RNA编辑是一种重要的转录后调控机制，通过初级转录本上碱基的插入、缺失或者替换，改变RNA所携带的遗传信息。RNA编辑功能多样，可改变氨基酸序列、影响可变剪接、导致内含子滞留、影响RNA稳定性等，为解释诸多复杂生命过程提供了一种方向。在哺乳动物中，由双链RNA腺苷酸脱氨酶家族催化的A-to-I编辑最为普遍。随着高通量测序技术及分子生物学的发展，科研人员开发出一系列高效灵活易用的检测工具，使全基因组水平鉴定RNA编辑位点成为现实，为解析RNA编辑在畜禽经济性状中的作用奠定了基础。本文对RNA编辑的定义、功能及RNA编辑位点检测方法等进行了综述，详细介绍了基于高通量测序检测RNA编辑位点的工具，以期更多科研人员了解认识RNA编辑并在畜禽中对其展开广泛深入的研究。

近年来，哺乳动物miRNA与妊娠的关系已成为研究动物妊娠方面的热点。动物体内许多miRNA能够在胎盘中优先表达，并且与妊娠和出生相关。本文结合哺乳动物miRNA对胚胎发育、怀孕、妊娠疾病及围产后期母乳产生等相关研究进行讨论和分析，总结了迄今为止哺乳动物血液和胎盘组织中miRNA对妊娠的作用，以期为研究miRNA与哺乳动物妊娠的关系提供参考。

禽霍乱是一种禽类的接触性、系统性传染病，发病率和致死率高，给养禽业发展造成巨大的经济损失。随着病原菌抗生素耐药问题的日益严重，疫苗应成为防控该病的主要手段。目前应用于我国家禽产业的疫苗包括传统的灭活苗和弱毒苗，但它们具有一定缺陷，如油乳灭活苗交叉保护差；自然弱毒株遗传背景不明，毒力时而返强等。因此，研制安全、高效、制备方便的新型疫苗是迫切需求，也是未来研究的趋势。本文针对近年来开发的减毒疫苗、亚单位疫苗、DNA疫苗等多种禽霍乱新型疫苗进行综述，为研制更安全有效的疫苗提供一定的参考。

旨在通过不同性别大白猪的全基因组高分辨率单碱基甲基化差异分析，检测差异甲基化区域（DMR）和差异甲基化基因（DMG），为进一步解析公母猪骨骼肌发育差异奠定基础。本研究采用全基因组重亚硫酸盐测序（WGBS）技术分析了4头210日龄长白猪（公、母各半）背最长肌全基因组DNA的甲基化程度和差异甲基化区域，探讨性别间DNA甲基化水平的差异。结果表明，全基因组范围约有5%的胞嘧啶（C）发生了甲基化（mC）；母猪和公猪的总体甲基化水平基本一致。共检测到1 629个DMRs和841个DMGs。母猪的DMRs平均甲基化水平明显高于公猪。通过基因本体分析（GO）和相关信号通路（KEGG）分析，共检测到171个GO条目和10个信号通路，显著富集在轴突导向、细胞连接、细胞粘附、ECM受体互作等相关过程中；筛选出5个与不同性别肌肉调节相关的候选基因。本研究绘制了不同性别大白猪的高分辨率单碱基全基因组甲基化图谱，为不同性别表观遗传研究以及肌肉发育和肉质相关候选基因的筛选提供了信息参考。

旨在研究促肾上腺皮质激素（adrenocorticotropic hormone，ACTH）对母猪肝中葡萄糖代谢相关酶转录表达及活性的影响，以探讨应激状态下肝调节血糖水平的分子机制。本研究选取9头健康经产断奶苏淮母猪，随机分成处理组（5头）和对照组（4头）。对处理组母猪注射外源ACTH，对照组母猪注射生理盐水；每天处理3次，连续7 d。试验期间每天采集母猪血液；试验结束后，取母猪肝组织。利用放射免疫分析方法测定血液皮质醇浓度，利用生化分析仪测定血糖浓度，通过荧光定量PCR检测葡萄糖代谢相关酶和糖皮质激素受体（glucocorticoid receptor，GR）的转录表达，利用分光光度法检测葡萄糖代谢相关酶的酶活性。结果表明，ACTH处理组母猪血液中皮质醇及葡萄糖水平均显著高于对照组（P<0.05）。ACTH处理对母猪肝中丙酮酸羧化酶（PC）、果糖-1，6-二磷酸酶（FBP）、磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶2（PCK2）、磷酸果糖激酶（PFKL）、丙酮酸激酶（PKLR）、己糖激酶1（HK1）、己糖激酶3（HK3）、糖原合成酶1（GYS1）、糖原磷酸化酶（PYGL）及6-磷酸葡萄糖脱氢酶（G6PD）的mRNA表达无显著影响（P>0.05）。ACTH处理显著上调母猪肝中葡萄糖-6-磷酸酶（G6PC）、磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶1（PCK1）和己糖激酶2（HK2）的mRNA表达水平（P<0.05）。此外，ACTH处理显著上调母猪肝中葡萄糖-6-磷酸酶（G6PC）的酶活性（P<0.05），显著下调磷酸果糖激酶（PFKL）的酶活性（P<0.05）。与对照组相比，ACTH处理组GR mRNA表达水平呈上调趋势，但组间差异不显著（P>0.05）。结果提示，ACTH处理上调母猪血糖水平，不仅通过促进肝中糖异生关键酶G6PC、PCK1和HK2的转录表达及增强G6PC的活性增加糖异生反应，还通过降低糖酵解关键酶PFKL的活性抑制糖酵解反应。此外，ACTH处理未影响肝中GR的转录表达。

