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当期目录

2016年 第47卷 第11期 刊出日期:2016-11-23
精品科技期刊证书(2014-2017)
畜牧兽医学报, 2016, 47(11):  0-0.  doi:
摘要 ( 38 )   HTML( )    PDF (330KB) ( 190 )  
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中文目次
畜牧兽医学报, 2016, 47(11):  0-0.  doi:
摘要 ( 43 )   HTML( )    PDF (264KB) ( 193 )  
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英文目次
畜牧兽医学报, 2016, 47(11):  0-0.  doi:
摘要 ( 64 )   HTML( )    PDF (159KB) ( 273 )  
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2015年“百种中国杰出学术期刊”
畜牧兽医学报, 2016, 47(11):  0-0.  doi:
摘要 ( 48 )   HTML( )    PDF (319KB) ( 268 )  
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综述
环状RNA研究进展
张进威,龙科任,王讯,李明洲,马继登
畜牧兽医学报, 2016, 47(11):  2151-2158.  doi:10.11843/j.issn.0366-6964.2016.11.001
摘要 ( 420 )   HTML( )    PDF (1478KB) ( 745 )  
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环状RNA(circRNAs)是一类不同于线性RNA的内源非编码RNA,它是通过反向剪接形成的闭合环状RNA分子。circRNA不具有5′端帽子和3′端poly(A)尾巴结构,能够稳定存在于各种类型真核细胞中。对于circRNA的数量和丰度的检测,传统分子生物学方法的能效非常有限,因此一直以来circRNA被认为是RNA异常剪接的产物。随着生物信息学的快速发展和高通量测序技术的不断革新,目前已经在真核细胞中发现了大量内源性circRNA,其中一些circRNA表达丰度高并呈现出时空表达特异性和物种间保守性,说明circRNA可能在调节基因表达方面具有重要功能。本文综述了circRNA的特征、形成机制及生物学功能,并对近年来circRNA研究进展进行归纳总结,以期为真核生物基因表达调控研究、疾病检测等提供基础资料,并对circRNA在动物分子育种方面的研究进行展望。

靶向MAPK信号通路调控脂肪细胞分化的microRNAs
张秀秀,郭云涛,黄万龙,李嫒,苗向阳
畜牧兽医学报, 2016, 47(11):  2159-2166.  doi:10.11843/j.issn.0366-6964.2016.11.002
摘要 ( 229 )   HTML( )    PDF (1064KB) ( 462 )  
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脂肪细胞分化是一个多能间充质干细胞(MSCs)逐渐向成熟脂肪细胞分化的复杂过程,该过程受很多转录因子、激素以及信号通路相关分子的严格调控。体内外的试验表明,microRNAs(miRNAs)也参与了脂肪细胞分化的调节,且可以靶向转录因子和信号通路中的关键分子发挥作用。丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路是真核细胞将胞外信号转导至胞内引起细胞反应的一类重要信号系统,研究证明,miRNAs可以靶向MAPK信号通路中的某些基因,影响该通路的信号转导,参与脂肪细胞分化的调控。因此本文总结了近几年有关miRNA改变MAPK信号转导,实现调控脂肪细胞分化功能的研究,以期为深入了解脂肪细胞分化的机制,为治疗脂肪型疾病提供新的思路。

病毒感染激活炎症小体的分子机制
高泽乾,朱学亮,张志东,窦永喜
畜牧兽医学报, 2016, 47(11):  2167-2174.  doi:10.11843/j.issn.0366-6964.2016.11.003
摘要 ( 245 )   HTML( )    PDF (4111KB) ( 532 )  
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炎症小体是宿主细胞应对外界刺激、特殊病原或细胞损伤相关分子产生的一类多聚蛋白复合物,可以直接导致宿主细胞发生炎性坏死,即细胞焦亡。炎症小体复合物主要由炎症信号识别受体、凋亡相关点样蛋白(ASC)和含半胱氨酸的天冬氨酸水解酶1(caspase-1)组成。炎症信号识别受体识别刺激信号后,自身发生寡聚化,并募集ASC和caspase-1,活化的caspase-1切割促炎症因子前体(pro-IL)-1β和IL-18,产生成熟的促炎细胞因子IL-1β和IL-18。根据炎症信号识别受体的种类,炎症小体主要分为两类,即核苷酸结合寡聚化结构域样受体(NLR)炎症小体和黑色素瘤缺乏因子2样受体(ALR)炎症小体。宿主细胞可以识别病毒的不同结构,如离子通道蛋白、非结构蛋白和病毒核酸等,并产生相应的炎症小体,进而激活后续炎症和免疫相关反应导致细胞焦亡。作者从病毒结构的角度出发,阐述了宿主细胞是如何应对病毒不同结构的刺激并产生相应的炎症小体。

