丹翘液对脂多糖诱导RAW264.7细胞炎症相关因子的抑制效应分析

doi:10.11843/j.issn.0366-6964.2015.12.023

畜牧兽医学报 ›› 2015, Vol. 46 ›› Issue (12): 2299-2306.doi: 10.11843/j.issn.0366-6964.2015.12.023

丹翘液对脂多糖诱导RAW264.7细胞炎症相关因子的抑制效应分析

魏立琴^1，2，王东升¹，董书伟¹，邝晓娇¹，张世栋^1*，严作廷^1*

(1.中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所/农业部兽用药物创制重点实验室/甘肃省中兽药工程技术研究中心，兰州 730050；2.甘肃农业大学动物医学院，兰州 730070）

收稿日期:2015-04-13 出版日期:2015-12-23 发布日期:2015-12-23
通讯作者: 张世栋（1983-），主要从事药理毒理学研究，E-mail：zhangshidong@caas.cn，Tel：0931-2115262；严作廷（1962-），主要从事中兽医临床和奶牛疾病防治的研究，E-mail：yanzuoting@caas.cn，Tel：0931-2115261
作者简介:魏立琴（1986-），女，甘肃兰州人，硕士，主要从事中兽医临床和奶牛疾病防治的研究，E-mail：24weiliqin@163.com，Tel：0931-2115262
基金资助:
“十二五”国家科技支撑计划项目（2012BAD12B03）；中国农业科学院科技创新工程-奶牛疾病研究

Inhibiting Effect Analysis of Danqiao Liquid on Inflammation-related Factors Induced by LPS in RAW264.7 Cells

WEI Li-qin^1，2，WANG Dong-sheng¹，DONG Shu-wei¹，KUANG Xiao-jiao¹，ZHANG Shi-dong^1* ，YAN Zuo-ting^1*

(1.Lanzhou Institute of Husbandry and Pharmaceutical Science of CAAS/Key Laboratory of Veterinary Pharmaceutics Discovery，Ministry of Agriculture/Engineering & Technology Research Center of Traditional Chinese Veterinary Medicine of Gansu Province，Lanzhou 730050，China；2.College of Veterinary Medicine，Gansu Agricultural University，Lanzhou 730070，China)

Received:2015-04-13 Online:2015-12-23 Published:2015-12-23

摘要/Abstract

摘要：

为研究丹翘液的体外抗炎作用及其抗炎机制，利用LPS诱导巨噬细胞建立炎症模型，MTT法检测不同浓度丹翘液对RAW264.7细胞活力影响；NO测试盒检测丹翘液对LPS诱导的NO释放量的影响；ELISA方法检测丹翘液对LPS诱导的TNF-α、IL-6和PGE₂分泌的影响；RT-PCR方法检测丹翘液对LPS诱导的TNF-α、IL-6、COX-2和iNOS基因转录的影响；Western blot检测对细胞核内NF-κB p65蛋白表达的影响。结果显示丹翘液小于700 μg•mL^-1对细胞无毒性作用；丹翘液各剂量组（100、300、600 μg•mL^-1）能不同程度地抑制LPS诱导的NO、PGE₂、TNF-α和IL-6的分泌；能显著抑制iNOS、COX-2、TNF-α和IL-6基因转录和细胞核内 NF-κB p65蛋白表达。丹翘液的抗炎作用机制可能与抑制NF-κB 通路激活，进而抑制炎症介质和炎性细胞因子的转录和表达有关。

Abstract:

The aim of the present study was to study the anti-inflammatory effects and possible underlying mechanisms of Danqiao liquid in LPS-stimulated RAW264.7 cells.The cytotoxicity of Danqiao liquid was detected by MTT method.The NO kit assay was adopted to detect the effect of Danqiao liquid on NO release from LPS-induced RAW264.7 cells.ELISA was used to evaluate the production of TNF-α，IL-6 and PGE₂ in LPS-induced RAW264.7 cells.Real-time PCR was used to detect the transcription of COX-2，iNOS，TNF-α and IL-6 in LPS-induced RAW264.7 cells.The protein expression of nuclear NF-κB p65 was detected by Western blot.The result showed that the safe medication range of Danqiao liquid was less than 700 μg•mL^-1.Compared with the LPS model group，Danqiao liquid(100，300，600 μg•mL^-1) could reduce the secretion of NO，PGE₂，TNF-α，and IL-6 in cells induced by LPS，and significantly inhibit the mRNA transcription of iNOS，COX-2，TNF-α，IL-6 and the protein expression of NF-κB p65.In conclusion，this study preliminarily proves the protective effect of Danqiao liquid on LPS-induced RAW264.7 macrophages.Its action mechanism may be related to inhibit NF-κB signal pathway and the genes expressions and secretion of inflammatory mediators and cytokines.