旨在研究猪MITF-M（microphthalmia associated transcription factor M）转录调控区域活性以及验证重要转录因子。以猪DNA为模板，利用PCR扩增获得MITF-M转录调控区，基因克隆得到5'端缺失重组载体，运用双荧光素酶报告基因试验进行转录活性分析，再通过干扰RNA试验验证重要转录因子。本试验成功克隆得到MITF-M 6 414 bp的转录调控区域；构建了9个调控区5'端缺失重组载体；鉴定出MITF-M转录调控区内3个转录活性显著变化区域（P<0.001），分别是位于-1 140～-1 397和-5 429～-6 036 bp的正调控区域、-2 470～-3 753 bp的负调控区域；发现了转录因子KLF4显著负向调控MITF-M的转录活性（P<0.01）。结果提示，转录因子KLF4抑制MITF-M的转录活性，调控黑色素细胞色素的合成与沉积，从而影响猪毛色的表型。本试验为进一步研究猪MITF-M基因的表达机制奠定了基础，对深入研究猪毛色变化的表达调控机理具有重要意义。

旨在了解骆驼属在缺水条件下组织环境适应机制。本研究选取6峰6~9岁的成年阿拉善双峰驼，随机分为2组，第一组为对照组（colon1_3），正常采食饲料与水；第二组为禁水组（colon3），不给骆驼饮水，其他处理（饲草量）与对照组相同，禁水24 d。采用Illumina HiSeq 2000测序平台通过对禁水（试验组）与正常饮水（对照组）条件下双峰驼结肠组织进行转录组测序，并对转录组数据进行质控、比对、差异表达、GO和KEGG分析。结果显示，禁水组与对照组比较共获得差异表达基因2 122个，其中上调表达基因813个，下调表达基因1 309个。GO分析结果显示，禁水组下调表达基因最为显著富集的条目有30条，上调表达基因中未得到统计学意义的富集条目。KEGG富集分析显示，禁水组下调表达基因显著富集到剪接体、蛋白外排、内质网蛋白合成过程、RNA转运、核糖体合成、mRNA检测、RNA降解代谢途径；上调表达基因富集到的通路包含局部细胞黏连、溶酶体功能等。上述结果表明，禁水环境下，结肠组织下调表达基因多于上调表达基因，下调表达基因多参与RNA加工和蛋白质合成，这些功能有利于骆驼在缺水环境下，减少RNA的合成，降低结肠组织的代谢速率。

旨在研究miR-487b-3p对小鼠C2C12细胞增殖与分化的具体调控机制。本研究以小鼠成肌细胞系（C2C12）为研究对象，利用qRT-PCR检测miR-487b-3p在小鼠各组织和C2C12细胞增殖与分化过程中的表达情况；通过转染miR-487b-3p mimics和miR-487b-3p inhibitor后，利用qRT-PCR检测转染效率，并采用qRT-PCR和Western blotting检测增殖标记基因PCNA和分化标记基因MYOD、MYOG和MYHC的表达差异；利用生物信息学软件对miR-487b-3p靶基因进行预测，利用qRT-PCR检测小鼠C2C12细胞增殖与分化过程中PITX2的表达情况，并检测过表达（抑制） miR-487b-3p后PITX2的表达差异，通过双荧光素酶报告系统验证miR-487b-3p和PITX2的靶标关系。结果表明，miR-487b-3p在小鼠骨骼肌中相对表达最高，在C2C12细胞增殖与分化的过程中miR-487b-3p的表达量整体上呈现上升趋势，推测miR-487b-3p参与调控骨骼肌发育。过表达miR-487b-3p后，极显著上调miR-487b-3p的表达（P<0.01），在转录和蛋白水平均极显著上调PCNA的表达（P<0.01），显著下调MYHC、MYOD和MYOG基因的表达（P<0.05），同时显著下调MYHC （P<0.05）、MYOD （P<0.01）和MYOG蛋白（P<0.05）的表达；而抑制miR-487b-3p后，极显著下调miR-487b-3p的表达（P<0.01），显著下调PCNA基因的表达（P<0.05），极显著下调PCNA蛋白的表达（P<0.01），显著上调MYHC、MYOD和MYOG蛋白的表达（P<0.05），上调MYHC、MYOD和MYOG基因的表达，但未达显著水平（P>0.05）。在C2C12细胞增殖和分化过程中，PITX2与miR-487b-3p表达趋势相反；过表达miR-487b-3p能极显著下调PITX2 mRNA的表达（P<0.01），相反，抑制miR-487b-3p的表达则极显著上调PITX2 mRNA的表达（P<0.01）；双荧光素酶报告系统验证PITX2是miR-487b-3p的直接靶基因。综上表明，miR-487b-3p通过靶向PITX2促进C2C12细胞增殖而抑制其分化。

