畜牧兽医学报 ›› 2009, Vol. 40 ›› Issue (5): 611-616.doi:
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刘丽娜,彭健,郑嵘,刘敏,蒋思文*
LIU Li-na, PENG Jian, ZHENG Rong, LIU Min, JIANG Si-wen*
摘要: 以人Suv39h2基因mRNA序列为基础,利用“电子克隆”获得猪的部分cDNA序列,并用RT-PCR技术从肌肉组织中扩增得到猪Suv39h2基因1 291 bp的cDNA序列,将其重组于pGEX-KG原核表达载体中,经酶切、序列鉴定正确后,用该重组质粒转化大肠杆菌BL21,经异丙基B-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,并用SDS-PAGE 电泳进行检测,优化后的最佳条件为IPTG 诱导4 h,其浓度为0.7 mmol·L-1,并主要以包涵体的形式存在。Western blotting 检测发现在约66 ku处有一条特异带,与预测的大小一致。猪Suv39h2基因的克隆和表达研究,为进一步研究该基因的生物学功能奠定了基础。