畜牧兽医学报 ›› 2005, Vol. 36 ›› Issue (12): 1275-1280.doi:
葛秀国; 徐小明;华进联; 杨继建; 窦忠英
GE Xiu-guo;XU Xiao-ming; HUA Jin-lian;YANG Ji-jian ;DOU Zhong-ying
摘要: 以牛胎儿为材料,从原始生殖细胞(PGC)分离培养出胚胎生殖细胞(EG),并进行传代和鉴定,对影响胚胎生殖细胞分离与培养的因素进行了探讨,研究发现以共培养方式培养牛原始生殖细胞时,原代培养都可以出现大量形态较好的EG细胞集落,说明同源的体细胞可以很好地支持PGC的生长和增殖,组织块培养细胞克隆数目较少,PGC很难增殖,不能形成典型的集落,传代也不理想,只传了一代。同时比较了不同传代方法对牛胚胎生殖细胞细胞传代的影响,发现消化+机械分离法和消化+吹打法都可以用于EG细胞的传代。消化+吹打法操作简单,省时省力,也能够很好的保持细胞的增殖活力。原代培养的牛原代胚胎生殖细胞进行了细胞表面标志抗原SSEA-1,3,4鉴定,呈弱阳性。细胞体外培养可以分化为成纤维样细胞、上皮样细胞和类胚体。