中图分类号:

S853.9

魏立琴，王东升，董书伟，邝晓娇，张世栋，严作廷. 丹翘液对脂多糖诱导RAW264.7细胞炎症相关因子的抑制效应分析[J]. 畜牧兽医学报, 2015, 46(12): 2299-2306.

WEI Li-qin，WANG Dong-sheng，DONG Shu-wei，KUANG Xiao-jiao，ZHANG Shi-dong，YAN Zuo-ting. Inhibiting Effect Analysis of Danqiao Liquid on Inflammation-related Factors Induced by LPS in RAW264.7 Cells[J]. ACTA VETERINARIA ET ZOOTECHNICA SINICA, 2015, 46(12): 2299-2306.

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参考文献

［1］MATHUR N，PEDERSEN B K.Exercise as a mean to control low-grade systemic inflammation［J/OL］.Mediators Inflamm，2008，2008：109502.［2015-10-23］.http：//www.hindawi.com/journals/mi/2008/109502/.
［2］RAMOS G C.Inflammation as an animal development phenomenon［J/OL］.Clin Dev Immunol，2012，2012：983203.［2015-10-23］.http：//www.hindawi.com/journals/jir/2012/983203/.
［3］郭醉元.溶菌酶与中药治疗奶牛子宫内膜炎的比较研究［D］.哈尔滨：东北农业大学，2008.
GUO Z Y.Comparative studies on lysozyme and traditional Chinese medicine treating cow endometritis［D］.Harbin：Northeast Agricultural University，2008.(in Chinese)
［4］岑玉文，谭行华，张坚生，等.中西医结合疗法改善艾滋病合并肺部感染患者中医症候的随机对照研究［J］.中国中药杂志，2013，38(15)：2448-2452.
CEN Y W，TAN X H，ZHANG J S，et al.Randomized controlled study of integrated treatment of traditional Chinese medicine and western medicine on AIDS with pulmonary inflammation patients［J］.China Journal of Chinese Materia Medica，2013，38(15)：2448-2452.(in Chinese)
［5］周松，刘永刚，张国祥，等.中药影响炎症免疫反应的机制研究进展［J］.医学综述，2012，18(2)：183-185.
ZHOU S，LIU Y G，ZHANG G X，et al.Research Progress on the Mechanism of the Influences of Traditional Chinese Medicine on Inflammation Immunity［J］.Medicine Recapitulate，2012，18(2)：183-185.(in Chinese)
［6］刘红，孙伟，万毅刚，等.慢性肾脏病肾组织炎症信号通路NF-κB的调节机制及中药的干预作用［J］.中国中药杂志，2013，38(24)：4246-4251.
LIU H，SUN W，WAN Y G，et al.Regulatory mechanism of NF-κB signaling pathway on renal tissue inflammation in chronic kidney disease and interventional effect of traditional Chinese medicine［J］.China Journal of Chinese Materia Medica，2013，38(24)：4246-4251.(in Chinese)
［7］王洪海，王国卿，郭梦尧，等.中药治疗奶牛子宫内膜炎研究进展［J］.中国兽医杂志，2010，46(8)：64-66.
WANG H H，WANG G Q，GUO M Y，et al.Progress of Treatment of Traditional Chinese Herb on Dairy Cows With Endometritis［J］.Chinese Journal of Veterinary Medicine，2010，46(8)：64-66.(in Chinese)
［8］SHELDON I M，PRICE S B，CRONIN J，et al.Mechanisms of infertility associated with clinical and subclinical endometritis in high producing dairy cattle［J］.Reprod Domest Anim，2009，44(Suppl 3)：1-9.
［9］魏立琴，王东升，苗小楼，等.丹翘灌注液抗炎镇痛作用的研究［J］.中国农学通报，2015，31(2)：75-79.
WEI L Q，WANG D S，MIAO X L，et al.Anti-inflammatory and analgesic activities of Danqiao perfusate［J］.Chinese Agricultural Science Bulletin，2015，31(2)：75-79.(in Chinese)
［10］ARROYO A G，IRUELA-ARISPE M L.Extracellular matrix，inflammation，and the angiogenic response［J］.Cardiovasc Res，2010，86(2)：226-235.
［11］MCCARTHY N.Inflammation：An innate response［J］.Nat Rev Cancer，2015，15(4)：197.
［12］MANTOVANI A，BISWAS S K，GALDIERO M R，et al.Macrophage plasticity and polarization in tissue repair and remodelling［J］.J Pathol，2013，229(2)：176-185.
［13］BISWAS S K，CHITTEZHATH M，SHALOVA I N，et al.Macrophage polarization and plasticity in health and disease［J］.Immunol Res，2012，53(1-3)：11-24.
［14］王强，廖清奎.一氧化氮在炎症反应中的作用［J］.医学综述，2002，8(4)：198-200.
WANG Q，LIAO Q Q.The role of nitric oxide in the inflammatory response［J］.Medicine Recapitulate，2002，8(4)：198-200.(in Chinese)
