畜牧兽医学报

猪HSD11B1和MyoG基因多态性与妊娠期长短的关系

马志刚;李家连;郭万虎;潘晚平;王家圣;韩安勤;丁山河;蒋思文

畜牧兽医学报, 2008, 39(6): 689-695. doi:

摘要 ( 1569 )

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选择HSD11B1和MyoG 2个基因作为影响妊娠期长短的候选基因。在7个中外猪群体中采用PCR-RFLP技术研究了HSD11B1和MyoG 2个基因多态性与妊娠期长短的关系。HSD11B1基因的PCR-Bsh1236Ⅰ-RFLP分析结果表明：清平猪、新清平猪母系、大白猪、长白猪、杜洛克猪、中国瘦肉猪新品系DIV1和DIV2系猪群中A等位基因的频率分别为0.538、0.752、0.522、0.941、1.000、0.889和0.594；除DIV2外，HSD11B1不同基因型与妊娠期长短无显著关系(P>0.05)。MyoG基因的PCR-MspⅠ-RFLP分析结果表明：清平猪、新清平猪母系、大白猪、长白猪、杜洛克猪、中国瘦肉猪新品系DIV1和DIV2系猪群中M等位基因的频率分别为1.000、0.534、0.370、0.115、0.094、0.382和0.243；清平猪中只存在MM基因型，其他群体中3种基因型皆有分布；新清平猪母系MM比NN基因型母猪妊娠期要短，且在经产长白猪中差异极显著（P<0.01）。

牛ACAA1和ACAA2基因多态性及其与生产性状的关联分析

李恒德;王淑辉;许尚忠;高雪;任红艳;陈金宝

畜牧兽医学报, 2008, 39(6): 696-700. doi:

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以鲁西牛、秦川牛、安格斯、海福特和西门塔尔与蒙古牛杂交牛5个品种共178头为试验材料，通过等位基因特异性聚合酶链式反应（AS-PCR）技术，发现牛乙酰辅酶A酰基转移酶1（ACAA1）基因的A1066G（GenBank登录号：EF576938）和A1452G（GenBank登录号：EF576938）2个单核苷酸多态（SNP），其中A1066G突变位于外显子9，是同义突变，A1452G突变位于3′非翻译区（UTR）；发现牛乙酰辅酶A酰基转移酶2（ACAA2）基因的C33119T（GenBank登录号：EF583005）单核苷酸多态，位于内含子8上。对ACAA1基因的2个SNP进行分析没有发现单倍型。2个基因多态性与牛生长性状的关联分析表明：ACAA1基因A1066G突变位点的3种基因型间眼肌面积差异显著（P<0.05），AA型最高，AG型次之，GG型最低；ACAA1基因A1452G突变位点的3种基因型间眼肌面积差异显著（P<0.05），GG型最高，AG型次之，AA型最低；ACAA2基因C33119T突变3种基因型间日增重差异极显著（P<0.01），其中CT型最高，TT型次之，CC型最低；眼肌面积差异显著（P<0.05），其中CC型最高，TT型次之，CT型最低。

中国牛属4个物种MSTN基因的遗传变异研究

冀德君;常洪;常春芳;耿荣庆;李永红

畜牧兽医学报, 2008, 39(6): 701-704. doi:

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针对牛肌肉生长抑制素基因(MSTN)3个外显子区设计引物，通过PCR扩增及测序，以蒙古牛、雷琼牛、独龙牛、巴音郭楞州牦牛共66个样本为材料检测了中国普通牛、瘤牛、大额牛和牦牛4个牛属该基因外显子区核苷酸序列的变异。结果显示，4个中国牛种的MSTN基因外显子1、2和3分别含375、372、381个碱基对，在所检样本中，发现7个核苷酸多态位点，定义17种单倍型；种内核苷酸歧异度(Pi)在0.000 36~0.001 03间，种间核苷酸歧异度（Dxy）在0.000 76~0.003 22间，说明群体内遗传多样性程度低；以单倍型序列为基础构建的分子进化树表明，牦牛的分化早于黄牛中普通牛和瘤牛的分化；大额牛明显分为2个类群，很可能是由于杂交造成的。

中国西南7品种黄牛Y染色体微卫星多态性分析

蔡欣

畜牧兽医学报, 2008, 39(6): 705-708. doi:

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对中国西南地区7个黄牛品种81头公牛在4个Y染色体特异微卫星的多态性进行了研究，发现4个微卫星中只有2个，即UMN2404和UMN0103具有多态性，UMN2404具有普通牛(104、91 bp)和瘤牛(120、110和85 bp)所特有的单倍型，UMN0103也呈现出能够区分普通牛(155、140 bp)和瘤牛(136、125 bp) 的单倍型，2个标记对不同品种或个体的鉴别一致率达到100%。通过对UMN2404和UMN0103的分析揭示了西南地区黄牛中普通牛和瘤牛Y染色体的分布频率，瘤牛Y染色体单倍型频率(72.8%)显著高于普通牛(27.2%)。普通牛Y染色体单倍型频率在西藏牛(100%)和迪庆牛(81.8%)中占有优势；而瘤牛单倍型在西南地区其他牛种群中占有优势 (76.5%~100%)。

5个山羊品种的遗传结构及多样性研究

武艳平;马月辉;韩俊文;赵倩君;何晓红;浦亚斌;关伟军;储明星;李奎

畜牧兽医学报, 2008, 39(6): 709-714. doi:

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用25个微卫星标记，对5个山羊品种进行遗传多样性分析。共检测到199个等位基因，并进行哈代－温伯格平衡检验，5个群体基本处于遗传不平衡状态。在25个座位中，除BMS1943在罕山白绒山羊上（PIC为0.93）表现为中度多态外，其余座位均为高度多态。以等位基因为基础，得出座位的平均杂合度为0.36～0.20之间，群体平均杂合度在0.92～0.38。对各微卫星标记进行F-计分析，Fst的变化范围是从BMC1206的0.11到BMS1943的0.78；群体每代迁移数在2.72～23.15，平均值为8.84。计算了遗传分化系数，结果表明群体间变异程度不高。内蒙的罕山白绒山羊和乌珠穆沁绒山羊有较大的基因流值（15.53），说明其交流比较活跃。计算了共祖遗传距离，并进行了UPGMA和NJ聚类分析，内蒙的罕山白绒山羊和乌珠穆沁绒山羊聚到一起。

PGC-1α基因突变对白洛克鸡肉品质影响的统计分析

安建勇;陈辽;侯卓成;吴桂琴;徐桂云

畜牧兽医学报, 2008, 39(6): 715-720. doi:

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PPAR-γ共激活因子1基因（PPAR-gamma coactivator 1,PGC-1α）对肌肉组织的能量代谢和脂类积累具有重要的调节作用。其开放阅读框中646位点发生的错义突变引起了蛋白序列216位点的天冬氨酸突变成天冬酰胺。本试验选用白洛克肉鸡建立孟德尔分离群体，采集8周龄胸肌肉样，应用TA-XT2型物性分析仪对肌肉品质进行了测定。建立最小二乘模型，对3种基因型的群体进行了统计分析，确定了PGC-1α不同基因型对肌肉品质的影响。结果发现AG基因型个体具有较好的肉品质,肌肉硬度、黏聚性、胶着度、咀嚼度和回复性等性状在不同基因型间存在显著性差异（P<0.05）。对各个指标进行相关性分析，发现硬度和弹性保持率、黏度和嫩度等都存在显著相关。对所有指标进行了主成分分析，确定出6个影响肌肉品质的主成分，其中前3个主成分分别代表了肉的硬度、新鲜度及黏性。

胰岛素、催乳素对奶山羊乳腺上皮细胞泌乳功能的影响

佟慧丽;高学军;李庆章;严云勤

畜牧兽医学报, 2008, 39(6): 721-725. doi:

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具有泌乳功能的乳腺上皮细胞可作为乳腺生长发育及泌乳功能调控机制研究的细胞模型。本研究对已建立的奶山羊乳腺上皮细胞系的泌乳功能进行评价。应用SDS-PAGE、TG试剂盒及HPLC方法对体外培养奶山羊乳腺上皮细胞总蛋白、乳脂和乳糖的分泌情况进行了测定以确定胰岛素、催乳素处理后的奶山羊乳腺上皮细胞的泌乳功能。结果表明：在添加表皮生长因子、胰岛素样生长因子-1、转铁蛋白硒钠、标准胎牛血清的DF12培养液中奶山羊乳腺上皮细胞具有乳脂、乳蛋白及乳糖的分泌能力。胰岛素处理48 h后对细胞的泌乳功能无显著影响，催乳素处理细胞48 h后可使奶山羊乳腺上皮细胞乳蛋白、乳糖分泌能力显著升高。从而建立了具有泌乳功能的奶山羊乳腺上皮细胞系，为奶山羊、奶牛等重要经济动物泌乳机制的研究提供了便利条件。

天祝白牦牛肾组织成纤维细胞系的建立与生物学特性研究

冯若飞;马忠仁;关伟军;李明生;乔自林;冯玉萍;周雪雁

畜牧兽医学报, 2008, 39(6): 726-732. doi:

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采集天祝白牦牛胚胎肾组织，用胰蛋白酶热消化法制备原代细胞，通过差速消化和差速贴壁法继代培养和细胞纯化，扩增至F3代后冷冻保存，并对复苏细胞的形态、活力、生长曲线、荧光蛋白质粒转染表达、核型以及乳酸脱氢酶同工酶等生物学特性进行了分析。结果显示，原代和传代细胞生长形态良好，群体倍增时间为27.2 h；染色体2n=60；二倍体为74%，占主体；乳酸脱氢酶同工酶电泳图谱有明显特征，LDH5浓度较高，活性较强；外源质粒在该细胞中能进行复制和表达；细菌、真菌、病毒、支原体检测呈阴性。表明本研究已成功建立天祝白牦牛肾组织成纤维细胞系，该细胞系的建立，使天祝白牦牛这一国家重要种质资源在细胞水平上得以保存，也为基因组文库和体细胞克隆等研究提供了理想的生物材料。

福美双对肉鸡生长性能和胫骨软骨发育不良组织病理学变化的影响

田文霞;李家奎;毕丁仁;张艳红;覃平

畜牧兽医学报, 2008, 39(6): 733-738. doi:

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用160羽1日龄健康AA肉鸡进行试验，研究福美双对肉鸡生长性能和胫骨软骨发育不良组织病理学变化的影响。将试验肉鸡预饲1周后随机分为2组。对照组饲以基础日粮；试验组饲以基础日粮添加福美双100 mg/kg饲料，4 d后继续饲以基础日粮。试验期23 d。在试验的第4、9、16、23天，计算平均日增重（ADG）和料重比（F/G）；胫骨软骨发育不良（TD）评分，计算TD发病率，观察病理变化；并进行发病不同阶段组织病理学观察。结果表明，第4天试验组肉鸡TD发病率达到94.44%，料重比增加；第4和第9天肉鸡体增重显著下降，病理剖检症状典型。不同阶段组织病理学观察表明，福美双可促进软骨细胞极剧增殖，引起细胞大量死亡，挤压血管以致血管坏死，基质合成受阻，延缓软骨钙化，最终导致前肥大细胞大量聚集形成软骨栓。因此，对肉鸡短期饲喂福美双100 mg/kg可显著影响AA肉鸡生长性能，提高TD发病率，引起与自然发生TD相同的形态学和组织病理学变化，是一个较为理想的研究TD发生发展、筛选各种微营养素预防TD的试验动物模型。

乳酸菌添加剂对禾本科混合牧草青贮发酵特性的影响

刘晗璐;桂荣;塔娜

畜牧兽医学报, 2008, 39(6): 739-745. doi:

摘要 ( 1473 )

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选用分离于青贮原料牧草天然附着的植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）和蒙氏肠球菌（Enterococcus mundtii）作为添加剂，进行披碱草和老芒麦混合牧草青贮发酵特性的研究。试验分4个处理：球菌组(Em)、杆菌组(Lp)、球菌+杆菌组(EL) 、对照组（Con，不添加）。实验室常温发酵。试验期60 d。结果表明：（1）与Con组相比，Em、Lp以及EL组均明显降低青贮pH（P<0.05）。（2）Em与Lp以及EL组都明显增加乳酸含量（P<0.05），以及乳酸与乙酸的比值，其中EL组增加效果最显著（P<0.05）；此外3个添加组丙酸及丁酸的含量明显下降（P<0.05）。（3）EL组显著降低青贮中NH₃-N含量（P<0.05），Em、Lp组也有降低的趋势，但未达显著水平（P>0.05）。（4）添加乳酸菌可以降低青贮DM的损失量，与对照组相比Em、Lp以及EL组DM的损失量分别降低了38.4%、43.4%、23.4%。综上所述添加乳酸菌可以改善试验牧草青贮发酵品质，球菌+杆菌组(EL组)对试验牧草青贮品质改善效果最优。

转录靶向猪瘟病毒3′-UTR shRNA细胞株干扰猪瘟病毒增殖的检测

郭抗抗;徐浩;张彦明;张为民;冶贵生;熊奎州;谢林红;党如意

畜牧兽医学报, 2008, 39(6): 746-751. doi:

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对筛选的转录猪瘟病毒石门株3′-UTR shRNA的PK-15细胞株P-1（114~132位）、P-2（136~154位）和P-3（209~227位）分别接种猪瘟病毒（CSFV），在接毒后第72和96小时用半定量反转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）检测CSFV NS3基因及β-actin基因，以研究构建细胞株在转录水平上对CSFV增殖干扰的效果；接毒后第72、96和148小时以酶联免疫吸附试验（ELISA）方法检测细胞NS3蛋白表达量，通过OD₄₉₀值分析构建细胞株在病毒蛋白表达水平上对CSFV增殖的影响。检测结果表明：（1）接毒后第72和96小时 P-1、P-2和P-3细胞株中NS3基因的量明显减少，与接毒的空白PK-15细胞比较差异显著(P<0.05)，说明P-1、P-2和P-3细胞株转录的shRNA能干扰CSFV RNA的转录；（2）接毒后第72和96小时 P-1、P-2、P-3细胞株中NS3蛋白的表达量明显少于接毒的PK-15细胞(P<0.05)，说明转录的shRNA在病毒蛋白水平上能干扰CSFV NS3基因的表达，但接毒后第148小时干扰效果有所降低。

实时荧光定量PCR检测H1N1亚型猪流感病毒

段廷云;;陈红英;崔保安;魏战勇;李新生;王学斌

畜牧兽医学报, 2008, 39(6): 752-756. doi:

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根据GenBank中H1N1亚型猪流感病毒NP基因的序列(DQ889686)，利用Premier express设计并合成1对引物和相应的TaqMan探针，从猪流感病毒HN407株接种的鸡胚尿囊液中提取总RNA，经RT-PCR扩增NP基因。将鉴定正确的NP基因片段克隆入pGEM-T Easy 载体中，转化大肠杆菌JM109，经PCR及测序鉴定后得到阳性重组质粒。以该阳性重组质粒为荧光定量PCR标准品模板建立标准曲线。对探针浓度、引物浓度、镁离子浓度和退火温度进行优化，建立了最佳的荧光定量PCR反应体系和扩增程序。经临床应用表明荧光定量PCR的建立为早期诊断猪流感病毒、定量分析猪流感病毒感染程度奠定了基础。

鹅细小病毒非结构蛋白和结构蛋白B细胞线性抗原表位的鉴定

于天飞;;仇铮;马波;袁率珍;;李俚;王君伟

畜牧兽医学报, 2008, 39(6): 757-763. doi:

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鹅细小病毒是小鹅瘟的病原体，其基因组含有2个主要开放阅读框（ORF），分别编码非结构蛋白（NS）和结构蛋白（VP）。为了对这2种蛋白进行抗原表位作图，设计了34个覆盖非结构蛋白NS和结构蛋白VP的50~60个氨基酸残基的重叠短肽，并进行了融合表达。用攻毒10周龄鹅血清对这34个融合蛋白进行蛋白质印迹分析，结果鉴定出NS蛋白线性抗原表位位于C末端的453-627氨基酸区域；VP蛋白线性抗原表位位于35—198、423—491、531—595、616—669和678—732氨基酸区域。

鸭病毒性肿头出血症病毒人工感染鸭的病理学观察

李传峰;程安春;汪铭书;沈婵娟;张舍郁;周毅;陈孝跃;

畜牧兽医学报, 2008, 39(6): 764-770. doi:

摘要 ( 890 )

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72只28日龄樱桃谷鸭肌注感染鸭病毒性肿头出血症病毒（DSHDV），于不同阶段解剖感染鸭和发病死亡鸭，应用光镜和电镜观察各器官的组织学和超微结构变化。结果：①光镜：感染前期（2~72 h）各组织充血、出血，并伴有数量不等的炎性细胞浸润；后期（119~170 h）免疫器官（脾脏、胸腺、法氏囊、哈德氏腺）、消化器官（肝、胰）、肾、大脑组织细胞坏死或出现大小不等的坏死灶；消化道（食管、腺胃和各段肠管）和气管黏膜上皮细胞完全坏死脱落，固有膜严重充血、出血；心脏肌纤维间弥漫性出血，肺脏和胸肌组织小血管充血。②电镜：主要表现为细胞核空化，胞质内各种细胞器肿胀、扩张，甚至溶解、消失，有的形成含有较多病毒粒子的“封入体”。研究表明法氏囊、胸腺、脾脏、肝脏、消化道和气管为DSHDV感染的主要靶器官。肝细胞、淋巴细胞、成纤维细胞、胆管上皮细胞、消化道上皮细胞为DSHDV侵害的靶细胞。

猪支气管黏膜上皮细胞的分离培养和传代研究

孙裴;张彦明;杨小云;温元鹏;张浩;何建锋;郭抗抗;党如意

畜牧兽医学报, 2008, 39(6): 771-777. doi:

摘要 ( 945 )

