鸡肉品质是决定肉鸡生产效益的重要因素之一。近年来，白条纹鸡肉（white striping，WS）和木质化鸡胸肉（woody/wooden breast，WB）两种新型肌肉缺陷问题因其出现概率高、影响范围大，正受到业界的广泛关注。WS是指肌肉表面出现平行于肌纤维的白色脂肪沉积条纹，WB主要表现为胸肉明显硬化。这两种肌肉缺陷问题表现出类似的组织学特征，并且常常共同出现。WS和WB的出现严重影响了屠宰鸡肉及分割产品的外观、营养品质以及加工特性，给肉鸡产业造成了严重的经济损失。目前，WS和WB的特征、性质及发生机理方面已取得较大进展，但大多数研究为国外团队报道，国内相关报道较少。本文针对WS和WB的病理学特征、品质特性以发生机理等方面相关研究进展进行综述，旨在为后续研究提供基础理论支撑及参考。

鸡肉品质是决定肉鸡生产效益的重要因素之一。近年来，白条纹鸡肉（white striping，WS）和木质化鸡胸肉（woody/wooden breast，WB）两种新型肌肉缺陷问题因其出现概率高、影响范围大，正受到业界的广泛关注。WS是指肌肉表面出现平行于肌纤维的白色脂肪沉积条纹，WB主要表现为胸肉明显硬化。这两种肌肉缺陷问题表现出类似的组织学特征，并且常常共同出现。WS和WB的出现严重影响了屠宰鸡肉及分割产品的外观、营养品质以及加工特性，给肉鸡产业造成了严重的经济损失。目前，WS和WB的特征、性质及发生机理方面已取得较大进展，但大多数研究为国外团队报道，国内相关报道较少。本文针对WS和WB的病理学特征、品质特性以发生机理等方面相关研究进展进行综述，旨在为后续研究提供基础理论支撑及参考。

外泌体是体内多种细胞分泌的一种囊泡，包含蛋白质、脂质和核酸等物质，发挥信号传导、免疫调控、代谢物清除及凝血等功能。外泌体可能是细胞间信息传递的重要纽带，寄生虫与宿主间存在复杂的信息交流，寄生虫可以通过分泌外泌体将生物活性物质转移到宿主细胞中，调控宿主免疫，介导寄生虫的免疫逃逸。以外泌体作为药物载体，可以阻断寄生虫在宿主细胞内的转移或增强宿主的免疫能力，为寄生虫病的预防和治疗提供新的契机，进而打破目前化学合成药物在畜禽生产中滥用的现状，减少药物残留，提高畜产品质量安全。笔者综述了外泌体的形成、组分以及不同寄生虫来源外泌体的生物学作用，以期为畜禽养殖业中以外泌体作为研究切入点的寄生虫病的诊断和治疗奠定基础。

外泌体是体内多种细胞分泌的一种囊泡，包含蛋白质、脂质和核酸等物质，发挥信号传导、免疫调控、代谢物清除及凝血等功能。外泌体可能是细胞间信息传递的重要纽带，寄生虫与宿主间存在复杂的信息交流，寄生虫可以通过分泌外泌体将生物活性物质转移到宿主细胞中，调控宿主免疫，介导寄生虫的免疫逃逸。以外泌体作为药物载体，可以阻断寄生虫在宿主细胞内的转移或增强宿主的免疫能力，为寄生虫病的预防和治疗提供新的契机，进而打破目前化学合成药物在畜禽生产中滥用的现状，减少药物残留，提高畜产品质量安全。笔者综述了外泌体的形成、组分以及不同寄生虫来源外泌体的生物学作用，以期为畜禽养殖业中以外泌体作为研究切入点的寄生虫病的诊断和治疗奠定基础。

旨在探究影响肌纤维性状的候选基因和信号通路。本研究以马身猪和大白猪为研究对象，采用HE染色法分析6月龄马身猪和大白猪背最长肌肌纤维直径和密度，利用RNA-Seq分析马身猪和大白猪背最长肌组织中基因表达情况，并对差异表达基因进行GO和KEGG富集分析，再通过qRT-PCR验证RNA-Seq结果的准确性。结果显示，马身猪背最长肌肌纤维直径极显著低于大白猪（P<0.01），而肌纤维密度极显著高于大白猪（P<0.01）。转录组测序结果显示，在6月龄马身猪和大白猪背最长肌中，差异倍数在2倍以上的基因共105个，其中，马身猪相对于大白猪上调的基因有55个，下调的基因有50个。GO富集分析表明，差异表达基因主要富集在与线粒体相关的细胞组分和骨骼肌分化有关的生物学过程中；KEGG分析结果显示，这些差异表达基因主要参与到与氧化磷酸化有关的信号途径。qRT-PCR和RNA-Seq对6个DEGs表达情况的检测结果表明它们的表达趋势相同，说明RNA-Seq结果准确可靠。结合差异基因表达丰度、GO和KEGG富集分析结果，本研究发现，MYL3、MYH3、MYH6基因通过影响肌纤维的组成而影响肌纤维特性，ND6基因通过参与线粒体氧化磷酸化过程影响肌纤维类型，MICU2基因通过维持线粒体Ca²⁺浓度的稳态影响细胞功能，编码转录因子的EGR1和FOS基因通过调节细胞增殖、分化和凋亡等过程影响肌肉生长发育。本研究初步揭示了造成马身猪和大白猪肌纤维性状差异的主要原因，为猪肉品质的改善提供了相应的理论依据。

旨在探究影响肌纤维性状的候选基因和信号通路。本研究以马身猪和大白猪为研究对象，采用HE染色法分析6月龄马身猪和大白猪背最长肌肌纤维直径和密度，利用RNA-Seq分析马身猪和大白猪背最长肌组织中基因表达情况，并对差异表达基因进行GO和KEGG富集分析，再通过qRT-PCR验证RNA-Seq结果的准确性。结果显示，马身猪背最长肌肌纤维直径极显著低于大白猪（P<0.01），而肌纤维密度极显著高于大白猪（P<0.01）。转录组测序结果显示，在6月龄马身猪和大白猪背最长肌中，差异倍数在2倍以上的基因共105个，其中，马身猪相对于大白猪上调的基因有55个，下调的基因有50个。GO富集分析表明，差异表达基因主要富集在与线粒体相关的细胞组分和骨骼肌分化有关的生物学过程中；KEGG分析结果显示，这些差异表达基因主要参与到与氧化磷酸化有关的信号途径。qRT-PCR和RNA-Seq对6个DEGs表达情况的检测结果表明它们的表达趋势相同，说明RNA-Seq结果准确可靠。结合差异基因表达丰度、GO和KEGG富集分析结果，本研究发现，MYL3、MYH3、MYH6基因通过影响肌纤维的组成而影响肌纤维特性，ND6基因通过参与线粒体氧化磷酸化过程影响肌纤维类型，MICU2基因通过维持线粒体Ca²⁺浓度的稳态影响细胞功能，编码转录因子的EGR1和FOS基因通过调节细胞增殖、分化和凋亡等过程影响肌肉生长发育。本研究初步揭示了造成马身猪和大白猪肌纤维性状差异的主要原因，为猪肉品质的改善提供了相应的理论依据。

