畜牧兽医学报

猪Toll样受体7 cDNA的克隆及序列分析

李强;李学伟;朱砺;陈磊;李明洲

畜牧兽医学报, 2008, 39(5): 531-535. doi:

摘要 ( 1725 )

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本研究应用RT-PCR和RACE技术从肠系膜淋巴结组织总RNA 中克隆出猪Toll样受体7 （Toll-like receptor 7， TLR7)的cDNA 序列。分析结果表明，克隆到的序列全长3 834 bp(GenBank 登录号：EF469730)，其3 150 bp 的开放阅读框编码1 050个氨基酸残基的猪Toll样受体7蛋白。推导的氨基酸序列分析显示，在猪TLR7的胞外区，具有LRRRI结构域，胞内具有TIR结构域，表现出典型的TLR家族结构特征，同源性分析结果显示，TLR7在进化过程中具有高度保守性，与牛、狗、人、猫和小鼠的氨基酸序列同源性分别为90.8%、87.4%、84.9%、86.7%和78.2%。

北京黑猪RBP4基因与繁殖性状的关联分析

罗仍卓么;;王立贤;孙世铎

畜牧兽医学报, 2008, 39(5): 536-539. doi:

摘要 ( 1419 )

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以北京黑猪为研究对象，选取视黄醇结合蛋白4(Retinol-binding proteins 4，RBP4)基因为繁殖性状的候选基因，其扩增产物经MspⅠ酶切后，在北京黑猪群体中发现AA、AB和BB 3种基因型，其A、B等位基因的频率、多态信息含量、杂合度分别为0.529 6、0.470 4、0.374 1和0.498 2，表明该位点处于中度多态。χ2适合性检验表明北京黑猪群体该位点处于Hardy-Weinberg平衡状态（P>0.05）。用SAS 8.0 软件最小二乘法拟合线性模型，将不同基因型与总产仔数（TNB）、产活仔数（NBA）和出生重（WB）进行了关联分析，结果表明：经产母猪各基因型间的TNB、NBA、WB差异均不显著（P＞0.05）。初产母猪BB型比AA和AB型个体的TNB分别多1.04（P＜0.05）和0.31头；BB和AB型比AA型个体的NBA分别多1.47（P＜0.05）和1.35头。基因效应分析结果表明，初产母猪该位点的B等位基因对TNB、NBA和WB都表现为正效应，分别使各性状增加了0.282 0头、0.408 5头和0.000 9 kg，即B等位基因可能为北京黑猪繁殖性能的有利等位基因。

牛α-actinin1基因的克隆及其多态性与繁殖性状的关联分析

淮亚红;;许尚忠;;王淑辉;高雪;陈金宝;任红艳

畜牧兽医学报, 2008, 39(5): 540-546. doi:

摘要 ( 1504 )

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本研究以牛睾丸组织总 RNA为模板，采用 RT-PCR 的方法合成了α-actinin1 的 cDNA，并进行了组织表达谱和生物信息学分析，结果表明：牛α-actinin1基因在肝脏、睾丸、肺、瘤胃、子宫、小肠、脾脏、心脏、脂肪和肾脏组织中表达， cDNA为2 911 bp, 包含2 679个碱基组成的开放读码框(53~2 731 bp), 编码892个氨基酸，主要包含CH、SPEC和EFh 3个结构域。此外，本研究以双胎和单胎鲁西牛、尼里－拉菲水牛、摩拉水牛、晋南牛、荷斯坦奶牛、西门塔尔牛和南阳牛为研究对象，通过测序和 PCR-RFLP 相结合的方法进行 SNP 检测和基因型分析,探讨基因多态性与产犊数之间的关系，结果表明：在α-actinin1 基因第13内含子的669 bp 处存在1个A/ G 的突变，使得产生Hae Ⅲ多态，产生AA和AG 2 种基因型；其基因多态性与产犊数之间的关联分析结果显示A→G的突变对产犊数没有显著影响 (P＞0.05)。

牛Nanog基因克隆及其在皮肤成纤维细胞中的表达

郑喜邦;;云彦;胡勇策;李勇;王华岩;窦忠英

畜牧兽医学报, 2008, 39(5): 547-554. doi:

摘要 ( 1551 )