旨在探索白绒山羊对颜色和左右空间的认知识别能力，并与中国美利奴羊（军垦型）进行比较。本研究选取年龄（约8月龄）、体重相近的白绒山羊和中国美利奴羊各6只作为测试对象，采用羊认知功能行为学测试方法-“视觉认知识别及颠倒测试”和“空间认知识别及颠倒测试”比较了两者对颜色以及对左右空间的识别认知和记忆能力。研究发现，两组羊在本研究的48次颜色的简单认知识别测试中都没有达到75%的正确率，因此两组羊在本试验中均没有学会对颜色的简单认知识别，但都学会了左右空间的认知识别以及颠倒转换识别，且两组差异显著（P<0.05），尤其是在颠倒转换识别中，山羊学得更快且犯错误次数更少。结果表明，与中国美利奴羊相比，白绒山羊在更复杂的压力环境中能更迅速建立正确的左右空间认知识别。本研究探索了羊的认知识别行为，并为品种与羊认知学习能力的相关性研究提供重要的参考价值。

旨在探究丝氨酸蛋白酶35（serine protease 35，PRSS35）在牛卵泡颗粒细胞（granulosa cells，GCs）中的表达及功能。采用B超超声波检测确定牛优势卵泡（dominant follicle，DF）与从属卵泡（subordinate follicles，SF），分离优势卵泡与从属卵泡颗粒细胞；利用qRT-PCR和Western blotting技术检测PRSS35在DF与SF的表达情况；免疫组化技术对PRSS35进行定位研究；设计PRSS35 siRNA基因沉默序列，经脂质体转染GCs，测定培养液雌激素（estrogen，E₂）浓度和GCs凋亡情况，研究PRSS35对牛卵泡颗粒细胞生长发育的影响。结果表明：1）PRSS35 mRNA在DF中的表达量极显著高于SF （P<0.001）；2） PRSS35在牛DF和SF颗粒层与膜层均有表达；3） PRSS35在DF中的表达量极显著高于SF （P<0.01）；4）PRSS35基因沉默后，GCs凋亡细胞百分率极显著增高（P<0.001），培养液雌激素浓度极显著降低（P<0.01）。综上表明，PRSS35在牛卵泡颗粒层和膜层均有表达，且在DF表达量极显著高于SF；PRSS35基因沉默后，通过抑制GCs增殖，降低E₂分泌浓度，从而抑制牛卵泡的生长发育。该研究为深入探讨PRSS35与牛卵泡发育的关系奠定基础。

旨在探究母猪初情日龄对其主要繁殖性能的影响。本研究共选用美系大白母猪923头，观察并记录了母猪初情日龄及其各胎次的总产仔数、产活仔数、健仔数和出生窝重，然后将母猪根据初情日龄的早晚分为4组，Ⅰ组：≤200日龄、Ⅱ组：201～215日龄、Ⅲ组：216～230日龄及Ⅳ组：>230日龄，对各试验组母猪的第1胎、第2胎、第3胎及综合3胎后数据和综合6胎主要繁殖性能的数据进行比较分析。结果表明：1）Ⅳ组母猪头胎总产仔数为12.05，显著高于Ⅰ组母猪头胎总产仔数的11.45（P<0.05），其他繁殖性状没有显著差异；2）Ⅱ组母猪第2胎的总产仔数和产活仔数分别为11.84和11.40，显著高于Ⅰ组母猪的总产仔数11.09和产活仔数10.66（P<0.05）；3）3胎和综合3胎后母猪Ⅱ组总产仔数、产活仔数和健仔数分别为12.47、11.82和11.48，显著高于Ⅳ组的总产仔数11.89、产活仔数11.22和健仔数10.85（P<0.05）；4）Ⅱ组母猪前6胎平均产仔总数、平均产活仔数和平均产健仔数分别为74.23、71.41和68.86，显著高于Ⅳ组母猪的前6胎平均产仔总数70.48、平均产活仔数67.32和平均产健仔数64.86（P<0.05）。综合比较，初情期日龄较早的母猪具有更好的繁殖性能（最佳日龄为201～215）。本研究通过挖掘出该群体后备母猪的最佳初情日龄和初配日龄，为后备母猪的挑选和猪场生产的应用提供了理论基础。

