畜牧兽医学报

野猪和16个国内外猪种Mx1基因第14外显子多态性分析

吴圣龙;包文斌;鞠慧萍;丁浩;李碧春;朱国强;陈国宏

畜牧兽医学报, 2008, 39(3): 257-261. doi:

摘要 ( 1307 )

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采用PCR-RFLP方法对野猪和国内外16个猪种Mx1基因第14外显子的多态性进行分析，共检测到3个等位基因，6种基因型。其中外来猪种和松辽黑猪中出现AA、CC和AC 3种基因型；野猪和中国地方猪种中出现AA、BB和AB 3种基因型；培育猪种中苏太猪中存在全部基因型。B等位基因仅在野猪和中国地方猪种中出现，而C等位基因仅在外来猪种和具有外来猪种血统的培育猪种中出现。根据Mx1基因第14外显子多态位点的基因频率构建的系统发生树也显示，中国地方猪种和外来猪种间的基因型分布存在明显差异，外来猪种和具有外来猪种血统的两个培育猪种聚在一起，野猪和中国地方猪种聚于另一类群，其中枫泾猪、二花脸和梅山猪首先聚在一起，且与野猪的遗传距离最近。野猪和藏猪中AB基因型的频率较高，分别为0.515和0.302，枫泾猪、二花脸和梅山猪中AB基因型频率为0.348～0.591。推测AB基因型可能具有较高的抗病毒能力，而且太湖猪（枫泾猪、二花脸和梅山猪）可能是进行猪流感病毒抗病育种的较好素材。

野猪群体结构基因遗传共适应特性的研究

李晓林;潘庆杰;闵令江;沈伟;刘娣

畜牧兽医学报, 2008, 39(3): 262-267. doi:

摘要 ( 1499 )

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本研究对吉林、黑龙江、辽宁3省的东北野猪群体随机采样42个，利用PCRSSCP和PCRRFLP技术检测到Nanog、瘦蛋白、胰岛素样生长因子蛋白3、JAK2、肠毒素大肠杆菌受体、心脏脂肪酸结合蛋白、钙蛋白酶抑制蛋白7个具有多态性的基因位点，并进行了群体遗传共适应性分析，结果表明：①7个多态性基因位点中有5个处于遗传不平衡状态，占所检测多态性基因位点的71.43%；②位于不同染色体上的基因位点之间的18个组合中有6个处于遗传不平衡状态，其主要原因可能是遗传共适应差异造成；③位于同一条染色体上的3个基因位点之间的3个组合都处于遗传平衡状态，但是Leptin-ECF18R组合处于连锁不平衡状态，这可能是因为遗传共适应和基因间的连锁作用的方向是相反的，两者共同作用使得两位点处于遗传平衡状态。

AQP7基因第4内含子多态性与猪脂肪沉积性状相关性研究

王丽霞;熊远著;左波

畜牧兽医学报, 2008, 39(3): 268-272. doi:

摘要 ( 926 )

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水通道蛋白7（Aquaporin 7, AQP7）是新发现的甘油水孔蛋白,其主要功能是运转甘油。本研究首次获得了大白、长白和梅山猪AQP7基因第4内含子序列，序列比对发现该序列存在G/A突变。采用PCR-PstI-RFLP方法在3个不同猪种之间进行了遗传变异分析，结果表明：大白和长白猪种以G等位基因为主，而梅山猪群以A等位基因为主，对234头大白×梅山F2代资源家系进行性状关联分析，结果表明该位点与猪板油重、内脂率、背膘厚、肥肉率和瘦肥比率等脂肪沉积性状显著相关（P<0.05），且GG基因型个体脂肪沉积性状值显著低于AA基因型个体,提高G等位基因频率可显著减少脂肪沉积。

PPAR-γ在八眉猪不同组织中的表达差异

王博;吴江维;杨公社

畜牧兽医学报, 2008, 39(3): 273-277. doi:

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以八眉猪为试验材料，提取其内脏脂肪、皮下脂肪、肌肉、肾脏、肝脏、心脏、肺脏和脾脏总RNA和总蛋白质，设计合成PPAR-γ1和PPAR-γ2基因的引物，以猪β-actin 基因为内参，用半定量(Semi-Quantitative ,SQ) RT-PCR检测PPAR-γ1和PPAR-γ2 mRNA在以上各组织中的表达；用免疫印迹技术（Western Blot）检测以上各组织中PPAR-γ1和PPAR-γ2蛋白的表达。结果显示，PPAR-γ1 mRNA及蛋白在以上各组织均表达，在内脏脂肪和皮下脂肪组织中表达水平显著高于其他组织，在肺脏中表达水平最低；PPAR-γ2 mRNA和蛋白质高表达于内脏脂肪、皮下脂肪、脾脏和心脏，而在肺脏、肾脏、肝脏、肌肉中表达水平很低。结果提示，PPAR-γ在不同组织的表达差异，可能与其在不同组织中的功能有关。

鸡SCD和Sirt1基因的SNP搜寻及其遗传多样性分析

刘三凤;任军;郭源梅;杨艳;张志燕;黄路生

畜牧兽医学报, 2008, 39(3): 278-285. doi:

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硬脂酰辅酶A去饱和酶(Stearoyl-CoA desaturase, SCD)和Sirt1基因是位于鸡6号染色体的两个与脂肪代谢相关的功能基因。本研究以泰和丝毛乌骨鸡、杏花鸡、隐性白洛克鸡为研究材料，利用DNA池比较测序技术对鸡SCD和Sirt1基因的整个编码区进行SNPs搜寻，共检测出鸡SCD基因SNPs 13个，其中5个编码区SNPs（cSNPs），2个为错义突变，10个为新发现的SNPs；检测出鸡Sirt1基因SNPs 35个，其中10个cSNPs，2个为错义突变，18个为新发现的SNPs，另外有3处插入/缺失多态。对SCD c.492G>A和Sirt1 c.1753G>A位点在隐性白洛克鸡、杏花鸡、泰和丝毛乌骨鸡、白耳黄鸡、康乐鸡、南城黑鸡等271 个个体中进行了PCR-SSCP检测，发现它们具有丰富的多态性，为这个染色体区域进一步的关联性分析提供了新的标记。

中国华东区地方鹅种群体遗传多样性及遗传分化研究

陈宽维;宋卫涛;徐文娟;李慧芳;汤青萍

畜牧兽医学报, 2008, 39(3): 286-290. doi:

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利用25对微卫星引物对我国华东14个地方鹅种进行群体遗传多样性及遗传分化分析。通过计算多态信息含量、平均杂合度、有效等位基因数、遗传距离、基因流和F统计量等参数，评估各品种遗传多样性和品种间遗传分化。结果表明：各座位的等位基因数为4～16。所有群体均显示较高水平的杂合度，其中，雁鹅最低，为0.566 2，百子鹅最高，为0.774 8。鹅品种间存在较大的遗传分化，27.5％的遗传变异来自于品种间的差异。基于DA遗传距离的NJ聚类法将14个群体划分为4类。分析遗传分化与地理距离的相关关系发现，华东地方鹅种的遗传分化与地理距离不存在显著相关。

华中地区家鸭种质资源的遗传结构研究

李慧芳;李碧春;杨宁;陈宽维;汤青萍;宋卫涛

畜牧兽医学报, 2008, 39(3): 291-295. doi:

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利用28个微卫星标记对华中地区6个家鸭资源（淮南麻鸭、攸县麻鸭、临武鸭、荆江麻鸭、沔阳麻鸭和恩施麻鸭）的遗传结构进行了评估。结果表明：6个群体的平均杂合度都较高，最低的为攸县麻鸭（0.551 2），最高的为荆江麻鸭（0.603 5），群体平均杂合度为0.580 1，反映了各鸭种的杂合度都较高，遗传多样性丰富；华中地区各鸭种间存在较大的遗传分化，22.5%的遗传变异来源于群体间的差异，进一步反映了各品种具有本品种特性的多样性；通过计算DA遗传距离发现各品种间的遗传距离较远，分化时间较长；NJ聚类结果将华中地区家鸭资源聚为3类，湖北省的荆江麻鸭、沔阳麻鸭和恩施麻鸭聚为一类；湖南省的攸县麻鸭和临武鸭聚为一类；河南省的淮南麻鸭独聚为一类。本研究结果为华中地区家鸭品种种质特性研究提供了基础，也为中国家鸭资源的合理保护和开发利用提供了科学依据。

