畜牧兽医学报

尼帕病毒研究进展

张晨飞;陈昌海;刘耀兴

畜牧兽医学报, 2012, 43(5): 669-675. doi:

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尼帕病毒（Nipah virus，NiV）是新近发现的引发脑部炎症或呼吸道疾病等重症的新型人畜共患病病毒，该病毒最初于1999年马来西亚尼帕镇的1名脑炎患者脑脊液中分离获得，至今已经历了数次大的流行，造成严重的经济损失和人员伤亡。该病毒可由动物传播给人，也可直接人与人传播，并且能够在猪等动物身上引起严重疾病，狐蝠科的果蝠是该病毒的天然宿主。NiV感染人后的病死率极高，并且目前还没有有效的疫苗和治疗措施，生物危害性极大，被列为生物安全4级病原（BSL4）。笔者从NiV的分类及分型、基因和蛋白质组、流行和分布、疫苗研制、临床和病理变化以及实验室诊断技术等方面对NiV做简单的概述。

不同猪种肉质相关基因Hal、RN和FTO的多态性研究

陶新;邓波;门小明;徐子伟

畜牧兽医学报, 2012, 43(5): 676-683. doi:

摘要 ( 412 )

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为了明确肉质相关基因氟烷基因（Hal）、酸肉基因（RN）和脂肪肥胖相关基因（FTO）在国内外不同猪种群体间的遗传变异特性，本研究以大约克、长白、杜洛克和金华猪等猪种群体为研究对象，应用PCRRFLP技术分别检测了Hal、RN和FTO基因的多态性，并分析了FTO基因上2个多态位点g.276G>T和c.594C>G的遗传变异情况。结果表明：(1) 在杜洛克猪中发现了Hal的基因型HalNHaln，其频率为0.166，但未发现基因型HalnHaln，其它猪种群体中仅检测到了基因型HalNHalN；(2)在已检测的所有猪种群体中只检测到RN基因的rn/rn基因型，未发现rn/RN和RN/RN基因型；（3）在FTO的g.276G>T位点上，金华猪呈现单态，其它猪种群体均呈现多态。在FTO的c.594C>G位点上，4个猪种群体均呈现多态，3个外来猪种群体均以CC基因型频率较高，而金华猪则以GG基因型频率较高。研究结果提示，由于Hal基因在养猪生产中的利弊双重性，因此在某些猪种群体中仍然存在较高频率的HalNHaln基因型。此外，结合FTO基因的生理功能和已有的研究结果，可在特定的猪群中将其作为影响猪肉质性状的候选基因。本研究发现FTO的基因型分布在我国优良地方猪种金华猪与国外3个种猪群间存在较大差异，为深入研究不同品种猪的肉质形成机理提供了基础数据。

徐淮山羊HFABP基因克隆、表达产物亚细胞定位的研究及转基因小鼠的制备

阴彦辉;韦光辉;李伟;朱才业;张亚妮;杜立新;曹文广;李碧春

畜牧兽医学报, 2012, 43(5): 684-692. doi:

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旨在克隆徐淮山羊心脏型脂肪酸结合蛋白(HFABP)基因的cDNA，探讨其生物信息学功能。通过EGFP融合蛋白对该基因亚细胞水平的表达定位，探究该基因在异种生物体内表达情况,探索制备异种转基因动物的可能性。采用反转录PCR(RTPCR)方法克隆徐淮山羊HFABP基因cDNA，进行生物信息学分析，构建其融合表达载体pEGFPHFABP。脂质体(LTX)介导基因转染山羊成纤维细胞（GEF），48 h后进行荧光检测，RTPCR检测mRNA在细胞内的表达。利用睾丸注射将目的基因转入小鼠体内，在DNA和蛋白水平上检测目的基因的表达情况。结果，徐淮山羊HFABP基因完整编码区(CDS)大小为402 bp，编码133个氨基酸,GenBank登录号为AY466498.1。徐淮山羊HFABP序列与人、鸡、褐家鼠、奶牛、野猪、驴及斑马鱼相应编码区同源性为89%、76%、85%、84%、93%、91%、70%，氨基酸序列同源性为90%、79%、88%、97%、95%、94%、72%。成功构建融合表达载体pEGFP HFABP，目的基因在mRNA水平上成功表达。目的蛋白定位于细胞质中,与在线预测结果相同(无信号肽,定位于细胞质中)。通过尾静脉注射和睾丸注射,该基因可以在小鼠体内实现暂态表达和持续性表达。本研究成功克隆了徐淮山羊HFABP基因cDNA，而且HFABP基因在进化过程中是保守的。该蛋白无信号肽，在单细胞水平上可表达于细胞质中，在小鼠体内也可以成功表达。

山羊卵巢组织繁殖力相关差异表达基因片段的生物信息学分析

冯安学;钱丽丽;贾青;邢增喜

畜牧兽医学报, 2012, 43(5): 693-700. doi:

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为考察山羊多羔性的遗传基础，以不同繁殖力的河北中部本地固有山羊为研究对象，在发情期卵巢组织用差异表达PCR方法筛查到4条基因差异片段作为山羊繁殖力性状候选基因。对这些候选基因进行同源性和转录因子结合位点分析，发现4个差异片段中2条为新发现的表达片段。1条与野猪中获得的克隆片段THY010003E05的同源性为81%，但功能未知。另1条差异片段的序列与牛pcnp的mRNA序列的同源性为94%，并据此对山羊pcnp基因进行PCR扩增、克隆及序列测定。应用生物信息学的相关软件和方法，对山羊PCNP蛋白的理化性质、二级结构、信号肽、核定位序列、磷酸化位点、跨膜区域以及蛋白质功能域等进行预测。结果，山羊pcnp基因完整CDS序列与牛的pcnp基因完整CDS序列同源性为100%，编码区为537 bp，编码179个氨基酸；推测与其他已报道的物种一样，山羊PCNP蛋白也是主要位于细胞核中的亲水蛋白，二级结构以无规则卷曲和α螺旋为主，局部为延伸链和β转角；预测出与PCNP蛋白相互作用的5种蛋白，另外还发现了3个LCR（Low complexity region）区域。由此推测，PCNP在物种间相对保守，而且其最可能在细胞核中行使功能，对细胞周期或某些基因的表达产生影响，进而影响山羊繁殖力。

江淮水牛线粒体Dloop区和Cytb基因遗传多态性及系统发育分析

卢永芳;蔡治华;李强;张毅;张勤;张沅

畜牧兽医学报, 2012, 43(5): 701-707. doi:

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为研究安徽江淮水牛群体的分子种质特性，本试验测定了江淮水牛2个亚群共82个个体的线粒体Dloop区和细胞色素b基因完整序列，分析了序列遗传多态性及系统进化关系，并结合GenBank中已发表的141条中国水牛Dloop序列，进行了联合分析。结果在Dloop区内共发现核苷酸多态位点91个，组成104个单倍型，其中32个是在江淮水牛中新发现的单倍型。总体mtDNA Dloop区核苷酸多样性为(0.015 43±0.001 42)，单倍型多样性为(0.948±0.009)。其中，江淮水牛的mtDNA Dloop 区核苷酸多样性为(0.014 89±0.002 32)，单倍型多样性为(0.955±0.013)，表明其群体遗传多样性丰富，群体变异性水平与中国其他水牛群体接近。根据线粒体Dloop区单倍型构建系统树和进化网络，显示江淮水牛存在沼泽型水牛线粒体支系A 和B，表明其具有2个线粒体母系来源，其中B支又分为b1和b2两个亚支；针对细胞色素b基因的进化分析也支持这一结论。这些研究结果为今后开展江淮水牛遗传资源的保护和利用提供了客观依据。
型

UCP2基因遗传多态性与西门塔尔牛生长相关性状的遗传效应分析

陈翠;张立敏;陈晓杰;刘喜冬;张猛;李姣;袁峥嵘;张路培;高雪;高会江;李俊雅;许尚忠

畜牧兽医学报, 2012, 43(5): 708-716. doi:

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本研究旨在分析UCP2基因SNPs及其单倍型与肉牛饲料转化率和体尺等生长相关性状的相关性。以118头西门塔尔牛为试验材料，利用DNA池和PCRRFLP方法检测UCP2基因G118A、 C161T、 C215G、C305T位点多态性，构建单倍型并与生长性状进行相关分析。结果表明，G118A、C161T和C305T位点均与饲料转化率显著相关(P<0.05)，其中杂合个体均值显著高于纯合个体且料肉比较高,而纯合个体之间差异不显著。位点C161T和C305T对胸围和腹围发挥主要影响作用，在差异显著表型性状中，TT基因型显著大于CC基因型个体。所构建的单倍型与单个SNP分析结果较为一致。综合考虑饲料转化率、平均日增体质量、胸围和腹围，建议将C161T和C305T位点的纯合个体TT基因型作为提高肉牛生长性状的候选分子标记。

苹果酸酶在葡萄糖和胰岛素诱导鹅肝脂肪变性中的作用研究

夏露;潘志雄;唐慧;向梳瑕;王静;韩春春;李亮;王继文

畜牧兽医学报, 2012, 43(5): 717-722. doi:

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本研究旨在研究不同浓度葡萄糖和胰岛素诱导鹅肝脂肪变性过程中苹果酸酶（Malic enzyme,ME）的活性及其mRNA表达情况，以探讨ME在鹅肝脂肪变性中的作用。根据鸡ME基因序列保守区设计引物，通过RTPCR、克隆测序等技术扩增鹅ME基因；分离、培养四川白鹅原代肝细胞，添加不同浓度葡萄糖和胰岛素诱导肝细胞脂肪变性，检测细胞内甘油三酯（TG）含量、ME活性及其mRNA表达情况。结果发现，鹅ME基因跟原鸡同源性最高；与对照组相比，葡萄糖及其与胰岛素协同作用均能显著促进肝细胞内甘油三酯（TG）沉积，且呈现出剂量递增效应，而胰岛素对细胞内TG含量影响不明显；与对照组比较得出：ME的活性和mRNA表达水平随着葡萄糖浓度升高而增加，30 mmol·L-1葡萄糖具有明显的促进作用（P＜0.05）；低浓度（50 nmol·L-1）胰岛素显著增加ME的活性和mRNA表达水平（P＜0.05），当胰岛素浓度达到200 nmol·L-1时， ME的活性和mRNA表达水平受到一定抑制；葡萄糖和低浓度胰岛素（50 nmol·L-1）协同能促进ME的活性和mRNA表达水平。本研究扩增获得了鹅ME基因部分序列，且发现葡萄糖和胰岛素协同可以增强ME的活性和mRNA表达水平，从而显著增加肝脏中TG的含量，诱导鹅肝脂肪变性。

5个家兔群体白细胞介素10基因外显子的遗传多样性分析

冒留留;潘雨来;王晓明;万小颖;李碧春;吴信生;

畜牧兽医学报, 2012, 43(5): 723-728. doi:

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本研究旨在分析家兔IL10基因外显子的多态性，以期为进一步研究家兔IL10与疾病抗性的相关性提供理论依据。根据GenBank上收录的IL10基因序列设计5对特异性引物，采用PCRSSCP方法对海狸色獭兔、白色獭兔、皖系长毛兔、闽西南黑兔、九疑山兔这5个家兔群体IL10基因的5个外显子序列进行多态性分析。结果表明：在IL10基因外显子3上检测到4种等位基因，10种基因型，存在3个SNPs位点；在外显子4上检测到2种等位基因，3种基因型，存在1个SNP位点。而外显子1、2、5对于实验群体未发现有遗传多态性。在外显子3中，D等位基因只在闽西南黑兔和九疑山兔中检测到，除海狸色獭兔和闽西南黑兔外其余群体均处于哈代温伯格平衡，各群体不同基因型分布存在极显著差异（P<0.01）。在外显子4中，A1B1基因型在獭兔群体中没有检测到；除海狸色獭兔外其余各群体均处于哈代温伯格平衡，海狸色獭兔跟白兔獭兔不同基因型分布差异不显著（P>0.05），而其余群体彼此不同基因型分布存在显著性差异（P<0.05或P<0.01）。结果提示：5个家兔群体在IL10基因外显子3和4中存在遗传多态性，不同家兔群体在遗传基础上存在着一定的差异。

PAX3转录因子在羊驼皮肤组织中的表达和定位分析

朱芷葳;贺俊平;于秀菊;李鹏飞;程志学;董常生

畜牧兽医学报, 2012, 43(5): 729-734. doi:

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本研究旨在研究PAX3在羊驼皮肤组织中的表达和分布。利用免疫组织化学和Western blot技术研究PAX3转录因子在不同被毛颜色羊驼皮肤组织中的表达与分布。结果表明PAX3在毛球基底层细胞之间，毛乳头周围和毛根部都存在阳性表达，并在不同被毛颜色羊驼皮肤组织中的表达存在显著差异（P<0.05）。结果提示PAX3参与了黑色素细胞的增殖、分化和迁移，PAX3与色素的形成相关。

体外培养猪小肠上皮细胞大豆凝集素结合位点的标记

车东升;;穆成龙;;刘飞飞;张海全;孙泽威;秦贵信;

畜牧兽医学报, 2012, 43(5): 735-739. doi:

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本研究旨在获得体外培养状态下的猪小肠上皮细胞，研究猪小肠上皮细胞与大豆凝集素的结合情况。选取新生未哺乳健康仔猪，取小肠组织对小肠上皮细胞进行分离培养，并进行纯化。纯化后的细胞以角蛋白抗体8为一抗进行细胞免疫化学试验鉴定，鉴定后的猪小肠上皮细胞以FITCSBA为探针进行细胞凝集素荧光标记化学试验，对猪小肠上皮细胞大豆凝集素结合位点进行标记。结果表明：试验分离纯化的细胞经角蛋白抗体8鉴定为阳性，所分离纯化的细胞为猪小肠上皮细胞，经检测其纯度达90%以上，猪小肠上皮细胞FITCSBA标记结果为阳性。体外培养的猪小肠上皮细胞表面存在大量的大豆凝集素结合位点，进一步明确了猪小肠上皮细胞是大豆凝集素结合的主要细胞类型之一，为单胃动物大豆凝集素抗营养机制研究提供理论依据。