本研究旨在以肥大细胞和组织胺为指标探讨大鼠围着床期植物性神经与子宫局部细胞免疫的关系。选择180日龄，体重为300～350 g的性成熟Wistar雌性大鼠90只，随机分为对照、假手术处理和手术处理（n=30）3组，手术处理为孕前切除支配子宫的植物性神经（肠系膜后神经节节后纤维和盆神经丛节前纤维），伤口愈合，开始合笼试验。在妊娠4～6 d，无菌条件下，取出大鼠子宫和卵巢，观察排卵、胚胎着床情况变化，通过细胞染色和ELISA方法测定肥大细胞数量和组织胺释放量。结果表明：正常大鼠子宫中组织胺自发释放量和总含量在着床（d5）时最低。肥大细胞数量也呈现相似的变化。神经切除后，自发释放组织胺量在妊娠4～6 d数值明显下降，且在妊娠4、6 d与对照组相比较差异显著（P<0.05）；可释放组织胺总含量在着床前（d4）极显著降低（P<0.01），且胚胎着床数量明显减少或延迟；肥大细胞数量在着床前后与组织胺总含量有相似的变化。这些结果说明，切除神经降低了着床前肥大细胞数量和组织胺水平，改变了子宫局部免疫水平，进而引起了胚胎着床减少或延迟。综上表明，支配子宫的植物性神经可在着床前上调子宫肥大细胞数量和组织胺水平，控制子宫局部免疫水平，在胚胎着床中起重要调控作用。

为了探索β-葡聚糖对绵羊瘤胃上皮细胞（ruminal epithelial cells，RECs）β-防御素-1（sheep β-defensin-1，SBD-1）表达的影响。本研究首先建立绵羊RECs培养体系作为体外试验模型，用不同浓度（0、5、10、20、50和100 μg·mL^-1）的β-葡聚糖刺激RECs 8 h后，利用qPCR和ELISA方法检测RECs中SBD-1的表达变化，选出诱导SBD-1表达最高的β-葡聚糖浓度。然后用β-葡聚糖的最佳刺激浓度对RECs分别刺激0、2、4、8、12和24 h，同样利用qPCR和ELISA方法对RECs SBD-1的表达变化进行检测，从而筛选出诱导SBD-1表达最高的刺激时间。qPCR和ELISA结果显示，β-葡聚糖（5～100 μg·mL^-1）刺激RECs 8 h后，SBD-1 mRNA和蛋白的表达随着β-葡聚糖浓度的升高均呈现先升高后降低趋势，且当β-葡聚糖浓度为10 μg·mL^-1时SBD-1 mRNA和蛋白的表达量极显著高于对照组（P<0.01）。当用10 μg·mL^-1的β-葡聚糖刺激RECs 0～24 h后，qPCR结果显示，10 μg·mL^-1的β-葡聚糖刺激RECs 2 h时SBD-1 mRNA的表达量最高（P<0.01），之后呈下降趋势，而ELISA结果显示，在β-葡聚糖浓度为10 μg·mL^-1刺激RECs 4 h后SBD-1蛋白分泌水平达到最高（P<0.01）。MTT测定结果显示，100 μg·mL^-1β-葡聚糖会对绵羊RECs活力产生显著的影响（P<0.05）。本研究结果表明，β-葡聚糖能够提高绵羊瘤胃上皮细胞SBD-1的表达，且用浓度为10 μg·mL^-1的β-葡聚糖分别刺激RECs 2和4 h后SBD-1的mRNA和蛋白表达达到最高。

