乐果诱导大鼠肝细胞凋亡的分析

畜牧兽医学报 ›› 2009, Vol. 40 ›› Issue (6): 928-933.

乐果诱导大鼠肝细胞凋亡的分析

刘学忠, 袁燕，袁楷，卞建春，刘宗平*

扬州大学兽医学院, 扬州 225009

收稿日期:1900-01-01 修回日期:1900-01-01 出版日期:2009-06-26 发布日期:2009-06-26
通讯作者: 刘宗平

Studies on Hepatic Cell Apoptosis Induced by Dimethoate in Rats

LIU Xuezhong, YUAN Yan, YUAN Kai, BIAN Jianchun, LIU Zongping*

College of Veterinary Medicine, Yangzhou University, Yangzhou 225009, China

Received:1900-01-01 Revised:1900-01-01 Online:2009-06-26 Published:2009-06-26
Contact: LIU Zongping

摘要/Abstract

摘要： 为研究乐果对大鼠肝细胞凋亡的影响，将24只SD大鼠分成对照组和3个染毒组，分别按体质量以0、1、6和30 mg·kg-1的剂量灌服乐果，连续灌服30 d后，观察肝脏组织学和超微结构变化。同时，通过给大鼠肝细胞培养液中加入乐果（染毒终浓度分别为0、3、10、30、100和300 μmol·L-1），染毒12、24 h后，Annexin V/PI双染法检测肝细胞凋亡率；分别用Fluo2/AM、双氢乙酰乙酸二氯荧光黄（DCFHDA）和罗丹明123检测细胞内Ca2+浓度、活性氧（ROS）和线粒体膜电位（Δψm）变化。结果表明，组织学和超微结构检查显示肝细胞脂肪变性、凋亡等。肝细胞染毒12和24 h后，细胞凋亡率明显升高，除3 μmol·L-1组外，与对照组相比差异显著（P<005或P<001），且呈时间剂量效应；3 μmol·L-1组细胞内Ca2+浓度极显著高于对照组（P<001），之后随染毒剂量的增加，细胞内Ca2+浓度逐渐下降；细胞内ROS水平在3~100 μmol·L-1范围内随染毒剂量的增大和染毒时间的延长而升高，而在300 μmol·L-1组略有下降，除3 μmol·L-1组外，与对照组相比均差异极显著（P<001）；Δψm除24 h高剂量染毒组（300 μmol·L-1）外均出现持续下降，30~300 μmol·L-1组均小于对照组（P＜001）。本研究表明低剂量乐果染毒可诱导肝细胞发生凋亡，细胞内Ca2+、ROS和Δψm可能参与了这一过程。

关键词: 大鼠, 肝脏, 乐果, 细胞凋亡

Abstract: In order to study the histopathological and ultrastructure changes in hepatic cells, twentyfour SD rats were divided into four groups with one control and three experimental groups; Dimethoate was administrated daily intragastrically to SD rats in four groups with concentration of 0, 1, 6 and 30 mg·kg-1 body weight respectivelyMeanwhile,Dimethoate was added to hepatocyte culture fluid of rats with final concentration of 0，3，10，30，100 and 300 μmol·L-1 in each in vitro treatment After 12 and 24 h, apoptosis rate was analyzed by Annexin V/PI method; intracellular Ca2+ concentration, reactive oxygen species (ROS) and mitochondria membrane potential (Δψm) changes were analyzed by Fluo2/AM, Dichlorofluorescin diacetate (DCFHDA ) and rhodamine 123 method respectively to study the effects of Dimethoate on liver cell apoptosis The results showed that adipose degeneration and apoptosis were observed by histopathological and ultrastructure examination After 12 and 24 h exposure, cell apoptosis rate increased significantly; experimental groups (apart from the group with 3 mmol·L-1) had significant (P<005 or P<001) differences with control group and followed dose proportionality. Intracellular Ca2+ concentration in group with 3 mmol·L-1 was significantly (P<001) higher than that of control group, and then the concentration decreased with increasing dosage. Intracellular ROS level increased with increasing dosage and time of exposure in the range of 3-100 μmol·L-1; however, ROS level decreased slightly in group with 300 μmol·L-1. Apart from group with 3 μmol·L-1, the differences between control group and experimental groups were significant (P<001). Δψm decreased continuously apart from group with 300 μmol·L-1 after 24 h exposure.The Δψm of 30-300 μmol·L-1 groups were significantly lower than that of control (P＜001). It was concluded that low dosage of Dimethoate can induce liver cell apoptosis, and intracellular Ca2+, ROS and Δψm may participate in this process.

Key words: rat, liver, Dimethoate, apoptosis

刘学忠;袁燕;袁楷;卞建春;刘宗平. 乐果诱导大鼠肝细胞凋亡的分析[J]. 畜牧兽医学报, 2009, 40(6): 928-933.

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