遗传繁育
华南家鸡MHC-B区域复合微卫星位点LEI0258的遗传多样性与进化研究
黄勋和,李丽芝,张金枫,何丹林,张细权,陈洁波,李威娜,杜炳旺,钟福生
畜牧兽医学报, 2016, 47(11):  2175-2183.  doi: 10.11843/j.issn.0366-6964.2016.11.004
摘要 ( 222 )   HTML( )    PDF (1160KB) ( 318 )  
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旨在应用MHC-B区域复合微卫星位点LEI0258研究华南家鸡的遗传多样性与进化历史。以华南地区和邻省家鸡及商品鸡为试验材料,对微卫星位点LEI0258进行基因分型和测序,分析其遗传多样性和构建中介网络图。结果表明,580份样品共检测到LEI0258的62个等位基因,长度范围为182~501 bp,其中37个为首次发现。华南家鸡LEI0258保持着较高的遗传多样性水平,观察杂合度、期望杂合度和多态信息含量分别为0.813、0.960和0.957。中山沙栏鸡、文昌鸡和五华三黄鸡的遗传多样性水平明显高于广西三黄鸡。LEI0258的28个等位基因与27种已知MHC血清型相对应。基于LEI0258侧翼区变异信息的中介网络图将62个等位基因分为8条进化枝,其中3条进化枝同样存在于红原鸡中,提示华南家鸡主要起源于红原鸡。部分等位基因存在于特定鸡品种中,可作为品种鉴定的参考依据。结果提示,微卫星位点LEI0258适用于地方鸡群体遗传多样性、血清型鉴定、品种鉴定和进化研究。

CRTC3基因多态性及基因型组合与秦川牛生长性状的关联分析
徐怀超,昝林森,王洪宝,宁越
畜牧兽医学报, 2016, 47(11):  2184-2190.  doi:10.11843/j.issn.0366-6964.2016.11.005
摘要 ( 196 )   HTML( )    PDF (1699KB) ( 468 )  
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旨在探讨CRTC3基因作为秦川牛生长性状候选基因的可能性,寻找与秦川牛生长相关的分子标记。本研究采用PCR-RFLP方法检测395头健康秦川牛CRTC3基因的多态性,分析其多态位点不同基因型及组合基因型与秦川牛生长性状的关联性。结果发现,CRTC3基因扩增序列区间存在2个SNPs位点(位于外显子区域的G66478C和位于内含子区域的C91297T)。关联性分析表明,在本试验所选取的395头秦川牛群体中, G66478C位点GC基因型个体在体斜长方面极显著高于CC型个体均值(P<0.01),且在胸深方面显著高于CC型个体均值(P<0.05)。在C91297T位点,CT基因型个体均值在体斜长、腰高、尻长和胸深方面显著高于TT基因型个体均值(P<0.01)。CRTC3基因的优势基因型组合CC-TT的个体在腰高、尻长上极显著高于CC-CT基因型组合的个体均值(P<0.01),且基因型组合CC-TT的个体在胸深、胸围显著高于CC-CT组合的个体均值(P<0.05)。综上,可以尝试将CRTC3基因作为影响秦川牛生长性状的候选基因用于标记辅助选择,为秦川牛选育工作提供科学依据。