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本研究克隆了牛Nanog 基因，构建其真核表达载体，并转染皮肤成纤维细胞，获得能够用作核移植供核细胞的稳定转染细胞株。从6周龄的胎牛原始生殖嵴中提取总RNA, 通过RT-PCR扩增Nanog 基因，将其克隆到pMD-18T载体，再从酶切鉴定和测序正确的质粒上切下目的片段，定向克隆到pCDNA3-FLAG表达载体上，挑选序列正确的真核表达质粒pCDNA3-Nanog 转染牛皮肤成纤维细胞，获得了稳定转染的细胞株。用RT-PCR 和 Western Blotting 分别检测Nanog mRNA和FLAG-Nanog融合蛋白的表达，用免疫染色法验证该细胞株是否具有干细胞特征。结果表明：（1）从胎牛原始生殖嵴中克隆了序列正确的Nanog 全长编码序列；(2)所构建的pFLAG-Nanog重组质粒能够在皮肤成纤维细胞中高效表达；(3)所获稳定转染的细胞株能表达ES 细胞表面抗原SSEA-4 和多能性维持因子Nanog、Oct4，表明其具有一定的多能性。为进一步研究Nanog基因功能, 尤其是探讨它在家畜早期胚胎发育、生产转基因动物，以及胚胎干细胞建系中的作用奠定了基础。

10个绵羊品种的微卫星DNA多态性研究

仲涛;;马月辉;关伟军;凌英会;郭军;赵倩君;何晓红

畜牧兽医学报, 2008, 39(5): 555-561. doi:

摘要 ( 1350 )

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本研究利用FAO和ILRI推荐的21个微卫星引物，结合荧光标记PCR，检测了中国9个地方绵羊（Ovis aries）品种和1个外来绵羊品种的遗传多样性。21个微卫星座位均呈现出高度多态，多态性信息含量和杂合度均表明我国地方绵羊品种有着丰富的遗传多样性。本研究共检测到342个等位基因，有效等位基因数在2.175 2～9.499 7之间，座位平均杂合度在0.524 8～0.855 1之间，品种平均杂合度在0.633～0.761之间。聚类关系和主成分分析结果与其起源、育成历史及地理分布基本一致。

中国南方地区7个山羊群体的遗传分化与基因流分析

杨章平;毛永江;马月辉;汪志国;王庆华;常洪;常国斌;孙伟;李树春

畜牧兽医学报, 2008, 39(5): 562-569. doi:

摘要 ( 1559 )

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利用23对微卫星标记分析了中国南方7个山羊群体的遗传分化、基因流、遗传分化程度与地理距离之间的关系，同时利用DC遗传距离构建系统树和STRUCTURE进行动态聚类。结果表明：7个山羊群体总近交系数（Fit）为－7.73%，群体内近交系数（Fis）为－26.5%，群体间基因分化系数（Fst）为14.84%，3个指标均达到极显著水平(P<0.001)，说明这 7个山羊群体总体上和群体内杂合度较高，群体间遗传分化较明显，14.84%的遗传变异来自于群体间，85.16%遗传变异来自于群体内个体间的差异。7个山羊群体每世代两群体间有效迁移个体数（Nem）变化范围为0.831 3（宜昌白山羊与黄淮山羊）到3.410 3（马头山羊与湘东黑山羊），平均为1.577 0。7个山羊群体间的基因分化程度与地理距离和遗传距离相关不显著（P>0.05）。宜昌白山羊、马头山羊、湘东黑山羊、福清山羊、戴云山羊、黄淮山羊、长江三角洲白山羊群体中属于各自采样群体的概率分别为99.1%、98%、96.2%、96.6%、98.7%、98.7%和98.7%。同时，STRUCTURE软件通过变化的分群数体现的聚类情况与用DC遗传距离所构建的系统聚类图结果一致。研究结果表明：这7个山羊群体间的遗传分化主要是自然选择作用的结果。

蒙古马血液蛋白（酶）遗传多态性及聚类分析

杨虹;孟克;王烨辉;芒来

畜牧兽医学报, 2008, 39(5): 570-575. doi:

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采用垂直平板不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳技术对221匹蒙古马（包括乌珠穆沁马、乌审马、锡尼河马和巴尔虎马）的8种血液蛋白进行多态性检测。计算了各位点的基因型频率、等位基因频率、遗传杂合度，并通过聚类分析探讨了群体间的亲缘关系和遗传距离。结果表明：除α1-B糖蛋白（A1B）位点呈现为单态外，其余7个蛋白（酶）位点均在不同程度上表现出多态。8个蛋白（酶）位点的平均杂合度分别为：乌珠穆沁马0.329 6，乌审马0.305 6，锡尼河马0.378 3和巴尔虎马0.366 6。对Nei氏标准遗传距离进行聚类分析，发现巴尔虎马和锡尼河马之间的遗传距离最近,它们与乌珠穆沁马和乌审马的遗传距离相对较远。