旨在讨论饲粮中过量维生素A对育成期水貂生长性能、营养物质代谢及血清生化指标的影响。本研究采用单因素随机试验设计，选择雄性水貂90只，随机分成6组，每组15个重复，维生素A添加水平分别为0（对照组）、5 000（Ⅰ组）、20 000（Ⅱ组）、80 000（Ⅲ组）、320 000（Ⅳ组）及1 280 000 IU·kg^-1（Ⅴ组）（干物质基础）。预饲期7 d，正式试验期60 d。正式期开始第30天每组随机选取8只水貂进行为期3 d的消化代谢试验，采用全收粪法收集粪便及尿样，测定各样品中的干物质（DM）、蛋白质（CP）及脂肪（EE）的含量，计算水貂的营养物质消化率。试验结束时，采集血清样本进行血糖（GLU）、三酰甘油（TG）、胆固醇（CHO）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL）、碱性磷酸酶（ALP）、天门冬酸氨基移酶（AST）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）及乳糖脱氢酶（LDH）的测定。结果表明：1）添加维生素A对水貂的末重、平均日增重均有显著影响，其中Ⅱ组与Ⅴ组间差异显著（P<0.05）。2）对照组营养物质消化率较其他组显著降低（P<0.05），其中Ⅱ组的营养物质消化率最高。3）维生素A对水貂血清中GLU、CHO含量的影响均不显著（P>0.05），Ⅱ组血清中TG含量最低，与Ⅴ组差异显著（P<0.05）。对照组、Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组血清中的HDL含量同Ⅳ组与Ⅴ组差异显著（P<0.05）。Ⅰ组的LDL含量最低，显著低于Ⅳ组与Ⅴ组（P<0.05），其余组差异不显著（P>0.05）。4）维生素A对水貂血清中的ALP、AST、ALT及LDH水平均有显著影响（P<0.05），其中对照、Ⅲ、Ⅳ组同Ⅴ组血清中的ALP含量差异显著（P<0.05）。Ⅱ组血清中AST的含量最低，显著低于对照组、Ⅳ组及Ⅴ组（P<0.05）。Ⅱ组血清中的ALT含量最低，显著低于其余各组（P<0.05），Ⅴ组显著高于对照组、Ⅰ、Ⅱ组（P<0.05）。Ⅴ组LDH的含量最低，且显著低于Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组（P<0.05），对照组同Ⅳ组差异不显著（P>0.05）。在本试验条件下，在水貂饲粮中添加5 000~80 000 IU·kg^-1维生素A均可以优化水貂的生长潜力。然而过量添加维生素A会造成水貂生长缓慢，脂类代谢能力下降等不良影响，过量添加维生素A对水貂生长造成的不良影响的机制仍需进一步研究。

为研究山羊源novel_miR218对小反刍兽疫病毒（PPRV）在淋巴细胞的主要受体——淋巴细胞信号活化分子（SLAM）表达水平的调节作用，通过荧光定量PCR法和Western blot技术检测PPRV疫苗毒N75-1株接种山羊外周血单核细胞（PBMCs）中SLAM和novel_miR218表达变化以及病毒增殖水平，然后检测novel_miR218模拟物（novel_miR218 mimic）和拮抗物（novel_miR218 inhibitor）转染山羊PBMCs中SLAM表达水平变化及对PPRV增殖的影响。结果表明，山羊PBMC感染PPRV后24 h （hpi）即可检测到细胞病变效应，特别在感染后48～72 hpi尤为明显；与对照组相比，PPRV感染组中SLAM受体mRNA表达水平在24 hpi极显著升高（P<0.01），随后逐渐降低，而novel_miR218表达水平在24 hpi极显著降低（P<0.01），随后逐渐升高，对照组中novel_miR218和SLAM的mRNA表达水平在各检测时间点未发现显著变化；感染组中SLAM受体的蛋白表达规律与其mRNA表达相似，而PPRV-N蛋白的表达水平呈现不断增加的趋势；novel_miR218 mimic转染组中SLAM和PPRV-N蛋白表达水平较对照组显著降低（P<0.05或P<0.01），且呈转染剂量依赖性，而novel_miR218 inhibitor转染组中SLAM和PPRV-N蛋白表达水平较对照组显著升高（P<0.05或P<0.01），且呈转染剂量依赖性。结果表明，PPRV感染山羊PBMCs中novel_miR218和SLAM表达水平具有相关性，细胞转染检测结果提示novel_miR218对SLAM受体的表达水平具有负调控作用并影响PPRV在山羊PBMCs中的复制水平。

旨在筛选具有高自然转化效率的副猪嗜血杆菌（HPS）菌株，为自然转化机制及基因功能研究提供生物材料；对所得菌株进行全基因组测序，通过比较基因组分析，挖掘HPS自然转化发生的分子背景。本研究采用自然转化方法对75株HPS田间分离株及15株标准株进行自然感受态菌株的筛选，并测定各自然感受态菌株的转化效率。采用PacBio三代测序技术对具有高自然转化效率的HPS菌株SC1401进行全基因组测序，对测序数据进行组装、基因预测、功能注释及共线性分析。将SC1401株测序结果与NCBI发布的SH0165（CP001321）、SH03（CP009158）、KL0318（CP009237）和ZJ0906（CP005384）进行全基因组比对。结果如下：1）共筛选出11株HPS自然感受态菌株，均为野生型，其中SC1401菌株自然转化效率最高；2）全基因组测序结果显示SC1401菌株整个基因组大小为2 277 540 bp，GC含量为40.03%，共编码2 220个基因，占整个基因组序列的87.75%（序列已上传至GenBank数据库，登录号为CP015099）；3）基因组共线性分析表明SC1401与其他四株全基因组测序菌株的共线性良好；4）比较基因组分析表明，SC1401菌株含特有基因385个，远多于其他4株菌株所含有的特有基因；5株HPS含有一系列相同的与自然转化相关的基因，且除tfox基因外，各基因氨基酸序列一致性均达90%以上。本研究首次报道了一株强自然转化能力的副猪嗜血杆菌SC1401的全基因组序列，并分析了其基因组基本特征，为后续HPS自然转化机制的研究提供一定理论基础。