乳酸锌对猪空肠上皮细胞IPECJ2增殖及相关调控基因mRNA表达的影响

韩国全;余冰;陈代文;相振田;亓宏伟;陈洪;毛倩;毛湘冰;黄志清

畜牧兽医学报, 2012, 43(5): 740-747. doi:

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旨在探讨乳酸锌对猪空肠上皮细胞增殖及相关调控基因ZnT2、DMT1、IREG1、MT1和ZIP4 mRNA表达的影响。用乳酸锌的锌浓度分别为50、100、150、200 mg·L-1的培养基培养IPECJ2细胞，采用比色法测定分析细胞增殖变化；用实时荧光定量RTPCR方法检测ZnT2、DMT1、IREG1、MT1及ZIP4 mRNA表达，以TBP mRNA的表达水平作为内参对照。在细胞培养前36 h，乳酸锌对IPECJ2细胞基本没有影响，随锌浓度递增细胞增殖幅度升高；乳酸锌处理IPECJ2细胞后， ZnT2、DMT1、IREG1及MT1 mRNA表达随锌浓度增高而升高，ZIP4 mRNA表达则随锌浓度增高而降低。添加乳酸锌可以促进IPECJ2细胞增殖，上调ZnT2、DMT1、IREG1、MT1 mRNA表达，下调ZIP4 mRNA表达。

持续高温对不同性别北京油鸡生长性能、肉质性状及脂肪沉积的影响

郝婧宇;卢庆萍;张宏福;张晓迪

畜牧兽医学报, 2012, 43(5): 748-754. doi:

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本研究旨在考察持续高温对不同性别北京油鸡生长性能、肉质性状及脂肪沉积的影响。选择健康、体况相近的49日龄北京油鸡公母各72只（公鸡平均体质量（608.58±13.07）g；母鸡平均体质量（518.50±8.33）g）随机分在2个处理中:⑴高温组，（35±0.37）℃；(2)适温组，（25±0.38）℃,分别在2个人工环境气候舱中饲养。每个处理设6个重复，每个重复6只鸡。试验持续23 d。测定试验第1～11、12～22和1～22 天的生产性能指标及第12和23天时的胴体性状、肉质性状及脂肪沉积率。结果表明：1）热暴露1～11 d，公母鸡的日增体质量都显著降低（P<0.01），料重比无明显变化（P>0.05）。热暴露12～22 d，公鸡的日增体质量显著降低（P<0.01），而母鸡无明显变化（P>0.05），同时，公鸡的料重比显著提高（P<0.01）；2）与适温组相比，高温组各性别北京油鸡的肉质性状均无明显变化（P>0.05）；3) 对公鸡而言，热暴露12 d时腹脂、肌间脂肪和皮下脂肪沉积率及胴体率、腿比率与适温组相比均无显著差异（P>0.05）。热暴露23 d时各部位脂肪沉积率均显著降低（P<0.01），而胴体率和腿比率显著提高（P<0.05）；对母鸡而言，热暴露12 d 时腹脂、肌间脂肪沉积率显著降低（P<0.05），热暴露23 d时皮下脂肪率显著降低（P<0.05），腹脂、肌间脂肪沉积率及胴体率、腿比率与适温组相比均无显著差异(P>0.05)。结果提示，热暴露12 d，各性别油鸡的日增体质量均显著降低，随着热暴露进一步延续，公鸡日增体质量的降低幅度加大，而母鸡的已无明显变化；随着热暴露时间的延长，公鸡的脂肪沉积逐渐下降，而母鸡的脂肪沉积下降程度有所缓解。

高体细胞数低乳糖含量时牛乳清蛋白组分变化的研究

沈维军;杨永新;王加启;袁廷杰;卜登攀;杨晋辉;周凌云

畜牧兽医学报, 2012, 43(5): 755-760. doi:

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旨在分析奶牛牛乳中体细胞数升高乳糖含量降低的同时乳清蛋白的表达变化。依据牛乳中体细胞数和乳糖含量，分为高体细胞数低乳糖含量组和正常牛奶组，超速离心分离乳清，采用二维凝胶电泳技术分离了高体细胞数低乳糖和正常牛乳清蛋白，考马斯亮蓝G250溶液染色，基质辅助激光解析飞行时间质谱检测表达变化的蛋白点。高体细胞数低乳糖含量的牛乳中β酪蛋白含量降低，而白蛋白、结合珠蛋白、乳铁蛋白、转铁蛋白和抗菌肽1等乳清蛋白表达量增加。表明随着牛乳中乳糖含量的降低，乳清蛋白组分表达量增加，这可能是奶牛乳腺在乳糖合成降低时乳腺上皮细胞完整性破坏引起的防御应答。