Bcl-2基因RNA干扰对体外培养的鹅卵泡颗粒细胞凋亡、增殖和孕激素分泌的影响

陈秀萍;陈锋剑;姜勋平;李兆国;丁家桐

畜牧兽医学报, 2008, 39(3): 296-301. doi:

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根据已发表的Bcl-2基因序列设计3对siRNA（Small interference RNA）序列，构建干扰表达载体，转染体外培养的鹅卵泡颗粒细胞，48 h后利用流式细胞术（Flow cytometry，FCM）检测颗粒细胞Bcl-2蛋白表达量、凋亡和增殖情况，收集细胞培养液用放射免疫分析法检测孕激素（P）的分泌水平；此外，还检测了F1~F4卵泡、最小的排卵前卵泡（The smallest preovulatory follicle, SPF）、小黄卵泡（Small yellow follicle, SYF）和闭锁卵泡（Atresic follicle）颗粒细胞Bcl-2蛋白表达和凋亡情况。结果表明：（1）各级卵泡颗粒细胞Bcl-2蛋白的表达存在着差异，正常卵泡颗粒细胞Bcl-2蛋白表达量显著高于闭锁卵泡（P < 0.05），SPF颗粒细胞Bcl-2蛋白表达水平显著高于SYF（P < 0.05）；（2）干扰组Bcl-2蛋白表达水平显著低于所有对照组（P < 0.05），而细胞凋亡指数（Apoptosis index, AI）、增殖指数（Proliferation index, PI）和P分泌水平均高于对照组。

不同繁殖节律母牦牛冷暖季血浆褪黑激素RP-HPLC测定

文勇立;王永;齐莎日娜;王艳红;马力

畜牧兽医学报, 2008, 39(3): 302-308. doi:

摘要 ( 1526 )

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为研究不同季节、不同繁殖节律和繁殖活动期与静止期成年母牦牛血浆MLT分泌水平的差异，应用反相高效液相色谱法(RP- HPLC)检测成年母牦牛血浆MLT浓度。供试母牦牛63头，分为A、B、C 3组，每组21头。A组：1年1胎，繁殖活动期；B组：2年1胎，全奶，繁殖静止期；C组：2年1胎，半奶，繁殖活动期。在暖季的7月21-23日和冷季的11月21-23日，自然光制：12.00L∶12.00D和14.65L∶9.35D，日落前2 h开始采血，持续50 min，颈静脉采血每头20 mL，肝素抗凝，离心取血浆。1年1胎母牦牛血浆MLT浓度(（68.90±5.82） pg/mL)高于2年1胎全奶个体(（44.38±2.61） pg/mL) (P< 0.01)和2年1胎半奶个体(（57.51±3.82） pg/mL) (P<0.05)；母牦牛血浆MLT浓度暖季高于冷季(P<0.05)，表明其具有季节波动，并提示除光照外牦牛MLT分泌还与气温等环境因子有关；母牦牛血浆MLT浓度繁殖活动期高于繁殖静止期(P<0.05)。母牦牛MLT分泌存在季节波动，母牦牛季节性繁殖和繁殖节律受到MLT水平的影响。

RecA蛋白介导的转基因小鼠制备

赵永贞;肖邦;张兴举;唐中林;崔文涛;杨述林;李奎

畜牧兽医学报, 2008, 39(3): 309-313. doi:

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受精卵原核内核酸酶对外源基因的降解是导致显微注射法制备转基因动物效率低的重要原因之一，RecA蛋白可与单链DNA结合而阻止细胞核内核酸酶对单链DNA的降解。本试验建立了显微注射和RecA蛋白结合制备转基因动物的技术模型，并初步探讨了RecA蛋白对显微注射法制备转基因动物效率的影响。以单链DNA、RecA蛋白与单链DNA的复合体以及双链DNA为外源基因进行受精卵原核显微注射转基因试验，分别获得F0代小鼠28、41和32只，并通过PCR和Southern blot进行了转基因鉴定。结果显示，在小鼠受精卵原核显微注射RecA+ssDNA复合体获得的F0代中14.6%（6/41）为转基因个体，显微注射dsDNA获得的F0代中转基因个体占6.2%（2/32），而显微注射ssDNA获得的F0代中无一为转基因个体。