旨在进一步阐明GnIH和VIP基因在绵羊季节性发情和繁殖调控中的作用。本研究选取短光照（模拟繁殖季节）和长光照（模拟休情期）下成年苏尼特母羊各3只及卵泡期和黄体期的小尾寒羊母羊各3只，同时选取短光照第21天和长光照第3、15、21、42、49天共6个不同光照时间点的成年苏尼特母羊各3只，屠宰后采集其性腺轴组织（下丘脑、垂体、松果体、卵巢、输卵管、子宫体），利用qPCR技术分析GnIH和VIP基因mRNA表达规律。结果表明，GnIH和VIP基因在2个绵羊品种上述各组织中均表达，且在下丘脑中的表达量较高；苏尼特羊下丘脑中2个基因在长光照条件下的表达量均极显著高于短光照条件（P<0.01）；在小尾寒羊下丘脑组织中，黄体期VIP基因的表达量显著高于卵泡期（P<0.05），黄体期GnIH基因的表达量稍高于卵泡期，但差异不显著（P>0.05）。由短光照转至长光照时，苏尼特羊下丘脑中GnIH和VIP基因表达上升，至长光照第3天时，2个基因表达均达到峰值，之后呈下降趋势。本研究揭示了GnIH和VIP基因在季节性发情和常年发情成年绵羊性腺轴各组织中的定量表达特征，不同光照条件和不同繁殖时期绵羊下丘脑中这2个基因的表达变化进一步提示了GnIH和VIP基因参与绵羊季节性发情调控和发情时期转换；在短光照转至长光照过程中，GnIH和VIP基因主要在长光照前3 d发挥关键作用。

旨在进一步阐明GnIH和VIP基因在绵羊季节性发情和繁殖调控中的作用。本研究选取短光照（模拟繁殖季节）和长光照（模拟休情期）下成年苏尼特母羊各3只及卵泡期和黄体期的小尾寒羊母羊各3只，同时选取短光照第21天和长光照第3、15、21、42、49天共6个不同光照时间点的成年苏尼特母羊各3只，屠宰后采集其性腺轴组织（下丘脑、垂体、松果体、卵巢、输卵管、子宫体），利用qPCR技术分析GnIH和VIP基因mRNA表达规律。结果表明，GnIH和VIP基因在2个绵羊品种上述各组织中均表达，且在下丘脑中的表达量较高；苏尼特羊下丘脑中2个基因在长光照条件下的表达量均极显著高于短光照条件（P<0.01）；在小尾寒羊下丘脑组织中，黄体期VIP基因的表达量显著高于卵泡期（P<0.05），黄体期GnIH基因的表达量稍高于卵泡期，但差异不显著（P>0.05）。由短光照转至长光照时，苏尼特羊下丘脑中GnIH和VIP基因表达上升，至长光照第3天时，2个基因表达均达到峰值，之后呈下降趋势。本研究揭示了GnIH和VIP基因在季节性发情和常年发情成年绵羊性腺轴各组织中的定量表达特征，不同光照条件和不同繁殖时期绵羊下丘脑中这2个基因的表达变化进一步提示了GnIH和VIP基因参与绵羊季节性发情调控和发情时期转换；在短光照转至长光照过程中，GnIH和VIP基因主要在长光照前3 d发挥关键作用。

旨在估计鸭颈椎、胸椎及相关性状的遗传参数，为未来选育北京鸭鸭脖与胸肌率性状提供依据。本试验以北京鸭×绿头野鸭F2代资源群体405只鸭（50♂、355♀）为研究材料，于49周龄屠宰，统计颈椎数、胸椎数、体长、体重、颈长、颈重、颈围、颈长/体长、颈重率、龙骨长、胸肌重和胸肌率，使用MTDFREML软件估计各性状的遗传参数。研究表明，颈、胸椎数变异在不同群体之间有所差异。鸭的颈椎数、胸椎数、体长、体重、颈长、颈重、颈围、颈长/体长、颈重率、龙骨长、胸肌重和胸肌率的遗传力分别是0.08、0.65、0.49、0.47、0.36、0.45、0.38、0.18、0.43、0.55、0.40和0.48。颈椎数和颈长、颈重、颈重率之间存在显著的正向遗传相关（0.40、0.13和0.23）和表型相关（0.29、0.17和0.19），颈椎数对鸭的颈长、颈重、颈重率均有显著影响（P<0.05）。胸椎数与龙骨长、胸肌率之间不存在显著遗传相关（0.01、0.03）和表型相关（0.05、-0.05），胸椎数对鸭的龙骨长、胸肌率均无显著影响（P>0.05）。而龙骨长和胸肌重、胸肌率之间有显著的正向遗传相关（0.72、0.11）和表型相关（0.49、0.32）。结果表明，鸭群体中存在颈、胸椎数目变异；通过选择增加群体的颈椎数量可以提高鸭脖的重量；选择增加群体的胸椎数量不能直接提高胸肌率指标，而通过测量龙骨长指标选择提高胸肌率的方法是可靠的。

旨在估计鸭颈椎、胸椎及相关性状的遗传参数，为未来选育北京鸭鸭脖与胸肌率性状提供依据。本试验以北京鸭×绿头野鸭F2代资源群体405只鸭（50♂、355♀）为研究材料，于49周龄屠宰，统计颈椎数、胸椎数、体长、体重、颈长、颈重、颈围、颈长/体长、颈重率、龙骨长、胸肌重和胸肌率，使用MTDFREML软件估计各性状的遗传参数。研究表明，颈、胸椎数变异在不同群体之间有所差异。鸭的颈椎数、胸椎数、体长、体重、颈长、颈重、颈围、颈长/体长、颈重率、龙骨长、胸肌重和胸肌率的遗传力分别是0.08、0.65、0.49、0.47、0.36、0.45、0.38、0.18、0.43、0.55、0.40和0.48。颈椎数和颈长、颈重、颈重率之间存在显著的正向遗传相关（0.40、0.13和0.23）和表型相关（0.29、0.17和0.19），颈椎数对鸭的颈长、颈重、颈重率均有显著影响（P<0.05）。胸椎数与龙骨长、胸肌率之间不存在显著遗传相关（0.01、0.03）和表型相关（0.05、-0.05），胸椎数对鸭的龙骨长、胸肌率均无显著影响（P>0.05）。而龙骨长和胸肌重、胸肌率之间有显著的正向遗传相关（0.72、0.11）和表型相关（0.49、0.32）。结果表明，鸭群体中存在颈、胸椎数目变异；通过选择增加群体的颈椎数量可以提高鸭脖的重量；选择增加群体的胸椎数量不能直接提高胸肌率指标，而通过测量龙骨长指标选择提高胸肌率的方法是可靠的。

旨在探究牛奶原始中红外光谱相关变量的遗传规律。本研究收集北京三元绿荷某牛场1 822头荷斯坦牛生产性能测定数据、中红外光谱数据和系谱数据，使用R语言（v3.51）、SAS（v9.2）、DMU（v6.0）等软件进行主成分分析和遗传参数估计，遗传参数估计使用的动物模型考虑了测定月份、胎次和泌乳天数的固定效应及个体加性遗传效应、永久环境效应的随机效应。结果表明，80%以上中红外光谱变量之间的相关系数达0.500~1.000，且3 574~3 521 cm^-1和3 630~3 618 cm^-1区域的变量变异程度较高。对中红外光谱的每个波数进行遗传参数估计，大部分波数的遗传力集中于0.010~0.030之间，处于中高遗传力的波数占比约为7%；随遗传力提高，吸光度增大、透射率降低，且变异系数降低。中红外光谱数据可用于探究牛奶成分的遗传规律，从遗传角度提高奶牛质量，为种牛选择提供参考。

旨在探究牛奶原始中红外光谱相关变量的遗传规律。本研究收集北京三元绿荷某牛场1 822头荷斯坦牛生产性能测定数据、中红外光谱数据和系谱数据，使用R语言（v3.51）、SAS（v9.2）、DMU（v6.0）等软件进行主成分分析和遗传参数估计，遗传参数估计使用的动物模型考虑了测定月份、胎次和泌乳天数的固定效应及个体加性遗传效应、永久环境效应的随机效应。结果表明，80%以上中红外光谱变量之间的相关系数达0.500~1.000，且3 574~3 521 cm^-1和3 630~3 618 cm^-1区域的变量变异程度较高。对中红外光谱的每个波数进行遗传参数估计，大部分波数的遗传力集中于0.010~0.030之间，处于中高遗传力的波数占比约为7%；随遗传力提高，吸光度增大、透射率降低，且变异系数降低。中红外光谱数据可用于探究牛奶成分的遗传规律，从遗传角度提高奶牛质量，为种牛选择提供参考。

