等贡献，并列第一作者
基金资助:
国家自然科学基金项目(31270172)；国家科技支撑计划（2012BAD39B0205）

Analysis of Hemagglutinin Molecular Characterization of H9N2 Avian Influenza Virus and Study on Its Pathogenicity to Mice

HUANG Rong^#， LIANG Wei^#， LIU Ji-yuan， WANG Ai-rong， CHAI Tong-jie^*

(Sino-German Cooperative Research Centre for Zoonosis of Animal Origin Shandong Province， College of Animal Science and Veterinary Medicine， Shandong Agricultural University，Tai′an 271018， China)

Received:2013-09-24 Online:2014-03-23 Published:2014-03-23

摘要/Abstract

摘要：

旨在了解H9N2禽流感病毒（AIV）山东分离株血凝素（HA）的遗传变异情况及其对哺乳动物的致病性。对5株H9N2 AIV山东分离株的HA蛋白的分子特征进行了分析，并以BABL/c小鼠为模型评价其致病性。结果表明：5株AIV均属于CK/Beijing谱系，其中2株病毒的HA具有人样受体结合特征（Leu²³⁴），3株病毒具有禽样受体结合特征（Gln234）。裂解位点分析表明，5株病毒均具有低致病性 AIV特征；个别病毒的潜在糖基化位点存在增加或缺失现象。攻毒BABL/c小鼠后，2株病毒能够在小鼠肺部复制，病理切片显示间质性肺炎病变，通过免疫组化染色在细支气管上皮细胞检测到病毒。研究表明，H9N2亚型AIV在进化过程中HA基因及其编码的蛋白存在一定的差异性，且5株山东分离株中有2株具备感染哺乳动物的能力。该试验结果为从分子水平上深入研究H9N2亚型AIV HA蛋白氨基酸位点与跨种传播的关系提供了理论依据。

Abstract:

The study was conducted to understand the evolution of hemagglutinin of H9N2 subtype avian influenza viruses (AIV) isolated from Shandong province and evaluate their pathogenicity to mammals.We analyzed hemagglutinin amino acids sequences of 5 H9N2 AIV isolated from Shandong province，and assessed their pathogenicity to mammals by using BABL/c mice model.The results indicated that all 5 strains belonged to CK/Beijing lineage.Two strains of them possessed human-like receptor binding specificity (Leu²³⁴)，while other three possessed avian-like receptor binding specificity (Gln²³⁴).The HA cleavage site showed that all the strains were low pathogenic.Potential glycosylation sites varied among the viruses.Two strains could replicate in mice’s lung，caused interstitial pneumonia，and could be detected in bronchial epithelial cells by immunohistochemistry.Our study demonstrated that the HA gene and its coding protein had some difference during the evolution of H9N2 subtype AIV，and two of the researched strains could infect mammal.This study provided theoretical basis at molecular level for further studies on amino acids of H9N2 subtype AIV HA protein，which relate to cross-species transmission.

中图分类号:

S852.659.5

黄蓉，梁威，刘纪园，王爱荣，柴同杰. H9N2亚型禽流感病毒血凝素蛋白分子特征分析及其对小鼠致病力的研究[J]. 畜牧兽医学报, 2014, 45(3): 443-450.

HUANG Rong， LIANG Wei， LIU Ji-yuan， WANG Ai-rong， CHAI Tong-jie. Analysis of Hemagglutinin Molecular Characterization of H9N2 Avian Influenza Virus and Study on Its Pathogenicity to Mice[J]. ACTA VETERINARIA ET ZOOTECHNICA SINICA, 2014, 45(3): 443-450.

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H9N2亚型禽流感病毒血凝素蛋白分子特征分析及其对小鼠致病力的研究

Analysis of Hemagglutinin Molecular Characterization of H9N2 Avian Influenza Virus and Study on Its Pathogenicity to Mice

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