为了解乌鸡中鸡杆菌的流行情况及其分离株的遗传进化特点，从河南信阳和南阳的两个乌鸡场采集棉拭子样品，进行鸡杆菌的分离和荧光定量PCR检测，对分离的菌株进行PCR鉴定、药敏试验和16S rRNA、rpoB及gyrB基因的PCR扩增，随后进行三个管家基因的序列测定分析，利用DNAStar中MegAlign程序计算分离株之间的相似性，利用MEGA5.0构建进化树进行遗传进化分析。结果显示：22只乌鸡中16只为鸭源鸡杆菌阳性，阳性率为72.7%；分离的4株鸡杆菌经鉴定均为鸭源鸡杆菌；4株鸭源鸡杆菌均为多重耐药菌株，只对头孢曲松、头孢噻肟、阿米卡星和妥布霉素等药物具有一定的敏感性；分离株与鸭源鸡杆菌的参考菌株相似性分别为99.1%~99.8%（16S rRNA）、85.4%~99.6%（rpoB）、92.7%~99.8%（gyrB）；在16S rRNA基因进化树中分离的4株鸭源鸡杆菌与参考鸭源鸡杆菌位于同一分支，在rpoB基因进化树中GAC193分离株与多杀性巴氏杆菌位于同一分支中，与其他鸭源鸡杆菌不在同一分支中，gyrB基因进化树中，GAC017与鸡杆菌基因种1在一个小的分支。结果表明：乌鸡中有鸭源鸡杆菌存在，并具有较高的检出率；从乌鸡中分离到4株鸭源鸡杆菌，这些菌株多重耐药现象严重；分离的部分鸭源鸡杆菌在rpoB和gyrB基因位点具有明显的遗传进化差异。

为了研究噬菌体Bp7蛋白gp38在噬菌体吸附宿主菌过程中的作用，PCR扩增gp38基因，对gp38蛋白氨基酸序列特征进行分析和同源性比对，构建重组表达质粒pColdTF-gp38，在E.coli BL21中诱导表达，SDS-PAGE电泳和Western blot检测重组蛋白gp38的表达；亲和层析法纯化蛋白，制备gp38多克隆抗体。免疫电镜检测gp38在噬菌体Bp7表面的定位，蛋白竞争试验和抗体阻断试验测定gp38及其抗体对噬菌体Bp7吸附效率的影响。序列分析结果表明，gp38蛋白氨基酸序列与T4噬菌体无同源性，与噬菌体T2、T6有同源性，C端序列保守区与高变区间隔排列，呈现马赛克特征；构建的重组质粒pColdTF-gp38在E.coli BL21实现可溶性表达，制备的gp38多克隆抗体效价达1∶16；免疫电镜检测结果表明，gp38蛋白抗体能够与长尾丝结合，引起噬菌体Bp7的聚集；蛋白竞争试验和抗体阻断试验结果表明gp38蛋白及其抗体均能完全抑制噬菌体Bp7对宿主菌E.coli K12的吸附。以上研究结果表明，gp38是噬菌体Bp7的尾丝蛋白，位于长尾丝末端，作为受体识别蛋白在噬菌体Bp7吸附宿主菌过程中具有关键作用，这为进一步阐明宽宿主谱噬菌体Bp7识别受体的机制提供了理论基础。

为了探讨我国绵羊痒螨（兔亚种）的遗传变异情况及群体遗传结构，采用PCR测序技术测定我国5个地区（华北、华东、华中、西北、西南）绵羊痒螨（兔亚种）线粒体12S基因的全序列，并进行遗传多样性分析。结果共获得89条序列，长度均为657 bp，核苷酸变异位点76个，单倍型50个（H1~H50），单倍型多样性（Hd）与核苷酸多样性（π）分别为0.931 05和0.005 59。进一步分析发现5个地理种群遗传分化程度较弱（F_st=0.042 322），基因交流非常频繁（Nm=5.657 372）。中性检验结果均为负值（Tajima's D=-0.928 31，Fu's Fs=-7.066 71），并且差异性不显著（P<0.05）。构建的NJ树和单倍型网络图均显示绵羊痒螨（兔亚种）5个地理种群的50个单倍型散在分布于不同的支系内，未形成明显的地理分布格局。我国绵羊痒螨（兔亚种）具有较高的遗传多样性，且有一定的遗传分化，基因交流频繁，但未形成以兔品种、温度带和地域来源划分的种群遗传结构。