11个地方鸡品种性状间的典型相关分析

吴信生;徐琪;肖小珺;张学余;吴圣龙;包文斌;李碧春;陈国宏

畜牧兽医学报, 2008, 39(5): 576-581. doi:

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对中国部分地方鸡品种的体尺性状、屠宰性状、产蛋性状和生态性状等4组性状间的17个变量关系进行了典型相关分析。结果表明，体尺性状和屠宰性状间、体尺性状与生态性状间以及屠宰性状与生态性状间的第1个典型相关系数达极显著水平，分别占总相关信息的38.17%、42.73%和42.13%，其典型相关系数分别为0.998、0.997和0.998；体尺性状与产蛋性状间和产蛋性状与生态性状间的第1个典型相关系数达显著水平，分别占总相关信息的42.55%和66.79%，其典型相关系数分别为0.965和0.984。研究结果对于鸡的遗传育种具有一定的参考价值。

溆浦鹅肌肉生成抑制因子基因（MSTN）的克隆及其表达量与日粮能量、血清IGF-I和GH的关系研究

胡骏鹏;何瑞国;范卫星;曹爱青

畜牧兽医学报, 2008, 39(5): 582-587. doi:

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从溆浦鹅（Xupu geese）的腿肌中抽提总RNA，用两步法RT-PCR扩增出MSTN基因的cDNA编码序列，以pGEM-T Vector为载体，将该片段克隆到大肠杆菌（Escherichia coli）中。通过筛选阳性克隆，双酶切鉴定后测序；以MSTN基因的克隆为基础，以β-actin为内标，构建优化的半定量RTPCR方法，研究高、中、低（A:13.38 MJ/kg、B:12.13 MJ/kg、C:10.87 MJ/kg）3种不同能量对溆浦鹅21和70日龄2个时期肌肉组织MSTN基因表达的差异；同时用放免法测定21、70日龄的血清GH和IGF-I浓度。结果表明：克隆的溆浦鹅MSTN基因cDNA的部分序列，其片段大小为1 128 bp，编码375个氨基酸组成的多肽，溆浦鹅与鸡、鸭、朗德鹅的核苷酸相似性分别为94％、94％、99％；推导氨基酸的相似性分别为98％、97％、98％。21日龄时，日粮能量水平对溆浦鹅MSTN表达量的影响不显著；70日龄时溆浦鹅MSTN的表达量为C>B>A。对于溆浦鹅21~70日龄阶段的生长，MSTN基因的表达量和血清IGFI的变化趋势基本一致；与血清GH含量之间并不存在很大关联，日粮能量对21日龄后溆浦鹅MSTN基因的表达有影响。本研究为MSTN基因在水禽中的进一步研究和应用打下了基础。

EGF和IGF-I对绵羊卵母细胞体外成熟和卵裂的影响

刘丑生;陆会宁;张利平;王志刚;赵俊金;孟飞

畜牧兽医学报, 2008, 39(5): 588-593. doi:

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本文研究了EGF、IGF-I以及EGF和IGF-I联合对绵羊卵母细胞体外成熟和卵裂的影响，以确立绵羊卵母细胞体外成熟的最佳条件。结果表明:50 ng/mL的EGF的成熟率和卵裂率分别为71.2%和45.5%，显著高于对照组和10、20、30、40 ng/mL组(P<0.05) ，当EGF浓度达到100 ng/mL时，成熟率和卵裂率最高，分别为72.9%和45.7%；40 ng/mL IGF-1的成熟率和卵裂率分别为70.7%和58.5%，显著高于对照组和10、20、60、80、100 ng/mL组(P <0.05) ,当IGF-I的浓度为100 ng/mL时，成熟率和卵裂率最低，分别为38.8%和20.0%，与对照组和其它各试验组差异显著(P <0.05)；50 ng/mL EGF和 40 ng/mL IGF-I联合使用，成熟率和卵裂率分别为85.6%和61.0%，同对照组和50 ng/mL EGF组、40 ng/mL IGF-I组之间差异显著(P <0.05)。