木聚糖酶对肉鸡肠道碱性氨基酸转运载体mRNA表达的影响

冯定远;谭会泽;王修启;邹仕庚;左建军;黄燕华;董泽敏;张常明;叶慧

畜牧兽医学报, 2008, 39(3): 314-319. doi:

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480只健康的1日龄父母代黄羽肉鸡随机分为A、B 2组，每组6个重复，每个重复40只鸡。A组饲喂小麦基础日粮，B组饲喂小麦基础日粮添加木聚糖酶（木聚糖酶在日粮中的含量为1.2×10⁴ U/kg）。16日龄时，各组每个重复选取2只接近平均体重的试验鸡，采集十二指肠和空肠黏膜样品，用RTPCR的方法研究添加木聚糖酶对碱性氨基酸转运载体mRNA表达丰度的影响。结果表明，小麦基础日粮添加木聚糖酶显著增加了肉鸡空肠rBAT 和CAT4 mRNA 的表达丰度 (P<0.05)，空肠y+LAT2 和CAT1 mRNA的表达丰度也有增加的趋势(P>0.05)；而对回肠rBAT mRNA的表达丰度没有显著影响，回肠y+LAT2、CAT1和CAT4 mRNA的表达丰度也有增加的趋势 (P>0.05)。

奶牛胎次对乳中CLA含量和△⁹-去饱和酶指数的影响

侯俊财;刘艳平;霍贵成;任达喜;提伟刚

畜牧兽医学报, 2008, 39(3): 320-326. doi:

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选择235头健康的中国北方荷斯坦奶牛为研究对象，为避免日粮和季节的影响，奶牛饲喂同种日粮，采集同一天的乳样，测定奶牛泌乳性能和乳脂肪酸组成，研究胎次对乳中CLA含量和△9去饱和酶指数的影响。研究结果表明：乳中c9,t11 CLA含量平均为5.14 mg/g脂肪酸，变化范围1.5~10.5 mg/g脂肪酸。初产奶牛的c9,t11 CLA平均含量为5.19 mg/g脂肪酸，而经产奶牛的c9,t11 CLA平均含量为5.11 mg/g脂肪酸，但二者间差异不显著（P>0.05），初产与经产奶牛之间的c9 C14∶1去饱和酶指数和c9 C16∶1去饱和酶指数差异显著（P<0.05）。初产奶牛的c9 C18∶1去饱和酶指数和c9,t11 CLA去饱和酶指数与经产奶牛的差异不显著（P>0.05）。

两株表达H9亚型禽流感病毒HA基因的重组鸡痘病毒的构建及其免疫效力

刘武杰;孙蕾;陈素娟;徐忠林;刘金彪;刘秀梵

畜牧兽医学报, 2008, 39(3): 327-332. doi:

摘要 ( 1502 )

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将H9亚型禽流感病毒（AIV）HA基因插入到具有新复制非必需区的通用型质粒载体pP12LS中构建转移载体pP12LSH9A，再分别转染预先感染不同毒力的2种鸡痘病毒（FPV）282E4株和LP株的鸡胚成纤维细胞，经系列蓝斑筛选纯化，获得了2种重组鸡痘病毒(rFPV)，分别命名为rFPV₂₈₂-12LSH9A和rFPV_LP-12LSH9A。将这2株rFPV在SPF鸡和带有高水平抗H9亚型AIV母源抗体的商品鸡上分别进行免疫效力试验。结果：rFPV28212LSH9A和rFPVLP12LSH9A在SPF鸡上的排毒保护率均为100%（10/10），在商品鸡上的排毒保护率分别为88%（23/26）和92%（24/26）。结果表明获得了2株在带有抗H9亚型AIV高水平母源抗体的商品鸡上免疫效力较好的rFPV。