［15］ZHOU L，ZHU D Y.Neuronal nitric oxide synthase：structure，subcellular localization，regulation，and clinical implications［J］.Nitric Oxide，2009，20(4)：223-230.
［16］MEDZHITOV R.Toll-like receptors and innate immunity［J］.Nat Rev Immunol，2001，1(2)：135-145.
［17］DEBPRASAD C，HEMANTA M，PAROMITA B，et al.Inhibition of NO2，PGE2，TNF-α，and iNOS expression by Shorea robusta L.：An ethnomedicine used for anti-inflammatory and analgesic activity［J/OL］.Evid Based Complement Alternat Med，2012，2012：254849.［2015-10-23］.http：//www.hindawi.com/journals/ecam/2012/254849/.
［18］WANG D，DUBOIS R N.The role of COX-2 in intestinal inflammation and colorectal cancer［J］.Oncogene，2010，29(6)：781-788.
［19］徐艺荣.九种黄酮类化合物对LPS诱导的RAW264.7细胞PGE2、COX-2表达的影响［D］.天津：天津科技大学，2012.
XU Y R.Comparison of Inhibitory Effects of nine flavonoids on prostaglandin E2 production and COX-2 expression in LPS-stimulated RAW264.7 macrophages［D］.Tianjin：Tianjin University of Science And Technology，2012.(in Chinese)
［20］CHEN J，JIANG X H，CHEN H，et al.CFTR negatively regulates cyclooxygenase-2-PGE₂ positive feedback loop in inflammation［J］.J Cell Physiol，2012，227(6)：2759-2766.
［21］LI H，BRADBURY J A，DACKOR R T，et al.Cyclooxygenase-2 regulates Th17 cell differentiation during allergic lung inflammation［J］.Am J Respir Crit Care Med，2011，184(1)：37-49.
［22］AHMAD S F，ANSARI M A，ZOHEIR K M，et al.Regulation of TNF-α and NF-κB activation through the JAK/STAT signaling pathway downstream of histamine 4 receptor in a rat model of LPS-induced joint inflammation［J］.Immunobiology,2015，220（7）：889-898.
［23］YAMANAKA H.TNF as a target of inflammation in rheumatoid arthritis［J］.Endocr Metab Immune Disord Drug Targets，2015，15(2)：129-134.
［24］HONG S H，ONDREY F G，AVIS I M，et al.Cyclooxygenase regulates human oropharyngeal carcinomas via the proinflammatory cytokine IL-6：a general role for inflammation?［J］.FASEB J，2000，14(11)：1499-1507.
［25］MANJEET K R，GHOSH B.Quercetin inhibits LPS-induced nitric oxide and tumor necrosis factor-alpha production in murine macrophages［J］.Int J Immunopharmacol，1999，21(7)：435-443.
［26］邢飞跃，赵克森，姜勇.NF-κB的信号通路与阻断策略［J］.中国病理生理杂志，2003，19(6)：849-855.
XING F Y，ZHAO K S，JIANG Y.Signal transduction pathway and blocking strategies of NF-κB［J］. Chinese Journal of Pathophysiology，2003，19(6)：849-855.(in Chinese)
［27］乔静.葫芦素E对脂多糖诱导的小鼠巨噬细胞RAW264.7炎症反应的抑制作用及其机制研究［D］.广州：暨南大学，2013.
QIAO J.The inhibitory effect of cucurbitacin E on the inflammatory response of lipopolysaccharides-induced mouse macrophage RAW264.7 and its mechanism［D］.Guangzhou：Jinan University，2013.(in Chinese)
［28］OH Y C，JEONG Y H，HA J H，et al.Oryeongsan inhibits LPS-induced production of inflammatory mediators via blockade of the NF-kappaB，MAPK pathways and leads to HO-1 induction in macrophage cells［J］.BMC Complement Altern Med，2014，14：242.
［29］GUGASYAN R，GRUMONT R，GROSSMANN M，et al.Rel/NF-κB transcription factors：key mediators of B-cell activation［J］.Immunol Rev，2000，176：134-140.
［30］BAWADEKAR M，DE ANDREA M，LO CIGNO I，et al.The extracellular IFI16 protein propagates inflammation in endothelial cells via p38 MAPK and NF-κB p65 activation［J］.J Interferon Cytokine Res，2015，35(6)：441-453.
［31］ZHAO W，SUN Z，WANG S，et al.Wnt1 participates in inflammation induced by lipopolysaccharide through upregulating scavenger receptor A and NF-κB［J］.Inflammation，2015，38(4)：1700-1706.