牛磺脱氧胆酸钠和CpG DNA对灭活H9N2禽流感病毒鼻腔免疫鸭的呼吸道抗体分泌细胞的影响

康海泓;申育萌;王红丽;杨倩

畜牧兽医学报, 2012, 43(5): 761-766. doi:

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运用牛磺脱氧胆酸钠和CpG DNA配合鸭源禽流感H9N2灭活病毒滴鼻免疫雏鸭，通过检测鸭呼吸道各组织中IgA和IgG抗体分泌细胞面积的变化对免疫效果进行评价。结果发现：应用牛磺脱氧胆酸钠和CpG DNA配合H9N2灭活病毒鼻腔免疫后3、5和7周，鼻腔、气管和气管叉组织中的IgA和IgG分泌细胞面积显著或极显著（P<0.05 或 P<0.01）高于单独H9N2灭活病毒免疫后的水平；应用CpG DNA配合H9N2灭活病毒鼻腔免疫后鼻腔和气管组织中IgA和IgG分泌细胞的面积有部分提高（P<0.05）；而单独运用H9N2灭活病毒鼻腔免疫后IgA和IgG分泌细胞面积同对照组相比没有显著差异。结果表明：在牛磺脱氧胆酸钠和CpG DNA的配合下，禽流感H9N2灭活病毒鼻腔免疫能够提高雏鸭呼吸道组织中IgA分泌细胞和IgG分泌细胞的面积，有效地增强呼吸道局部的免疫应答水平。

TaqMan荧光定量PCR检测鸡产蛋下降综合征病毒方法的建立及应用

马震原;;李刚;李文超;郭宇飞;

畜牧兽医学报, 2012, 43(5): 767-772. doi:

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根据GenBank公布的鸡产蛋下降综合征病毒六邻体蛋白基因的高度保守序列，设计了2对特异性引物和1条TaqMan探针。以构建的阳性重组质粒为标准品，绘制标准曲线，建立了一种快速检测鸡产蛋下降综合征病毒的TaqMan荧光实时定量PCR方法。该方法最小检出量达10 copies·μL－1，在1.0×102～1.0×108copies·μL－1检测范围间有良好的线性关系，特异性、稳定性和重复性也较好。用建立的本方法检测感染鸡产蛋下降综合征病毒鸡群的产蛋分离物，与普通PCR相比，该荧光实时定量PCR方法具有更高的敏感性，可更好地用于鸡产蛋下降综合征病毒的临床检测。

Ⅰ型雏鸭肝炎病毒侵染后鸭组织中ALB基因表达的分析

李秀;毕瑜林;徐琪;赵文明;张扬;陈昌义;陈阳;黄正洋;甄霆;段修军;陈国宏

畜牧兽医学报, 2012, 43(5): 773-778. doi:

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检测Ⅰ型雏鸭肝炎病毒侵染后ALB基因mRNA以及ALB蛋白分别在肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、大脑、小脑、腿肌和胸腺等组织中的相对表达量和含量并分析其意义。分别利用实时荧光定量RTPCR技术和ELISA法检测ALB基因在易感组、抗病组和对照组各组织中mRNA的表达量以及ALB蛋白含量。总体而言，除腿肌外， ALB基因mRNA在易感组中的表达量极显著低于对照组和抗病组（P<0.01），抗病组显著或极显著低于对照组（P<0.01或P<0.05）；各处理组间，肝、小脑和胸腺中ALB蛋白含量与ALB基因mRNA相对表达量规律一致，在其他组织中，各处理组间ALB蛋白含量差异均不显著（P>0.05）。RTPCR与ELISA的结果比较可见，两者在肝脏、胸腺、小脑等与雏鸭肝炎病直接相关的指示性组织中表现一致。本试验研究结果，进一步揭示了ALB基因为Ⅰ型雏鸭肝炎病的抗性基因，与前期抑制性消减杂交法得到的结果一致，其表达量的变化可以作为区分易感鸭和抗病鸭的标志。

微卫星引物PCR快速鉴定兔皮肤病原真菌方法的建立及应用

李代军;周玉法;刘敬博;高丽丽;赵效楠;蔡玉梅;柴同杰

畜牧兽医学报, 2012, 43(5): 779-784. doi:

摘要 ( 364 )

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本研究旨在借助微卫星引物PCR和聚类分析软件，建立一种快速准确鉴定兔皮肤病原真菌的分子生物学方法。本试验以寡核苷酸重复序列(GACA)4为引物，首先对3种常见兔皮肤病原真菌（须癣毛癣菌、犬小孢子菌和石膏样小孢子菌）标准菌株的DNA进行扩增，然后用NTSYSpc2.10软件分析其DNA指纹的多态性，并根据其多态性的差异进行鉴定分析。最后，用上述方法对临床上的分离株进行鉴定分析，并与传统的形态学鉴定方法进行比较。结果表明，3种不同的兔皮肤病原真菌均呈现不同的DNA指纹，且条带差异明显；聚类分析图显示，同种病原真菌的DNA指纹有很高的相似性（90%~100%）；该方法对分离株的鉴定结果与形态学鉴定结果一致。可见，通过微卫星引物PCR结合聚类分析软件可以准确、快速地鉴定兔皮肤病原真菌。

