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当期目录

2008年 第39卷 第2期 刊出日期:2008-02-24
遗传繁育
遗传距离与利用微卫星进行系统树构建初探
毛永江;常洪;杨章平;张柳;许明;常国斌;孙伟;宋光明;Henner Simianer
畜牧兽医学报, 2008, 39(2):  129-135.  doi:
摘要 ( 1542 )   HTML( )    PDF (372KB) ( 864 )  
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以中国牛亚科家畜6个群体12对微卫星数据为基础,采用6种遗传距离(DA、 DC、 DS、 Dsw,(σμ)2和DTL )和2种聚类方法(UPGMA和NJ法),探索它们对系统树构建准确性的影响。结果表明:微卫星位点平均杂合度水平显著影响系统树构建的准确性,用DA和DC遗传距离构建的系统树准确性相对较高,但很难确定NJ法和UPGMA法哪一种更适合于系统树的构建,而DTL遗传距离用于系统树构建有待进一步完善;最后,对微卫星用于家畜系统树构建的有效性和局限性进行了探讨。
西农萨能羊泌乳高峰期和初期乳腺组织差异表达基因研究
武会娟;罗军;张丽娟;韩雪峰;杨宝进;王海滨
畜牧兽医学报, 2008, 39(2):  136-142.  doi:
摘要 ( 771 )   HTML( )    PDF (555KB) ( 725 )  
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利用抑制性削减杂交和实时定量PCR研究西农萨能羊泌乳高峰期差异表达基因,结果表明成功构建泌乳高峰期和泌乳初期乳腺组织差异表达削减cDNA文库,以GAPDH为指标检测文库削减效率为25倍,共获得78个阳性克隆,PCR检测插入片段主要分布在150~1 000 bp,挑选插入片段不等的30个克隆测序,获得25个有效序列,代表18个基因。对文库中所包含的血清淀粉样蛋白A3(SAA3),ATP结合盒亚家族G成员2(ABCG2),心脏型脂肪酸结合蛋白(HFABP)和黄嘌呤脱氢酶(XDH)进行实时定量PCR检测,发现上述4个基因在泌乳高峰期乳腺组织中的表达水平分别是泌乳初期的170,77,163和17倍。结论:构建的消减文库可用于筛选泌乳高峰期差异基因,已鉴定的4个基因很可能是调控产奶量和乳成分变化的候选基因。
东亚和南亚固有绵羊群体X-蛋白等位基因特有频率分布的研究
孙伟;常洪;Tsunoda Kenji;杨章平;张鉴华;马国龙;鲁生霞;杜垒
畜牧兽医学报, 2008, 39(2):  143-149.  doi:
摘要 ( 1427 )   HTML( )    PDF (519KB) ( 512 )  
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本研究利用单向水平板淀粉凝胶电泳以我国5个固有地方绵羊品种包括湖羊(Hu)、同羊(Tong)、滩羊(Tan)、小尾寒羊(Han)、洼地羊(WD)为研究对象对X-蛋白遗传多样性进行了检测,并引用我国周边国家、地区绵羊品种为分析背景。结果表明以喜马拉雅山脉为界的亚洲东部和南部的北部群体和南部群体在编码的X(+)型的显性等位基因X频率上存在极显著差异(P<0.01)。北部检测的群体中X等位基因频率范围为0~0.18,平均值为0.087 8,包括属于藏羊和蒙古羊系统的小尾寒羊(Han)、不丹羊(Bhutan)、同羊(Tong)、湖羊(Hu)、滩羊 (Tan)、洼地绵羊(WD)、Bhyanglung绵羊(Bhy)、Baruwal绵羊(Bar)、云南绵羊(Yunnan)、哈拉和林绵羊(Kh)和乌兰巴托绵羊(Ub)。南部检测的群体中X等位基因频率范围为0.203 7~0.465 5,平均值为0.308 2,包括属于印度绵羊系统的孟加拉国绵羊(Ban)、Kagi绵羊(Kagi)、Lampuchhre绵羊(Lamp)、越南占部落绵羊(Cham)和缅甸绵羊(Mya)。本研究揭示X等位基因可作印度绵羊的标记,在绵羊群体尤其是亚洲东部和南部绵羊系统形成的研究中具有潜在的重要作用。