旨在挖掘牦牛不同年龄肌肉组织中miRNA表达谱，分析其生物学特征，以探索其在牦牛肌肉发育过程中的调节模式。本研究构建0.5、2.5、4.5和7.5岁肌肉组织的4个小RNA文库，利用Solexa技术进行测序，用生物信息学方法和RT-qPCR技术对测序结果进行分析和验证。结果，获得各miRNAs分别在4个年龄段肌肉组织中的表达量，在7.5岁肌肉组织中发现58个共同与0.5、2.5、4.5岁差异表达的miRNAs，其中53个miRNAs在7.5岁肌肉组织中显著下调，5个显著上调。运用R语言进行GO富集和KEGG信号通路分析，58个miRNAs可能通过PI3K-Akt、MAPK、Ras和肌动蛋白细胞骨架调节通路（regulation of actin cytoskeleton）参与调节牦牛肌肉细胞的增殖与分化，且PI3K-Akt、MAPK、Ras 3个信号通路共同靶向53个靶基因，说明3个信号通路相互关联。随机选择8个miRNAs进行RT-qPCR验证，结果表明其中7个miRNAs的表达趋势与测序结果一致。结果表明，牦牛肌肉发育可能受到多种miRNA的调控并涉及多个信号通路，有助于构建肌肉组织中miRNA的调控网络，为进一步研究miRNA调控哺乳动物肌肉发育奠定了理论基础。

旨在挖掘牦牛不同年龄肌肉组织中miRNA表达谱，分析其生物学特征，以探索其在牦牛肌肉发育过程中的调节模式。本研究构建0.5、2.5、4.5和7.5岁肌肉组织的4个小RNA文库，利用Solexa技术进行测序，用生物信息学方法和RT-qPCR技术对测序结果进行分析和验证。结果，获得各miRNAs分别在4个年龄段肌肉组织中的表达量，在7.5岁肌肉组织中发现58个共同与0.5、2.5、4.5岁差异表达的miRNAs，其中53个miRNAs在7.5岁肌肉组织中显著下调，5个显著上调。运用R语言进行GO富集和KEGG信号通路分析，58个miRNAs可能通过PI3K-Akt、MAPK、Ras和肌动蛋白细胞骨架调节通路（regulation of actin cytoskeleton）参与调节牦牛肌肉细胞的增殖与分化，且PI3K-Akt、MAPK、Ras 3个信号通路共同靶向53个靶基因，说明3个信号通路相互关联。随机选择8个miRNAs进行RT-qPCR验证，结果表明其中7个miRNAs的表达趋势与测序结果一致。结果表明，牦牛肌肉发育可能受到多种miRNA的调控并涉及多个信号通路，有助于构建肌肉组织中miRNA的调控网络，为进一步研究miRNA调控哺乳动物肌肉发育奠定了理论基础。

旨在利用iTRAQ技术探究卵巢静止奶牛血清差异蛋白。本试验在奶牛产后60~90 d，根据发情表现、直肠检查和B超检查，按判定标准将试验奶牛分为卵巢静止组（IO）和正常发情对照组（CON），每组50头，采集血清。应用同位素标记绝对定量（iTRAQ）/质谱（MS）联用技术筛选差异蛋白，并应用免疫印迹以及ELISA方法鉴定奶牛卵巢静止血清差异蛋白。结果表明，试验共获得61种血清差异表达蛋白。GO分析表明，生物学过程包括34个注释，分子功能包括15个注释，细胞组成包括13个注释。蛋白质网络互作分析共得到57个节点，68条蛋白互作注释，蛋白质互作富集P<10^-16，得到11个信号代谢通路。经过筛选发现，糖酵解/糖异生、氨基酸的生物合成、胰高血糖素信号通路，维生素的消化与吸收可能与卵巢静止的发生存在相关性。与卵巢静止相关差异表达蛋白共有14种：其中GPX3、SCGB1D和PKM2表达下调，ADIPOQ、AHSG、APOA4、FETUB、ALDOB、SPAM1、LDHB、RBP4、IGFBP2、ITIH3及GLYCAM1表达上调。ADIPOQ、IGFBP2和RBP4通过生殖激素生物过程影响卵泡发育，GPX3通过氧化应激而影响卵泡发育。

旨在利用iTRAQ技术探究卵巢静止奶牛血清差异蛋白。本试验在奶牛产后60~90 d，根据发情表现、直肠检查和B超检查，按判定标准将试验奶牛分为卵巢静止组（IO）和正常发情对照组（CON），每组50头，采集血清。应用同位素标记绝对定量（iTRAQ）/质谱（MS）联用技术筛选差异蛋白，并应用免疫印迹以及ELISA方法鉴定奶牛卵巢静止血清差异蛋白。结果表明，试验共获得61种血清差异表达蛋白。GO分析表明，生物学过程包括34个注释，分子功能包括15个注释，细胞组成包括13个注释。蛋白质网络互作分析共得到57个节点，68条蛋白互作注释，蛋白质互作富集P<10^-16，得到11个信号代谢通路。经过筛选发现，糖酵解/糖异生、氨基酸的生物合成、胰高血糖素信号通路，维生素的消化与吸收可能与卵巢静止的发生存在相关性。与卵巢静止相关差异表达蛋白共有14种：其中GPX3、SCGB1D和PKM2表达下调，ADIPOQ、AHSG、APOA4、FETUB、ALDOB、SPAM1、LDHB、RBP4、IGFBP2、ITIH3及GLYCAM1表达上调。ADIPOQ、IGFBP2和RBP4通过生殖激素生物过程影响卵泡发育，GPX3通过氧化应激而影响卵泡发育。

旨在研究牛卵泡发育过程中蛋白质组表达变化并筛选卵泡发育关键调控蛋白，利用非标记（label-free）定量蛋白质组学技术对牛卵泡颗粒细胞（granulesa cells，GCs）蛋白质组分进行比较分析。采集牛发情周期优势卵泡（dominant follicles，DF）和从属卵泡（subordinate follicles，SF），分别分离GCs，并提取总蛋白，胰蛋白酶酶解，液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）进行蛋白质组分分析，数据库检索分析DF和SF中蛋白质表达情况，并应用生物信息学方法筛选牛卵泡发育关键调控蛋白。结果表明：本试验从30 321个肽段中共成功鉴定出3 409种蛋白质（FDR ≤ 0.01），其中，DF中表达2 895种蛋白质，SF中表达3 102种蛋白质，获得差异表达蛋白质（差异倍数>2，P<0.05）259种，17种差异表达蛋白质可能与牛卵泡优势化过程相关，SERPINB2可能调控牛卵泡闭锁。该研究筛选获得的牛卵泡差异表达蛋白质和特异表达蛋白质，丰富了牛卵泡发育调控理论，为进一步研究卵泡闭锁及优势化奠定基础。

旨在研究牛卵泡发育过程中蛋白质组表达变化并筛选卵泡发育关键调控蛋白，利用非标记（label-free）定量蛋白质组学技术对牛卵泡颗粒细胞（granulesa cells，GCs）蛋白质组分进行比较分析。采集牛发情周期优势卵泡（dominant follicles，DF）和从属卵泡（subordinate follicles，SF），分别分离GCs，并提取总蛋白，胰蛋白酶酶解，液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）进行蛋白质组分分析，数据库检索分析DF和SF中蛋白质表达情况，并应用生物信息学方法筛选牛卵泡发育关键调控蛋白。结果表明：本试验从30 321个肽段中共成功鉴定出3 409种蛋白质（FDR ≤ 0.01），其中，DF中表达2 895种蛋白质，SF中表达3 102种蛋白质，获得差异表达蛋白质（差异倍数>2，P<0.05）259种，17种差异表达蛋白质可能与牛卵泡优势化过程相关，SERPINB2可能调控牛卵泡闭锁。该研究筛选获得的牛卵泡差异表达蛋白质和特异表达蛋白质，丰富了牛卵泡发育调控理论，为进一步研究卵泡闭锁及优势化奠定基础。

