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当期目录

2017年 第48卷 第6期 刊出日期:2017-06-23
中国精品科技期刊证书
畜牧兽医学报, 2017, 48(6):  0-0.  doi:
摘要 ( 67 )   HTML( )    PDF (330KB) ( 127 )  
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中文目次
畜牧兽医学报, 2017, 48(6):  0-0.  doi:
摘要 ( 39 )   HTML( )    PDF (265KB) ( 147 )  
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英文目次
畜牧兽医学报, 2017, 48(6):  0-0.  doi:
摘要 ( 40 )   HTML( )    PDF (163KB) ( 134 )  
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封面封底
畜牧兽医学报, 2017, 48(6):  0-0.  doi:
摘要 ( 42 )   HTML( )    PDF (451KB) ( 136 )  
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2015年百种中国杰出学术期刊
畜牧兽医学报, 2017, 48(6):  0-0.  doi:
摘要 ( 42 )   HTML( )    PDF (319KB) ( 129 )  
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综述
SOX9基因调控雄性哺乳动物生殖活动的研究进展
李讨讨, 马友记, 赵兴绪
畜牧兽医学报, 2017, 48(6):  971-978.  doi:10.11843/j.issn.0366-6964.2017.06.001
摘要 ( 243 )   HTML( )    PDF (1652KB) ( 362 )  
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SRY-盒包含蛋白9(Sex determining region Y-box 9,SOX9)基因属于SRY-盒包含蛋白(SRY-type HMG box,SOX)基因家族中的重要成员,是继Y染色体性别决定基因(Sex-determining region of Y chromosome,SRY)后发现的又一重要的性别决定基因。近些年研究表明,SOX9基因在哺乳动物生殖活动中发挥着重要的调控作用,与性别分化、精子发生等生殖活动密切相关。本文主要从SOX9基因的结构特点和在胚胎期及生后哺乳动物生殖活动中的作用机制等方面的研究进展进行综述,旨在为进一步深入研究其在调控哺乳动物生殖活动中的分子作用机制及与其他基因的联合调控机制提供参考。

动物寄生性蠕虫基因组学研究进展
杨洋, 付宝权
畜牧兽医学报, 2017, 48(6):  979-989.  doi:10.11843/j.issn.0366-6964.2017.06.002
摘要 ( 156 )   HTML( )    PDF (1029KB) ( 335 )  
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动物(人)寄生性蠕虫病主要由寄生性线虫、吸虫和绦虫引起,严重威胁着人和动物的健康,但目前尚无有效的防治措施。近年来,随着测序技术的不断发展,越来越多种类的寄生性蠕虫基因组序列被测定和解析,寄生性蠕虫的生物学特征也被更深层次地挖掘。本文中作者将就寄生性蠕虫全基因组测序现状、基因的组成及特征、功能基因组的研究等进行综述,为深入了解寄生性蠕虫的起源、进化和致病机制,以及为寄生性蠕虫病的诊断、新药设计和疫苗研发提供新的思路。

遗传育种
ev21占位区和未占位区重复序列结构与羽速表型关系研究
张乐超, 王晗, 张秀玲, 刘春杨, 王麒, 周荣艳, 李祥龙, 李兰会
畜牧兽医学报, 2017, 48(6):  990-999.  doi:10.11843/j.issn.0366-6964.2017.06.003
摘要 ( 252 )   HTML( )    PDF (1774KB) ( 242 )  
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本试验旨在探讨鸡羽速基因型Hae Ⅲ酶切鉴定方法的分子基础。以羽型明确的6个品系(太行鸡、坝上长尾鸡、大午粉鸡、海兰灰鸡、海兰褐鸡、海兰灰祖代四系鸡)313份鸡基因组为模板,利用Hae Ⅲ酶切的RFLP试验进行羽速验证,并对ev21占位区(OS)和非占位区(US)共有序列以及OS区特有序列进行酶切试验。结果表明:1)Blast分析发现1 450 bp为鸡ev21的US区域片段。海兰灰及其祖代四系和大午粉祖代的羽速基因型与Hae Ⅲ酶切结果完全一致,但太行慢羽公鸡、慢羽母鸡、坝上长尾慢羽公鸡和海兰褐慢羽鸡的一致率分别为40.0%、27.6%、28.6%和0.0%;2)太行鸡和坝上长尾鸡ev21的OS和US区共有序列538 bp酶切鉴定结果与表型一致率达到92%以上,其他品系(除海兰褐快羽公鸡为0.0%)均为100.0%;3)鸡ev21的OS区特异序列1 440 bp的扩增阳性率在太行慢羽公鸡、慢羽母鸡和快羽公鸡中的阳性率分别为94.1%、65.5%和0.0%,在海兰灰祖代鸡中分别为100.0%和0.0%,并且1 440片段不能被Hae Ⅲ切开。综合分析6个品系ev21的OS和US区结构特征,认为US区Hae Ⅲ酶切位点变异不能作为慢羽和内源病毒ev21的鉴定依据,而OS区的ev21插入与1 440 bp序列Hae Ⅲ酶切位点的A→G突变和八碱基重复是紧密连锁的。

