猪LIAS基因微环表达载体的构建

doi:10.11843/j.issn.0366-6964.2014.03.006

畜牧兽医学报 ›› 2014, Vol. 45 ›› Issue (3): 380-384.doi: 10.11843/j.issn.0366-6964.2014.03.006

猪LIAS基因微环表达载体的构建

高会贞,王晓婷，郭豫杰,韩立强,鲁维飞,杨国宇^*

（河南农业大学农业部动物生化与营养重点开放实验室，郑州 450002）

收稿日期:2013-07-03 出版日期:2014-03-23 发布日期:2014-03-21
通讯作者: 杨国宇，教授，博士，主要从事动物生物化学研究，E-mail: haubiochem @163.com
作者简介:高会贞（1987-），女，河南新乡人，硕士生，主要从事动物生物化学研究，E-mail:gaohuizhen0716@163.com
基金资助:
农业部“引进国际先进农业科学技术”（948）重点项目(2011-G35)

Construction of Minicircle Vector Carrying Porcine LIAS Gene

GAO Hui-zhen，WANG Xiao-ting,GUO Yu-jie，HAN Li-qiang,LU Wei-fei,YANG Guo-yu^*

（Key Laboratory of Animal Biochemisty and Nutrition，Ministry of Agriculture，Henan Agricultural University，Zhengzhou 450002， China）

Received:2013-07-03 Online:2014-03-23 Published:2014-03-21

摘要/Abstract

摘要：

为了构建猪LIAS基因长期高效的表达载体，本研究通过RT-PCR方法从猪肌肉组织中克隆了LIAS基因片段，并将该基因片段与微环表达载体minicircle进行连接，构建成微环载体minicircle-LIAS，然后转染HeLa细胞，检测其在HeLa细胞中绿色荧光蛋白的持续表达时间。结果表明，本研究克隆了猪LIAS基因，该基因长度为1 119 bp，并将该基因成功构建到了微环表达载体minicircle上；转染HeLa细胞对绿色荧光蛋白持续表达时间的观察显示，构建的微环表达载体minicircle-LIAS中绿色荧光蛋白的持续表达时间明显高于常用的pEGFP-N1质粒，为进一步阐明LIAS合成的生化过程及功能调控提供了新思路和试验材料。

关键词: 猪, 硫辛酸合成酶, 基因, 微环表达载体, HeLa细胞

Abstract:

In order to construct a long-term and high-level transgene expression recombinant vector，LIAS gene was cloned from the muscle of porcine by RT-PCR and inserted into minicircle plasmid.The minicircle-LIAS vector was transfected into HeLa cells to investigate the duration of GFP expression.The results showed that the LIAS gene which was 1 119 bp length was completely cloned and inserted into minicircle plasmid.The vector was transfected into HeLa cells and the duration of GFP expression of recombinant minicircle-LIAS vector was obviously higher than that of pEGFP-N1 plasmid.This result provides a new thought and experimental material for the process of LIAS biological synthesis and function regulation.

Key words: porcine, lipoic acid synthase, gene, minicircle vector, HeLa cells

中图分类号:

S828
S813.3

高会贞,王晓婷，郭豫杰,韩立强,鲁维飞,杨国宇. 猪LIAS基因微环表达载体的构建[J]. 畜牧兽医学报, 2014, 45(3): 380-384.

GAO Hui-zhen，WANG Xiao-ting,GUO Yu-jie，HAN Li-qiang,LU Wei-fei,YANG Guo-yu. Construction of Minicircle Vector Carrying Porcine LIAS Gene[J]. ACTA VETERINARIA ET ZOOTECHNICA SINICA, 2014, 45(3): 380-384.

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