旨在解析miRNA在细粒棘球绦虫原头蚴中的表达谱特性，为进一步揭示miRNA在细粒棘球绦虫原头蚴发育中的作用及调控机制提供理论依据。从患病绵羊肝无菌采集细粒棘球绦虫原头蚴，提取总RNA，构建原头蚴miRNA文库，利用RNA sequencing技术进行测序分析。结果表明，本研究从细粒棘球绦虫原头蚴中分离得到109个已知的miRNA分子，同时得到189个新的miRNA发夹前体分子。靶基因的预测结果显示，已知miRNA共有132个靶基因，而新发现的miRNA共有3 152个靶基因。进一步的研究发现这些miRNA分子广泛参与虫体生长发育相关的关键信号通路，诸如wnt、cAMP、Hedgehog、NF-κB、Notch以及胆酸盐等信号通路，研究又进一步采用实时荧光定量PCR以及原位杂交技术对虫体经典wnt信号通路相关的miRNA分子以及其靶标基因进行了差异表达以及组织定位研究。结果提示，HG328413.1_36258和β-catenin、HG328414.1_36364*和dis以及HG328399.1_25846和axin可能存在潜在的调控关系。综上所述，本研究在细粒棘球绦虫原头蚴中发现了大量的新的miRNA分子，丰富了原头蚴miRNA的数据，为进一步解析miRNA在细粒棘球绦虫原头蚴发育中的作用奠定了基础。

本研究旨在预测和鉴定鸡基质蛋白3（matrin 3，MATR3）的核定位信号（nuclear localization signal，NLS）。通过核定位信号在线预测软件预测鸡MATR3蛋白中存在的假定NLS （putative NLS，pNLS），根据预测结果构建鸡MATR3蛋白pNLS缺失的重组真核表达载体，转染细胞后通过观察缺失体重组蛋白的亚细胞定位来确定其NLS。根据鸡MATR3蛋白NLS邻近碱性氨基酸序列特征，构建NLS邻近氨基酸缺失的重组真核表达载体，转染细胞后通过荧光观察和亚细胞定位分析来确定NLS邻近碱性氨基酸是否参与鸡MATR3蛋白的细胞核定位。另外，对鸡MATR3蛋白NLS在不同物种间的保守性以及对外源蛋白的核输入能力进行分析和检测。结果表明，鸡MATR3蛋白中存在4个pNLS，其中pNLS2（⁵⁹⁶PSDKKSK⁶⁰²）缺失导致鸡MATR3蛋白丧失细胞核定位特征。将构建的鸡MATR3蛋白NLS邻近碱性氨基酸缺失的重组真核表达载体转染细胞，通过荧光观察和亚细胞定位分析，发现鸡MATR3蛋白NLS邻近的碱性氨基酸不参与NLS介导的MATR3蛋白细胞核定位。此外，笔者发现该NLS基序在不同物种的MATR3蛋白中均保守，并且与SV40大T抗原NLS具有相同的核输入能力。鸡MATR3蛋白中存在一个高度保守的NLS （⁵⁹⁶PSDKKSK⁶⁰²），其邻近的碱性氨基酸位点不参与MATR3蛋白的细胞核定位。

为了解gga-miR-155对MDCC-MSB1细胞生物学行为的影响，将人工合成的gga-miR-155模拟物、gga-miR-155抑制物以及阴性对照瞬时转染MDCC-MSB1细胞。然后采用实时荧光定量PCR （RT-qPCR）检测MDCC-MSB1细胞中gga-miR-155的表达水平，CCK-8法检测转染后细胞增殖能力的变化，流式细胞术检测MDCC-MSB1细胞的细胞周期与凋亡的变化，Transwell检测MDCC-MSB1细胞的迁移、侵袭能力的变化。结果显示，gga-miR-155模拟物可显著上调MDCC-MSB1细胞gga-miR-155表达水平，促进MDCC-MSB1细胞增殖，细胞G1期细胞减少，S和G2期细胞增加，同时凋亡减少，迁移、侵袭能力增加；gga-miR-155抑制物可显著下调MDCC-MSB1细胞gga-miR-155表达水平，抑制MDCC-MSB1细胞增殖，细胞G1期细胞增加、S和G2期细胞减少，同时凋亡增加，迁移、侵袭能力下降。结果表明，gga-miR-155可促进MDCC-MSB1细胞增殖、迁移和侵袭，抑制其凋亡。