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利用气管-支气管扎结灌注酶冷消化法分离气管黏膜上皮细胞，比较胰蛋白酶和链霉蛋白酶消化效果，并研究含不同细胞生长因子和血清浓度的培养体系来寻找经济、易重复的气管上皮细胞最适培养技术。用抗8/18细胞角蛋白免疫组化法鉴定气管上皮细胞，用流式细胞仪检测细胞凋亡来分析本研究中气管上皮细胞最大传代次数。研究结果表明胰蛋白酶消化气管所得的目的细胞量小、活性差、细胞贴壁和生长困难，链霉蛋白酶灌注冷消化法可获得数量大、活性高、纯度好的目的细胞；基础的上皮细胞培养体系中含低浓度血清、转铁蛋白和人表皮生长因子可以有效保证气管上皮原代和传代生长。本研究所分离的气管上皮细胞可连续传到第6代，传代细胞活性好、纯度高，可为进一步的气管上皮细胞永生化研究提供材料和奠定技术基础。

脱氧雪腐镰刀菌烯醇诱导血管内皮细胞凋亡及其凋亡相关因子的初步研究

刘秀芳;张爱华;张洪英;何成华;樊彦红;张海彬

畜牧兽医学报, 2008, 39(6): 778-783. doi:

摘要 ( 902 )

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脱氧雪腐镰刀菌烯醇（DON）是由镰刀菌属病原真菌产生的真菌毒素之一，在自然界广泛存在，可引起人畜中毒。为了解DON对血管内皮细胞的危害及其可能机制，本试验采用不同浓度的DON （0.25 ～10 μg/mL）作用于猪髋动脉内皮细胞（PIEC）和人脐静脉内皮细胞（HUVEC）2种细胞 24 h，倒置显微镜下观察其形态变化，MTT法测定细胞增殖的变化，TUNEL法检测细胞凋亡率，免疫组织化学染色方法测定细胞凋亡过程中Caspase-9和Bax表达的变化。结果显示，高浓度DON可明显改变细胞的形态；不同浓度的 DON均可抑制细胞的增殖；TUNEL凋亡检测结果显示，不同浓度的DON对这2种细胞均有诱导凋亡的作用；对于PIEC细胞，在DON浓度为0.5 μg/mL时，凋亡率达到最高(71.74%)；HUVEC细胞则在DON浓度为5 μg/mL时，凋亡率达到最高 (26.61%)，此后随浓度的升高，凋亡率下降，可能与凋亡细胞崩解脱离细胞片有关。根据试验结果初步推断，DON诱导PIEC凋亡可能与Caspases途径有关，Bax 在其中起到了一定的凋亡促进作用；而在诱导HUVEC细胞凋亡的过程中未检测到Caspase-9和Bax的变化，故认为DON诱导HUVEC细胞凋亡与Caspases途径和促凋亡因子Bax均无关。

荧光定量RT-PCR检测鸡CD4、CD8基因表达水平

岳华;黄兴;杨发龙;李明义;范根成;马莉;汤承

畜牧兽医学报, 2008, 39(6): 784-790. doi:

摘要 ( 956 )

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白细胞分化抗原CD4和CD8在机体免疫应答及其信号传递过程中发挥着重要作用。本试验建立了定量检测鸡CD4和CD8 mRNA表达水平的SYBR Green I实时荧光定量RT-PCR（RRT-PCR）方法，并采用该方法对26～50日龄商品鸡外周血淋巴细胞（PBL）中CD4和CD8 mRNA表达水平进行了检测。结果显示：所建立的RRT-PCR对CD4和CD8 mRNA的扩增效率分别为93%和91%；线性范围分别在10-4～10-9和 10-3～10-9；相关系数分别为0.998 0和0.999 9；最低分别能检测105和120拷贝；熔解曲线分别在78.2和86.7℃附近出现1个单特异峰；组内变异系数分别在1.13%～2.15%和1.17%～3.68%，组间变异系数分别在1.16%～3.25%和1.66%～2.86%。26～50日龄鸡PBL CD4和CD8的 mRNA表达水平有小幅波动，与采用流式细胞术检测结果的报道一致。本试验建立的RRT-PCR方法敏感性高、稳定性和再现性好，为检测鸡CD4、CD8 基因表达水平提供了精确定量的新方法。

氟对体外培养的小鼠成骨细胞中OPG/RANKL mRNA表达的影响

王建舫;张国中;吴培福;曲伟杰;赵继勋;韩博;赵德明

畜牧兽医学报, 2008, 39(6): 791-796. doi:

摘要 ( 912 )