旨在探究双酚A（BPA）对子代雄鼠睾丸发育的影响。本研究将8周龄体重18~22 g的SPF级母鼠随机分为7组，每组4个重复，每个重复5只，A组每天给予普通蒸馏水，B组每天饮水给予0.05 mg·kg^-1 BPA，C组每天饮水给予0.5 mg·kg^-1 BPA组，D组每天饮水给予5 mg·kg^-1 BPA，E组每天饮水给予10 mg·kg^-1 BPA，F组每天饮水给予20 mg·kg^-1 BPA，G组每天饮水给予50 mg·kg^-1 BPA。F0代母鼠自怀孕起直至F1代子鼠断奶止饮水染毒BPA，F1代雄鼠于断奶（21日龄）处死。ELISA结果显示，母鼠染毒BPA剂量5 mg·kg^-1以上时，子代血清和睾丸组织BPA含量显著增加（P<0.05）。睾丸器官指数测定结果证明，染毒BPA剂量大于等于20 mg·kg^-1可导致子代雄鼠睾丸指数显著增大（P<0.05）。H&E染色显示，母鼠染毒BPA剂量大于等于10 mg·kg^-1可导致睾丸生精小管萎缩，小管间隙变大。彗星试验结果证明，染毒BPA大于等于5 mg·kg^-1可使子代睾丸细胞核DNA损伤显著上升（P<0.05）。免疫组化结果显示，母鼠染毒BPA剂量大于等于20 mg·kg^-1时子代睾丸雄激素受体（AR）表达量显著减少（P<0.05）。转录组测序结果显示，母鼠染毒50 mg·kg^-1BPA后子代雄鼠睾丸剪切体代谢通路U5 snRNA亚基编码基因Snrnp40上调，剪切体通用蛋白组件编码基因Hnrnpu下调，导致mRNA转录后修饰第一步受阻，荧光定量PCR结果与转录组测序结果一致，证实了转录组结果。结果表明，母鼠暴露于低剂量BPA可以引起子代睾丸发育异常，其分子机制可能与剪切体进行mRNA转录后修饰第一步反应受阻有关。

旨在探究双酚A（BPA）对子代雄鼠睾丸发育的影响。本研究将8周龄体重18~22 g的SPF级母鼠随机分为7组，每组4个重复，每个重复5只，A组每天给予普通蒸馏水，B组每天饮水给予0.05 mg·kg^-1 BPA，C组每天饮水给予0.5 mg·kg^-1 BPA组，D组每天饮水给予5 mg·kg^-1 BPA，E组每天饮水给予10 mg·kg^-1 BPA，F组每天饮水给予20 mg·kg^-1 BPA，G组每天饮水给予50 mg·kg^-1 BPA。F0代母鼠自怀孕起直至F1代子鼠断奶止饮水染毒BPA，F1代雄鼠于断奶（21日龄）处死。ELISA结果显示，母鼠染毒BPA剂量5 mg·kg^-1以上时，子代血清和睾丸组织BPA含量显著增加（P<0.05）。睾丸器官指数测定结果证明，染毒BPA剂量大于等于20 mg·kg^-1可导致子代雄鼠睾丸指数显著增大（P<0.05）。H&E染色显示，母鼠染毒BPA剂量大于等于10 mg·kg^-1可导致睾丸生精小管萎缩，小管间隙变大。彗星试验结果证明，染毒BPA大于等于5 mg·kg^-1可使子代睾丸细胞核DNA损伤显著上升（P<0.05）。免疫组化结果显示，母鼠染毒BPA剂量大于等于20 mg·kg^-1时子代睾丸雄激素受体（AR）表达量显著减少（P<0.05）。转录组测序结果显示，母鼠染毒50 mg·kg^-1BPA后子代雄鼠睾丸剪切体代谢通路U5 snRNA亚基编码基因Snrnp40上调，剪切体通用蛋白组件编码基因Hnrnpu下调，导致mRNA转录后修饰第一步受阻，荧光定量PCR结果与转录组测序结果一致，证实了转录组结果。结果表明，母鼠暴露于低剂量BPA可以引起子代睾丸发育异常，其分子机制可能与剪切体进行mRNA转录后修饰第一步反应受阻有关。

旨在研究早期饲喂对20~60日龄山羊羔羊瘤胃和小肠组织形态的影响，并探究瘤胃和小肠组织形态发育之间的关系。本研究采取单因素试验设计，以饲喂方式为试验因子。选取72只20日龄体重相近健康的海门山羊羔羊，随机分为3组，分别为仅饲喂代乳粉组（MRO组）、代乳粉加精料组（MRC组）、代乳粉加精料加苜蓿颗粒组（MCA组），每组6个重复，每重复4只羊。试验预饲期3 d，正式期40 d。试验期间，测定羔羊的生长性能和营养物质表观消化率。在羔羊60日龄时，进行屠宰试验，测定瘤胃和小肠的组织形态。结果表明：1）在山羊羔羊20~60日龄阶段，MRO组羔羊干物质和粗蛋白采食量显著低于MCA组和MRC组（P<0.05），但干物质和粗蛋白表观消化率显著高于MCA组和MRC组（P<0.05）。2）MCA组羔羊瘤胃乳头长度和乳头宽度均显著高于MRO组（P<0.05），MRC组羔羊瘤胃乳头长度显著高于MRO组（P<0.05）。3）MCA组羔羊十二指肠隐窝深度显著高于MRO组（P<0.05），而V/C值显著低于MRO组（P<0.05）；MRC组和MRO组羔羊空肠隐窝深度显著低于MCA组（P<0.05），而V/C值显著高于MCA组（P<0.05）；MRC组和MCA组回肠V/C值显著低于MRO组（P<0.05）。4）可消化干物质、可消化蛋白质摄入量与瘤胃乳头长度、乳头宽度、上皮厚度、空肠、回肠隐窝深度均呈显著正相关（P<0.05），与十二指肠、回肠V/C值呈显著负相关（P<0.05）；可消化NDF摄入量与瘤胃角质层厚度呈显著负相关（P<0.05），与瘤胃肌肉层厚度呈显著正相关（P<0.05）；可消化NFC摄入量与瘤胃乳头长度和宽度呈显著正相关（P<0.05），但与十二指肠和回肠的V/C值呈显著负相关（P<0.05）。综上所述，早期补饲精料颗粒或者精料加苜蓿颗粒有利于瘤胃组织形态发育，但其相对于代乳粉较低的营养物质表观消化率会减缓小肠组织形态的发育。

旨在研究早期饲喂对20~60日龄山羊羔羊瘤胃和小肠组织形态的影响，并探究瘤胃和小肠组织形态发育之间的关系。本研究采取单因素试验设计，以饲喂方式为试验因子。选取72只20日龄体重相近健康的海门山羊羔羊，随机分为3组，分别为仅饲喂代乳粉组（MRO组）、代乳粉加精料组（MRC组）、代乳粉加精料加苜蓿颗粒组（MCA组），每组6个重复，每重复4只羊。试验预饲期3 d，正式期40 d。试验期间，测定羔羊的生长性能和营养物质表观消化率。在羔羊60日龄时，进行屠宰试验，测定瘤胃和小肠的组织形态。结果表明：1）在山羊羔羊20~60日龄阶段，MRO组羔羊干物质和粗蛋白采食量显著低于MCA组和MRC组（P<0.05），但干物质和粗蛋白表观消化率显著高于MCA组和MRC组（P<0.05）。2）MCA组羔羊瘤胃乳头长度和乳头宽度均显著高于MRO组（P<0.05），MRC组羔羊瘤胃乳头长度显著高于MRO组（P<0.05）。3）MCA组羔羊十二指肠隐窝深度显著高于MRO组（P<0.05），而V/C值显著低于MRO组（P<0.05）；MRC组和MRO组羔羊空肠隐窝深度显著低于MCA组（P<0.05），而V/C值显著高于MCA组（P<0.05）；MRC组和MCA组回肠V/C值显著低于MRO组（P<0.05）。4）可消化干物质、可消化蛋白质摄入量与瘤胃乳头长度、乳头宽度、上皮厚度、空肠、回肠隐窝深度均呈显著正相关（P<0.05），与十二指肠、回肠V/C值呈显著负相关（P<0.05）；可消化NDF摄入量与瘤胃角质层厚度呈显著负相关（P<0.05），与瘤胃肌肉层厚度呈显著正相关（P<0.05）；可消化NFC摄入量与瘤胃乳头长度和宽度呈显著正相关（P<0.05），但与十二指肠和回肠的V/C值呈显著负相关（P<0.05）。综上所述，早期补饲精料颗粒或者精料加苜蓿颗粒有利于瘤胃组织形态发育，但其相对于代乳粉较低的营养物质表观消化率会减缓小肠组织形态的发育。