Gab1和Sfmbt2基因在成年普通牛8种不同组织中的印记状态分析
王冠楠, 赵宇鹏, 陈玮娜, 张萃, 徐达, 李冬杰, 李世杰
畜牧兽医学报, 2017, 48(6):  1000-1006.  doi:10.11843/j.issn.0366-6964.2017.06.004
摘要 ( 189 )   HTML( )    PDF (1877KB) ( 200 )  
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旨在揭示Gab1(Grb2-associated binding protein 1)和Sfmbt2(Scm-like with four mbt domains 2)基因在牛不同组织以及胎盘中的印记状态,本研究应用基于单核苷酸多态性(Single nucleotide polymorphisms,SNP)的RT-PCR(Reverse transcription-PCR)产物直接测序方法对Gab1和Sfmbt2基因在牛7个组织(心、肝、脾、肺、肾、肌肉和脂肪)以及胎盘中的印记状态进行分析。结果显示,在被分析的7个组织和胎盘中均检测到Gab1和Sfmbt2基因的表达。通过比较杂合子牛基因组PCR扩增产物与RT-PCR扩增产物在SNP位点的测序峰图,发现Gab1和Sfmbt2在被检测的7个组织和胎盘中均为双等位基因表达,说明Gab1和Sfmbt2在牛的组织和胎盘中是非印记的。

蒙古马高负荷运动训练前后转录组差异表达分析
赵启南, 芒来, 白东义, 赵一萍, 李蓓, 乌尼尔夫, 乌英嘎, 苏日嘎, 敖乳嘎
畜牧兽医学报, 2017, 48(6):  1007-1016.  doi:10.11843/j.issn.0366-6964.2017.06.005
摘要 ( 234 )   HTML( )    PDF (2407KB) ( 246 )  
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旨在对蒙古马高负荷运动训练前后转录组差异表达进行分析。本试验对6匹进行了4个月高负荷运动训练的蒙古马进行研究,分别在训练前后两个时期采集肌肉样品,利用二代测序技术对肌肉样品建立转录组文库,对发生显著变化的差异基因进行GO功能富集和KEGG Pathway分析,寻找训练前后发生显著变化的代谢通路及相关候选基因。结果表明,在转录组筛选到的1 102个显著差异表达基因中,有299个在训练后发生下调,803个发生上调。这些差异基因被注释到3 398条GO term上。其中与运动学相关的生物学过程有:肌肉结构发育、心血管系统发育、循环系统发育、肌肉组织发育、肌肉器官发育、肌肉收缩和肌肉细胞分化等。对差异表达基因进行KEGG pathway分析,结果表明,差异基因被富集到如扩张型心肌病、肥厚型心肌病、心肌收缩、钙信号通路、肌动蛋白骨架调节等与运动相关的193条通路中。本研究结果为探究蒙古马强耐力的基本分子机理提供理论基础,同时也为理解蒙古马运动学特性提供新的思路。

利用犬170K高密度SNP芯片检测16个中国地方犬种全基因组拷贝数变异
刘晨龙, 杨前勇, 陈浩, 黄晓畅, 陈从英
畜牧兽医学报, 2017, 48(6):  1017-1027.  doi:10.11843/j.issn.0366-6964.2017.06.006
摘要 ( 223 )   HTML( )    PDF (2547KB) ( 375 )  
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旨在解析中国地方犬全基因组拷贝数变异(CNV)分布情况,为分析CNV对犬表型变异的影响提供前期基础。本研究采集了16个来自中国不同地方犬品种和9头罗威纳犬共计185头犬的血液样品,使用血液DNA提取试剂盒提取DNA,利用犬170 K SNP芯片和PennCNV软件对中国地方犬进行全基因组范围内的CNV分析。参照Illumina芯片标准操作流程进行芯片扫描和基因分型。将质控后的SNP参考PennCNV软件使用说明书,设定分析参数进行CNV检测分析。从分析结果中随机挑选8个CNV区间(CNVRs)使用实时定量PCR进行验证。利用BioMart以及DAVID软件进行基因和功能注释分析。结果表明,在185个个体中共发现了477个CNV,这些CNV随机分布在38条常染色体上,合并后可以得到220个CNVR,总长度约占犬整个基因组序列的1.25%,平均长度为142.24 kb。在220个CNVR中,115个为缺失,74个为重复,31个为缺失/重复CNVR。此外,笔者发现53个CNVR为潜在的中国地方犬品种特异性CNVR。在基因和功能注释中,本研究共发现162个基因位于所检测到的CNVR内,这些基因主要富集的功能类别是嗅觉受体活动,嗅觉的感知,对化学刺激物的感知,感官知觉和神经系统过程。这些结果解析了中国地方犬基因组结构变异分布情况,将有助于进一步研究CNV与犬表型变异的关联性。

生物技术与繁殖
肾上腺素能受体β2和胆碱能受体M1在小鼠睾丸的表达定位及功能研究
霍书英, 李玉荣, 武现军
畜牧兽医学报, 2017, 48(6):  1028-1034.  doi:10.11843/j.issn.0366-6964.2017.06.007
摘要 ( 234 )   HTML( )    PDF (2353KB) ( 236 )  
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旨在研究肾上腺素能受体β2和胆碱能受体M1在小鼠睾丸组织的表达定位及其生理功能。采用RT-PCR方法检测β2受体和M1受体mRNA在小鼠睾丸不同发育时期的表达变化;免疫组织化学方法研究β2受体和M1受体在小鼠睾丸的表达定位;通过体外细胞培养方法研究睾丸间质细胞β2受体和M1受体的生理功能。结果表明:β2受体和M1受体mRNA在小鼠睾丸不同发育时期均显著表达;β2受体和M1受体主要在睾丸间质细胞表达; 10-5和10-6 mol·L-1经递质 NE和Ach均能显著促进小鼠睾丸间质瘤细胞MLTC-1的增殖(P<0.05),β2受体阻断剂布托沙明(Buto)和M1受体阻断剂哌吡氮平(Pire)均能阻断NE和Ach的促增殖作用(P<0.05);NE和Ach均能明显抑制MLTC-1细胞3β-HSD mRNA的表达,其阻断剂Buto和Pire均能阻断其作用效果;NE可明显促进雌激素受体α(ERα)mRNA的表达,而Ach可明显促进ERβ的表达,但其阻断剂Buto和Pire并不能阻断NE 和Ach促进ERα和ERβ mRNA表达的作用效果。综上表明,NE和Ach调节睾丸间质细胞的数量和雄激素的合成,主要是通过分布于睾丸间质细胞的功能受体β2受体和M1受体介导的,但NE和Ach调节雌激素受体ERα和ERβ的表达并不受β2受体和M1受体的介导。