O型口蹄疫病毒O/LZ株拯救

马鸣潇;金宁一;沈国顺;刘慧娟;霍晓伟;金明兰;郑敏;鲁会军;金扩世

畜牧兽医学报, 2008, 39(3): 333-336. doi:

摘要 ( 1517 )

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以构建的口蹄疫病毒O/LZ 株全长cDNA为模板，使用T7RNA 聚合酶系统在体外进行转录，得到病毒RNA。用脂质体转染法将转录物RNA导入BHK细胞，可观察到典型的口蹄疫病毒致细胞病变效应。对收获的病毒分别用RT-PCR、免疫荧光以及免疫电子显微镜观察等方法进行鉴定，结果表明拯救到特定的口蹄疫病毒。同时用空斑试验法观察了拯救病毒及其母本毒株的生长特性，结果表明二者没有明显差异，这将为进一步探索猪口蹄疫病毒致病的分子机制及研制新型口蹄疫疫苗奠定良好的基础。

RNAi抑制PrP表达载体的构建及其在PrP功能研究中的初步应用

李玉荣;周向梅;尹晓敏;杨建民;乔俊文;赵德明

畜牧兽医学报, 2008, 39(3): 337-342. doi:

摘要 ( 1287 )

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本文旨在构建有效抑制朊蛋白（Prion protein，PrP）表达的重组质粒，并以此为工具控制PrP表达，从而探讨PrP对细胞SOD活性的影响。设计并化学合成1对含有发夹结构的寡核苷酸片段（shPrP），退火后与表达载体pG-super（Hairpin siRNA expressing vector）定向连接，构建重组质粒pG-super-shPrP。对重组子进行PCR鉴定，测序正确后，脂质体法转染C6细胞，采用实时荧光定量RT-PCR检测PrP mRNA的表达水平，以验证pG-super-shPrP的抑制效率；结果表明：重组质粒pG-super-shPrP构建成功，且显著降低C6细胞PrP mRNA表达（P<0.05），抑制效率为34.2%。利用pG-super、pG-super-shPrP分别转染C6细胞，并检测细胞SOD总活性及SOD表达水平，探讨PrP对细胞SOD活性的影响及其作用机制，结果表明PrP促进细胞SOD的活性（P<0.01），但对细胞SOD的表达量无影响，即PrP对SOD活性的促进作用与SOD1的表达量无关。本研究在成功构建了PrP的RNA干扰表达质粒的基础上，利用此质粒，在细胞水平上揭示了PrP对细胞SOD活性的促进作用。

免疫磁珠技术分离猪胸膜肺炎放线杆菌

张蓉蓉;梁望旺;方兵兵;邵华斌;徐涤平;何启盖

畜牧兽医学报, 2008, 39(3): 343-348. doi:

摘要 ( 854 )

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利用表达并纯化的胸膜肺炎放线杆菌保守外膜蛋白作为抗原，免疫家兔制备抗血清，并利用纯化后的IgG包被免疫微球，确定了包被磁珠所需的IgG浓度及包被时间，建立了利用免疫磁珠技术检测胸膜肺炎放线杆菌的操作流程。该方法能检测本室保存的胸膜肺炎放线杆菌的14个标准血清型，敏感性高于直接涂布平皿法，用此方法分离送检的20个疑似菌株，分离出10个菌株，与apxⅣ-PCR检测结果相比，符合率为100%。该方法也能从人工感染猪的肺和扁桃体回收到病原。用建立的免疫磁珠技术检测了从河南、湖南和湖北等地送检的病料，成功分离了5株可疑胸膜肺炎放线杆菌，经apxⅣ-PCR鉴定为胸膜肺炎放线杆菌。上述结果表明，建立的免疫磁珠技术可用于胸膜肺炎放线杆菌的分离。

Orexin B在猪中枢神经系统的分布定位

苏娟;雷治海;宁红梅;宋捷;贾翠平

畜牧兽医学报, 2008, 39(3): 349-354. doi:

摘要 ( 849 )