Wnt3a在不同毛色羊驼皮肤中的表达和定位

宋云飞#;田雪#;卢绪秀;郭青云;张丹丽;解晓晶;于秀菊;贺俊平;王海东;董常生

畜牧兽医学报, 2012, 43(5): 785-790. doi:

摘要 ( 341 )

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本研究旨在探索Wnt3a在羊驼皮肤中的表达与定位。以不同毛色的成年羊驼为研究对象，应用荧光定量PCR技术分析不同毛色羊驼皮肤Wnt3a基因的相对表达量,并运用Western blotting及免疫组织化学法对Wnt3a蛋白在不同毛色羊驼皮肤中进行表达和定位研究。结果：荧光定量PCR结果显示棕色羊驼中Wnt3a mRNA相对表达量是白色羊驼的2.970 2倍；Western blotting结果表明，羊驼皮肤组织组蛋白提取物中存在相对分子质量约39 ku的产物，棕色羊驼皮肤平均蛋白表达量显著高于白色羊驼；免疫组织化学结果显示Wnt3a在羊驼皮肤毛囊的根鞘和毛球部呈阳性表达，根据光密度值分析得出Wnt3a在棕色和白色羊驼毛囊中的表达差异显著(P<0.05)。通过以上研究显示Wnt3a可能与羊驼毛色形成具有相关性。

牦牛颈上神经节对其生境适应的形态学机制

丁艳平;李加龙;柴尔青;王建林;邵宝平

畜牧兽医学报, 2012, 43(5): 791-797. doi:

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本研究旨在研究牦牛颈上神经节（SCG）对其生境适应的形态学特征,以探讨高原动物交感神经系统对青藏高原生态环境适应的形态学机制。运用常规HE及尼氏染色法,并采用形态计量学和SPSS16.0统计软件，对成年牦牛和黄牛SCG的形态学特征进行比较研究。结果表明：牦牛SCG的长、宽和厚度均显著地小于黄牛的相应数据（P<0.01）；牦牛的SCG主要由表面被膜、神经节单元、神经纤维、血管及结缔组织组成，被膜较黄牛的薄，结缔组织所占比例较黄牛的少，但节内组织较黄牛的致密；牦牛的神经节单元主要包含神经节细胞、卫星细胞、成纤维细胞、毛细血管和神经纤维，该组成特征与黄牛的相似；其神经节单元单个视野内节细胞、卫星细胞及成纤维等细胞与黄牛的基本相同（P =1），但牦牛节细胞间的神经纤维较黄牛的少，而血管数显著多于黄牛的（P＜0.01）；牦牛SCG的头部以神经节单元为主，尾部以神经纤维为主，其特征与黄牛的相似。结果提示，在青藏高原高寒、低氧的极端生态环境中，牦牛在半放野、全年放牧的状态下，其SCG经长期进化形成了体积较小，神经节细胞、卫星细胞及其细胞间神经纤维较少，但血管十分丰富等形态学特征以适应极端生境。

鸡白痢沙门氏菌超广谱β内酰胺酶基因亚型分析

苑丽;潘玉善;吴华;刘建华;胡功政

畜牧兽医学报, 2012, 43(5): 798-802. doi:

摘要 ( 400 )

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为研究鸡白痢沙门氏菌的耐药表型及产超广谱β内酰胺酶（ESBLs）的基因亚型，分别采用微量稀释法及PCR扩增、测序比对法对8株分离自河南的鸡白痢沙门氏菌进行耐药表型检测及ESBLs基因亚型分析。结果显示，8株鸡白痢沙门氏菌对氨苄西林、三代头孢、氟苯尼考、恩诺沙星等耐药较为严重，仅对头孢噻呋/舒巴坦（2∶1）、头孢哌酮/他唑巴坦（4∶1）和头孢吡肟高度敏感。PCR检测表明8株受试菌共检出TEM1（6株）、CTXM65（3株）、CTXM90（1株）、OXA1（2株）和OXA10（1株）5种基因亚型，其中CTXM90为国内外首次检出并命名。CTXM90的氨基酸序列与CTXM14 和CTXM65相比均仅发生了1处氨基酸变异（80Ala→Val或275Arg→Ser），故CTXM90亚型属于CTXM9亚群。结果提示8株鸡白痢沙门氏菌不仅多重耐药严重，而且携带的ESBL基因型复杂。