镰刀菌毒素对断奶仔猪子宫组织结构、Hsp70分布和表达的影响
孙文涛, 高文博, 戴美玲, 陈祥兴, 杨在宾, 姜淑贞, 杨维仁, 黄丽波
畜牧兽医学报, 2017, 48(6):  1035-1043.  doi:10.11843/j.issn.0366-6964.2017.06.008
摘要 ( 223 )   HTML( )    PDF (2760KB) ( 319 )  
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本研究旨在探讨镰刀菌毒素对断奶仔猪子宫的组织结构、Hsp70 的分布和 mRNA 表达量的影响。选择 35日龄体重为(8.45±0.94)kg的健康三元杂交(杜洛克×长白×大白)雌性断奶仔猪20头,仔猪随机分为 2 组,每组10头。对照组饲喂基础饲粮,镰刀菌毒素组饲喂含有镰刀菌毒素(玉米赤霉烯酮 0.90 mg·kg-1,呕吐毒素1.43 mg·kg-1,烟曲霉毒素5.85 mg·kg-1)的试验饲粮,预试期 7 d,正试期 35 d,试验结束进行屠宰取出子宫。结果表明:与对照组相比,镰刀菌毒素极显著降低了仔猪的平均日增重和平均日采食量(P< 0.01),引起子宫器官指数极显著增加(对照组:0.91±0.03,镰刀菌毒素组:1.90±0.10,P<0.01),子宫腺腺泡数量增多、密度增大,子宫内膜厚度极显著增加(对照组:1 002.55±101.22 μm,镰刀菌毒素组:1 343.09±104.57 μm,P<0.01)。肌层增厚一倍以上(对照组:355.58±28.26 μm,镰刀菌毒素组:779.56±40.38 μm),与对照组相比均差异极显著(P< 0.01)。子宫中的Hsp70阳性细胞主要分布在子宫内膜上皮和子宫腺柱状上皮内,为胞质着色。与对照组相比,镰刀菌毒素组子宫Hsp70的免疫阳性反应明显增强(P<0.01),且内环肌层也可见有Hsp70阳性细胞存在,子宫腺上皮细胞Hsp70 IOD较对照组增加2倍多。镰刀菌毒素组子宫Hsp70 mRNA相对表达量显著高于对照组(P< 0.05)。综上表明,本试验条件下,镰刀菌毒素可引起断奶仔猪子宫氧化应激反应,子宫内膜上皮和子宫腺上皮通过增加自分泌 Hsp70 能力,一定限度内能够对抗镰刀菌毒素对子宫正常生理机能的影响。

营养与饲料
日循环高温对蛋鸡抗氧化能力及免疫机能的影响
刁华杰, 冯京海, 王雪洁, 刁新平
畜牧兽医学报, 2017, 48(6):  1044-1053.  doi:10.11843/j.issn.0366-6964.2017.06.009
摘要 ( 315 )   HTML( )    PDF (2272KB) ( 426 )  
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本试验旨在模拟夏季规模化蛋鸡舍内温度变化,研究不同日循环高温对蛋鸡抗氧化能力及机体免疫机能的影响,以期引起生产及研究人员对夏季高温的重视。选取28周龄海兰褐蛋鸡288只,随机分为适温组(21 ℃,自由采食)、低循环温度组(27~30 ℃,自由采食)、高循环温度组(29~35 ℃,自由采食)及采食配对组(21 ℃,饲喂量同高循环温度组)4个处理组,每个处理6个重复,每个重复12只鸡,分别饲养于4个人工环境控制舱内,试验持续4周。从试验第25天开始,使用微型温度记录仪测定连续3天蛋鸡的体核温度。试验第29天,每重复随机选取1只鸡翅静脉采血,而后屠宰,分离脾和肝,计算脾脏指数,测定蛋鸡血清和肝中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)、总抗氧化能力(T-AOC)及血清中免疫球蛋白A(IgA)、G(IgG)、M(IgM )、溶菌酶。结果表明,与适温组相比,低循环温度组蛋鸡体核温度(TC)无显著差异,除血清T-AOC降低外,肝和血清中MDA含量及抗氧化酶活性均无显著差异,血清IgA、IgM含量显著降低(P<0.05);而高循环温度组蛋鸡TC显著升高(P<0.05),血清和肝中MDA含量显著升高(P<0.05),T-AOC显著下降(P<0.05),血清GSH-Px活性有降低趋势(0.05< P< 0.1),血清IgA、IgM含量以及脾脏指数显著降低(P<0.05);与采食配对组相比,高循环温度组蛋鸡TC显著升高(P<0.05),血清和肝中MDA含量同样显著升高(P<0.05),T-AOC显著下降(P<0.05),血清GSH-Px活性显著降低(P<0.05),血清中仅IgA含量显著降低(P<0.05),IgM、IgG含量以及脾脏指数无显著差异。结果表明,夏季蛋鸡舍温度在27~30℃波动时,蛋鸡血液和肝中抗氧化能力变化不明显,但血液中IgA和IgM含量显著降低;在29~35 ℃波动时,蛋鸡的体核温度显著升高,血液和肝中抗氧化能力显著降低,脾脏指数及血液中IgA和IgM含量显著降低。高温对蛋鸡抗氧化能力的影响可能与升高体温有关,对免疫机能的影响可能与降低采食量有关。