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本试验采用免疫组织化学方法对10头苏钟猪中枢神经系统Orexin B的分布定位进行了研究。结果表明，Orexin B免疫阳性神经元和纤维在猪下丘脑、脑干和脊髓均有分布。在下丘脑，阳性神经元和纤维分布于视前区、视交叉上核、室旁核、室周核、背内侧核、穹隆周核、乳头体核、外侧区和后区，其中以穹隆周区、背内侧核、未定带和下丘脑后区分布较密集，以视前区、视交叉上核、下丘脑外侧区和乳头体核分布较稀少。在脑干，阳性神经元分布于蓝斑、前庭神经核、下橄榄核、孤束核和疑核。在脊髓，阳性神经元较少，主要分布于颈部脊髓背角第Ⅳ层。此外，在斜角带、隔区、终纹床核等部位观察到密集的阳性纤维分布。本试验为进一步研究Orexin B的生理功能奠定了基础。

1日龄牦牛肺泡毛细血管的扫描电镜观察

杜晓霞;俞红贤;刘英;杜晓华;郭建强;赵建红;王宇;柳东阳;李仁阁;赵海涛;刘斌

畜牧兽医学报, 2008, 39(3): 355-359. doi:

摘要 ( 942 )

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本文运用血管铸型和扫描电镜技术对1日龄牦牛肺实质内微血管的铸型进行研究，旨在发现新生牦牛肺微血管的分布特征，为探讨牦牛肺微血管在出生后的发生与生长规律奠定基础。结果显示：低倍镜下肺泡微血管网呈现不规则的、类似于蜂窝样的肺泡群结构，局部区域的肺泡血管网伸展不完全，血管网形成肺泡腔的形态和大小差异很大，可以看到完全开张的肺泡、半开张的肺泡、轻微开张的肺泡以及未开张的肺泡。根据血管管径的粗细、血管网孔的大小、血管分布的疏密以及局部区域血管分布的形态差异可以将局部区域肺泡壁的毛细血管网分为3种形式：即板块状血管网、筛孔状血管网以及网络状血管网。肺泡隔内微血管网的存在形式和毗邻关系不尽相同，可以分为单层型血管网、双层型血管网以及毗邻型血管网。肺泡毛细血管的铸型表面还可见到内皮细胞核的压迹。

中药有效部位组方对高温刺激小鼠肠道淋巴细胞体外增殖的影响

王自力;董虹;刘凤华;毛帅;刘仁志;许剑琴

畜牧兽医学报, 2008, 39(3): 360-364. doi:

摘要 ( 1438 )

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根据中兽医“君、臣、佐、使”的组方原则和正交试验设计法将藿香、苍术、黄柏和石膏4味中药的有效部位按照不同剂量组合成8个不同中药有效部位复方，利用MTT法检测高温刺激小鼠肠道淋巴细胞增殖情况，探讨各个复方对高温刺激小鼠肠道淋巴细胞体外增殖的影响及其组方机制。结果表明：以中药有效部位复方A1B1C1D1（黄柏生物碱、藿香挥发油、苍术挥发油各200 μg/mL，石膏水提物100 μg/mL）对高温刺激小鼠肠道淋巴细胞体外增殖效果最优，复方中以藿香挥发油和黄柏生物碱为主药，苍术挥发油和石膏水提物为臣、佐药，以藿香挥发油和苍术挥发油交互作用较好。

小尾寒羊YB-1基因全长cDNA克隆与原核表达

宋雪梅;李宏滨;杜立新

畜牧兽医学报, 2008, 39(3): 365-367. doi:

摘要 ( 733 )

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采用RT-PCR技术从小尾寒羊睾丸组织获得YB-1基因全长cDNA，并将其编码区重组于融合表达质粒pET32a中，经酶切和序列鉴定分析后，重组质粒在大肠杆菌BL21 plys(E)中经不同浓度IPTG诱导后获得表达，但表达量较低，且IPTG的浓度变化不影响目的蛋白的表达量。通过改变筛选抗生素，最终获得了目的融合蛋白的高效表达，为深入开展YB-1蛋白功能研究打下了良好的基础。