食品动物源沙门氏菌质粒介导喹诺酮类耐药基因的检测与分析

林居纯;覃春红;赖婧;舒刚;吴聪明

畜牧兽医学报, 2012, 43(5): 803-809. doi:

摘要 ( 314 )

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：为了解食品动物源沙门氏菌质粒介导喹诺酮类耐药性(Plasmidmediated quinolone resistance,PMQR)，采用微量肉汤稀释法和PCR方法，检测了316株食品动物源沙门氏菌对20种抗菌药物的敏感性，以及菌株中PMQR基因的携带率。结果显示：316株沙门氏菌对20种抗菌药物呈不同程度的耐药性，95.57%菌株为多重耐药菌；316株菌中未检出qnrA 、qnrC 、qnrD、qnrS和qepA基因，7.91%菌株检出qnrB基因，15.19%菌株检出aac(6′)Ibcr基因，7.91%菌株检出oqxA基因，8.86%菌株检出oqxB基因，这是首次在沙门氏菌中发现oqxAB基因；98.11%PMQR阳性菌同时携带2种及以上的耐药基因，呈8～17耐的多重耐药性，其中以qnrB和aac(6′)Ibcr基因型为主；53株PMQR阳性菌分属于5种不同的基因型，耐药表型或耐药基因型不同的菌株却有相同的PFGE谱型。本次检测的316株食品动物源沙门氏菌耐药较为严重；菌株主要携带qnrB、aac(6′)Ibcr及oqxAB基因；不同来源菌株存在同一耐药克隆株的流行。

子宫内膜基质金属蛋白酶2、9 mRNA表达与奶牛子宫内膜炎关系的研究

王国卿;王洪海;张乃生

畜牧兽医学报, 2012, 43(5): 810-815. doi:

摘要 ( 343 )

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为探讨基质金属蛋白酶（MMPs）2、MMP9在奶牛子宫内膜炎中的作用机制，选用产后6～10 d健康及患急性化脓性子宫内膜炎的中国荷斯坦奶牛各10头，分别为对照组和试验组，通过ELISA检测PGF2a、孕酮浓度；免疫组化检测子宫内膜Ⅰ型胶原、Ⅳ型胶原的表达；SYBR Green I荧光定量PCR检测子宫内膜MMP2和MMP9 mRNA表达。结果表明：试验组PGF2a浓度极显著低于对照组（P<0.01），孕酮含量显著高于对照组（P<0.05），PGF2a与孕酮浓度呈显著负相关（r=0.893）；试验组子宫内膜中Ⅰ型胶原、Ⅳ型胶原的表达量均高于对照组，差异极显著(P<0.01)；MMP2和MMP9 mRNA水平则显著低于对照组（P<0.01）。结果提示：产后子宫内膜炎病牛子宫内膜MMP2、MMP9低表达，导致Ⅰ型和Ⅳ型胶原降解受阻，使细胞外基质为子宫内膜细胞提供的刺激信号不足，子宫分泌PGF2a量少，黄体消退障碍，血清孕酮含量高；说明子宫内膜MMP2、MMP9 mRNA表达对产后子宫内膜炎的发生和发展起促进作用。

芩连液与白虎汤对气分证家兔补体经典途径活化的影响比较

张世栋;王东升;王旭荣;李世宏;李锦宇;陈炅然;李宏胜;严作廷

畜牧兽医学报, 2012, 43(5): 816-820. doi:

摘要 ( 294 )

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为比较经方白虎汤与自拟方芩连液的分子疗效区别，以静脉注射内毒素建立了具有高热证候的气分证家兔模型，并用白虎汤和自拟方芩连液分别进行治疗，通过ELISA检测比较治疗前后血清总补体（CH50）的含量变化，并采用实时荧光定量PCR技术检测了肝组织中补体第三成分（C3）基因和C反应蛋白（CRP）基因的表达变化。结果表明，在气分证家兔模型中，补体系统以经典途径活化。白虎汤的治疗能同时保证C3基因和CRP基因的高表达起到治愈作用，而芩连液仅以提高CRP的表达量发挥一定的保护作用。研究表明白虎汤对动物气分证的疗效优于芩连液。

阿替美唑对小型猪特异性麻醉剂诱导大鼠大脑皮质内Fos蛋白表达的影响

尹柏双;石星星;李小波;李志强;范宏刚;高利;王洪斌

畜牧兽医学报, 2012, 43(5): 821-825. doi:

摘要 ( 301 )