饲粮n-6/n-3多不饱和脂肪酸配比对北极狐冬毛期体脂沉积、体脂肪酸组成及血液生化指标的影响
钟伟, 张婷, 罗婧, 王卓, 岳志刚, 刘学庆, 李光玉
畜牧兽医学报, 2017, 48(6):  1054-1065.  doi:10.11843/j.issn.0366-6964.2017.06.010
摘要 ( 237 )   HTML( )    PDF (916KB) ( 216 )  
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本试验旨在研究饲粮n-6/n-3多不饱和脂肪酸( PUFA)配比对冬毛生长期雄性北极狐体脂沉积、体脂肪酸组成及血液生化指标的影响。试验选取48只157日龄,平均体重为(5 658±47)g的健康雄性北极狐,随机分成4组(每组12个重复,每个重复1只),分别饲喂n-6/n-3 PUFA 配比为3、18、41和136的试验饲粮,试验饲粮对应添加的油脂为12%鱼油和2%豆油(Ⅰ组),9.38%玉米油和4.62%豆油(Ⅱ组),12%玉米油和2%豆油(Ⅲ组),1.5%鱼油和12.5%玉米油(Ⅳ组)。预饲期7 d,试验期40 d。结果表明:1)饲粮n-6/n-3 PUFA配比极显著影响北极狐肝体指数(P<0.01),Ⅳ组极显著高于II和Ⅲ组(P<0.01),与Ⅰ组差异不显著(P>0.05),对肝脂肪含量、肝脂率、皮下脂肪重、皮脂率均无显著影响(P>0.05);2)饲粮n-6/n-3 PUFA配比显著或极显著影响北极狐肌内脂肪饱和脂肪酸(SFA)、单不饱和脂肪酸(MUFA)、PUFA、n-6和n-3 PUFA含量(P<0.05或P<0.01),Ⅰ组SFA显著高于Ⅱ组(P<0.05),与Ⅲ和Ⅳ组差异不显著(P>0.05),Ⅰ组MUFA显著高于Ⅲ和Ⅳ组(P<0.05),与Ⅱ组差异不显著(P>0.05),Ⅱ组PUFA极显著高于I和Ⅳ组(P<0.01),与Ⅲ组差异不显著(P>0.05),I和Ⅲ组n-3极显著高于II和Ⅳ组(P<0.01),Ⅲ组n-6极显著高于I和Ⅳ组(P<0.01),与Ⅱ组差异不显著(P>0.05);饲粮n-6/n-3 PUFA配比极显著影响皮下脂肪中的MUFA,PUFA,n-3和n-6 PUFA(P<0.01),而对SFA无显著影响(P>0.05),Ⅰ组MUFA极显著高于II、Ⅲ和Ⅳ组(P<0.01),II和Ⅲ组PUFA极显著高于I和Ⅳ组(P<0.01),I和Ⅲ组n-3极显著高于II和Ⅳ组(P<0.01),Ⅱ组n-6极显著高于I和Ⅳ组(P<0.01),与Ⅲ组差异不显著(P>0.05);3)饲粮n-6/n-3 PUFA配比显著影响了北极狐血清中的高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)和补体4(C4)(P<0.05),而对血清中的TG、TC和GLU、IgA、IgM、IgG、补体3、TNF和IL-2无显著影响(P>0.05,Ⅰ组HDL-C显著高于II、Ⅲ和Ⅳ组(P<0.05),Ⅰ组LDL-C显著高于Ⅲ和Ⅳ组(P<0.05),与Ⅱ组差异不显著(P>0.05),Ⅳ组C4显著高于II和Ⅲ组(P<0.05),与Ⅰ组差异不显著(P>0.05)。饲粮n-6/n-3 PUFA配比为41时,降低了肝体指数,动员了肌内脂肪和皮下脂肪中不饱和脂肪酸(UFA)含量,利于机体SFA的沉积,降低了血脂中高密度脂蛋白(HDL-C)和低密度脂蛋白(LDL-C)含量,保证了北极狐机体的健康。

3种饲草不同配比的体外消化特性及组合效应分析
刘丽英, 王志军, 尹强, 孙林, 成启明, 范文强, 刘亚红, 贾玉山
畜牧兽医学报, 2017, 48(6):  1066-1075.  doi:10.11843/j.issn.0366-6964.2017.06.011
摘要 ( 190 )   HTML( )    PDF (897KB) ( 294 )  
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本研究旨在实现低质粗饲料的有效利用,为我国北方地区饲草型发酵全混合日粮确定最佳粗饲料组合配方。将玉米秸、苜蓿、燕麦草3种饲草通过机械预处理,按不同比例混合后进行体外发酵,根据混合饲草的体外发酵指标(pH、IVDOM、GP、TVFA等)以及组合效应进行综合评定。结果表明,玉米秸+燕麦草组合体外发酵各指标及组合效应效果不佳;玉米秸+苜蓿干草组合中,处理组D(玉米秸∶苜蓿干草=60%∶40%)和处理组E(玉米秸∶苜蓿干草=50%∶50%)体外发酵指标(pH、IVDOM、GP、TVFA)值及正组合效应高于或显著高于其他组合(P<0.05);玉米秸+苜蓿干草+燕麦草组合中,处理组R(玉米秸秆∶苜蓿干草∶燕麦干草=50%∶30%∶20%)和处理组Q(玉米秸秆∶苜蓿干草∶燕麦干草=50%∶40%∶10%)体外发酵指标值及正组合效应高于或显著高于其他组合(P<0.05)。综合考虑,玉米秸+苜蓿干草和玉米秸+苜蓿干草+燕麦草两个组合中,苜蓿的添加比例在30%以上时,体外发酵积累的pH、IVDOM、GP、TVFA值及组合效应显著增加,能明显地提高秸秆的消化率或降解率,饲草间产生正组合效应更显著。