水牛bbu-miR-103-1在泌乳期与非泌乳期表达模式及靶向基因的初步研究
蔡小艳,李胜,陈秋萍,王萍,邓凯,刘庆友,石德顺
畜牧兽医学报, 2016, 47(11):  2191-2201.  doi:10.11843/j.issn.0366-6964.2016.11.006
摘要 ( 227 )   HTML( )    PDF (3295KB) ( 365 )  
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旨在探讨bbu-miR-103-1在水牛泌乳期和非泌乳期的差异表达模式,并预测其靶向调控基因及功能。本研究应用qRT-PCR检测bbu-miR-103-1,在水牛泌乳期和非泌乳期的差异表达。构建bbu-miR-103-1前体表达质粒LpEZX-pre-miR-103-1,并在293T细胞中包装高滴度的慢病毒颗粒,用于感染水牛乳腺上皮细胞实现过表达bbu-miR-103-1,同时应用化学合成的bbu-miR-103-1抑制剂转染水牛上皮细胞实现抑制表达bbu-miR-103-1,研究bbu-miR-103-1对PANK3及乳脂代谢相关基因表达的影响。结果表明,水牛泌乳期bbu-miR-103-1的相对表达量为非泌乳期的5.29倍(P<0.01);成功构建的慢病毒载体LpEZX-pre-miR-103-1包装获得了感染滴度为3.47×106 PFU•mL-1的慢病毒颗粒;过表达和抑制表达bbu-miR-103-1分别极显著下调和上调了水牛乳腺上皮细胞PANK3基因的相对表达量(P<0.01);过表达bbu-miR-103-1极显著提高了ACACAGPAMDGAT1和PDK4基因的表达(P<0.01),对SREBP1c、ADFPCD36、ACSS1等基因产生了显著的上调作用(P<0.05)。过表达bbu-miR-103-1通过下调PANK3的表达,反馈提高了SREBP1c的mRNA水平,促进了以ACACA开头的脂肪酸从头合成。表明bbu-miR-103-1对水牛乳脂肪合成有十分重要的促进作用,为揭示水牛高乳脂形成和调控机理提供了分子依据。

山羊CC类趋化因子受体(CCR2)基因的克隆及组织表达分析
朱江江,林亚秋,王永,李倩,林森
畜牧兽医学报, 2016, 47(11):  2202-2209.  doi:10.11843/j.issn.0366-6964.2016.11.007
摘要 ( 232 )   HTML( )    PDF (5198KB) ( 434 )  
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本研究旨在克隆山羊CC类趋化因子受体基因(CCR2)的CDS区序列,并检测其在山羊不同组织中mRNA和蛋白表达水平,从而为CCR2基因在山羊脂代谢中的作用研究奠定基础。选取2~3周岁的健康简州大耳羊和藏山羊羯羊各4只,屠宰后分别采集心、肝、脾、肺、肾、肌肉和皮下脂肪组织,分别提取组织总RNA及总蛋白,利用RT-PCR法克隆山羊CCR2基因序列,进行生物信息学分析,并利用实时定量PCR法和Western blot分别检测CCR2基因mRNA和蛋白的表达水平。结果显示,克隆得到CCR2基因cDNA序列1 186 bp,包含CDS全长1 100 bp,5′ UTR 2 bp 和3′ UTR 74 bp,编码370个氨基酸残基。山羊CCR2氨基酸序列与牛、猪、小鼠、人的相似性分别为97.3%、91.9%、77.0%和69.2%。山羊CCR2基因与牛具有最近的亲缘关系,其次为猪、狗和小鼠,而与人的亲缘关系较远。组织表达结果显示,CCR2在两种山羊肾和心中均具有较高的表达水平,而在皮下脂肪和肌肉中的表达水平较低。这些结果表明,CCR2可能在山羊脂质代谢过程中具有重要的调控作用。

