畜牧兽医学报 ›› 2011, Vol. 42 ›› Issue (7): 1032-1038.doi:

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鹅垂体特异性转录因子荧光素酶报告基因重组体的构建和鉴定

赵荣雪1 ,段修军2,赵文明1,董飚2,徐琪1,孙国波1,乔娜1,张海波1,陈国宏1*
  

  1. 1.扬州大学动物科学与技术学院,扬州 225009; 2.国家级水禽基因库,泰州 225300
  • 收稿日期:1900-01-01 修回日期:1900-01-01 出版日期:2011-07-28 发布日期:2011-07-28
  • 通讯作者: 陈国宏

  • Received:1900-01-01 Revised:1900-01-01 Online:2011-07-28 Published:2011-07-28

摘要: 为研究垂体特异性转录因子(Pituitary transcription factor 1, Pit1)启动子转录调控机制,将获得的Pit1基因的启动子,插入荧光素酶报告基因载体中,构建Pit1基因启动子调控的报告基因重组表达质粒。本研究利用染色体步移技术扩增鹅Pit1基因的启动子,定向亚克隆至荧光素酶表达载体pGL3Basic 中,构建含有正确目的基因的报告基因重组体pGL3Pit1,并通过限性内切酶酶切、PCR 及测序进行鉴定。通过酶切鉴定及基因测序证明,所克隆的基因产物与预期结果一致,序列无碱基突变。结果,成功构建了含有Pit1启动子基因序列的荧光素酶报告基因真核表达载体,为下一步分析该启动子活性及转录调控机理奠定基础。