畜牧兽医学报 ›› 2008, Vol. 39 ›› Issue (11): 1548-1553.doi:
高志强，张鹤晓*，赖平安，谷强，蒲静，汪琳，乔彩霞，吴丹，柏亚铎，张伟
GAO Zhi-qiang，ZHANG He-xiao*，LAI Ping-an，GU Qiang，PU Jing，
WANG Lin，QIAO Cai-xia，WU Dan，BAI Ya-duo，ZHANG Wei
摘要： 采用人工拼接的方式拼接了非洲马瘟病毒(AHSV)含有绝大多数线性抗原表位的VP7编码基因片段，克隆于pET-30a构建重组质粒pET-30a-VP7，将pET-30a-VP7转化BL21(DE3)，经1.0 mmol/L IPTG 诱导，外源基因以包涵体的形式获得高效表达。通过Dot-ELISA以及ELISA试验证明表达产物具有良好的反应原性。以纯化后表达产物作为诊断抗原包被酶标板建立了检测AHSV抗体的间接ELISA 方法。结果表明，抗原的最佳包被浓度为0.25 μg/mL，血清的最佳稀释度为1∶40，待检血清阳性临界值初步定为0.25。用此方法和商品化ELISA试剂盒检测了184份血清样品，结果完全符合。