预防兽医
猪圆环病毒3型检测及其Cap结构序列和抗原性预测分析
湛洋, 王东亮, 王乃东, 蒋一凡, 黄坤, 崔尚金, 姜平, 杨毅
畜牧兽医学报, 2017, 48(6):  1076-1084.  doi:10.11843/j.issn.0366-6964.2017.06.012
摘要 ( 402 )   HTML( )    PDF (5354KB) ( 639 )  
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近期报道在美国多个州的养猪场发现了一种新型的猪圆环病毒3型毒株(porcine circovirus 3,PCV3)。为了确定PCV3是否已经在我国南方部分省份的猪场中广泛存在,并对目前PCV2疫苗是否对PCV3感染具有交叉保护作用作出科学预测,笔者对我国南方几个省份疑似猪皮炎肾病综合征的病猪组织样品进行PCV3巢式PCR检测及其核衣壳蛋白质(capsid protein,Cap)结构的PyMol和抗原表位服务器在线模拟分析。结果首次在这些病料中检测到PCV3的存在,部分病料表现为PCV2和PCV3共感染的特性。对其Cap结构及抗原性分析发现,PCV2和PCV3表现出很大的差异。因此,推测PCV2和PCV3不具有交叉免疫保护的特性,新的疫苗研究和开发,对于将来控制PCV3流行是必要的。

检测猪流行性腹泻病毒S1蛋白抗体的间接ELISA方法
姚作俊, 郝达仁, 白云, 颜国华, 王海敏, 宋勤叶, 李潭清
畜牧兽医学报, 2017, 48(6):  1085-1091.  doi:10.11843/j.issn.0366-6964.2017.06.013
摘要 ( 226 )   HTML( )    PDF (1186KB) ( 291 )  
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为了建立检测猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)抗体的间接ELISA方法,初步分析PED灭活疫苗免疫母猪所产仔猪的血清母源特异抗体动态,笔者应用重组PEDV部分纤突(spike,S)蛋白作为检测抗原,建立了基于PEDV S1蛋白的间接ELISA抗体检测方法,并用该方法检测了产前4周用PED灭活疫苗免疫母猪的初乳、分娩当天血清及其仔猪1、7、14、21、28和35日龄(d)时血清中的PEDV抗体。结果显示:建立的间接ELISA方法能够特异地检测PEDV抗体,与猪瘟病毒、猪圆环病毒2型、猪繁殖与呼吸综合征病毒、伪狂犬病病毒、猪传染性胃肠炎病毒及猪轮状病毒的抗血清无交叉反应;敏感性高于免疫过氧化物酶单层试验(immunoperoxidase monolayer assay,IPMA),与IPMA检测结果的符合率为97.14%;批内和批间重复性试验的变异系数小于10%。免疫母猪初乳、分娩当天血清中的PEDV抗体阳性率为100%,初乳比血清中的平均抗体水平低;1 d仔猪血清PEDV抗体阳性率为50%,平均抗体水平低,与初乳中的抗体水平接近,7 d以后所有仔猪血清全部转为PEDV抗体阴性。建立了检测PEDV抗体的间接ELISA方法;产前用PEDV灭活疫苗给怀孕母猪免疫1次时,其所产仔猪血清中的母源特异抗体阳性率和抗体水平低,且维持时间短暂。

基于恒温隔绝式荧光PCR技术现场检测牛轮状病毒方法的建立及应用
李凡, 岳华, 邱莞思, 张斌, 黄建德, 汤承
畜牧兽医学报, 2017, 48(6):  1092-1098.  doi:10.11843/j.issn.0366-6964.2017.06.014
摘要 ( 291 )   HTML( )    PDF (743KB) ( 232 )  
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轮状病毒(rotavirus,RV)是犊牛腹泻的重要病因,笔者旨在建立基于恒温隔绝PCR(insulated isothermal PCR,iiPCR)技术现场检测牛轮状病毒(bovine rotavirus,BRV)的方法。根据BRV和牦牛RV VP6基因序列,设计合成引物和探针,通过优化反应体系,配合商品化PetNAD核酸萃取试剂盒,建立了检测BRV和牦牛RV的iiPCR方法。结果显示该方法只能检出BRV和牦牛RV,不能检出牛冠状病毒、牛星状病毒、牛病毒性腹泻-黏膜病病毒、牛大肠杆菌、牛沙门菌、牛艾美尔球虫、牛瑞氏隐孢子虫等无关病原;检测下限为96.6 copies·μL-1,重复性好;对30 份牛腹泻样本和 30 份牦牛腹泻样本的检测结果表明,本方法对BRV的检出率是33.33%,对牦牛RV的检出率为73.33%,与文献报道的检测BRV和牦牛RV的方法的符合率分别为100%;对2016年四川阿坝藏羌自治州14个牧场的88份犊牦牛腹泻样本RV的检测结果显示RV核酸阳性检出率为98.86%。本研究建立的BRV iiPCR方法特异性好、灵敏度高、重复性好,既可用于BRV检测,又可用于牦牛RV的检测;从核酸提取到报告检测结果仅需1 h,操作方便,可现场使用,为BRV的现场快速诊断提供有力的工具。