山羊ADD1基因部分序列的克隆与分析
朱吉;杨仕柳;欧阳叙向;孙建帮
畜牧兽医学报, 2008, 39(2):  150-157.  doi:
摘要 ( 873 )   HTML( )    PDF (1067KB) ( 635 )  
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提取湘东黑山羊基因组总DNA,用所设计的3对引物以聚合酶链式反应扩增山羊ADD1 (Adipocyte Determination and Differentiation factor-1)基因,并进行克隆测序。序列分析表明所克隆的山羊ADD1基因包含exon 2~8 、intron 2~7序列, 将序列提交GenBank, 获2个登录号:DQ480338、DQ487874;对编码序列(exon 2~8)与牛、人同区域进行Blast对比,同源性分别达到了96.14%和83.82%,所翻译氨基酸序列与牛属同源性更高达97.9% ;此外,通过不同引物的测序结果比较,分别在exon6的第42处和intron6的第82处发现了一个碱基突变(C→T)和碱基插入/缺失(G/-),前者属于沉默突变,未引起氨基酸的变化。
济宁青山羊不同季节血浆内褪黑素分泌规律的研究
葛仕豪;高立坤;王树迎;魏述东;侯衍猛
畜牧兽医学报, 2008, 39(2):  158-163.  doi:
摘要 ( 1546 )   HTML( )    PDF (827KB) ( 737 )  
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为了探讨济宁青山羊季节性发情的内分泌机理,本试验分别用放射性免疫法和免疫组织化学方法研究了济宁青山羊在春分、夏至、秋分和冬至时血浆内褪黑素的变化规律以及松果体细胞内5-羟色胺(5-HT)的含量变化。结果显示,血浆内褪黑素含量在午夜达到最大值,而在白天日中附近降到最小值,在夜间显著高于白天(P <0.01)。褪黑素含量也存在明显的季节性变化,夏至时夜间的平均含量极显著高于其它3个季节(P <0.01),春分和秋分时差异不明显(P >0.05),但它们显著高于冬至时的夜间平均水平(P <0.05)。白天血浆褪黑素含量在各个季节差异不显著(P >0.05)。夏季5羟色胺阳性细胞面积和占总面积比值都显著小于其它3个季节,冬季最大,春季和秋季差异不显著(P >0.05)。
鸡胚精原细胞体外转染EGFP方法的比较
余飞;孙国波;孙鹏翔;何先红;倪黎纲;李碧春
畜牧兽医学报, 2008, 39(2):  164-169.  doi:
摘要 ( 818 )   HTML( )    PDF (805KB) ( 570 )  
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以增强型绿色荧光蛋白(Enhanced green fluorescent protein,EGFP)为报告基因体外转染鸡胚胎精原细胞(Chicken embryonic spermatogonial cells,CESCs),比较磷酸钙、脂质体(梭华-Sofast)、电穿孔3种方法转染EGFP的效率,以获得高效的体外转染方法。本研究分离孵化16 d的鸡胚睾丸,获取CESCs,体外培养和传代扩增,传至第2代后进行碱性磷酸酶(AKP)活性和阶段特异性表面抗原-1(Stage specific embryonic antigen-1,SSEA-1)免疫荧光鉴定。运用磷酸钙、脂质体(梭华-Sofast)、电穿孔3种方法体外转染第2代CESCs,荧光细胞计数法分析转染效率。结果表明:与磷酸钙法、脂质体法相比,电穿孔法可获得更高的细胞成活率和转染率(68%vs39%、65%,19.70%vs2.92%、9.73%),差异显著(P<0.05)。因此得出,电穿孔法是将外源基因导入鸡胚精原细胞的适宜方法。
