本研究旨在分离鉴定猪胰脂肪酶相关蛋白2 (Pancreatic lipaserelated protein 2，PNLIPRP2)基因，并对其分子特征及在主要组织中的表达分布进行探讨。利用电子克隆和RTPCR技术克隆出猪PNLIPRP2基因编码区（CDS）全长，并将序列提交到GenBank；采用GENSCAN等软件和NCBI等在线资源对其及其预测编码蛋白序列进行生物信息学和比较基因组学分析；同时利用半定量PCR技术分析该基因在2月龄大白猪12种组织中的表达情况。结果表明，猪PNLIPRP2基因CDS全长1 416 bp （EU715062），编码471个氨基酸，含有1个保守的甘油三酯脂酶抑肽酶PLAT结构域（PLATPL），在进化上与人、黑猩猩PNLIPRP2的遗传距离较近。进一步分析显示，该基因定位于猪14号染色体，含有12个外显子和11个内含子。另外，猪PNLIPRP2在小肠中表达量最高，脑、脂肪中次之，骨髓、胃中表达量较低，在其它组织中几乎不表达。本研究对猪PNLIPRP2基因CDS进行了克隆，初步分析了该基因的结构与表达特征，结果提示，猪PNLIPRP2可能是与脂肪沉积和免疫调节密切相关的重要候选基因。

为阐明活性氧（ROS）对睾丸支持细胞（SC）的影响，并深入探讨精子发生调节机制，通过体外培养的仔猪睾丸支持细胞研究ROS对SC中微丝结构的影响。利用H2O2模拟细胞内的ROS环境，使用细胞松弛素B(CytB)破坏细胞中的微丝并利用维生素E（VE）抑制细胞内的ROS，通过细胞活性检测、免疫荧光、酶活检测、免疫印迹等方法检测ROS对睾丸支持细胞微丝的影响。结果表明，H2O2和细胞松弛素B均能提高SC内ROS的水平和细胞外信号调节激酶（ERK）的活性，降低抗氧化酶的活性，破坏细胞内微丝的结构和分布，二者具有协同作用，VE能降低ROS对SC的作用。上述证明， H2O2通过不依赖于微丝途径和降低细胞内抗氧化能力使细胞内ROS处于较高水平，并通过ERK级联，使细胞中微丝发生多聚化，破坏微丝的结构。

为了检测骨形态发生蛋白15(BMP15)基因在绵羊和山羊中的突变，本研究采用PCRSSCP方法在高繁殖力绵羊品种（小尾寒羊和湖羊）、山羊品种（济宁青山羊和波尔山羊）和低繁殖力绵羊品种（多赛特和特克塞尔）、山羊品种（内蒙古绒山羊和安哥拉山羊）中检测BMP15基因FecXR突变，并对小尾寒羊和济宁青山羊扩增片段进行核苷酸和氨基酸序列分析。结果表明，这8个羊品种均没有发生与Rasa Aragonesa绵羊相同的FecXR突变；小尾寒羊核苷酸序列与GenBank中绵羊BMP15序列（AF236079，NM_001114767）完全一致，济宁青山羊与小尾寒羊相比存在3处碱基不同（T529G、C530G和T576C）和2个氨基酸差异（V155G和S171P）。可见BMP15基因影响Rasa Aragonesa绵羊高繁殖力的突变FecXR对小尾寒羊、湖羊、济宁青山羊和波尔山羊的繁殖力均没有显著影响。

旨在为牛科物种进化和山羊毛色基因染色体定位研究提供更多的理论依据。利用GOATMAP DATABASE和NCBI生物学数据库查询牛、山羊和绵羊常染色体上的标记，然后用Phylogenetic Computer Tools与进化树软件Phylip进行牛、绵羊和山羊染色体同源性分析；利用比较基因组学和生物信息学方法对山羊部分皮毛颜色候选基因进行定位。结果表明，山羊、牛和绵羊染色体具有较高的同源性，相应同源染色体间相似性系数在0.000 0～1.000 0；结果，山羊皮毛颜色候选基因Myo5a，Brca1、Sox10、Zic2、kit、Snai2、Wnt3a和Tyrp1分别电子定位于山羊10、17、5、12、6、14、7和8号染色体上。