新疆优势种银盾革蜱各龄期形态超微观察
吴辉, 呼尔查, 朱玉涛, 许正茂, 巴音查汗
畜牧兽医学报, 2017, 48(6):  1099-1109.  doi:10.11843/j.issn.0366-6964.2017.06.015
摘要 ( 182 )   HTML( )    PDF (4065KB) ( 241 )  
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拟阐明银盾革蜱(Dermacentor niveus)各发育阶段形态及其发育特点,为各龄期革蜱类的防治提供一定的实验依据。笔者以新疆地区优势种革蜱——银盾革蜱为实验材料,通过体视显微镜及扫描电子显微镜对银盾革蜱各龄期虫体形态进行观察、鉴定。结果表明,在革蜱属中,银盾革蜱虫卵、幼蜱、若蜱和成蜱超微结构上存在明显差异,虫卵多为长椭圆形,随着孵化时间的增加,虫卵的颜色及内部的结构发生明显改变;幼蜱口下板齿式为2|2、肢节为3对(Ⅰ~Ⅲ)、无气门板、无生殖孔、肛门瓣刚毛1对、无肛后沟等;若蜱口下板齿式为3~2|2~3、肢节为4对(Ⅰ~Ⅳ)、无生殖孔但具有气门板、肛门瓣刚毛3对、假头基为三角形等;成蜱雄性的口下板齿式为3|3、具有生殖孔和气门板、肛门瓣刚毛5对半、肢节Ⅳ(股节、胫节和后跗节)腹面都具有3个齿状突等;成蜱雌性的口下板齿式为4~3|3~4、每一侧孔区具有一根刚毛、肛门瓣刚毛5对、肢节Ⅳ无齿状突等。本试验对银盾革蜱各发育阶段形态结构、鉴定要点等进行研究,初次描述了其各龄期超微结构及发育过程,为地方蜱传疾病综合防控提供一定的实验依据。

基础兽医
比利时输入中国牛精液携带的施马伦贝格病毒潜在入侵风险评估
张志诚, 李继东, 孙明军, 马珊珊, 戈胜强, 吴晓东, 王志亮
畜牧兽医学报, 2017, 48(6):  1110-1117.  doi:10.11843/j.issn.0366-6964.2017.06.016
摘要 ( 276 )   HTML( )    PDF (2118KB) ( 214 )  
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为明确现阶段比利时输入中国牛精液携带施马伦贝格病毒的潜在入侵风险,基于世界动物卫生组织(Office International Des Epizooties ,OIE)风险评估的框架,结合贝叶斯统计推断的方法,开展现阶段比利时拟输入中国牛精液产品携带施马伦贝格病毒(Schmallenberg virus,SBV)通过口岸贸易的输入量化风险评估。释放评估显示,比利时畜群存在SBV的释放风险。基于对比利时的SBV的监测监控体系、易感畜群监视、实验室诊断方法选择,结合检测方法和试剂有效性的参数化模拟,显示比利时牛精液供体动物SBV阳性预测值超过66.886 6%的概率不大于0.001 9。参照比利时2011年度出口到中国的精液批次标准,模拟现阶段比利时种用牛精液出口到中国市场每1批次中可能检出的假阴性概率在82.16%的置信区间内分布在0.001到0.006之间,即1 000批次精液的假阴性检出批次在82%的置信区间为1到6个批次,大于6个批次的假阴性概率小于13.63%,大于1个批次的概率大于95.80%。评估结论认为,从比利时输入有关的牛精液等产品将会对我国养殖畜群及其生态安全等产生较大的不确定性风险。

核桃(Juglans regia L.)青皮提取物抗氧化及抑菌活性的研究
吴莹, 包晓玮, 陈勇, 于全平, 魏欢, 杨光
畜牧兽医学报, 2017, 48(6):  1118-1127.  doi:10.11843/j.issn.0366-6964.2017.06.017
摘要 ( 203 )   HTML( )    PDF (906KB) ( 292 )  
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核桃青皮是核桃(Juglans regia L.)加工的副产物,因含有多种活性成分,可能是一种潜在的天然抗氧化剂和抑菌剂来源。本研究旨在研究核桃青皮提取物的抗氧化能力和抑菌活性,为开发新的饲用抗生素替代品提供参考。以蒸馏水及25%、50%、75%和100%的甲醇、乙醇,丙酮为溶剂分别提取8和12 h获得核桃青皮提取物。通过测定提取物中的总酚和总黄酮含量,根据还原能力和2,2-二苯基-1-苦肼基(DPPH)自由基清除率评价其抗氧化能力;以大肠杆菌、枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌为受试菌,分别测定抑菌圈直径、最小抑菌浓度(MIC)及抑菌率评价其抑菌活性。结果表明,有机溶剂浓度显著影响提取物中的总酚和黄酮含量(P< 0.01);除丙酮外,提取时间对提取物中总酚和黄酮含量均有显著的影响(P< 0.05);在所有提取溶剂中,以25%乙醇提取8 h获得的总酚和黄酮最高,分别达到25.35和12.63 mg·g-1。有机溶剂浓度对提取物的还原能力具有显著的影响(P< 0.01),而提取时间仅对丙酮提取物的还原能力具有显著影响(P< 0.05),其中25%乙醇提取物的还原能力在各处理中最高,为0.366。有机溶剂浓度对提取物的DPPH自由基清除率具有显著的影响(P< 0.01),而提取时间仅对甲醇提取物的自由基清除率有显著影响(P< 0.01),其中75%丙酮提取物可清除88.81%的自由基,在各处理中最高。有机溶剂浓度对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径和最小抑菌浓度(MIC)均有显著的影响(P< 0.01);从提取时间来看,除甲醇提取物对大肠杆菌以及丙酮提取物对枯草芽孢杆菌的抑菌圈直径无显著影响外(P> 0.05),其他均有显著的差异(P< 0.01);此外,提取时间显著影响对大肠杆菌的MIC(P< 0.05),乙醇和丙酮提取物的金黄色葡萄球菌MIC以及丙酮提取物的枯草芽孢杆菌MIC有显著差异(P< 0.05),其他提取物的MIC均不受提取时间的影响(P> 0.05)。抑菌率测试结果表明核桃青皮25%乙醇提取物对枯草芽孢杆菌的抑菌活性强于对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑制。由此可见,所有核桃青皮提取物均具有一定的抗氧化及抑菌活性,尤其以25%乙醇8 h提取物的作用最好。

