山羊Lcn 5的表达特点及其在繁殖器官中定位

doi:10.11843/j.issn.0366-6964.2015.05.005

畜牧兽医学报 ›› 2015, Vol. 46 ›› Issue (5): 711-718.doi: 10.11843/j.issn.0366-6964.2015.05.005

山羊Lcn 5的表达特点及其在繁殖器官中定位

任有蛇^#，郭丽娜^#，张春香^*，张国林，夏龙钢，乔利英，靳黎，刘文忠

（山西农业大学动物科技学院，太谷 030801）

收稿日期:2014-11-17 出版日期:2015-05-23 发布日期:2015-05-23
通讯作者: 张春香，副教授，E-mail：zhchx66@126.com
作者简介:任有蛇（1970-），男，山西岢岚人，副教授，博士，主要从事动物繁殖调控研究，E-mail：rys925@126.com；郭丽娜（1987-），女，河南安阳人，硕士生，主要从事动物繁殖调控研究，E-mail：guolina5188@163.com。任有蛇和郭丽娜为共同第一作者
基金资助:
山西省科技攻关计划项目（20110311029；20130311025-2）

Expression Characteristics of Lcn 5 and Its Localization in Reproduction Organ of Bucks

REN You-she^#，GUO Li-na^#，ZHANG Chun-xiang^*，ZHANG Guo-lin，XIA Long-gang，QIAO Li-ying，JIN Li，LIU Wen-zhong

（College of Animal Science and Veterinary Medicine，Shanxi Agricultural University，Taigu 030801，China）

Received:2014-11-17 Online:2015-05-23 Published:2015-05-23

摘要/Abstract

摘要：

为探明附睾视黄酸结合蛋白5（Lcn 5）mRNA在公山羊体组织及不同月龄附睾中的表达特性，及其在睾丸、附睾和精子中的定位。采用实时荧光定量PCR方法检测18种组织和不同月龄附睾Lcn 5 mRNA表达规律；利用蛋白印迹技术对成年公羊睾丸和附睾Lcn 5蛋白表达进行定量分析；利用免疫组化技术对5月龄公羊睾丸和附睾Lcn 5进行定位，利用免疫荧光技术对精子Lcn 5进行定位。Lcn 5 mRNA在不同组织中均有表达，其中在性腺中的表达量最高，附睾头＞附睾尾＞附睾体＞睾丸；在5月龄前附睾的Lcn 5 mRNA表达量随月龄逐渐升高，5月龄时达到最高，随后又逐渐降低。Western blotting 结果显示，Lcn 5蛋白表达量：附睾头＞附睾尾＞附睾体＞睾丸，支持了Lcn 5 mRNA定量的结果。免疫组化结果显示，5月龄山羊在附睾管壁的柱状细胞、纤毛细胞检测到较强Lcn 5蛋白表达的阳性信号，附睾尾管腔检测到较强的阳性信号。在睾丸各级生精细胞中也检测到了微弱阳性信号。Lcn 5蛋白包裹在精子头部顶体帽上。Lcn 5在山羊附睾中高度表达，其表达具有时空特异性，推测其在精子成熟和维持正常生理功能方面发挥重要作用，其生物学功能需要进一步深入研究。

Abstract:

This study was conducted to investigate the expression characteristics of Lcn 5 mRNA and its protein localization in testes，epididymis in 5-month-old bucks and spermatozoa in adult bucks.Relative expressions of Lcn 5 mRNA were detected by real-time fluorescent quantitative PCR in 18 different tissues and epididymis at different ages.The expression of Lcn 5 protein was detected by Western blotting.The localization of Lcn 5 protein in testis and epididymidis were examined by immunohistochemistry，and in spermatozoa by immunofluorescence assay.The results of qRT-PCR showed that Lcn 5 mRNA was expressed in all tissues detected，which had higher levels in reproductive tissues than in other tissues.The order of expression levels in reproductive tissues：caput>cauda>corpus>testis.The expression of Lcn 5 mRNA in epididymis was increased with the increase of age before 5 months old，which was the highest at age of 5 months and was decreased subsequently.The results of Western blotting analysis showed order of the protein of Lcn 5 caput >cauda>corpus> testis，which verified the results of qRT-PCR.Immunohistochemistry results showed that there were strong positive signal in columnar epithelium of epididymis，and weak positive signal in testis.Lcn 5 protein was located on the sperm acrosome surface.Lcn 5 mRNA was highly expressed in epididymis，while was time-special and region-special expression.Lcn 5 was coated on sperm acrosome surface，which maybe play an important role in sperm maturation and capacitation process.Therefore，the functions need further research.

中图分类号:

S827.2

任有蛇，郭丽娜，张春香，张国林，夏龙钢，乔利英，靳黎，刘文忠. 山羊Lcn 5的表达特点及其在繁殖器官中定位[J]. 畜牧兽医学报, 2015, 46(5): 711-718.

REN You-she，GUO Li-na，ZHANG Chun-xiang，ZHANG Guo-lin，XIA Long-gang，QIAO Li-ying，JIN Li，LIU Wen-zhong. Expression Characteristics of Lcn 5 and Its Localization in Reproduction Organ of Bucks[J]. ACTA VETERINARIA ET ZOOTECHNICA SINICA, 2015, 46(5): 711-718.

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