旨在研究2个品系母鸡饲喂不同蛋白水平日粮对后代肌纤维发育及肌肉生成抑制因子基因（MSTN）mRNA表达的影响。试验通过对高、低脂系肉种鸡饲喂3个蛋白水平（分别是NRC肉种鸡饲养标准蛋白水平的80%、100%、120%）的日粮，子代饲喂正常蛋白水平日粮，研究母体效应对后代肌纤维发育的影响。结果表明：①母代高蛋白日粮可显著提高子代1日龄肉仔鸡初生体质量（P<0.05），但屠宰日龄肉仔鸡体质量各组间差异不显著（P>0.05）。②随着母代日粮蛋白水平的降低，子代胸肌肌纤维直径逐渐减小，且低蛋白组显著低于正常蛋白和高蛋白组（P<0.05），2个品系间差异不显著（P>0.05）。③随着母代日粮蛋白水平的降低，胸肌肌纤维密度逐渐增加，且低蛋白组显著高于正常蛋白组和高蛋白组（P<0.05），2个品系间差异不显著（P>0.05）。④母代高蛋白日粮有降低MSTN mRNA表达量的趋势，但未达显著水平（P>0.05），低脂系肉仔鸡高蛋白组21日龄胸肌MSTN mRNA表达量显著低于正常蛋白组和低蛋白组（P<0.05）。结果表明，母代高蛋白日粮可提高后代初生体质量，且高蛋白日粮有降低胸肌中MSTN mRNA表达量的趋势；母代低蛋白日粮可显著降低后代肌纤维直径提高肌纤维密度，从而改善肌肉品质。品系对肌纤维无显著影响。

对中国11个省（市）部分猪场收集的812份病料，应用ORF2PCR进行检测，发现有235份为PCV2阳性病料。利用鉴别PCR方法从235份阳性病料中，检出10份PCV2a基因型和133份PCV2b基因型，检出率分别为4.2%、56.6%。进一步对ORF2PCR检测阳性的部分模板进行全基因组扩增，构建阳性重组质粒，对插入质粒的片段进行测序鉴定，利用DNAStar进行同源性分析，同GenBank参考毒株绘制系统发育树，从系统发育树中也可分出PCV2a、PCV2b 2种基因型。鉴别PCR和测序结果说明，我国部分地区流行的猪圆环病毒2型以PCV2b基因型为主，少数为PCV2a基因型，也有既非PCV2a又非PCV2b的基因型（PCV2c?）。

为了评估副猪嗜血杆菌（Haemophilus parasuis）对豚鼠的毒力以及在豚鼠组织器官的分布，作者采用改进的寇氏法测定了H. parasuis血清5型标准株对豚鼠的LD50，以1 LD50剂量经鼻腔、气管、肺、腹腔、肌肉和皮下接种感染豚鼠，比较不同途径感染H. parasuis对豚鼠致病性的差异；以1 LD50剂量气管接种豚鼠，接种后在不同时间取豚鼠的脑、心、肝、肺、脾和肾组织，制作石蜡切片，用免疫组化技术检测H. parasuis在豚鼠上述组织的分布。结果显示该H. parasuis血清5型标准株的LD50为1.33×109 CFU，LD50的95%可信限范围为1.35×109～1.30×109 CFU；感染试验结果显示，气管、肺和腹腔3个接种途径试验组豚鼠出现了4/8、2/8和5/8的死亡；在气管感染豚鼠6 h后，首先在肺脏组织呈现阳性结果，在感染8 h后，上述组织中都出现了阳性结果。结果表明气管、肺、腹腔和肌肉4个途径都可以使H. parasuis对豚鼠致病，免疫组化检测并结合细菌分离结果表明H. parasuis感染后能侵染肺、心、肝、脾和肾组织，并能突破血脑屏障而侵染脑组织。

为研究日粮氟添加水平对雏鸡肝脏抗氧化功能及超微结构的影响，作者选用1日龄Avian肉鸡健雏300只，随机分为4组，分别饲以对照日粮(F 23 mg·kg1)和高氟日粮(F 400 mg·kg1，Ⅰ组；F 800 mg·kg1，Ⅱ组；F 1 200 mg·kg1，Ⅲ组)42 d。结果表明：与对照组比较，高氟Ⅱ组、Ⅲ组雏鸡肝脏SOD、GSHPx活性显著下降（P<0.01或P<0.05），MDA、NEFA含量显著升高（P<0.01或P<0.05）。同时，高氟Ⅱ组、Ⅲ组雏鸡血清SOD、GSHPx活性显著下降（P<0.01或P<0.05），MDA、NEFA含量显著升高（P<0.01或P<0.05）。透射电镜下高氟Ⅱ组、Ⅲ组肝细胞线粒体肿胀，嵴断裂、消失，内质网扩张，胞质内糖原颗粒减少。日粮氟含量800~1 200 mg·kg1时可引起雏鸡肝脏抗氧化功能降低，损伤细胞膜性结构，导致肝脏功能受损。