临床兽医
黄芪、枸杞、金银花等中草药复方制剂对肉鸡免疫器官发育及免疫功能的影响
靳二辉, 陈耀星, 周金星, 李升和, 任曼, 胡倩倩, 金光明
畜牧兽医学报, 2017, 48(6):  1128-1139.  doi:10.11843/j.issn.0366-6964.2017.06.018
摘要 ( 373 )   HTML( )    PDF (4515KB) ( 470 )  
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为了研究由黄芪、枸杞、金银花等药材组成的复方中草药制剂对肉鸡免疫器官发育及免疫功能的影响,将1日龄健康AA肉鸡1 000羽随机分为对照组和试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组,每组5个重复,每个重复50羽,对照组饲喂基础日粮,试验Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ组分别在基础日粮中添加0.5%、1.0%和1.5%的复方中草药制剂,试验期42 d。结果显示,在21日龄时,试验Ⅱ组肉鸡法氏囊指数、血清IgG和IgM含量以及NDV抗体和IL-4水平均显著高于对照组(P<0.05),试验Ⅲ组脾质量和器官指数以及血清IL-2和IFN-γ水平均显著高于对照组(P<0.05),试验Ⅰ组肉鸡血清IgG含量和NDV抗体水平均显著高于对照组(P<0.05);在42日龄时,试验Ⅱ组肉鸡胸腺和法氏囊质量与器官指数、血清IgG和IgM含量以及NDV抗体和IL-4水平均显著高于对照组(P<0.05),试验Ⅲ组肉鸡脾质量与器官指数、血清IgG和IgM含量以及IL-2、IL-4和IFN-γ水平均显著高于对照组(P<0.05),试验Ⅰ组肉鸡血清IgG和IgM含量以及NDV抗体水平均显著高于对照组(P<0.05)。显微观察可见,在21日龄时,试验Ⅱ组肉鸡法氏囊组织结构清晰,法氏囊小结面积显著大于对照组(P<0.05),小结内淋巴细胞数量较多,排列紧密。在42日龄时,试验Ⅱ组肉鸡胸腺皮质厚度显著大于对照组(P<0.05),法氏囊小结面积显著大于对照组(P<0.05);试验Ⅲ组肉鸡胸腺皮质厚度显著大于对照组(P<0.05),脾小结和脾动脉周围淋巴鞘小结面积显著大于对照组(P<0.05),脾小结数量也明显较多;试验Ⅰ组肉鸡脾小结面积也明显大于对照组(P<0.05)。结果表明,日粮中添加不同剂量黄芪、枸杞、金银花等复方中草药制剂对肉鸡免疫器官发育和免疫功能可产生不同程度的促进作用,其中以添加1.0%复方中草药制剂效果最好。

郁金散对大肠湿热证模型大鼠血清及肠道组织胃肠激素的影响
文艳巧, 姚万玲, 杨朝雪, 马琪, 张晓松, 纪鹏, 华永丽, 魏彦明
畜牧兽医学报, 2017, 48(6):  1140-1149.  doi:10.11843/j.issn.0366-6964.2017.06.019
摘要 ( 213 )   HTML( )    PDF (4645KB) ( 289 )  
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探讨郁金散对大肠湿热证模型大鼠血清和肠道组织胃肠激素的影响。Wistar大鼠60只,体重180~220 g,随机分为正常对照组、大肠湿热证模型组、自愈组、郁金散高、中、低剂量治疗组,每组10只。通过自由饮用蜂蜜水;前10 d禁食与饲喂充足饲料并灌胃猪油隔日交替进行;之后5 d每天灌白酒,并置于高温高湿环境(8 h·d-1);然后腹腔注射大肠杆菌,24 h后再注射一次建立大肠湿热证大鼠模型。造模成功后,分别给予高(10.4 g·kg-1)、中(5.2 g·kg-1)、低(2.6 g·kg-1)剂量郁金散进行治疗。整个试验过程中观察大鼠的临床症状和体征,记录体重变化,检测血清和回肠、结肠组织中的胃肠激素含量。结果显示:模型大鼠出现便溏、粪便色黄恶臭、肛门红肿、发热等症状和体征。正常组体重逐渐上升,模型大鼠造模期间体重呈现先波状上升、再逐渐下降的趋势,郁金散治疗后体重呈逐渐上升的趋势,其中以高剂量组回升最明显,但各组均无显著性差异(P>0.05)。与正常对照组相比,模型组和自愈组大鼠血清、回肠及结肠组织中胃动素(MTL)、胃泌素(GAS)、P物质(SP)含量极显著或显著升高(P<0.01或P<0.05),血管活性肠肽(VIP)无显著变化,生长抑素(SS)含量极显著降低(P<0.01);与自愈组相比,各剂量郁金散治疗后,MTL、GAS、SP、VIP和SS都有不同程度的回调,以高剂量组回调最为明显,其中高剂量组大鼠血清、回肠、结肠中MTL、GAS和SP极显著或显著降低(P<0.01或P<0.05),SS极显著或显著升高(P<0.01或P<0.05)。大肠湿热证模型大鼠机体出现了胃肠激素紊乱,表现为MTL、GAS、SP和VIP含量升高,而SS含量降低,郁金散能改善大肠湿热证模型大鼠机体胃肠激素异常水平,且高剂量的治疗效果最好。