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为了观察氟对体外培养的小鼠成骨细胞中OPG /RANKL mRNA表达的影响，取30只出生24 h以内的昆明小鼠，无菌条件下取其头盖骨，去除筋膜和结缔组织，用胰蛋白酶-胶原酶消化法进行原代成骨细胞的培养。取其第2代成骨细胞，分成试验组和对照组，试验组培养液中分别加入不同浓度的氟化钠（10^-12、10^-11、10^-10、10^-9、10^-8 mol/L），培养40 h，收集细胞板中贴壁的细胞提取总RNA，采用荧光定量RT-PCR法检测细胞中OPG/RANKL mRNA的变化。结果试验组中OPG /RANKL mRNA的比值显著升高，且随着氟化钠浓度的增加先升高，后降低，10^-10mol/L氟化钠达到最大值(P<0.01)。说明微量氟可以减少破骨细胞的成熟分化，使骨吸收能力减弱，相应地增加了骨形成的过程。

高铜对雏鸭胸腺影响的病理学研究

杨帆;赵丽;彭西;邓俊良;崔恒敏

畜牧兽医学报, 2008, 39(6): 797-803. doi:

摘要 ( 986 )

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本文旨在研究高铜对雏鸭胸腺的病理学影响。选用1日龄天府肉鸭360只，随机分为6组，分别喂以对照日粮(Cu 8 mg/kg)和高铜日粮(Cu 100 mg/kg，高铜Ⅰ组；Cu 200 mg/kg，高铜Ⅱ组；Cu 400 mg/kg，高铜Ⅲ组；Cu 600 mg/kg，高铜Ⅳ组；Cu 800 mg/kg，高铜Ⅴ组)6周。与对照组比较，高铜Ⅲ组、高铜Ⅳ组、高铜Ⅴ组雏鸭胸腺出现不同程度的病变，生长指数显著降低（P<0.05或P<0.01），淋巴细胞的静止期增长及增殖指数明显下降（P<0.05或P<0.01），淋巴细胞的调亡率显著升高（P<0.05或P<0.01）；高铜Ⅰ组和高铜Ⅱ组雏鸭胸腺上述指标变化不明显。结果表明，日粮铜含量高于400 mg/kg时，不同程度地抑制雏鸭胸腺的发育，导致雏鸭细胞免疫功能受损。

犬穿透性角膜移植术后血清TNF-α、IL-2和β-EP的动态变化

周庆国;刘为民;侯加法

畜牧兽医学报, 2008, 39(6): 804-809. doi:

摘要 ( 919 )

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为了解犬穿透性角膜移植术后的免疫排斥反应、炎症反应与疼痛反应，在选择11只6~12月龄、体重为4.0~6.5 kg的西施犬、北京犬和小型杂交犬进行穿透性角膜移植后，每天观察受体犬的全身及眼部表现，并于术后30 d内每5 d和30 d后每10 d采集1次受体犬外周静脉血，应用放射免疫法检测血清中的TNF-α、IL-2与β-EP含量，研究其动态变化。试验结果显示，术后第5-10天各受体犬血清TNF-α、IL-2、β-EP含量均表现不同程度的升高；从术后第15天开始，受体犬血清TNF-α、IL-2、β-EP含量则受多种因素影响而发生不同变化。研究结果表明，犬同种异体穿透性角膜移植和术后局部使用地塞米松，基本不出现亚急性免疫排斥反应或排斥反应程度很轻，术后血清TNF-α含量的动态变化不宜用于免疫排斥反应的早期预测及诊断；犬同种异体穿透性角膜移植后，血清IL-2含量可随眼部炎症程度的改变而发生相应变化，术后监测其变化可作为判断角膜移植术后炎症程度及其转归的重要指标；角膜创伤及其表面线结可引起犬的疼痛反应和血清β-EP含量显著升高，术后监测血清β-EP含量的动态变化能够准确反映角膜移植后犬对角膜疼痛的应激程度。

中药复方对热刺激小鼠脾脏IFN-γ、IL-4含量的影响

陈韩英;陈文云;刘丽梅;陈琳;王瑞海;许剑琴;刘凤华

畜牧兽医学报, 2008, 39(6): 810-813. doi:

摘要 ( 888 )

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用ELISA 法测定了中药复方对热刺激小鼠脾脏IFN-γ 和IL-4 水平的影响。结果，高温对照组IFN-γ、IL-4 和IL-4/IFN-γ 上升，中药复方组IFN-γ 从热刺激后第1天显著上升，第3天达高峰，第6天下降到常温对照组水平；IL-4 在第1天显著下降，然后回升，第6天显著升高，第10天下降，接近常温对照组水平；IL-4/IFN-γ 第1天显著降低，然后逐步回升。研究表明，热刺激会引起小鼠脾脏IFN-γ、IL-4 水平的紊乱，中药复方有显著的调节作用，从而促进免疫功能的恢复。