外源褪黑激素促进绒山羊皮肤毛囊相关基因表达差异的研究
刘斌,杨军,阿云嘎,乌日格希拉图,那顺其木格,郝巴雅斯胡良,赵存发,李玉荣
畜牧兽医学报, 2016, 47(11):  2210-2217.  doi:10.11843/j.issn.0366-6964.2016.11.008
摘要 ( 207 )   HTML( )    PDF (4366KB) ( 378 )  
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旨在通过对非长绒期阿尔巴斯型绒山羊进行褪黑激素埋植,研究褪黑激素对羊绒周期性生长的调控,以期借此延长绒山羊毛囊的兴盛期,提高羊绒产量。将试验羊随机分成两组:埋植褪黑激素的试验组(T)和对照组(C),每组3只(试验组(TI、T2和T3)和对照组(C1、C2和C3)),采集绒山羊的皮肤组织进行组织切片,染色观察埋植褪黑激素对毛囊生长诱导作用。分别抽提两组样本总RNA,逆转录合成相应被标记的cDNA探针,采用Agilent绵羊的8×15K规格全基因组表达谱芯片进行杂交,筛选差异表达基因。利用实时荧光定量PCR技术进行验证。结果表明,从组织学分析可观察到埋植褪黑激素对毛囊生长具有明显的促进作用;芯片数据显示,筛选出差异表达的基因95个,其中61个表达上调、34个下调。GO分析基因数量分布情况:参与分子功能的基因占47.78%,参与生物学过程的基因占33.89%,组成细胞成分的基因占18.33%。与对照组的样本相比,埋植褪黑激素后相关基因的差异性表达涉及毛囊生长及周围皮肤附属物形态发生等生物学过程。这些差异性表达的基因为绒山羊毛囊生长及周期性调控的基因功能研究提供极有价值的参考。

卵泡期和黄体期山羊垂体miRNAs表达谱及差异分析
凌英会,朱龙,睢梦华,郑琪,吴昊,张运海,章孝荣
畜牧兽医学报, 2016, 47(11):  2218-2227.  doi:10.11843/j.issn.0366-6964.2016.11.009
摘要 ( 214 )   HTML( )    PDF (2707KB) ( 412 )  
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旨在通过高通量测序的方法筛选与分析卵泡期和黄体期安淮山羊垂体中差异表达miRNAs,探索垂体在转录后水平调节山羊从卵泡期-黄体期过渡中发挥的作用。测序结果表明,卵泡期和黄体期文库分别得到11 319 069和11 432 846条原始序列。经过去除杂质后,得到11 162 888和11 016 138条纯净序列。在两个不同时期的文库中,分别检测到148和150种差异表达的miRNA,有147种miRNA共同表达;分别预测到52和95种差异表达的miRNA,有27种miRNA两文库共同表达。已知miRNA中,let-7f在两文库表达量最高,且差异极显著;新miRNA中,novel-miR-159在两文库表达量最高,且差异极显著。通路分析表明,ko00511、ko00052、ko01100、ko00030、ko00520 5个通路可能影响性激素的合成。测序获得安淮山羊垂体组织miRNA序列及表达谱,垂体组织miRNA表达丰富,且表达量各异。研究结果有助于理解miRNA在山羊垂体中调节性激素分泌的作用,并且所鉴别的miRNA有助于后续卵泡期~黄体期转变的相关研究。