动物营养
猪肠道碱性氨基酸转运载体(CAT1)mRNA表达的组织特异性和发育性变化
周响艳;左建军;职爱民;张常明;黄志毅;张艳;王修启;冯定远
畜牧兽医学报, 2008, 39(2):  170-175.  doi:
摘要 ( 1317 )   HTML( )    PDF (800KB) ( 726 )  
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本研究旨在探讨不同品种猪肠道碱性氨基酸转运载体(CAT1)mRNA表达的组织特异性和发育规律。试验选取1、7、26、30、60、90和150日龄长白和蓝塘公猪各5头(同一品种同一日龄且体重接近),共70头,测体重后屠宰,采集十二指肠、空肠、回肠和结肠组织样品。以18S基因为内标,用实时荧光定量RTPCR法(SYBR Green Ⅰ试剂盒)检测CAT1 mRNA在60日龄长白猪十二指肠、空肠、回肠和结肠表达的组织特异性,以及在长白和蓝塘猪不同日龄其十二指肠、空肠、回肠表达的发育性变化。结果显示:60日龄长白猪CAT1 mRNA的表达丰度从十二指肠到回肠呈逐渐升高的趋势,到结肠开始下降,回肠极显著高于其他3个肠段(P<0.01),十二指肠最低;十二指肠和空肠CAT1 mRNA的表达在1~26 d(即哺乳期)都呈上升的趋势,随后都开始有所下降;蓝塘猪十二指肠CAT1 mRNA的表达丰度在150 d时显著低于其他各个阶段(P<0.05),而长白猪90和150 d都显著低于其他各阶段(P<0.05);空肠CAT1 mRNA的表达在26~150 d各阶段都差异不显著,而26 d显著高于1和7 d(P<0.05);1~60 d长白和蓝塘猪回肠CAT1 mRNA的表达都呈逐渐上升的趋势,60 d后都显著下降(P<0.05)。两品种猪不同日龄时十二指肠和空肠CAT1 mRNA的表达量都没有显著差异(P>0.05);长白猪回肠CAT1 mRNA表达在26 d时显著高于蓝塘猪(P<0.05);在90和150 d时,长白猪都显著低于蓝塘猪(P<0.05),其他各阶段没有显著差异。结果说明,CAT1 mRNA在不同肠段及不同发育阶段的表达存在明显的差异,这可能与肠腔中氨基酸的浓度和氨基酸的需要水平及相关激素水平有关。
全收粪和指示剂法测定阉牛日粮有机物消化率的差异性分析
陈瑶;邢壮;莫放;徐萍;姜军;高博;黄木家;姜莉
畜牧兽医学报, 2008, 39(2):  176-181.  doi:
摘要 ( 755 )   HTML( )    PDF (405KB) ( 1288 )  
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选用两个肉牛消化代谢试验所测定的8个不同日粮有机物消化率,对比分析全收粪法、Cr2O3法、AIA法对所测定有机物消化率的影响。结果表明:用全收粪法、Cr2O3法、AIA法测定日粮有机物的表观消化率分别为67.43%、62.93%、72.15%,其中AIA法测定值显著高于Cr2O3法(P<0.05),外源指示剂Cr2O3在粪中回收率为90.74%,内源指示剂AIA回收率为118.17%。
预防兽医
雏鹅新型病毒性肠炎病毒强毒在感染鸭胚体内形态发生学和宿主细胞超微病理学研究
陈舜;程安春;汪铭书;周毅;陈孝跃
畜牧兽医学报, 2008, 39(2):  182-188.  doi:
摘要 ( 714 )   HTML( )    PDF (1591KB) ( 725 )  