不同光照周期对蛋鸡高峰期血液激素水平的影响

黄仁录;陈辉;邸科前;张竞乾;李军乔;张振红;潘栋

畜牧兽医学报, 2008, 39(3): 368-371. doi:

摘要 ( 842 )

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将320只10周龄海兰褐商品蛋鸡，随机分为8组，每组4个重复，每个重复10只鸡。采用渐增和骤增两种增光方式，光照周期设11L∶13D、 13L∶11D、 15L∶9D、 17L∶7D 4个水平。29周龄末，每个重复随机抽取2只鸡单笼饲养,每隔2 h采1次血，测定FSH、LH、P4和E2水平。结果表明： FSH和LH协同能促进卵泡成熟，促进卵巢分泌E2和P4，并引起排卵。以缓增，光照周期为11L∶13D（处理组Ⅱ）组的FSH、LH峰值含量最高；激素分泌规律性并不和光照周期长短呈正相关。

免疫组化法检测猪圆环病毒2型在人工感染猪体内的分布

唐宁;吕艳丽;郭鑫;杨汉春;赖婷;冯华兵

畜牧兽医学报, 2008, 39(3): 372-375. doi:

摘要 ( 881 )

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将猪圆环病毒2型（PCV2）BF株经滴鼻接种28日龄健康普通仔猪，于接种后不同时间剖杀，采集相关的器官组织制备组织切片，使用免疫组化方法检测病毒在猪体内的分布。结果显示，淋巴结、脾脏、扁桃体等淋巴组织均出现阳性信号，心、肝、肺、肾、胃、十二指肠、大脑及小脑同样存在阳性细胞，其他组织呈阴性反应。阳性信号主要位于感染细胞的胞质中，偶尔出现在细胞核内。结果表明，PCV2确已造成猪体组织感染。

猪带绦虫未知基因SLC10在毕赤酵母中的表达

王颖;骆学农;郑亚东;马全英;丁军涛;景志忠;才学鹏

畜牧兽医学报, 2008, 39(3): 376-379. doi:

摘要 ( 819 )

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SLC10是以反式剪切引导序列为基础，通过RT-PCR从猪囊尾蚴中克隆到的一个未知基因。将猪囊尾蚴SLC10基因从重组克隆载体pGEM-SLC10扩增并酶切后，与相应酶切处理的毕赤酵母分泌性表达载体pPIC9K相连接,构建重组表达载体pPIC9K-SLC10，转化大肠杆菌JM109，经PCR、酶切和测序鉴定，基因序列完全正确。纯化的重组质粒pPIC9KSLC10用内切酶SacⅠ线性化，电转化毕赤酵母,使重组表达载体与酵母染色体发生同源整合；采用G418抗性梯度法筛选多拷贝重组菌株，用甲醇进行诱导表达；通过SDS-PAGE和Western-blot分析表达产物，结果表明目的蛋白得到了表达，但不具有免疫反应性。

链霉素残留检测ELISA试剂盒的研制及应用

范国英;王顺岗;王自良;张改平;邓润广;杨艳艳

畜牧兽医学报, 2008, 39(3): 380-384. doi:

摘要 ( 868 )

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本研究采用EDC法人工合成链霉素抗原（SM-BSA），免疫BALB/c小鼠，通过杂交瘤技术获得了分泌抗链霉素单克隆抗体的杂交瘤细胞株，建立了快速检测链霉素(SM)残留的酶联免疫方法，并成功研制了试剂盒。然后对其灵敏度、准确度、特异性、基质效应性等技术指标进行检测，同时应用该试剂盒对生长猪尿液中的残留情况进行检测。结果表明：除双氢链霉素外，该试剂盒与其它抗生素类药物均无交叉反应；线性检测范围为1～128 μg/L，相关系数R²＝0.925 1，灵敏度为0.45 μg/L，半数抑制浓度（IC50）为7.76 μg/L，检测限为1 μg/L；猪尿样的平均添加回收率为84.1%；基质对该试剂盒的检测结果影响不大。该试剂盒具有快速、敏感、特异、简便等特点，适合于SM残留的快速检测，具有较高的推广应用价值。

中国标准连	ISSN 0366-6964
续出版物号	CN 11-1985/S

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