酿酒葡萄皮渣对单栏饲养方式下公绵羊繁殖性能及睾丸抗氧化性的影响
金亚倩,刘文忠,赵俊星,任有蛇,张春香,张文佳,项斌伟,马雪豪,张建新
畜牧兽医学报, 2016, 47(11):  2228-2239.  doi: 10.11843/j.issn.0366-6964.2016.11.010
摘要 ( 176 )   HTML( )    PDF (1593KB) ( 374 )  
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 旨在研究日粮中添加一定量的酿酒葡萄皮渣对绵羊繁殖性能及睾丸抗氧化性能的影响。试验选取30只5月龄,体重(25±1)kg的杜泊×小尾寒羊杂交公羊,采用完全随机设计平均分为5组。1组自由活动,其余4组单栏饲养,建立应激模型。自由活动绵羊饲喂未添加葡萄皮渣日粮,单栏饲养绵羊分别饲喂不同葡萄皮渣添加水平(0%、5%、10%、20%)日粮。试验期80 d。试验结束后,屠宰取样,测定睾丸系数并作附睾精子分析,测定睾丸组织抗氧化水平,对睾丸组织中Cu-ZnSOD、CAT、GPx4及Nrf2 mRNA和蛋白相对表达量进行研究。结果表明,与自由活动组相比,单栏组绵羊睾丸组织中MDA及ROS水平升高(P<0.01),睾丸重量显著降低(P<0.05),睾丸系数也表现出下降趋势(P=0.06),附睾精子密度及顶体完整率显著降低(P<0.05),精子活动率极显著降低(P<0.01),精子畸形率极显著升高(P<0.01),表明单栏饲养方式对绵羊造成氧化应激,并在一定程度上影响绵羊繁殖性能。适量添加酿酒葡萄皮渣后,绵羊附睾精子密度和精子活动率均显著升高(P<0.05),精子畸形率显著降低(P<0.05),睾丸组织MDA含量显著下降(P<0.01),SOD、CAT及GSH-Px活性均显著提高(P<0.01,P<0.05,P<0.01);睾丸组织中Cu-ZnSOD mRNA相对表达量显著提高(P<0.05),Cu-ZnSOD、CAT、GPx4蛋白相对表达量显著提高(P<0.05)。综上表明,酿酒葡萄皮渣可以提高单栏饲养方式下绵羊睾丸组织抗氧化性,进而改善绵羊繁殖性能。

吡格列酮对MZT期小鼠胚胎发育阻滞的影响
徐礼杰,李钟淑,方南洙
畜牧兽医学报, 2016, 47(11):  2240-2247.  doi:10.11843/j.issn.0366-6964.2016.11.011
摘要 ( 265 )   HTML( )    PDF (1431KB) ( 352 )  
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本研究旨在了解活性氧(Reactive oxygen species,ROS)、发育阻滞与抗氧化物吡格列酮(Pioglitazone,PIO)之间的关系。试验分3组:对照组、H2O2处理组和H2O2+PIO处理组。通过H2O2建立小鼠胚胎氧化损伤模型,添加抗氧化物质PIO对胚胎进行氧化修复, DCHFDA测定胚胎内部ROS水平,半定量PCR测定母型-合子型胚胎内部相关母性效应基因和合子型基因的表达。结果表明:(1)1-细胞和2-细胞胚胎H2O2处理组的ROS水平明显比对照组和H2O2+PIO处理组的高(P<0.05);(2)H2O2处理组的2-细胞向4-细胞过渡率明显比对照组和H2O2+PIO处理组低(P<0.05),但各处理组之间1-细胞向2-细胞过渡率差异不显著(P>0.05);(3)H2O2处理组的母性效应基因Hsf1、Zfp3612、Zp3和合子型基因Eif1-α、Zscan4d和Muerv-L的表达明显比对照组和H2O2+PIO处理组低(P<0.05)。综上表明,氧化应激通过下调2-细胞胚胎母型效应基因和合子型基因表达,导致小鼠胚胎2-细胞发育阻滞,抗氧化物质吡格列酮可促进胚胎发育,有效克服胚胎体外2-细胞发育阻滞现象。