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将雏鹅新型病毒性肠炎病毒(NGVEV)强毒CH株经尿囊腔途径人工感染10日龄鸭胚,应用透射电镜和超薄切片技术研究病毒在宿主细胞内的形态发生及各组织器官的超微结构变化。结果表明:感染后不同时间剖杀及死亡鸭胚的尿囊膜、肠、心、肝、脑和肌胃组织中,均观察到60~70 nm的病毒粒子。病毒粒子主要通过与细胞膜融合而进入细胞质内,然后在细胞核内进行复制和装配。最后病毒粒子通过核膜和细胞膜破裂的方式被释放。病毒侵害的主要靶细胞包括鸭胚尿囊膜上皮细胞、肠上皮细胞、肠道平滑肌细胞、成纤维细胞、肝细胞、肌胃黏膜上皮细胞和心肌细胞等,表现为细胞核内外膜间隙严重扩张,细胞质整体结构严重空化。病毒侵害的主要靶细胞器包括粗面内质网和线粒体,表现为粗面内质网扩张呈囊状;尿囊膜上皮细胞的线粒体出现固缩和异常聚集变化,而其他组织细胞的线粒体均表现为肿胀和嵴断裂、消失。本试验还发现NGVEV可诱导宿主细胞发生严重的细胞凋亡现象,表现为细胞皱缩,胞核内染色质密度增高,核固缩成一个或数个团块凝聚在核膜周边,胞质浓缩深染并形成凋亡小体。
H9N2亚型禽流感病毒复制特性的基因分析
石火英;孙蕾;陈素娟;卢建红;刘秀梵
畜牧兽医学报, 2008, 39(2):  189-194.  doi:
摘要 ( 1428 )   HTML( )    PDF (380KB) ( 593 )  
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利用反向遗传技术,通过基因重排方法,以A/Chicken/Shanghai/F/98 (H9N2) 禽流感病毒(Avian influenza virus, AIV)的6个内部基因为骨架,与A/Chicken/Guangdong/SS/94(H9N2)AIV的HA和NA基因组合,产生3株H9N2亚型重排AIVs。动物试验发现A/Chicken/Shanghai/F/98 (H9N2)和A/Chicken/Guangdong/SS/94(H9N2)AIV主要在呼吸系统复制,A/Chicken/Shanghai/F/98 (H9N2)株在气管和肺组织的复制能力明显强于A/Chicken/Guangdong/SS/94(H9N2)AIV株。3株H9N2亚型重排AIVs的动物试验发现HA和NA基因对H9N2亚型AIV在呼吸道的复制特性起主要作用。内部基因对H9N2亚型AIV在呼吸道的复制也有一定的作用。结果表明1994年中国首次分离到的H9N2亚型AIV经过4年的宿主适应和基因进化,加强了其在呼吸系统的复制能力,奠定了气溶胶传播的基础。
猪流感病毒H3N2亚型的分离鉴定与全基因组序列测定
孙志勇;郭万柱;韩国全;陈进会;王小玉;徐志文
畜牧兽医学报, 2008, 39(2):  195-200.  doi:
摘要 ( 2023 )   HTML( )    PDF (533KB) ( 773 )  
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通过鸡胚接种、MDCK细胞培养、血凝及血凝抑制试验、RT-PCR等方法,笔者在四川首次分离并鉴定了1株既能在鸡胚上稳定传代又能在MDCK细胞上稳定产生CPE的H3N2 亚型猪流感病毒,命名为A/swine/Sichuan/01/2006(H3N2);NS基因的测序结果表明:该病毒分离株与A/swine/Hong Kong/4361/99(H3N2)、A/New York /429 / 2003 (H3N2)、A/Queensland/6/2000(H3N2)、A/New South Wales/4/1999(H3N2)等具有代表性的标准毒株的同源性都达到99%;从MDCK细胞中抽提流感病毒基因组进行全基因克隆,构建了11个包含全基因8个基因片段的文库。全基因测序结果表明,A/swine/Sichuan/01/2006(H3N2)共8个节段,全基因序列共计13 577 bp;基于HA、NA推导蛋白的无根进化树结果显示,四川分离株与人流感标准株A/Queensland/6/2000(H3N2)、A/South Australia/81/2000 (H3N2)有较近的亲缘关系,而与猪流感标准株A/swine/Spain/42386/2002(H3N2)的亲缘关系较远。
亚洲璃眼蜱P27基因的克隆和表达模式分析
王玉霞;周勇志;龚海燕;程天印;周金林
畜牧兽医学报, 2008, 39(2):  201-205.  doi:
摘要 ( 1073 )   HTML( )    PDF (1263KB) ( 588 )  
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为了进一步研究蜱吸血时唾液腺的基因表达调控机制,并为蜱疫苗的制备筛选功能性抗原,本试验对从亚洲璃眼蜱雌蜱吸血前后唾液腺消减文库中筛选出的一个具有Poly(A)尾的EST序列P27进行了研究。首先运用RACE 技术扩增出该基因的5′端,在此基础上设计引物,扩增出该基因全长,此基因全长827 bp,其开放阅读框从第35个碱基始至第706个碱基止,预测分子量为2728 ku,等电点422。生物信息学结构分析表明该基因含有跨膜区及多个活性位点,可能与细胞内DNA的转录相关;该基因与现有其他基因同源性很小,为一新基因;RTPCR结果显示该基因在半饱血雌蜱的唾液腺、蜱壳、中肠均有表达,但在壳中表达丰度稍低。本研究克隆的P27基因序列已登录GenBank,序列号为EU180067。
大片吸虫组织蛋白酶L全长序列的获取及其生物信息学分析
罗洪林;张为宇;黄维义
畜牧兽医学报, 2008, 39(2):  206-211.  doi:
摘要 ( 1164 )   HTML( )    PDF (713KB) ( 664 )  
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根据文库载体序列与原组织蛋白酶表达序列标签(EST)设计引物,以大片吸虫cDNA文库为模板,进行Touchdown PCR与梯度PCR相结合的扩增反应, 扩增产物克隆入pMD18-T载体,经鉴定后测序,并采用生物信息学技术对序列进行开放阅读框(ORF)、编码氨基酸序列、蛋白质同源性比较、二级、三级结构等分析; 结果所获序列全长990 bp,编码330个氨基酸,分子量36 771.2 u,等电点5.44;具有较明显的螺旋、片层和无规卷曲等二级结构,α螺旋占17.3%,β折叠占27.0%,无规卷曲占55.8%;具有2个较明显的跨膜区和2个疏水区,未发现明显的信号肽和糖基化位点;氨基酸序列同源性比对显示其属于半胱氨酸家族;三级结构同源建模预测显示其与组织蛋白酶K(PDB number 2f7dA)有49%的一致性。
猪带绦虫45W-4BX和TSOL18的高效表达及免疫效果研究
骆学农;郑亚东;胡志敏;丁军涛;张少华;侯俊玲;窦永喜;郭爱疆;景志忠;才学鹏
畜牧兽医学报, 2008, 39(2):  212-217.  doi:
摘要 ( 1166 )   HTML( )    PDF (573KB) ( 662 )  
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RT-PCR扩增45W-4B和TSOL18基因,PCR截去45W-4B基因的N端信号肽和C端疏水氨基酸序列形成45W-4BX。将45W-4BX和TSOL18 PCR产物分别亚克隆入pGEX-4T-1,用IPTG诱导表达,取产物进行SDS-PAGE和Western blot分析。纯化表达产物制成油佐剂疫苗分别免疫家猪,用25 000枚猪带绦虫成熟虫卵进行攻击感染,ELISA检测各组的抗体水平,90 d后剖检计算各组的减虫率。结果表明,45W-4BX和TSOL18基因在大肠杆菌中分别以可溶性和包涵体形式获得高效表达,并能被囊虫病人血清所识别。重组蛋白免疫猪15 d血清抗体即为阳性,30 d左右达到峰值。2种重组抗原的减虫率均在88%以上,与囊虫粗抗原免疫效果相当。这为进一步研制基于45W-4BX和TSOL18的猪囊虫重组基因工程疫苗奠定了基础。
临床兽医
IFN-γR和ER在大鼠下丘脑中的共存
赵慧英;何书海;徐永平
畜牧兽医学报, 2008, 39(2):  218-222.  doi:
摘要 ( 1248 )   HTML( )    PDF (872KB) ( 682 )  