旨在以体外培养的小鼠成肌细胞（C2C12）为研究对象，探讨氧化损伤可能的路径。本试验分为3个处理组，每个处理组6个重复。处理组分别为：对照组（Control），以DMEM培养基培养的细胞作为空白对照，培养24 h；吡咯烷二硫代氨基甲酸酯（PDTC）组（PDTC），以每个孔1 mL的PDTC（20 μmol·L^-1）孵育细胞24 h；H₂O₂组（H₂O₂），加入0.5 mmol·L^-1的H₂O₂处理细胞24 h。检测各组细胞的存活率、ROS水平与凋亡率，采用荧光定量PCR和蛋白免疫印记法检测细胞凋亡和自噬相关基因的表达以及NF-κB信号通路相关因子的表达。结果表明，与对照组相比，PDTC可显著提高细胞的总凋亡率（P<0.05），可显著上调细胞半胱天冬蛋白酶-3（caspase-3）、caspase-6、caspase-9的mRNA表达量以及caspase-3蛋白表达水平（P<0.05），显著上调Beclin 1的mRNA表达量和微管相关蛋白1轻链3（LC3）-Ⅱ/I的值以及LC3-Ⅱ蛋白表达水平（P<0.05），显著下调核因子kappa B副族1（p50）、B型白细胞/2型淋巴细胞样蛋白（Bcl-2）、v-rel禽网状内皮增生病病毒癌基因同源物A（RelA）和环氧合酶（Cox）-2的mRNA表达量以及NF-κB蛋白表达水平（P<0.05）；H₂O₂可显著提高细胞的ROS水平和细胞总凋亡率（P<0.05），可显著上调caspase-3、caspase-6、caspase-8、caspase-9的mRNA表达量以及caspase-3蛋白表达水平（P<0.05），显著上调Beclin 1和LC3-Ⅱ/LC3-I的mRNA表达量以及LC3-Ⅱ蛋白表达水平（P<0.05），显著提高Bcl-2相关X蛋白（Bax）的mRNA表达量（P<0.05），显著下调p50、Bcl-2、RelA和Cox-1、Cox-2的mRNA表达量以及核因子kappa B（NF-κB）蛋白表达水平（P<0.05）。结果提示，H₂O₂会引起C2C12细胞的ROS升高，并且能够通过抑制NF-κB信号通路介导细胞凋亡和自噬的发生，这与NF-κB因子的特异性抑制剂PDTC的作用相类似。

旨在以体外培养的小鼠成肌细胞（C2C12）为研究对象，探讨氧化损伤可能的路径。本试验分为3个处理组，每个处理组6个重复。处理组分别为：对照组（Control），以DMEM培养基培养的细胞作为空白对照，培养24 h；吡咯烷二硫代氨基甲酸酯（PDTC）组（PDTC），以每个孔1 mL的PDTC（20 μmol·L^-1）孵育细胞24 h；H₂O₂组（H₂O₂），加入0.5 mmol·L^-1的H₂O₂处理细胞24 h。检测各组细胞的存活率、ROS水平与凋亡率，采用荧光定量PCR和蛋白免疫印记法检测细胞凋亡和自噬相关基因的表达以及NF-κB信号通路相关因子的表达。结果表明，与对照组相比，PDTC可显著提高细胞的总凋亡率（P<0.05），可显著上调细胞半胱天冬蛋白酶-3（caspase-3）、caspase-6、caspase-9的mRNA表达量以及caspase-3蛋白表达水平（P<0.05），显著上调Beclin 1的mRNA表达量和微管相关蛋白1轻链3（LC3）-Ⅱ/I的值以及LC3-Ⅱ蛋白表达水平（P<0.05），显著下调核因子kappa B副族1（p50）、B型白细胞/2型淋巴细胞样蛋白（Bcl-2）、v-rel禽网状内皮增生病病毒癌基因同源物A（RelA）和环氧合酶（Cox）-2的mRNA表达量以及NF-κB蛋白表达水平（P<0.05）；H₂O₂可显著提高细胞的ROS水平和细胞总凋亡率（P<0.05），可显著上调caspase-3、caspase-6、caspase-8、caspase-9的mRNA表达量以及caspase-3蛋白表达水平（P<0.05），显著上调Beclin 1和LC3-Ⅱ/LC3-I的mRNA表达量以及LC3-Ⅱ蛋白表达水平（P<0.05），显著提高Bcl-2相关X蛋白（Bax）的mRNA表达量（P<0.05），显著下调p50、Bcl-2、RelA和Cox-1、Cox-2的mRNA表达量以及核因子kappa B（NF-κB）蛋白表达水平（P<0.05）。结果提示，H₂O₂会引起C2C12细胞的ROS升高，并且能够通过抑制NF-κB信号通路介导细胞凋亡和自噬的发生，这与NF-κB因子的特异性抑制剂PDTC的作用相类似。

作为α疱疹病毒的重要成员，马立克病病毒（MDV）感染鸡可引起免疫抑制及快速发作的T细胞淋巴瘤，即马立克病（MD）。此前发现MDV基因组编码大量病毒miRNA，可能在病毒复制、潜伏感染及肿瘤发生中起重要作用。基因敲除miR-M11-5p可显著增强MDV致病性及致瘤性，表明其可能是MD肿瘤抑制因子。为进一步揭示miR-M11-5p介导的调控机制，本研究利用鸡胚成纤维细胞（CEF）总RNA的cDNA为模板，通过hybrid-PCR扩增miR-M11-5p的候选宿主靶基因片段，然后连接至pMD19-T载体、转化至E.coli JM109中构建cDNA文库。对文库菌落进行PCR鉴定、测序分析以及Blast序列对比，共获得77个候选宿主靶基因，其中37个miRNA结合靶点位于候选靶基因的3'-UTR中。进一步通过双荧光素酶报告试验、miR-M11-5p过表达以及RT-qPCR分析，最终鉴定鸡MAFB、LOC776816和RFX7为miR-M11-5p的宿主靶基因。本研究为进一步阐明miR-M11-5p在MDV肿瘤发生中的调控机制奠定了重要基础。

作为α疱疹病毒的重要成员，马立克病病毒（MDV）感染鸡可引起免疫抑制及快速发作的T细胞淋巴瘤，即马立克病（MD）。此前发现MDV基因组编码大量病毒miRNA，可能在病毒复制、潜伏感染及肿瘤发生中起重要作用。基因敲除miR-M11-5p可显著增强MDV致病性及致瘤性，表明其可能是MD肿瘤抑制因子。为进一步揭示miR-M11-5p介导的调控机制，本研究利用鸡胚成纤维细胞（CEF）总RNA的cDNA为模板，通过hybrid-PCR扩增miR-M11-5p的候选宿主靶基因片段，然后连接至pMD19-T载体、转化至E.coli JM109中构建cDNA文库。对文库菌落进行PCR鉴定、测序分析以及Blast序列对比，共获得77个候选宿主靶基因，其中37个miRNA结合靶点位于候选靶基因的3'-UTR中。进一步通过双荧光素酶报告试验、miR-M11-5p过表达以及RT-qPCR分析，最终鉴定鸡MAFB、LOC776816和RFX7为miR-M11-5p的宿主靶基因。本研究为进一步阐明miR-M11-5p在MDV肿瘤发生中的调控机制奠定了重要基础。