动物营养
胚蛋给养β-羟基-β-甲基丁酸对肉仔鸡孵化率、生长性能和骨骼肌发育的影响
马友彪,张海军,王晶,武书庚,齐广海
畜牧兽医学报, 2016, 47(11):  2248-2256.  doi:10.11843/j.issn.0366-6964.2016.11.012
摘要 ( 216 )   HTML( )    PDF (839KB) ( 336 )  
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本试验旨在研究胚蛋给养(in ovo feeding)β-羟基-β-甲基丁酸(beta-hydroxy-beta-methylbutyrate, HMB)对肉仔鸡孵化率、生长性能及骨骼肌发育的影响。选用540枚商品代AA肉仔鸡受精蛋,随机分为3个组:空白组(不注射)、生理盐水组(7胚龄气室注射1 mL 0.9% 生理盐水)、HMB组(7胚龄气室注射1 mL含0.1% HMB的生理盐水)。出壳后,每组选取72只体重相近健康公雏随机分成6个重复,每重复12只。结果表明:1)胚蛋给养对种蛋孵化率无显著性影响(P>0.05);2)HMB组出壳重、2l日龄体重、0~21日龄平均日增重均显著高于其他组(P<0.05);3)7日龄时,HMB组肉仔鸡胸肌率较生理盐水组提高了1.01%(P=0.019);21日龄时,HMB组胸肌率显著高于其他组(P<0.05),较空白组和生理盐水组分别提高了1.11%和1.04%;4)HMB组肉仔鸡的腹脂率最低,且在21日龄时显著低于空白组(P=0.018);5)与空白组和生理盐水组相比,HMB组肉仔鸡出壳当天和4日龄肌细胞直径显著增大(P<0.05)。6)出壳当天和7日龄肉仔鸡,HMB组胸肌卫星细胞有丝分裂活性指数较其他两组显著提高(P<0.05);7)7日龄肉仔鸡,HMB组血浆IGF-1含量显著高于空白组(P<0.05),与生理盐水组之间差异不显著(P>0.05)。结果提示,胚蛋给养HMB可提高肉仔鸡出壳重,增加卫星细胞有丝分裂活性,促进肉鸡胸肌发育,加快肉鸡前期生长;注射HMB不影响种蛋孵化率和肉鸡饲料转化效率;注射生理盐水与不注射处理结果相似,对肉仔鸡生长没有影响。

精料来源对肉羊营养物质消化率的影响及代谢能预测模型的建立
赵江波,魏时来,赵明明,马涛,肖怡,丁静美,李岚捷,冯文晓,贾鹏,刁其玉
畜牧兽医学报, 2016, 47(11):  2257-2265.  doi:10.11843/j.issn.0366-6964.2016.11.013
摘要 ( 188 )   HTML( )    PDF (821KB) ( 398 )  
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本试验旨在通过概略养分或可消化养分建立肉用绵羊配合饲料代谢能预测模型。选取66只18月龄体重为(49.6±1.3) kg的杜泊×小尾寒羊F1代杂交去势肉羊,采用完全随机试验设计。共11个处理,包括1个基础饲粮组和10个试验饲粮组。分别测定10种试验饲粮的概略养分和可消化养分;代谢试验测定10种试验饲粮的消化能(DE)和代谢能(ME);线性回归方法建立代谢能与概略养分和可消化养分的预测模型。结果表明,饲粮的OMD和GED与CP、NDF、ADF、GE相关极显著(P<0.01);CPD与CP、NDF、ADF相关极显著(P<0.01),与OM相关显著(P<0.05);NDFD和ADFD与GE和CP相关极显著(P<0.01),NDFD与OM和NDF相关显著(P<0.05)。建立的饲料概略养分代谢能预测模型:ME(MJ•kg-1)=38.881-19.516ADF(%)-28.672OM(%)(R2=0.640,n=60,P<0.01);可消化养分代谢能预测模型:ME(MJ•kg-1)=1.613DE(MJ•kg-1)-14.705DOM(%)+2.743DNDF(%)-3.179(R2=0.879,n=60,P<0.01)。综上表明,饲料概略养分和可消化养分与代谢能之间相关性显著,可以通过概略养分和可消化养分对饲料的代谢能进行有效的预测。