[1]	雷亚萍, 周世伟, 滕雨萌, 农碧丹, 庞晓敏, 张诣, 刘晓丽, 王玉莲, 胡薛英. 麻杏石甘口服液治疗肉鸡感染鸡毒支原体的效果评价[J]. 畜牧兽医学报, 2023, 54(12): 5264-5274.
[2]	常伟辰, 李帅奇, 李琰, 闫微, 张红英, 王彦彬, 杨明凡, 张昂克. 白头翁散煎剂发酵物对感染猪流行性腹泻病毒仔猪肠道屏障功能的影响[J]. 畜牧兽医学报, 2023, 54(10): 4403-4410.
[3]	周炜炜, 王雪峰, 张梦洁, 杨娟, 孙悦龙, 张祖烽, 张宇欣, 豆佳红, 王梓颖, 戴小枫, 李秀梅. 基于生物网络功能模块整合组方规律分析四黄止痢颗粒治疗仔猪腹泻的作用机制[J]. 畜牧兽医学报, 2023, 54(7): 3031-3043.
[4]	任曼, 刘欣, 唐玉林, 张瑞雪, 秦俊杰, 朱浩, 郭延生. 归芪益母复方制剂对产后奶牛瘤胃微生物和短链脂肪酸的调节[J]. 畜牧兽医学报, 2022, 53(12): 4461-4469.
[5]	郭大伟, 侯思鲁, 池宇佳, 于非可, 尉啸涵, 邓倩, 肖传明, 刘晓晔, 董虹. 芪英汤和子甘汤中药复方促进母猪繁殖性能和断奶仔猪生长性能的临床研究[J]. 畜牧兽医学报, 2022, 53(6): 1994-2004.
[6]	贺尚文, 王月明, 张慧, 侯思鲁, 刘晓晔, 董虹. 白头翁汤通过抑制TLR4-ERK1/2信号通路缓解LPS诱导的微血管内皮细胞炎性反应[J]. 畜牧兽医学报, 2021, 52(8): 2317-2325.
[7]	刘晓曦, 马云飞, 李焕荣, 刘凤华, 鲍明隆, 张继东, 林红英, 许剑琴. 加味葛根芩连汤对湿热泄泻仔猪肠道炎症和损伤修复的作用[J]. 畜牧兽医学报, 2021, 52(1): 246-255.
[8]	罗艺晨, 杨庆昌, 林春发, 叶芮伶, 尚杨斐, 胡宇, 刘娟. 肾复康颗粒对人工诱发鸡肾肿病理模型的炎性细胞因子及IL-1R/NF-κB信号通路的影响[J]. 畜牧兽医学报, 2020, 51(11): 2886-2894.
[9]	林春发, 罗艺晨, 王忠清, 冯静波, 刘娟. 板芩桔甘合剂对传染性支气管炎病毒人工感染雏鸡的临床疗效分析[J]. 畜牧兽医学报, 2020, 51(2): 382-391.
[10]	姚万玲, 文艳巧, 华永丽, 纪鹏, 魏彦明. 郁金散对大肠湿热证大鼠回肠、结肠黏膜SIgA和炎性因子的影响[J]. 畜牧兽医学报, 2019, 50(10): 2147-2155.
[11]	李健, 陈耀星, 陈福宁, 王子旭, 曹静, 董玉兰, 刘洋, 王兴德, 汪洋. 疏肝益阳胶囊对炔雌醚诱导大鼠生精紊乱和氧化应激的缓解作用[J]. 畜牧兽医学报, 2019, 50(2): 422-430.
[12]	闫志强, 郑华, 朱买勋, 付文贵, 张邑帆, 翟少钦. 女黄颗粒对免疫抑制模型小鼠脾组织病理及细胞周期的影响[J]. 畜牧兽医学报, 2018, 49(12): 2771-2776.
[13]	文艳巧, 姚万玲, 杨朝雪, 马琪, 张晓松, 纪鹏, 华永丽, 魏彦明. 郁金散对大肠湿热证模型大鼠血清及肠道组织胃肠激素的影响[J]. 畜牧兽医学报, 2017, 48(6): 1140-1149.
[14]	王明明，杨舒，董虹，穆祥. 白头翁汤通过保护微血管内皮细胞的完整性及PMNs迁移杀菌功能的影响[J]. 畜牧兽医学报, 2016, 47(4): 836-843.
[15]	王自力，王晓谦，张翥，涂君平，蒋会会，别应堂，张家骅. 増液承气汤对热结肠道型气分证大鼠肠道组织结构、血清IL-1β、IL-6及TNF-α含量的影响[J]. 畜牧兽医学报, 2016, 47(4): 828-835.

丹翘液对脂多糖诱导RAW264.7细胞炎症相关因子的抑制效应分析

Inhibiting Effect Analysis of Danqiao Liquid on Inflammation-related Factors Induced by LPS in RAW264.7 Cells

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