旨在研究肉鸡呼肠孤病毒分离株致病与基因组变异情况。2017年从山东潍坊地区跗关节肿胀、出血严重商品肉鸡中收集病料，进行病毒分离，通过RT-PCR检测、电镜观察对病毒进行鉴定；将分离到的病毒回归商品肉鸡；设计18对引物对分离株全基因组扩增测序，并进行了遗传进化分析；将分离毒株与经典毒株S1133进行血清交叉中和试验。结果表明分离到一株禽呼肠孤病毒（命名为WF17），回归商品肉鸡能完全复制出临床症状，并能从试验鸡中重新分离到该病毒。该分离株基因组完全符合禽呼肠孤病毒基因组结构特点，主要抗原σC蛋白基因与台湾918株最接近，相似性为92.7%，与S1133株的相似性只有55.9%。WF17株与S1133株的抗原相关指数（R值）只有0.19。目前以S1133株为主的商品化疫苗无法对禽呼肠孤病毒变异株产生有效保护。

旨在研究肉鸡呼肠孤病毒分离株致病与基因组变异情况。2017年从山东潍坊地区跗关节肿胀、出血严重商品肉鸡中收集病料，进行病毒分离，通过RT-PCR检测、电镜观察对病毒进行鉴定；将分离到的病毒回归商品肉鸡；设计18对引物对分离株全基因组扩增测序，并进行了遗传进化分析；将分离毒株与经典毒株S1133进行血清交叉中和试验。结果表明分离到一株禽呼肠孤病毒（命名为WF17），回归商品肉鸡能完全复制出临床症状，并能从试验鸡中重新分离到该病毒。该分离株基因组完全符合禽呼肠孤病毒基因组结构特点，主要抗原σC蛋白基因与台湾918株最接近，相似性为92.7%，与S1133株的相似性只有55.9%。WF17株与S1133株的抗原相关指数（R值）只有0.19。目前以S1133株为主的商品化疫苗无法对禽呼肠孤病毒变异株产生有效保护。

牛诺如病毒（bovine norovirus，BNoV）是一种引起犊牛腹泻的病原，目前已在19个国家检出。本研究旨在调查该病毒在国内部分地区的流行情况及分子特征。采用RT-PCR方法检测了5个省12个奶牛场的93份腹泻粪便样本和54份健康粪便样本。结果显示：腹泻样本中BNoV检出率为25.81%，极显著高于健康粪便样本中9.26%的检出率（P<0.01），证明该病毒与犊牛腹泻具有相关性；基于29个RdRp序列的遗传进化分析显示，5份样本为GⅢ.1型，24份样本为GⅢ.2型。对获得的18个VP1和13个VP2基因片段的遗传进化分析发现，中国的BNoV毒株具有独特的演化趋势。本研究证明BNoV已在国内的奶牛中广泛流行，是国内犊牛腹泻的新发病原，且国内的BNoV毒株具有独特的演化趋势，为犊牛腹泻的防控提供了重要参考。

牛诺如病毒（bovine norovirus，BNoV）是一种引起犊牛腹泻的病原，目前已在19个国家检出。本研究旨在调查该病毒在国内部分地区的流行情况及分子特征。采用RT-PCR方法检测了5个省12个奶牛场的93份腹泻粪便样本和54份健康粪便样本。结果显示：腹泻样本中BNoV检出率为25.81%，极显著高于健康粪便样本中9.26%的检出率（P<0.01），证明该病毒与犊牛腹泻具有相关性；基于29个RdRp序列的遗传进化分析显示，5份样本为GⅢ.1型，24份样本为GⅢ.2型。对获得的18个VP1和13个VP2基因片段的遗传进化分析发现，中国的BNoV毒株具有独特的演化趋势。本研究证明BNoV已在国内的奶牛中广泛流行，是国内犊牛腹泻的新发病原，且国内的BNoV毒株具有独特的演化趋势，为犊牛腹泻的防控提供了重要参考。

建立高表达PCV2-Cap蛋白的CHO-K1悬浮稳转细胞系，鉴定蛋白的免疫原性，为开发新型且有效防治猪圆环病毒的亚单位疫苗奠定基础。构建重组质粒pEE12.4-PCV2-Cap，转染CHO-K1细胞，通过加压筛选，有限稀释，细胞悬浮驯化及Western blot检测得到高表达Cap蛋白的悬浮稳转单克隆细胞株，并对该细胞株进行发酵，纯化得到的目的蛋白，通过小鼠免疫验证其免疫原性。结果表明PCV2-Cap蛋白能够在CHO-K1细胞中正确表达；发酵过程中活细胞密度高达6×10⁶个·mL^-1，细胞活力在80%以上，PCV2-Cap蛋白表达量约为370 mg·L^-1；利用间接ELISA检测小鼠免疫后血清中的抗体水平，证明了利用CHO-K1细胞生产的Cap蛋白具备良好的免疫原性。本研究成功构建了表达PCV2-Cap蛋白的CHO-K1悬浮稳转细胞系，并进一步对目的蛋白进行免疫原性分析，为猪圆环病毒亚单位疫苗的开发打下扎实的基础。

建立高表达PCV2-Cap蛋白的CHO-K1悬浮稳转细胞系，鉴定蛋白的免疫原性，为开发新型且有效防治猪圆环病毒的亚单位疫苗奠定基础。构建重组质粒pEE12.4-PCV2-Cap，转染CHO-K1细胞，通过加压筛选，有限稀释，细胞悬浮驯化及Western blot检测得到高表达Cap蛋白的悬浮稳转单克隆细胞株，并对该细胞株进行发酵，纯化得到的目的蛋白，通过小鼠免疫验证其免疫原性。结果表明PCV2-Cap蛋白能够在CHO-K1细胞中正确表达；发酵过程中活细胞密度高达6×10⁶个·mL^-1，细胞活力在80%以上，PCV2-Cap蛋白表达量约为370 mg·L^-1；利用间接ELISA检测小鼠免疫后血清中的抗体水平，证明了利用CHO-K1细胞生产的Cap蛋白具备良好的免疫原性。本研究成功构建了表达PCV2-Cap蛋白的CHO-K1悬浮稳转细胞系，并进一步对目的蛋白进行免疫原性分析，为猪圆环病毒亚单位疫苗的开发打下扎实的基础。

本研究旨在了解我国猪群中流行的多杀性巴氏杆菌（Pm）的主要基因型。利用荚膜基因分型、脂多糖（LPS）基因分型、多位点序列分型（MLST）对2013年12月-2017年12月4年间来源于我国各地区规模化猪场患有疑似呼吸系统疾病的病死猪肺、鼻拭子、气管、肝等样品中分离鉴定的Pm进行基因型分析，并对23种主要毒力基因进行检测。结果表明，当前在我国猪群中流行的Pm的荚膜基因型为A（48.85%）、D（42.75%）、F（2.67%），优势基因型为A和D；LPS基因型为L3（25.00%）和L6（75.00%）型，优势基因型为L6；MLST基因型为ST3（21.25%）、ST10（27.50%）、ST11（42.50%）、ST12（2.50%）、ST16（2.50%）、ST74（1.25%）及ST75（2.50%），优势基因型为ST3、ST10和ST11。如果将荚膜基因型、LPS基因型和MLST基因型组合起来看，当前在我国猪群中流行的Pm的主要基因型为荚膜：脂多糖：MLST基因型A：L3：ST3（20.00%）、A：L6：ST10（26.25%）及D：L6：ST11（42.50%）。毒力基因检测的结果发现部分毒力基因的分布表现出一定的"基因型偏好性"。结果提示，D：L6：ST11是我国猪群中流行的多杀性巴氏杆菌的主要基因型，可能与我国猪群中由多杀性巴氏杆菌导致的呼吸道疾病密切相关。