添加酪蛋白酶解物对宫内生长迟缓仔猪肠道生长发育的影响

赵念;张莉莉;金融;杜伟;王恬

畜牧兽医学报, 2008, 39(5): 594-400. doi:

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为研究酪蛋白酶解物对宫内生长迟缓（IUGR）仔猪肠道生长发育的影响，本试验选择15头IUGR新生仔猪，分为新生对照组（N组）、酪蛋白组（C组）和酪蛋白酶解物组（CH组），以牛乳为基础日粮，C和CH组分别加入10%的酪蛋白溶液和10%的酪蛋白酶解物溶液，人工饲喂3 d后取样。结果显示，CH组仔猪小肠长度显著高于C组（P<0.05），CH组空肠后段和回肠前段的绒毛高度/隐窝深度显著高于C组（P<0.05）；CH组小肠黏膜的蛋白质含量显著高于C组（P<0.05），同时其DNA含量显著高于C和N组（P<0.05）；CH组的麦芽糖酶活性和相对活性均显著高于C和N组（P<0.05或P<0.01），CH组的碱性磷酸酶（AKP）活性显著高于C组（P<0.05）。结果表明，酪蛋白酶解物有促进新生IUGR仔猪肠道组织生长的作用，同时能够刺激IUGR仔猪小肠黏膜上皮细胞的增殖和提高小肠黏膜麦芽糖酶和碱性磷酸酶的活性。

鸭空肠液中淀粉酶、胰蛋白酶、糜蛋白酶活性变异的研究

赵峰;张宏福;侯水生;张子仪

畜牧兽医学报, 2008, 39(5): 601-607. doi:

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本试验旨在通过研究鸭空肠套管中食糜流量及空肠液中消化酶活性的变异，探讨获取相对可比的空肠液样品的适宜采样方案，为鸭小肠中消化酶酶谱的研究提供依据。采用3×6（日期×时间）完全随机设计，每4 h采集1次空肠食糜，每采集1 h后间隔3 h，隔日重复采样过程，共采集3 d。试验1，随机选择15只荷术鸭，分成5个重复，每个重复3只鸭，测定空肠套管中食糜的流量。试验2，从鸭群中随机选择24只荷术鸭，分成6个重复，每个重复4只鸭，测定空肠液中淀粉酶、胰蛋白酶、糜蛋白酶的活性。结果表明：空肠套管内的食糜流量呈现出日间及日内变异，日内食糜流量呈现出先升后降的总体规律。日内采样时间对空肠液中淀粉酶、胰蛋白酶、糜蛋白酶活性有极显著的影响（P<0.01）。不同日间，淀粉酶、糜蛋白酶的日平均活性有显著差异（P<0.05），而胰蛋白酶日间平均活性没有显著差异（P=0.28）。3种消化酶活性均呈现出同一日内随采样时间而逐渐降低的总体现象。鉴于上述现象，通过套管获取反映鸭空肠中消化酶活性生理水平的采样方案为：白天采集3次样品，每次采集1 h间隔3 h，隔日重复采样，共采集3 d。

脂多糖对断奶仔猪外周血免疫细胞和免疫器官中PPARγ mRNA表达水平的影响

石君霞;刘玉兰;鲁晶;范伟;赵胜军;朱惠玲;侯永清;丁斌鹰;郭广伦

畜牧兽医学报, 2008, 39(5): 608-613. doi:

摘要 ( 929 )

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研究脂多糖（Lipopolysaccharide，LPS）对断奶仔猪外周血白细胞、胸腺、脾脏和肠道淋巴结过氧化物酶体增殖物活化受体（PPARγ）mRNA表达水平的影响，探讨免疫应激是否影响免疫细胞和免疫器官PPARγ mRNA的表达。选取12头健康的（21±1）d断奶仔猪，分成2个处理，每个处理6个重复。试验组注射100 μg/kg BW的LPS，对照组注射等量的生理盐水。于注射LPS后1.5和3 h，采血分离血浆、白细胞；注射LPS后3 h屠宰仔猪，取胸腺、脾脏和肠道淋巴结进行相关检测。结果表明：（1）LPS刺激后1.5和3 h，肿瘤坏死因子TNFα和皮质醇含量均急剧上升（P<0.001）；LPS刺激后3 h，胰岛素含量显著下降（P<0.001），胰高血糖素含量显著上升（P<0.001）。此外，LPS刺激也导致血液生化指标发生了显著变化。这表明LPS刺激导致机体处于急性免疫应激状态。（2）LPS刺激导致外周血白细胞（P<0.001）、胸腺（P<0.05）和肠道淋巴结（P<0.05）的PPARγ mRNA表达量显著升高，表明免疫应激诱导了免疫细胞和免疫器官中PPARγ mRNA的表达。提示PPARγ可能参与仔猪免疫应激的调控，可能成为缓解免疫应激的一个新靶点。