四君子汤发酵液的抗肿瘤作用及其对荷瘤小鼠免疫功能的影响

韩春杨;林德贵;刘翠艳;郭顺星

畜牧兽医学报, 2008, 39(6): 814-818. doi:

摘要 ( 884 )

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本试验研究了四君子汤发酵液对S180肿瘤模型小鼠的抗肿瘤作用和对免疫功能的影响。采用血清溶血素法检测荷瘤小鼠体液免疫功能；MTT比色法检测淋巴细胞的增殖和流式细胞术检测T细胞亚群。结果表明，四君子汤发酵液具有明显的抑制肿瘤生长的作用，并且可以增强环磷酰胺（CTX）的抗肿瘤作用，降低CTX免疫抑制的副作用。四君子汤发酵液可以提高免疫器官指数；对肿瘤小鼠脾淋巴细胞转化、血清抗体产生都有促进作用；可以明显提高模型小鼠CD3⁺ 和CD8⁺T淋巴细胞水平，降低由于肿瘤引起的CD4⁺/CD8⁺ T淋巴细胞比值的升高，与模型组比较差异显著（P <0.05）。研究表明四君子汤发酵液的抗肿瘤作用和增强机体免疫调节功能有关。

鸭A-FABP基因的克隆及其组织表达

张军;董飚;张红;储冬生;徐国庆;龚道清;段修军;赵旭庭;顾志良

畜牧兽医学报, 2008, 39(6): 819-822. doi:

摘要 ( 935 )

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本文采用RT-PCR方法从35周龄母鸭脂肪组织中克隆了A-FABP基因的cDNA序列，其长度为422 bp，包含了1个399 bp的完整CDS，编码132个氨基酸。该序列与家禽（鹅、鸡）和哺乳动物（人、小鼠、猪、牛）的AFABP基因序列约有94％和73.4%～75.7%的同源性，而相应氨基酸序列的同源性为92.4%和72.0% ～77.3％。半定量RT-PCR研究结果为A-FABP基因在间脑、肺和肾组织中不表达，在脂肪组织中的表达明显高于其他组织(P<0.5)。表明A-FABP基因在动物进化中具有高度保守性，该基因的表达具有组织特异性。

浙东白鹅催乳素受体基因的克隆及其表达特点的研究

褚晓红;胡锦平;卢立志;王亚琴;陈维虎;徐宁迎

畜牧兽医学报, 2008, 39(6): 823-826. doi:

摘要 ( 887 )

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本研究克隆了浙东白鹅催乳素受体基因（PRLR）的部分序列，并应用荧光定量PCR技术研究了浙东白鹅在产蛋期、就巢期和恢复期时PRLR基因在下丘脑、垂体和卵巢中的表达特点，结果表明，浙东白鹅PRLR基因的表达量在产蛋期、就巢期和恢复期差异显著（P<0.05），就巢期表达量最高，产蛋期次之，恢复期表达量最低。对不同组织PRLR的表达量分析，垂体最多，其次是下丘脑，卵巢中的表达量最低，垂体与卵巢中的表达量、卵巢与下丘脑的表达量均有极显著的差异（P<0.01），垂体与下丘脑中的表达量差异不显著(P>0.05)。

环境高温对两品种肉鸡生长、胴体性状及脂肪沉积的影响

卢庆萍;文杰;张宏福

畜牧兽医学报, 2008, 39(6): 827-831. doi:

摘要 ( 1624 )

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选择体重相近、健康的5周龄AA肉鸡公鸡和北京油鸡公鸡各108只，评价持续高温对其生产性能、胴体组成、脂肪沉积的影响，比较其对高温耐受性的差异。试验设3个处理：34℃持续高温，自由采食（试验组，34AL）； 21℃适温，自由采食（适温对照组，21AL）；21℃适温，采食量与34AL组相同（采食配对组，21PF）。所有仔鸡在人工环控舱饲养至8周龄试验结束。结果表明： AA肉鸡在持续高温下的采食量比适温对照组降低45％（P<0.001），日增重由61.45 g/d降至22.29 g/d（P<0.001），饲料利用率明显降低（P<0.05）。对北京油鸡而言，热暴露虽然也使采食量大幅下降（下降幅度为20％，P<0.001），但日增重却没有受到高温的影响，饲料利用率明显提高（P<0.05）。北京油鸡在试验期间无一死亡，而高温处理的AA肉鸡死亡率高达36％。与适温对照组相比，高温试验组AA肉鸡的胸肌率明显下降（P<0.05），肌间脂肪和皮下脂肪的沉积率明显降低（P<0.01），腹脂沉积率无明显变化（P>0.05）。北京油鸡胸肌率未受到高温的影响，但热暴露北京油鸡腹脂沉积率明显高于适温对照组（P<0.05），肌间脂肪和皮下脂肪的沉积相对稳定（P>0.05）。研究表明，北京油鸡对高温表现出极高的耐受性，在持续34℃高温下正常的生长、发育没有受到影响；AA肉鸡在持续34℃高温下，正常的生长、发育被极大程度地破坏，死亡率高。北京油鸡适应高温的调节机制可能与其在高温下腹脂沉积增加及饲料利用率提高有关。