本研究旨在了解我国猪群中流行的多杀性巴氏杆菌（Pm）的主要基因型。利用荚膜基因分型、脂多糖（LPS）基因分型、多位点序列分型（MLST）对2013年12月-2017年12月4年间来源于我国各地区规模化猪场患有疑似呼吸系统疾病的病死猪肺、鼻拭子、气管、肝等样品中分离鉴定的Pm进行基因型分析，并对23种主要毒力基因进行检测。结果表明，当前在我国猪群中流行的Pm的荚膜基因型为A（48.85%）、D（42.75%）、F（2.67%），优势基因型为A和D；LPS基因型为L3（25.00%）和L6（75.00%）型，优势基因型为L6；MLST基因型为ST3（21.25%）、ST10（27.50%）、ST11（42.50%）、ST12（2.50%）、ST16（2.50%）、ST74（1.25%）及ST75（2.50%），优势基因型为ST3、ST10和ST11。如果将荚膜基因型、LPS基因型和MLST基因型组合起来看，当前在我国猪群中流行的Pm的主要基因型为荚膜：脂多糖：MLST基因型A：L3：ST3（20.00%）、A：L6：ST10（26.25%）及D：L6：ST11（42.50%）。毒力基因检测的结果发现部分毒力基因的分布表现出一定的"基因型偏好性"。结果提示，D：L6：ST11是我国猪群中流行的多杀性巴氏杆菌的主要基因型，可能与我国猪群中由多杀性巴氏杆菌导致的呼吸道疾病密切相关。

为研究不同微生物硫辛酸修饰相关酶的功能，构建了大肠杆菌菌体内研究模型。利用Red同源重组系统对大肠杆菌的lplA、lipB基因依次进行敲除，获得大肠杆菌lplA及lipB双基因缺失株△lplA△lipB~DH5α。将lplA和lipB基因分别克隆到载体pBAD322G，构建基因回补株ClplA-△lplA△lipB~DH5α和ClipB-△lplA△lipB~DH5α。通过Western blot、质谱分析和补偿试验等方法检测缺失株和回补株对底物的硫辛酸修饰功能。结果显示：上述突变株构建成功并能稳定遗传，回补株构建成功并能发挥生物学功能。补偿试验结果显示，在甘油为碳源的M9基础培养基中，回补株ClipB-△lplA△lipB~DH5α能够生长，ClplA-△lplA△lipB~DH5α补偿硫辛酸后能够生长。以上结果表明，大肠杆菌DH5α硫辛酸修饰功能缺陷菌株构建成功，这有利于以大肠杆菌为生物模型进行其他微生物硫辛酸修饰相关酶的功能研究。

为研究不同微生物硫辛酸修饰相关酶的功能，构建了大肠杆菌菌体内研究模型。利用Red同源重组系统对大肠杆菌的lplA、lipB基因依次进行敲除，获得大肠杆菌lplA及lipB双基因缺失株△lplA△lipB~DH5α。将lplA和lipB基因分别克隆到载体pBAD322G，构建基因回补株ClplA-△lplA△lipB~DH5α和ClipB-△lplA△lipB~DH5α。通过Western blot、质谱分析和补偿试验等方法检测缺失株和回补株对底物的硫辛酸修饰功能。结果显示：上述突变株构建成功并能稳定遗传，回补株构建成功并能发挥生物学功能。补偿试验结果显示，在甘油为碳源的M9基础培养基中，回补株ClipB-△lplA△lipB~DH5α能够生长，ClplA-△lplA△lipB~DH5α补偿硫辛酸后能够生长。以上结果表明，大肠杆菌DH5α硫辛酸修饰功能缺陷菌株构建成功，这有利于以大肠杆菌为生物模型进行其他微生物硫辛酸修饰相关酶的功能研究。

为了探索脾酪氨酸激酶（Syk）是否参与酿酒酵母甘露聚糖（S.c M）诱导绵羊瘤胃上皮细胞（ORECs）β-防御素-1（SBD-1）表达的过程，首先利用免疫组化、RT-PCR和免疫荧光等方法检测Syk在ORECs内的表达情况；然后采用qPCR和Western blot方法检测S.c M刺激ORECs后Syk的表达变化，同时用Western blot方法检测Syk的磷酸化水平；接着用3条Syk特异性siRNAs（#1、#2和#3）转染ORECs 24 h后，qPCR检测Syk mRNA的表达变化，筛选出干扰效果最佳的Syk siRNA；最后用效果最佳的siRNA和Syk特异性抑制剂R406分别处理ORECs后，采用qPCR和ELISA检测SBD-1的表达变化，以确定Syk在S.c M诱导SBD-1表达过程中的作用。结果显示：Syk在ORECs内表达；且S.c M刺激ORECs后Syk的mRNA和蛋白表达水平显著高于未刺激组（P<0.01或P<0.05），S.c M刺激ORECs不同时间（5、15、30、45和60 min）均能使Syk发生磷酸化，且刺激15 min后磷酸化水平达到最大（P<0.01）；此外，Syk的3条特异性siRNAs转染ORECs后Syk的表达均降低，且Syk siRNA#2的抑制效果最明显（P<0.01）；同时Syk siRNA#2和R406均能极显著降低S.c M诱导ORECs SBD-1的表达（P<0.01）。上述结果表明，Syk参与S.c M诱导ORECs SBD-1的表达。

为了探索脾酪氨酸激酶（Syk）是否参与酿酒酵母甘露聚糖（S.c M）诱导绵羊瘤胃上皮细胞（ORECs）β-防御素-1（SBD-1）表达的过程，首先利用免疫组化、RT-PCR和免疫荧光等方法检测Syk在ORECs内的表达情况；然后采用qPCR和Western blot方法检测S.c M刺激ORECs后Syk的表达变化，同时用Western blot方法检测Syk的磷酸化水平；接着用3条Syk特异性siRNAs（#1、#2和#3）转染ORECs 24 h后，qPCR检测Syk mRNA的表达变化，筛选出干扰效果最佳的Syk siRNA；最后用效果最佳的siRNA和Syk特异性抑制剂R406分别处理ORECs后，采用qPCR和ELISA检测SBD-1的表达变化，以确定Syk在S.c M诱导SBD-1表达过程中的作用。结果显示：Syk在ORECs内表达；且S.c M刺激ORECs后Syk的mRNA和蛋白表达水平显著高于未刺激组（P<0.01或P<0.05），S.c M刺激ORECs不同时间（5、15、30、45和60 min）均能使Syk发生磷酸化，且刺激15 min后磷酸化水平达到最大（P<0.01）；此外，Syk的3条特异性siRNAs转染ORECs后Syk的表达均降低，且Syk siRNA#2的抑制效果最明显（P<0.01）；同时Syk siRNA#2和R406均能极显著降低S.c M诱导ORECs SBD-1的表达（P<0.01）。上述结果表明，Syk参与S.c M诱导ORECs SBD-1的表达。

旨在通过脱氧雪腐镰刀菌烯醇（DON）体内暴露试验，检测仔猪延髓组织的脂质过氧化反应、神经递质分泌及钙稳态的变化，研究DON对仔猪的神经毒性作用。选取30头21日龄"杜×长×大"三元杂交断奶仔猪，随机分为对照组、DON低剂量组和DON高剂量组，每组10头仔猪。对照组饲喂基础饲料，DON低剂量组和高剂量组分别饲喂含1、2 mg·kg^-1DON的饲料，试验期为60 d。试验结束时，每组随机选择5头仔猪屠宰，采集延髓组织，检测氧化与过氧化水平、神经递质含量和Ca²⁺浓度、钙调蛋白（CaM）与钙调蛋白依赖性激酶Ⅱ（CaMKⅡ）mRNA相对表达量及CaM、CaMKⅡ、p-CaMKⅡ的蛋白表达水平。结果显示：与对照组相比，DON高、低剂量组脂质过氧化指标超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性极显著降低（P<0.01），而一氧化氮（NO）浓度极显著升高（P<0.01）；DON高、低剂量组神经递质5-羟色胺（5-HT）浓度极显著升高（P<0.01），而乙酰胆碱（ACH）浓度极显著降低（P<0.01），高剂量组多巴胺（DA）和γ-氨基丁酸（GABA）浓度显著下降（P<0.05）；DON高、低剂量组钙稳态指标Ca²⁺浓度均极显著升高（P<0.01），低剂量组CaM mRNA表达量显著降低（P<0.05），高、低剂量组CaMKⅡ mRNA表达量均极显著降低（P<0.01）；DON高剂量组CaM蛋白表达水平极显著降低（P<0.01），而p-CaMKⅡ蛋白表达水平极显著升高（P<0.01）。试验结果表明，DON暴露能够改变仔猪延髓组织脂质过氧化反应及神经递质的分泌，并导致钙稳态紊乱，对断奶仔猪具有一定的神经毒性作用。