鸡舍内外环境中气载大肠杆菌同源性的分子鉴定

段会勇;柴同杰

畜牧兽医学报, 2008, 39(5): 614-620. doi:

摘要 ( 1222 )

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采用ANDERSEN-6级空气微生物样品收集器和RCS离心式采样器在5个鸡场舍内空气、舍外上风向和下风向不同距离收集气载大肠杆菌；并收集鸡的粪便，分离大肠杆菌。利用大肠杆菌基因间重复一致序列为引物的聚合酶链式反应（ERIC-PCR）分型技术，扩增不同测量点收集的大肠杆菌的DNA图谱。通过每个采样点的大肠杆菌的浓度变化以及大肠杆菌遗传相似性分析确认动物舍微生物气溶胶向舍外环境的传播。结果显示：5个鸡舍内空气中大肠杆菌的浓度远远高于舍外上风和下风向的大肠杆菌浓度（P<0.05或P<0.01），但是舍外不同距离间的大肠杆菌浓度差异并不显著（P>0.05）。同样，ERIC-PCR结果表明，从鸡的粪便中分离的大肠杆菌与从舍内空气中分离的部分大肠杆菌（34.1%），以及从鸡场舍外下风方向分离到的多数大肠杆菌(54.5%)与从舍内空气或粪便中分离的大肠杆菌相似性可达100%。而从鸡舍上风向分离到的大肠杆菌与从舍内空气或粪便中分离的大肠杆菌相似性为73%~92%。从而说明来自动物体的大肠杆菌既能污染舍内空气，又能对其周围的环境构成污染。本研究揭示了微生物气溶胶的传播规律，具有公共卫生及流行病学意义。

鸡白痢沙门氏菌Mini-Tn5转座子插入突变

耿士忠;焦新安;陈晓娟;潘志明;张辉;陈祥

畜牧兽医学报, 2008, 39(5): 621-626. doi:

摘要 ( 1055 )

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将氯霉素（Cm）抗性基因克隆到pUTmini-Tn5Km2载体中，利用含卡那霉素（Km）和氯霉素（Cm）抗性基因的pUTmini-Tn5Km2(Cm)转座载体将Km和Cm抗性基因随机插入鸡白痢沙门氏菌基因组中，以相应的抗生素进行筛选，获得大量在不同位点插入突变的突变体，从中筛选鸡白痢沙门氏菌某功能缺陷型突变株。通过对突变株的基本特征以及PCR鉴定后，再进行插入基因定位。结果表明，Km和Cm抗性基因已成功转座至鸡白痢沙门氏菌基因组上；基因定位显示突变株均有且只有1个插入位点，插入位点的位置不尽相同。这为研究鸡白痢沙门氏菌功能基因和筛选特定突变株提供了必要的基础。

单核细胞增多性李斯特菌LIPI-1全基因克隆与序列分析

谭炳乾;何启盖;肖军;陈焕春

畜牧兽医学报, 2008, 39(5): 627-633. doi:

摘要 ( 836 )

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参考GenBank中单核细胞增多性李斯特菌（LM）第I毒力岛（LIPI1）有关基因序列设计引物，分段扩增、克隆了分离菌株XFL0605 LIPI-1毒力岛全基因序列，序列全长8 558 bp，包括完整的prfA、plcA、hly、mpl、actA和plcB 6个基因。对LIPI-1编码的6个毒力基因进行序列分析，各毒力基因反映的进化关系不尽一致，表明李斯特菌株在获得外源性毒力基因方面具有不同步性，各毒力基因来源也不尽相同。应用相应软件对各毒力基因编码蛋白的信号肽、跨膜区进行预测，确定了基因序列中调控蛋白PrfA结合区核苷酸序列。分析并确认了hlyA基因及推导氨基酸序列PEST基序和C端保守11肽序列。研究还发现LM菌株XFL0605 actA基因编码604个氨基酸，缺失了105 bp富脯氨酸重复片段编码碱基，只有2个E/DFPPPPXD/E重复序列。

胸膜肺炎放线杆菌血清7型apxIV基因缺失突变株的构建和鉴定

刘金林;郭毅;谭臣;陈砚;贝为成;陈焕春;

