畜牧兽医学报 ›› 2008, Vol. 39 ›› Issue (2): 212-217.doi:
骆学农;郑亚东;胡志敏;丁军涛;张少华;侯俊玲;窦永喜;郭爱疆;景志忠;才学鹏
LUO Xue-nong;ZHENG Ya-dong;HU Zhi-min;DING Jun-tao;ZHANG Shao-hua;HOU Jun-ling;DOU Yong-xi;GUO Ai-jiang;JING Zhi-zhong; CAI Xue-peng
摘要: RT-PCR扩增45W-4B和TSOL18基因,PCR截去45W-4B基因的N端信号肽和C端疏水氨基酸序列形成45W-4BX。将45W-4BX和TSOL18 PCR产物分别亚克隆入pGEX-4T-1,用IPTG诱导表达,取产物进行SDS-PAGE和Western blot分析。纯化表达产物制成油佐剂疫苗分别免疫家猪,用25 000枚猪带绦虫成熟虫卵进行攻击感染,ELISA检测各组的抗体水平,90 d后剖检计算各组的减虫率。结果表明,45W-4BX和TSOL18基因在大肠杆菌中分别以可溶性和包涵体形式获得高效表达,并能被囊虫病人血清所识别。重组蛋白免疫猪15 d血清抗体即为阳性,30 d左右达到峰值。2种重组抗原的减虫率均在88%以上,与囊虫粗抗原免疫效果相当。这为进一步研制基于45W-4BX和TSOL18的猪囊虫重组基因工程疫苗奠定了基础。