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为了探讨神经-免疫-内分泌网络中生物活性物质间相互调节和平衡的关系,本试验应用免疫组化双标记法对成年SD雌性大鼠下丘脑中IFN-γ受体(IFN-γR) 和雌激素受体(ER)的共表达进行了研究。结果发现,IFN-γR和ER广泛存在于大鼠下丘脑中,其中在视前交叉上核、视前内侧核、室周核、交叉上核、下丘脑前核、下丘脑内侧核、下丘脑外侧核、乳头体前背侧核、乳头体前腹侧核等13个核团中存在大量的IFN-γR和ER双标记细胞,双标记细胞约占全部阳性标记细胞的60.9%;双标记细胞胞质呈黑褐色、胞核呈棕黄色;ER单标着色细胞以神经胶质细胞居多。研究结果表明,IFN-γ和雌激素可以分别以其各自受体为介质进行信号传递和信息整合,同时也通过在同一细胞中的相互作用而参与机体的神经-免疫-内分泌调节。
萱草根素对家兔中枢神经损害的病理学研究
赵兴华;王建华;何欣;余永涛;刘志滨;耿果霞
畜牧兽医学报, 2008, 39(2):  223-227.  doi:
摘要 ( 1672 )   HTML( )    PDF (1602KB) ( 827 )  
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本研究旨在对萱草根素中毒家兔中枢神经系统进行病理学研究。从北黄花菜根中提取萱草根素,用1%的淀粉溶液配制成2%混悬液,试验组家兔每只每天灌服萱草根素混悬液4 mL/kg,对照组灌服等量的1%淀粉溶液。于处理后第4、7、10、13、16、19天进行常规病理学检查。试验第4天大脑、小脑、脊髓和视神经中的神经纤维出现脱髄鞘变化,在小脑从白质中央向两侧进行性扩展,在脊髓从边缘向中央扩展,最终呈丝瓜络样变;第7天起,蒲肯野氏细胞和脊髓神经细胞发生固缩、坏死;第10天,大脑神经细胞出现坏死、凋亡,并且数目逐渐增多,出现噬神经现象,视网膜萎缩,节细胞固缩、溶解消失。超微结构观察显示,髄鞘变薄,板层崩解、断裂、分离,失去原来的致密结构;神经细胞染色体边集,线粒体肿胀、消失并空泡化、粗面内质网扩张,结构模糊。结果表明,萱草根素可引起神经纤维脱髓鞘和神经细胞的广泛性坏死,并最终导致家兔失明和死亡。
研究简报
表皮生长因子和胰岛素样生长因子对水牛卵母细胞胞质成熟的影响
王晓丽;崔奎青;舒金辉;冯贵雪;石德顺;卞桂华;韦精卫
畜牧兽医学报, 2008, 39(2):  228-232.  doi:
摘要 ( 790 )   HTML( )    PDF (928KB) ( 745 )  
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以皮层颗粒(CG)单层分布于质膜下做为卵母细胞胞质成熟的标志,利用CG荧光染色法,研究了不同浓度表皮生长因子(EGF)和胰岛素样生长因子(IGF-1)及其组合对水牛卵母细胞胞质成熟的影响。结果发现:(1)添加不同浓度的EGF(10、20、30、50 ng/mL)都可以提高胞质的成熟率,但是组间差异不显著(P>0.05);皮质颗粒的分布随着EGF浓度的升高逐步由中间分布向皮层分布转变;(2)在成熟液中添加IGF-1 30 ng/mL时效果较好,能显著提高卵母细胞胞质的成熟率;皮质颗粒的分布随着IGF-1浓度的升高逐步由中间分布向皮层分布转变,在添加IGF-1 30 ng/mL时,在皮层分布最好,随着IGF-1 量的进一步增加,皮质颗粒又向中间分布转变;(3)添加20 ng/mL EGF+30 ng/mL IGF-1组卵母细胞体外成熟率高于添加30 ng/mL的IGF-1组,显著高于添加20 ng/mL EGF组和对照组(P<0.05)。由此表明,EGF和IGF-1对水牛卵母细胞体外成熟有协同作用。
不同品种初生肉仔鸡卵黄囊耗用规律及其激素调节的研究
黄金秀;罗绪刚;吕林;刘彬
畜牧兽医学报, 2008, 39(2):  233-239.  doi:
摘要 ( 1447 )   HTML( )    PDF (367KB) ( 671 )  