畜牧兽医学报, 2008, 39(5): 634-638. doi:

摘要 ( 950 )

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ApxIV是胸膜肺炎放线杆菌的一种RTX毒素，为探究其在胸膜肺炎放线杆菌致病过程中的作用，以血清7型APP HB04为亲本菌株，通过接合转移和负向筛选方法，构建了一株apxIV基因缺失突变株。通过PCR、序列分析、Southern blot分析及遗传稳定性分析等证明成功构建了突变株。对突变株生物学特性进行初步研究，发现突变株与亲本菌株相比，体外生长速度未发生明显变化，对小鼠的致病力有所降低。结果表明，毒素ApxⅣ在胸膜肺炎放线杆菌致病过程中发挥一定作用。突变株的成功构建及生物学特性研究为进一步阐明胸膜肺炎放线杆菌的致病性及开发更为安全、高效的基因工程疫苗奠定了坚实基础。

猪圆环病毒2型灭活疫苗的制备与免疫效力研究

董信田;李玉峰;姜平;王先炜;冯志新;俞俐莉

畜牧兽医学报, 2008, 39(5): 639-644. doi:

摘要 ( 953 )

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猪圆环病毒2型（PCV2）经0.2%甲醛37℃作用一定时间后接种PK-15细胞，盲传3代，用PCR方法检测灭活效果。将灭活的PCV2加入适量的白油和氢氧化铝胶制成PCV2油佐剂和铝胶佐剂灭活疫苗，免疫小鼠，共免疫2次，时间间隔为3周，分别于一免后第21天和二免后第14天进行ELISA抗体检测。同时为了评价国产油佐剂和进口油佐剂的免疫效果，笔者进行了猪体免疫效力试验。通过ELISA抗体、攻毒后临床表现及体温变化、剖解时的病理变化、平均日增重及病毒血症等指标对疫苗免疫效果进行评价。结果如下：① PCV2能被0.2%甲醛完全灭活，灭活时间为16 h。② PCV2油佐剂和铝胶佐剂灭活疫苗免疫小鼠后均能产生较好的免疫应答，并且油佐剂灭活疫苗免疫效果好于铝胶佐剂灭活疫苗。③ 猪体免疫效力试验表明，两种油苗均能产生较高水平的ELISA抗体。攻毒后，攻毒对照猪的体温高于免疫猪，空白对照猪体温正常。免疫猪及空白对照猪平均体重均升高，而攻毒对照猪平均体重有所降低，且两个免疫组和空白对照组之间平均日增重差异显著（P<0.05）。病毒血症检测及病毒DNA在组织中的分布检测表明两油苗均能够有效降低猪体的带毒。以上结果表明，PCV2灭活疫苗免疫小鼠和猪体后均能诱导机体产生免疫应答，并能够在一定程度上抵抗PCV2对猪体的感染。

伪狂犬病毒在潜伏感染猪体内的组织分布

龙晓婷;刘俊磊;郭洪;习杨;邱德新;陈焕春;周锐

畜牧兽医学报, 2008, 39(5): 645-651. doi:

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潜伏感染是猪伪狂犬病防治和净化工作中的重要障碍之一。本研究用伪狂犬病毒（PRV）gG/LacZ+标记毒株感染经过PRV灭活疫苗免疫的PRV阴性仔猪，建立了猪伪狂犬病毒潜伏感染动物模型，再用地塞米松激活PRV在猪体内的潜伏感染。运用免疫组织化学SABC染色法研究了PRV在潜伏感染猪和潜伏感染激活猪体内部分组织的分布情况。结果显示，阳性细胞主要分布在神经系统的大脑、小脑、脑干、三叉神经和视神经以及非神经系统的扁桃体、肺和肾等部位。阳性细胞数量随着攻毒后时间的发展呈现减少的趋势，而注射地塞米松后，阳性细胞数量在上述组织中显著增加。

枸杞多糖对DES诱导的仓鼠睾丸氧化损伤的保护作用

马爱团;陈耀星;王子旭;董玉兰

畜牧兽医学报, 2008, 39(5): 652-657. doi:

摘要 ( 933 )