旨在通过脱氧雪腐镰刀菌烯醇（DON）体内暴露试验，检测仔猪延髓组织的脂质过氧化反应、神经递质分泌及钙稳态的变化，研究DON对仔猪的神经毒性作用。选取30头21日龄"杜×长×大"三元杂交断奶仔猪，随机分为对照组、DON低剂量组和DON高剂量组，每组10头仔猪。对照组饲喂基础饲料，DON低剂量组和高剂量组分别饲喂含1、2 mg·kg^-1DON的饲料，试验期为60 d。试验结束时，每组随机选择5头仔猪屠宰，采集延髓组织，检测氧化与过氧化水平、神经递质含量和Ca²⁺浓度、钙调蛋白（CaM）与钙调蛋白依赖性激酶Ⅱ（CaMKⅡ）mRNA相对表达量及CaM、CaMKⅡ、p-CaMKⅡ的蛋白表达水平。结果显示：与对照组相比，DON高、低剂量组脂质过氧化指标超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性极显著降低（P<0.01），而一氧化氮（NO）浓度极显著升高（P<0.01）；DON高、低剂量组神经递质5-羟色胺（5-HT）浓度极显著升高（P<0.01），而乙酰胆碱（ACH）浓度极显著降低（P<0.01），高剂量组多巴胺（DA）和γ-氨基丁酸（GABA）浓度显著下降（P<0.05）；DON高、低剂量组钙稳态指标Ca²⁺浓度均极显著升高（P<0.01），低剂量组CaM mRNA表达量显著降低（P<0.05），高、低剂量组CaMKⅡ mRNA表达量均极显著降低（P<0.01）；DON高剂量组CaM蛋白表达水平极显著降低（P<0.01），而p-CaMKⅡ蛋白表达水平极显著升高（P<0.01）。试验结果表明，DON暴露能够改变仔猪延髓组织脂质过氧化反应及神经递质的分泌，并导致钙稳态紊乱，对断奶仔猪具有一定的神经毒性作用。

旨在研究细菌脂多糖（LPS）急性暴露对小鼠睾丸及其功能的影响。将健康雄性小鼠随机分为4组：对照组（Control）、1.25 mg·kg^-1 LPS组、2.5 mg·kg^-1 LPS组和5.0 mg·kg^-1 LPS组，对照组腹腔注射200 μL生理盐水，其余3组注射等体积含不同剂量的LPS，作用12 h。收集睾丸组织制作石蜡切片，染色后观察其病理变化，记录体重、睾丸和附睾指数，并测定精子品质相关指标，用RT-qPCR法检测炎症相关基因TNF-α、IL-6、GAS6和TGF-β1的转录，同时用ELISA检测血清中睾酮（T）的含量。结果表明，与对照组相比，LPS急性暴露时，以剂量依赖性方式降低小鼠体重（P<0.05或P<0.01），同时显著降低睾丸指数（P<0.05或P<0.01）、精子密度（P<0.01）及精子活力（P<0.05或P<0.01），增加精子畸形率（P<0.05或P<0.01）；使睾丸组织发生不同程度的病理学变化，表现在生精细胞凋亡，曲细精管管腔增大，精子数量减少等；导致血清中睾酮（T）的含量显著下降；另外，LPS还呈剂量依赖方式增加促炎因子TNF-α和IL-6及抑制抗炎因子GAS6和TGF-β1的转录。结果提示，细菌LPS急性暴露可通过破坏机体中炎症因子的平衡，使睾丸组织受到损伤从而导致生精障碍。

旨在研究细菌脂多糖（LPS）急性暴露对小鼠睾丸及其功能的影响。将健康雄性小鼠随机分为4组：对照组（Control）、1.25 mg·kg^-1 LPS组、2.5 mg·kg^-1 LPS组和5.0 mg·kg^-1 LPS组，对照组腹腔注射200 μL生理盐水，其余3组注射等体积含不同剂量的LPS，作用12 h。收集睾丸组织制作石蜡切片，染色后观察其病理变化，记录体重、睾丸和附睾指数，并测定精子品质相关指标，用RT-qPCR法检测炎症相关基因TNF-α、IL-6、GAS6和TGF-β1的转录，同时用ELISA检测血清中睾酮（T）的含量。结果表明，与对照组相比，LPS急性暴露时，以剂量依赖性方式降低小鼠体重（P<0.05或P<0.01），同时显著降低睾丸指数（P<0.05或P<0.01）、精子密度（P<0.01）及精子活力（P<0.05或P<0.01），增加精子畸形率（P<0.05或P<0.01）；使睾丸组织发生不同程度的病理学变化，表现在生精细胞凋亡，曲细精管管腔增大，精子数量减少等；导致血清中睾酮（T）的含量显著下降；另外，LPS还呈剂量依赖方式增加促炎因子TNF-α和IL-6及抑制抗炎因子GAS6和TGF-β1的转录。结果提示，细菌LPS急性暴露可通过破坏机体中炎症因子的平衡，使睾丸组织受到损伤从而导致生精障碍。

为分析当前猫泛白细胞减少症病毒（FPLV）基因组遗传变异情况，对FPLV胶体金试纸条检测结果为阳性的猫粪进行病毒分离，通过血凝、分子生物学等试验对分离株进行鉴定。结果表明：病毒在CRFK细胞上盲传5代后产生明显细胞病变，电镜观察病毒粒子直径约25 nm，分离病毒的血凝效价为1：256，将分离株命名为FPLV BJ04。基因组扩增结果显示，FPLV BJ04基因组大小为5 118 bp。决定病毒宿主范围和抗原性的VP2蛋白系统进化树分析表明，FPLV BJ04株与2017年意大利分离株KX434462株位于同一分支；分离株的VP2、NS1基因与GenBank收录的FPLV VP2、NS1基因相似性分别为99.1%~99.5%和99.0%~99.5%。动物回归试验中攻毒组猫出现临床症状和病理变化。本研究对分离的FPLV北京流行株的VP2和NS1基因进行遗传变异分析，可为更好地预防和控制FPLV提供基础。

为分析当前猫泛白细胞减少症病毒（FPLV）基因组遗传变异情况，对FPLV胶体金试纸条检测结果为阳性的猫粪进行病毒分离，通过血凝、分子生物学等试验对分离株进行鉴定。结果表明：病毒在CRFK细胞上盲传5代后产生明显细胞病变，电镜观察病毒粒子直径约25 nm，分离病毒的血凝效价为1：256，将分离株命名为FPLV BJ04。基因组扩增结果显示，FPLV BJ04基因组大小为5 118 bp。决定病毒宿主范围和抗原性的VP2蛋白系统进化树分析表明，FPLV BJ04株与2017年意大利分离株KX434462株位于同一分支；分离株的VP2、NS1基因与GenBank收录的FPLV VP2、NS1基因相似性分别为99.1%~99.5%和99.0%~99.5%。动物回归试验中攻毒组猫出现临床症状和病理变化。本研究对分离的FPLV北京流行株的VP2和NS1基因进行遗传变异分析，可为更好地预防和控制FPLV提供基础。