TGF-β₁基因真核表达载体的构建及在猪脐静脉内皮细胞中的表达

王文秀;邓文;张彦明;代晨;熊奎州;谢林红;温元鹏

畜牧兽医学报, 2008, 39(6): 832-836. doi:

摘要 ( 831 )

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应用RT-PCR技术从猪外周血单个核细胞扩增转化生长因子β₁（Transforming growth factor-β₁，TGF-β₁）全基因，构建含有TGF-β₁基因及EGFP报告基因的真核表达质粒pEGFP-C1-TGF-β₁。采用脂质体法转染体外培养的猪脐静脉内皮细胞（SUVECs）后，通过直接荧光观察pEGFP-C1-TGF-β₁融合蛋白在细胞中的分布定位，并通过RT-PCR、间接免疫荧光方法检测TGF-β₁基因在SUVECs中的表达。结果在转染后1周观察到绿色荧光，RT-PCR、间接免疫荧光法检测TGF-β₁表达均为阳性。本研究成功构建了含有绿色荧光蛋白基因的真核表达载体pEGFP-C1-TGF-β₁，且TGF-β₁基因在SUVECs中获得表达。

猪链球菌种及其主要致病血清型多重PCR检测方法的建立

王花茹;;王长军;唐家琪;陆承平;潘秀珍;郭恒彬

畜牧兽医学报, 2008, 39(6): 837-841. doi:

摘要 ( 905 )

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根据猪链球菌谷氨酸脱氢酶基因和血清型1型、2型、1/2型、7型、9型和14型的荚膜多糖编码基因核酸序列，分别设计猪链球菌种和血清型特异性引物，建立并优化多重PCR检测方法，检测分析种属背景明确的73株菌株(其中猪链球菌49株、其他对照菌株24株)及临床分离样本94株（包括四川资阳临床分离样本45株）。其中73株种属背景明确菌株多重PCR种检测结果符合率为87.5%，6种主要致病血清型检出率可达100%。24株对照菌株在种和血清型检测均为阴性。对45株四川猪链球菌病暴发现场分离菌株进行检测，其中41株为猪链球菌2型。上述结果提示建立的多重PCR方法对猪链球菌种及主要致病血清型的检测具有较好的特异性和敏感性，可用于猪链球菌病的快速诊断和流行病学调查。

绵羊黏膜趋化因子CCL28基因的克隆、序列分析与原核表达

乔新安;李宏基;王月影;朱彦彩;韩立强;杨国宇;王艳玲

畜牧兽医学报, 2008, 39(6): 842-847. doi:

摘要 ( 1052 )

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利用同源序列克隆原理设计1对克隆引物，从绵羊结肠黏膜组织提取mRNA，通过RT-PCR获得CCL28 基因，将PCR产物克隆、测序，并进行序列分析；再根据克隆的序列设计1对表达引物，用PCR法从重组克隆载体中扩增出含BamHⅠ/XhoⅠ酶切位点的CCL28片段，双酶切后亚克隆至pGEX-4T-1载体，构建重组原核表达载体pGEX-CCL28，转化宿主菌E.coli BL21(DE3)，经IPTG诱导进行表达，SDS-PAGE鉴定。克隆的绵羊CCL28基因包含完整的开放阅读框，克隆片段长444 bp，ORF为387 bp，编码129个氨基酸，与人、小鼠、猪、牛该基因的同源性分别为76.4％、61.4%、84.3%和92.9%，推测的氨基酸序列与人、小鼠、猪、牛的同源性分别为76％、63%、84%和93%，表达的融合蛋白分子量约为39 ku，并以包涵体形式存在。为下一步研究绵羊CCL28的生物学功能奠定基础。

中国标准连	ISSN 0366-6964
续出版物号	CN 11-1985/S

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