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为研究枸杞多糖（LBP）对己烯雌酚（DES）诱导的仓鼠睾丸氧化损伤的保护作用，将24只成年雄性仓鼠随机分为4组，即正常对照组、DES组、DES+LBP组、DES+VC+VE组。连续处理7 d后统计睾丸质量和相对质量，观察睾丸组织结构的变化，检测睾丸组织和血浆中超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、总抗氧化能力（T-AOC）和丙二醛（MDA）的含量。结果LBP显著逆转了DES引起的生精损害，睾丸质量显著上升（P <0.05），曲细精管排列有序，生精细胞轮廓清晰。同时LBP显著提高体内SOD和T-AOC含量（P <0.01），降低MDA水平（P <0.01）。给予LBP后各项指标均接近对照组，与补充维生素组没有显著性差异。说明枸杞多糖可有效对抗自由基，抑制脂质过氧化，减弱DES导致的生精损害，提示LBP是缓解环境雌激素生殖毒性的有效成分之一。

日粮高铜对雏鸡法氏囊影响的研究

徐之勇;崔恒敏;彭西;朱奎成;邓俊良;吴强;杨帆;赵丽

畜牧兽医学报, 2008, 39(5): 658-664. doi:

摘要 ( 985 )

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本试验旨在研究高铜对雏鸡法氏囊的影响。选用1日龄艾维茵肉鸡健雏420只，随机分为7组，分别喂以对照日粮(Cu 11 mg/kg)和高铜日粮(Cu 100 mg/kg，高铜Ⅰ组；Cu 200 mg/kg，高铜Ⅱ组；Cu 300 mg/kg，高铜Ⅲ组；Cu 400 mg/kg，高铜Ⅳ组；Cu 500 mg/kg，高铜Ⅴ组；Cu 600 mg/kg，高铜Ⅵ组)6周。结果表明：（1）高铜Ⅰ、Ⅱ组雏鸡法氏囊组织学变化与对照组比较不明显，高铜Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ组雏鸡法氏囊组织结构呈不同程度的病变；（2）高铜Ⅰ、Ⅱ组雏鸡法氏囊质量、生长指数与对照组比较均增高（P＞0.05），高铜Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ组雏鸡法氏囊质量、生长指数均不同程度地降低；（3）高铜Ⅰ、Ⅱ组雏鸡法氏囊细胞周期中增殖指数（PI）在试验期间均高于对照组（P＞0.05），高铜Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ组雏鸡法氏囊细胞周期中增殖指数（PI）不同程度地降低；（4）各高铜组雏鸡法氏囊细胞凋亡率在试验期间与对照组比较均增高，与日粮含铜量呈正相关，其中高铜Ⅰ、Ⅱ组与对照组比较差异均不显著（P＞0.05）。由本试验可见，日粮铜含量在11～200 mg/kg能够促进雏鸡法氏囊的发育，而高于300 mg/kg时不同程度地抑制了雏鸡法氏囊的发育，导致雏鸡体液免疫功能受损。

维拉帕米对肺动脉高压综合征肉鸡心、肺组织中肥大细胞的影响

欧德渊;乔健;张建军;孙茂红;董世山

畜牧兽医学报, 2008, 39(5): 665-671. doi:

摘要 ( 884 )

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为了探索肥大细胞（MC）钙信号系统在肉鸡肺动脉高压综合征（PHS）形成中的作用，采用低温诱发肉鸡PHS，给予钙通道阻断剂（维拉帕米）后，右心导管法测定肉鸡血流动力学，常规阿尔新蓝法显示MC，免疫组化方法显示组胺，利用焦锑酸钾组化电镜技术，观察肺组织MC脱颗粒时胞浆钙沉积现象。结果：（1）维拉帕米组肉鸡肺动脉收缩压和舒张压显著低于低温组；（2）维拉帕米维持右心舒缩功能相对正常，抑制右心肥大；（3）维拉帕米组肺血管壁MC数显著（P＜0.05）高于低温组，心脏MC数极显著（P＜0.01）高于低温组，31和38日龄维拉帕米组肺呼吸毛细管和肺小动脉血管壁MC脱颗粒率也显著（P＜0.05）低于低温组；（4）维拉帕米组肺呼吸毛细管组胺阳性细胞数显著（P＜0.05）高于低温组，血管壁组胺阳性细胞数亦显著（P＜0.05）高于低温组；（5）肺动脉高压综合征肉鸡的脱颗粒MC胞浆中可见Ca2+颗粒沉积，出现Ca2+超载现象。研究表明钙信号参与PHS肉鸡MC的激活，维拉帕米稳定肺和心脏中的MC，防止MC脱颗粒，抑制组胺的释放，同时降低了肺动脉压，这可能是维拉帕米抑制PHS形成的重要机制之一。