为了探讨水牛卵母细胞体外发育潜能与卵丘颗粒细胞凋亡之间的关系，本研究将水牛卵母细胞体外培养22～24 h后，取其卵丘颗粒细胞，采用Annexin VFITC法进行颗粒细胞凋亡染色，进行凋亡率的分析，并与卵母细胞的成熟情况和卵母细胞的评分及形成卵裂、囊胚的结果进行对照。结果发现，随着卵母细胞成熟时间的增加，卵丘颗粒细胞凋亡率升高；随着卵母细胞评分和发育潜能的降低，卵丘颗粒细胞凋亡率逐渐升高。由此表明，卵母细胞发育潜能与卵丘颗粒细胞凋亡密切相关，通过测定卵丘颗粒细胞的凋亡率可预测未成熟卵母细胞的发育潜能。

为了研究填饲对LXRα mRNA表达水平的影响，本试验以四川白鹅和朗德鹅为试验对象，通过RTPCR方法克隆了鹅肝脏X受体α（LXRα）基因部分序列，并采用SYBRGreen法研究了填饲对LXRα基因在肝脏和脂肪组织中转录水平的影响。结果获得了1 005 bp的鹅LXRα部分序列,且与其它物种有较高的相似性，但存在8个氨基酸变异位点。LXRα基因在肝脏、腹脂和皮脂中都有表达，但在肝脏中的表达量最高。填饲引起鹅皮脂、腹脂和肝脏的LXRα mRNA表达丰度的显著增加。对照组中，LXRα在朗德鹅肝中的表达量高于四川白鹅（P<0.05）, 而在皮脂、腹脂中朗德鹅的表达量低于四川白鹅（P<0.05）。填饲组，在肝和腹脂中LXRα的表达量四川白鹅显著高于朗德鹅（P<0.05），皮脂中表达量品种间差异不显著。填饲后LXRα mRNA表达丰度与皮脂、腹脂和肝脏的相对质量呈显著正相关，并且朗德鹅的相关性要强于四川白鹅。结论：填饲引起鹅肝脏和脂肪组织的LXRα mRNA表达丰度的显著增加，填饲对LXRα mRNA表达的影响存在显著的品种差异。

MicroRNA（miRNA）是一类长19~26个核苷酸的内源性非编码单链小分子RNA，其异常表达将会导致生理的异常和疾病的产生。为了研究miRNAs在牛肺泡巨噬细胞抗菌机制中的作用，构建了牛肺泡巨噬细胞miRNA cDNA文库，从438个克隆中筛选出22个miRNAs，其中有19 个miRNAs在牛的miRBase数据库中没有发现，但是有8个miRNAs与人和（或）鼠中的序列完全同源，因此，将它们命名为BtamiR141、BtamiR187、BtamiR191、BtamiR448、BtamiR589、BtamiR873、BtamiR463 和BtamiR562；另外有11个miRNAs在所有miRBase数据库中都没有发现，有待进一步研究。这些数据为研究miRNAs调控牛肺泡巨噬细胞抗菌机制奠定了基础。

从黑龙江省某牛场患有呼吸道疾病的病牛鼻汁中分离到1株病毒，并对其进行了系统鉴定。结果该病毒株能在Vero细胞上增殖并产生特征性的合胞体形态的细胞病变；病毒对5碘脱氧尿核苷不敏感，对酸、氯仿、乙醚均敏感，不耐热，56 ℃加热30 min可被灭活，且无血凝性和血吸附特性；该病毒能被牛呼吸道合胞体病毒（BRSV）标准阳性血清中和；应用特异性引物，通过反转录聚合酶链式反应可从病毒细胞培养物中扩增出BRSV N基因中596 bp的特异性片段，并且分离株与GenBank中BRSV毒株N基因相应片段的核苷酸序列同源性为97.8％～99.3％。以上结果表明所分离到的病毒为牛呼吸道合胞体病毒，命名为BRSV HJ株。

采用高保真DNA聚合酶，分7个片段扩增猪瘟病毒（CSFV）Thiverval株全基因组序列，克隆至pMD18T载体并测序。经适当的连接策略将各片段连接克隆至低拷贝载体质粒pAC/F101，同时对病毒基因组5′和3′末端进行修饰，构建出含有T7启动子、榔头状（HH）核酶基因、CSFV Thiverval全基因组、丁型肝炎病毒（HDV）核酶基因和T7终止子的重组质粒pAC/F101/T17。利用T7 RNA聚合酶将线性化重组质粒pAC/F101/T17体外转录成基因组RNA，再使用脂质体转染将体外转录RNA转染PK15细胞。通过传代、RTPCR、免疫过氧化物酶细胞单层试验鉴定，表明成功的从感染性克隆拯救出活病毒粒子。猪瘟病毒低温诱变疫苗“Thiverval”株感染性克隆的构建及病毒的成功拯救，为进一步研究CSFV疫苗株的致弱机制提供了重要工具。