本试验旨在研究瞬时性受体电位通道香草酸受体6（transient receptor potential vanilloid receptor 6，TRPV6）基因沉默对蛋鸡十二指肠和空肠跨细胞钙离子转运相关蛋白表达、血浆钙磷浓度、PTH水平及骨密度的影响。将64只220日龄高产蛋鸡随机分为对照组和TRPV6基因沉默组，分别一次性注射生理盐水和pSIREN-TRPV6-3质粒，连续观察28 d。结果表明，与对照组相比，pSIREN-TRPV6-3质粒注射第7、14和21天，十二指肠和空肠中均检测到ZsGreen蛋白表达；TRPV6、CaBP-D28K mRNA和蛋白表达水平均显著降低（P<0.05或P<0.01）；血浆PTH浓度显著升高（P<0.05或P<0.01）；此外，血浆钙、磷浓度不受影响，股骨和胫骨骨密度有降低趋势，但与对照组相比差异不显著（P>0.05）。由此可见，siRNA TRPV6质粒抑制十二指肠和空肠TRPV6和CaBP-D28K的表达，但不影响血液中钙离子浓度和骨密度水平，表明在正常日粮钙水平条件，沉默TRPV6通道蛋白不影响蛋鸡体内正常的钙转运。

旨在研究冷冻前后牦牛精子质量和HSP70表达变化。采集健康且繁殖能力正常的6头大通牦牛精液，将试验分为鲜精组和冻精组，以精子活力和质膜完整率作为评价精子质量的指标。采用实时荧光定量PCR、Western blot和免疫荧光技术检测HSP70在精子冷冻前后的表达差异。结果表明，与鲜精相比，冻融后精子活力和质膜完整率均极显著下降（P<0.01），HSP70 mRNA转录水平显著降低（P<0.05），蛋白水平极显著下降（P<0.01）。鲜精HSP70蛋白定位于精子顶体区、顶体赤道段、后顶体区和精子中段，而冻融精子HSP70蛋白主要位于后顶体区和精子中段，且平均光密度值极显著降低（P<0.01）。综上表明，冻融后牦牛精子质量与HSP70表达量均降低，推测两者之间存在一定关联。

临床上禽流感病毒（avian influenza virus，AIV）与新城疫病毒（Newcastle disease virus，NDV）共同感染情况经常发生。为研究AIV与NDV在鸡成纤维细胞DF-1中的共感染对病毒复制的相互影响，首先对NDV和H9N2亚型AIV单独感染DF-1细胞时病毒的复制情况进行了分析，设定以NDV和AIV共感染细胞后12和24 h作为样品采集点，通过Western blot、间接免疫荧光和实时荧光定量PCR检测了两种病毒共感染与单独感染对病毒NP蛋白表达的相互影响。结果显示：Western blot分析表明共感染12和24 h，NDV NP蛋白的表达分别下调了70.6%（P<0.001）和45.7%（P<0.001），AIV NP蛋白的表达分别下调了61.5%（P<0.001）和82.8%（P<0.001）；免疫荧光分析显示共感染组细胞中NDV和AIV的NP蛋白丰度在感染12 h时间点分别下调81.1%（P<0.001）和65.5%（P<0.001），24 h时则分别下调41.2%（P<0.05）和47.4%（P<0.001）；qPCR结果也证实共感染12和24 h组NDV NP的mRNA表达水平分别下调了64.3%（P<0.001）和64.4%（P<0.05），AIV NP的mRNA表达水平分别下调了61.5%（P<0.001）和63.0%（P<0.001）。本研究证明AIV与NDV共感染在细胞水平上可引起病毒复制的相互抑制，为研究NDV和AIV共感染机制在细胞水平上奠定了基础。

为获悉云南省部分地区猫血巴尔通氏体的感染情况，采集来自云南省部分地区猫血液样品338份，PCR扩增猫血巴尔通氏体的16S rRNA基因，通过测序、序列比对分析、构建进化树，确定所检获的猫血巴尔通氏体种属关系。结果有21个样本确定为猫血巴尔通氏体感染阳性，总体感染率为6.21%（21/338），其中检测20份样品为猫小型血巴尔通氏体，1份样品为猫大型血巴尔通氏体。对不同养殖模式和不同年龄进行感染因素分析，表明感染率在不同养殖模式和不同年龄段之间有显著的差异（P<0.05）。本研究首次报道了云南省部分地区猫体内存在猫血巴尔通氏体的感染，为云南省猫血巴尔通氏体病的防控提供了数据参考。