畜牧兽医学报 ›› 2011, Vol. 42 ›› Issue (6): 765-771.doi:

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FSH对体外培养仔猪睾丸支持细胞skp2表达的影响

甘瑞,左敬,张国升,朱峰伟,孙燕,王鲜忠*,张家骅   

  1. 西南大学动物科技学院 重庆市牧草与草食家畜重点实验室,重庆 400716
  • 收稿日期:1900-01-01 修回日期:1900-01-01 出版日期:2011-06-25 发布日期:2011-06-25
  • 通讯作者: 王鲜忠

  • Received:1900-01-01 Revised:1900-01-01 Online:2011-06-25 Published:2011-06-25

摘要: 本研究旨在确定促卵泡素是否可通过cAMP、Ca2+内流和细胞外调节的蛋白激酶 (ERK1/2)调节培养条件下未成熟仔猪睾丸支持细胞中S期激酶相关蛋白2(skp2)的表达。以培养的仔猪睾丸支持细胞为实验材料,通过添加各种信号通路的抑制剂,运用Western blot检测skp2、p27kip1蛋白的表达,运用实时荧光定量PCR检测skp2 mRNA的表达。结果发现,促卵泡素(50 ng·mL-1)以时间依赖的方式促进了skp2 蛋白和mRNA的表达(P<0.05),这一作用在30 min时达到高峰。FSH(50 ng·mL-1) 和Forskolin(10 μmol·L-1)均促进了skp2 蛋白和mRNA的表达(P<0.05),但降低了p27kip1蛋白的水平,而RpcAMP、Verapamil和U0126都抑制了FSH的作用,使skp2 蛋白和mRNA的表达有所下降,但提高了p27kip1蛋白的表达,但3种抑制剂单独作用时对skp2 蛋白、mRNA以及p27kip1蛋白的表达没有显著影响(P>0.05)。这表明FSH可能主要通过影响cAMP的产生和Ca2+内流,并激活ERK1/2通路调节skp2 蛋白的表达,而skp2 蛋白的水平与p27kip1蛋白成负相关。