研究简报
DKK1基因启动子区的克隆及其活性分析
胡慧艳, 贾青, 侯胜奎, 刘津, 赵思思, 张伟峰, 张军, 张建亭, 边慧敏
畜牧兽医学报, 2017, 48(6):  1150-1157.  doi:10.11843/j.issn.0366-6964.2017.06.020
摘要 ( 218 )   HTML( )    PDF (1526KB) ( 253 )  
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旨在初步探索DKK1基因转录调控机制,本研究利用启动子在线预测软件分析了该基因启动子区序列特征,根据Ensembl数据库已公布的猪DKK1基因的5'侧翼区序列,设计特异性PCR引物进行扩增、测序,进而构建启动子区不同缺失片段的pGL3-DKK1双荧光素酶表达载体,分别转染293T细胞和Hela细胞,并进行双荧光素酶报告基因检测。结果显示,DKK1基因启动子中含有1个TATA-box、多种转录因子和1个CpG岛;DKK1基因启动子对239T细胞具有偏好性,其中p-1 679/+292 bp启动子片段活性最高,且显著高于其他缺失片段(P<0.01)。-953~-1 679 bp为核心启动子区域,-586~-953 bp区域可能存在负调控元件,在-953~-1 679 bp区域可能存在正调控元件。本试验通过对DKK1基因进行生物信息学分析并结合不同长度启动子片段双报告基因活性检测,证实了DKK1基因的5'侧翼区序列具有启动子转录活性,并初步确定了该基因的启动子区域,找到了启动子的核心区域和主要调控区域,为进一步研究DKK1基因转录调控机制奠定基础。

绵羊TRA2B基因的克隆、序列信息与表达分析
赵帅平, 焦小丽, 李留安, 郭亮, 田川尧, 王颖, 杨婧, 张品东
畜牧兽医学报, 2017, 48(6):  1158-1166.  doi:10.11843/j.issn.0366-6964.2017.06.021
摘要 ( 225 )   HTML( )    PDF (2599KB) ( 253 )  
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旨在研究绵羊TRA2B基因的结构与功能,探讨其在两品种脂尾型绵羊脂肪等不同组织中的表达和调控特性。采用RT-PCR克隆TRA2B基因编码区(CDS)并对其进行生物信息学分析; Real-time PCR检测广灵大尾羊和小尾寒羊8月龄公羊共8只心、肝、肾、小肠、睾丸、肾周及尾脂肪组织、股二头肌中TRA2B基因mRNA的表达。结果表明,TRA2B基因CDS区长867 bp,编码288个氨基酸。生物信息学分析表明,TRA2B为不稳定的水溶性蛋白,无信号肽和跨膜域,有2个O-糖基化位点和70个磷酸化位点,109~196氨基酸残基为RRM保守结构域。TRA2B基因mRNA在所检测的组织中均有一定的表达,睾丸中表达量最高,显著高于肾、肾周脂肪与尾脂(P<0.05)以及肝、股二头肌和小肠中的表达量(P<0.05),心中表达量最低(P<0.05)。品种间总mRNA表达量差异不显著(P>0.05),品种因素显著影响该基因组织间的表达(P<0.05)。TRA2B可能在绵羊繁殖及脂质代谢中发挥重要作用。为深入研究TRA2B在绵羊中的基因功能提供了理论基础。

新城疫病毒F蛋白在水稻中的表达及检测
许倩茹, 张二芹, 郭军庆, 杨继飞, 刘运超, 王爱萍, 王丽, 万博, 汪磊, 蒋大伟, 邓瑞广, 张改平
畜牧兽医学报, 2017, 48(6):  1167-1172.  doi:10.11843/j.issn.0366-6964.2017.06.022
摘要 ( 227 )   HTML( )    PDF (1249KB) ( 231 )  
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旨在研究水稻表达新城疫病毒F蛋白,制备亚单位疫苗。根据GenBank中的新城疫病毒F基因序列以及水稻偏爱性密码子筛选、优化并合成F基因,通过两次载体构建,先使目的基因连在中间载体pMP3上,再连接到pCAMBIA1300植物载体上,通过农杆菌导入水稻愈伤组织中,经过潮霉素抗性筛选,获得表达植株。通过QPCR的方法筛选获得高表达的纯合子株系5株。新城疫抗原试纸条检测和Western blot检测确定F蛋白具有良好的反应原性。本试验为家禽传染病的植物性水稻疫苗研究奠定了基础。