双拷贝抑制素基因疫苗pcISI的构建和表达及免疫

曹少先;;邢朝芳;张德坤;舒邓群;杨利国;

畜牧兽医学报, 2008, 39(5): 672-676. doi:

摘要 ( 1542 )

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为构建高免疫原性的卵泡抑制素(Inhibin，INH)DNA疫苗，将INH基因片段α1-32插入到pcIS中乙肝表面抗原(HBsAg) S基因第112~113氨基酸残基密码子之间，构建含2拷贝INH的融合表达质粒pcISI。酶切和测序鉴定表明，重组质粒pcISI构建成功。脂质体包裹法将pcISI转染HeLa细胞，ELISA检测表达产物的INH免疫反应原性。结果表明，融合目的基因在HeLa细胞获得表达，ISI融合蛋白具有比IS融合蛋白更强的INH抗原抗体反应性。将pcISI免疫6只大鼠后，5/6的大鼠产生了抗INH抗体，抗体P/N值在免疫后第2~6周高于pcIS免疫组。这些结果表明，所构建的质粒pcISI可以表达抑制素，表达产物具有较强的免疫原性。

硒添加水平对氧化应激仔猪生产性能和免疫功能影响的研究

袁施彬;余冰;陈代文

畜牧兽医学报, 2008, 39(5): 677-681. doi:

摘要 ( 1342 )

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探讨硒添加水平对氧化应激仔猪生产性能和仔猪免疫功能的影响。48头断奶公猪（未注射猪瘟疫苗）平均分配到4个处理，即基础日粮组和0.2、0.4和0.6 mg/kg的硒添加组，每个处理6个重复，每个重复2头猪，试验期49 d。试验开始时，所有试猪腹腔注射10 mg/kg的敌快死诱导慢性氧化应激，试验21 d采血后，颈部皮下注射猪瘟兔化弱毒疫苗（2头份/头）。结果表明：添加硒可促进氧化应激仔猪生长和增强免疫功能，其中，以06 mg/kg组效果最为突出，表现为全期日增重提高，料肉比降低；淋巴细胞转化率、活性玫瑰花环率和总玫瑰花环率升高；IgG、IgA和IgM提高，猪瘟抗体滴度随着试验期的延长，几乎呈直线上升，在免疫后28 d，阳性保护率达到100%；IL-1β和IL-6下降。添加0.6 mg/kg硒可提高氧化应激仔猪细胞免疫和体液免疫能力，降低由氧化应激引起的细胞因子的异常上升，提高试猪生产性能。

不同种属动物消化道内大豆凝集素免疫活性残留的比较研究

王利民;胡海霞;王涛;秦贵信

畜牧兽医学报, 2008, 39(5): 682-686. doi:

摘要 ( 1284 )

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比较研究大豆凝集素（SBA）在反刍动物（羊）、肉食动物（狗）、啮齿动物（兔）、杂食动物（猪）和禽类（鸡）等不同种属动物消化道不同区段食糜中的免疫活性的残留规律，并探讨SBA对不同种属动物抗营养机制的差异。各种属动物均选取半性成熟雄性8只（头）。日粮中含20%的生大豆和质量分数1%的Cr2O3（外源指示剂），试验期为2周，最后一次进食2 h后，麻醉状态下颈动脉放血，立即取十二指肠、空肠前、空肠中、空肠后、回肠、盲肠、结肠（鸡为结直肠）各肠段内的食糜。食糜和饲料中具有免疫活性的SBA采用竞争性间接抑制ELISA方法检测，食糜和饲料中的Cr采用原子吸收光谱法检测。结果表明，同一种动物不同肠段内的SBA残留率不同，总的趋势是由十二指肠到结肠呈下降趋势，其中由十二指肠到空肠前段的残留率变化均达到显著水平（P＜0.05），各肠段内均能检测到SBA。在不同动物的同一区段肠道内，SBA的残留率随动物的不同而不同，各肠段中SBA的残留率在兔均最低；十二指肠到空肠SBA的残留率在羊和鸡较高、在猪和狗居中；空肠之后在猪、羊和鸡较高。SBA在不同种属动物及其消化道不同部位内的免疫活性残留规律不同，SBA对不同种属动物的抗营养机制和抗营养作用可能不尽相同。

中国标准连	ISSN 0366-6964
续出版物号	CN 11-1985/S

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