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选用北京油鸡和AA鸡的公雏研究不同品种初生肉仔鸡卵黄囊耗用规律及其激素调节。每个品种276只健康公雏按体重随机分为6个重复,每个重复46只。分别在孵出后第0、1、3、5、7、9、11天称重后,每个品种选取36只雏鸡进行屠宰。结果表明:(1)北京油鸡的初生重和生长速度均显著低于AA鸡;(2)2个品种鸡的卵黄整重、卵黄囊风干物质含量和总能值均随日龄增长呈指数方式递减,但北京油鸡的指数函数系数均高于AA鸡;(3)卵黄囊瘦素和胰岛素的水平随日龄和品种的不同而变化。在出壳后前3天,北京油鸡和AA鸡的卵黄囊瘦素和胰岛素水平均随日龄的增长而增加。且在孵出后第0和3天,北京油鸡的卵黄囊瘦素和胰岛素水平显著高于相同日龄的AA鸡(P≤0.041 3)。试验结果提示,2个品种的初生肉仔鸡卵黄囊耗用规律基本一致,但北京油鸡的耗用速度比AA鸡快,部分原因可能是北京油鸡卵黄囊瘦素和胰岛素水平更高。
不同纤维素水平对瘤胃微生物分离获得率及DNA提取率的影响
王梦芝;李国祥;王洪荣;张洁;曹恒春
畜牧兽医学报, 2008, 39(2):  240-244.  doi:
摘要 ( 692 )   HTML( )    PDF (453KB) ( 664 )  
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以3只瘘管山羊为瘤胃液供体,研究体外培养条件下不同纤维素水平底物对微生物的分离获得率及DNA提取率的影响。底物可溶性淀粉与纯纤维素比例设计为:100∶0,70∶30,50∶50,30∶70,0∶100。结果表明:总微生物分离获得率与DNA提取率随底物纤维素含量的增加,总体上呈现下降趋势;分离获得率为53.29%,总微生物DNA提取率为51.0%;细菌DNA的提取率(45.4%)显著低于原虫DNA的提取率(56.1%)(P<0.05);所提得DNA片段在20 kb以上,PCR扩增效果较好,适合于后续研究的分子操作。
血清1和3型多杀性巴氏杆菌铁调控外膜蛋白共同抗原的初步分析
余旭平;邬栋栋;刘晓宁;胡东建;杜鑫;陈玉银
畜牧兽医学报, 2008, 39(2):  245-250.  doi:
摘要 ( 747 )   HTML( )    PDF (583KB) ( 681 )  
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用普通BHI和缺铁BHI培养基培养禽多杀性巴氏杆菌C48-19(血清1型)、P1059株(血清3型),提取外膜蛋白(OMPs),SDSPAGE电泳比较不同培养条件下两株细菌的外膜蛋白,发现缺铁培养时2株细菌均增加了87、81、79、64、60.5 ku铁调控外膜蛋白(IROMPs)。以C48-19株攻毒后耐过的鸡血清作为抗体进行免疫印迹,检测到其中的87、79和60.5 ku蛋白是2株细菌共同的、具有交叉免疫反应性的IROMPs,推测这3种蛋白可能是这2个菌株的共同抗原,并可能在C48-19感染的鸡体内特异表达;对鸡胚尿囊液中培养的C48-19株OMPs的SDS-PAGE电泳和免疫印迹试验,也观察到类似IROMPs的表达。这些IROMPs的发现为亚单位疫苗的研制提供了候选蛋白。
淫羊藿多糖的硫酸化修饰及其对IBDV感染细胞的影响
卢宇;胡元亮;黄小燕;王德云;王君敏;徐玉凤;赵晓娜
畜牧兽医学报, 2008, 39(2):  251-256.  doi:
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按正交试验设定氯磺酸-吡啶法的9种修饰条件,对淫羊藿多糖(EPS)进行硫酸化修饰,得到9种硫酸化淫羊藿多糖(sEPS),用MTT法比较了9种sEPS抵抗鸡传染性法氏囊病毒(IBDV)感染鸡胚成纤维细胞(CEF)的作用。结果表明,硫酸化修饰后sEPS较未修饰的EPS显著提高了CEF抵抗IBDV感染的作用,以sEPS2和sEPS5的效果较好,且与sEPS的硫酸基取代度和糖含量有一定的相关性,反应温度80℃、氯磺酸与吡啶的配比1∶8、反应2 h为最佳修饰条件。