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研究阿替美唑对小型猪特异性麻醉剂（XFM）麻醉下大鼠大脑皮质Fos蛋白表达的影响，探讨阿替美唑颉颃XFM催醒大鼠与大脑皮质cfos基因的关系。将72只SD纯种大鼠随机分为XFM对照组、XFM+阿替美唑组、XFM+生理盐水组，每组又按采脑时间点分成4个亚组。采用蛋白质印迹法检测大脑皮质内Fos蛋白表达量。结果表明： XFM麻醉大鼠大脑皮质内Fos蛋白表达量逐渐增加，与给药后10 min比较差异显著（P<0.01或P<0.05）；XFM麻醉大鼠腹腔注射生理盐水，各时间点Fos蛋白表达量与对照组间比较无显著差异（P>0.05）；阿替美唑注射后引起XFM麻醉大鼠大脑皮质Fos蛋白表达量减少，与XFM对照组比较差异显著（P<0.01或P<0.05）。结果提示，大脑皮质cfos基因参与了阿替美唑颉颃XFM麻醉作用。阿替美唑抑制XFM诱导大鼠大脑皮质Fos蛋白表达，可能是阿替美唑催醒XFM麻醉大鼠的重要机理之一。

山羊溶酶体αAMA基因的克隆、生物信息学及组织表达谱分析

孔祥雅;李义;程敏;荆新堂;李勤凡

畜牧兽医学报, 2012, 43(5): 826-831. doi:

摘要 ( 366 )

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本研究旨在对山羊溶酶体α甘露糖苷酶（αAMA）基因进行组织表达谱和生物信息学分析。参考牛αAMA基因序列设计引物，采用PCR技术克隆山羊αAMA基因序列，并利用荧光定量RTPCR进行组织表达谱分析以及进行生物信息学预测。首次获得了山羊αAMA基因，含有完整CDS编码区3 000 bp，编码999个氨基酸，其中前50个氨基酸为信号肽序列。其编码区的核苷酸序列和预测氨基酸序列与牛的αAMA相似性最高，分别为95.93%和94.79%。组织表达谱分析表明αAMA在山羊各组织均不同程度的表达，其中在肺脏、肝脏、小脑表达量较高。生物信息学预测发现，αAMA蛋白属于糖苷水解酶38家族成员，有2个保守的结构域，存在9个N糖基化位点。SWISSMODEL同源建模山羊αAMA具有良好的可信度。本研究为探讨酶的作用机理及疯草解毒剂的研制提供了理论依据。

SLADQA基因在大约克、苏太和梅山猪断奶仔猪中组织表达差异分析

訾臣;吴正常;刘璐;杜子栋;黄小国;;杨建生;朱国强;;;吴圣龙;;;包文斌;;

畜牧兽医学报, 2012, 43(5): 832-837. doi:

摘要 ( 347 )

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本研究旨在通过对SLADQA基因在苏太猪大肠杆菌F18菌株抗性群体和大约克猪、梅山猪断奶仔猪各组织间的表达规律及其在3个群体间表达差异的分析，探讨SLADQA基因与国内外猪品种断奶仔猪不同水平免疫机能和大肠杆菌抗性间的潜在关系。研究结果显示，SLADQA基因在3个猪群体所检测的11个组织中均表达，并且表达规律基本一致，在肺脏、脾脏、淋巴结等免疫器官中的表达量较高，在胃、十二指肠、空肠等消化道中表达量居中。SLADQA基因在苏太猪所有检测组织中的表达量均最高，大约克中次之，梅山猪中表达量最低。尤其在肺脏、淋巴结和胸腺 3个组织中，SLADQA基因在苏太猪中的表达量均显著高于其在梅山猪中的表达量；在胸腺组织中，SLADQA基因在苏太猪中的表达量显著高于大约克猪。研究结果表明，SADQA基因在断奶仔猪受大肠杆菌F18菌株病原菌侵袭后引起的一系列生理变化和应答过程中发挥着重要的抗原递呈和激发机体免疫的作用。

1株山羊内源性肺腺瘤反转录病毒的序列测定与分析

周艳喜;李靖;敖威华;刘霄卉;于立新;幺宏强;马学恩

畜牧兽医学报, 2012, 43(5): 838-842. doi:

摘要 ( 325 )

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参照内源性绵羊肺腺瘤病毒株enJSRV20（EF680302.1）全基因组序列设计合成3对引物，以山羊基因组DNA为模板，应用PCR技术扩增山羊内源性病毒基因片段，分别连接PMD18T载体并测序，完成了1株山羊内源性肺腺瘤反转录病毒全基因序列的测定。结果分析显示测定序列全长7 480 bp，获得的序列与内源性绵羊肺腺瘤病毒株enJSRV18（EF680301.1）的核苷酸相似性为93.4% ，与外源性绵羊肺腺瘤病毒株JS7（AF357971.1）的核苷酸相似性为88.1%。根据pro基因序列构建系统进化树，结果显示扩增序列与内源性绵羊反转录病毒株enJSRV5（EF680305.1）的亲缘关系最近。本研究有助于内源性肺腺瘤反转录病毒感染性克隆的构建和内源性肺腺瘤反转录病毒功能的研究。

中国标准连	ISSN 0366-6964
续出版物号	CN 11-1985/S

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