日粮能量和蛋白水平对滩羊脂肪组织PPARγFABP4 mRNA表达的影响
王小芳,曾洁,田崇奇,王小龙,杨雨鑫,陈玉林,张恩平
畜牧兽医学报, 2016, 47(11):  2266-2273.  doi:10.11843/j.issn.0366-6964.2016.11.014
摘要 ( 192 )   HTML( )    PDF (1096KB) ( 462 )  
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旨在研究日粮能量和蛋白水平对滩羊脂肪组织中PPARγFABP4 mRNA表达的影响。选择健康、体重相近的滩羊112只,公母各半,随机分4组,每组4个重复,每个重复7只羊。参考肉羊饲养标准NY/T(816-2004),根据生长阶段(22~28、29~35、36~40 kg)以目标增重设计标准日粮,每阶段设置0.84×标准(I组)、0.96×标准(II组)、1.08×标准(III组)和1.20×标准(IV组)4个营养水平日粮,分别饲喂4组试验滩羊。于每阶段末每个重复屠宰1只试验羊,取尾部脂肪、肾周脂肪和皮下脂肪组织,通过实时荧光定量PCR检测PPARγFABP4 mRNA表达水平。结果表明,尾部脂肪组织,在22~28和36~40 kg阶段末,II组PPARγ和FABP4 mRNA表达量显著高于其他组(P<0.05);在29~35 kg阶段末,II组FABP4 mRNA表达量显著高于其他组(P<0.05),且IV组mRNA表达量显著低于其他组(P<0.05)。肾周脂肪组织,在3个不同阶段末, II组PPARγ mRNA表达量显著高于其他组(P<0.05),且IV组mRNA表达量显著低于III组(P<0.05)。在22~28 kg 阶段末,II组和III组FABP4 mRNA表达量显著高于其他组(P<0.05);在29~35 kg阶段末,II组FABP4 mRNA表达量显著高于IV组(P<0.05);在36~40 kg阶段,I组和II组FABP4 mRNA表达量显著高于其他组(P<0.05)。皮下脂肪组织,在3个阶段末,各组PPARγFABP4 mRNA表达无显著差异(P>0.05)。结果表明,日粮能量和蛋白水平对滩羊深层脂肪组织(肾周脂肪)中PPARγFABP4 mRNA表达的影响大于浅层脂肪组织(皮下脂肪),对尾部脂肪组织中PPARγFABP4 mRNA的表达有影响。

预防兽医
副猪嗜血杆菌potD基因缺失株的构建及其部分生物学特性
谨瑾,张禄滑,文心田,李英,代科,周鹏,赵玉佳,曹三杰,黄小波,伍锐,赵勤,文翼平
畜牧兽医学报, 2016, 47(11):  2274-2279.  doi:10.11843/j.issn.0366-6964.2016.11.015
摘要 ( 171 )   HTML( )    PDF (1395KB) ( 405 )  
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potD基因编码的蛋白质作为转运体蛋白,负责多胺的结合和转运,为细胞的正常生长提供必需因子,已在多种病原菌中鉴定为毒力相关因子,但在副猪嗜血杆菌中的作用还不清楚。利用自然转化法构建potD缺失株SC1401ΔpotD::kan,再比较亲本株和缺失株的生长特性、自凝集活性、生物被膜形成能力、抗血清杀菌能力以及对小鼠的致病力。结果显示potD基因的缺失不影响副猪嗜血杆菌的生长、自凝集活性和生物被膜形成能力,但导致该菌的抗血清杀菌能力和对小鼠的致病力显著降低。以上结果表明potD基因可能与副猪嗜血杆菌的毒力相关。

慢病毒介导稳定表达抑制PRRSV复制的shRNA细胞系的建立
吴锦艳,田宏,尚佑军,陈妍,王光祥,刘湘涛,张志东
畜牧兽医学报, 2016, 47(11):  2280-2287.  doi:10.11843/j.issn.0366-6964.2016.11.016
摘要 ( 173 )   HTML( )    PDF (2352KB) ( 346 )  
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利用慢病毒表达技术将稳定持续抑制PRRSV复制的shRNA导入Marc-145细胞,建立稳定表达靶向抑制PRRSV复制的shRNA的Marc-145阳性细胞克隆,并从细胞模型水平阐明抑制PRRSV复制的关键靶基因的干扰效果。采用LR重组技术,将pENTR/U6/Nsp9-4、pENTR/U6/Nsp9-6及pENTR/U6/-CON分别与pDEST载体进行LR重组,获得表达骨架,重组后的表达载体在转染试剂介导下与已经优化的辅助质粒Vira PowerTM Packaging Mix共转染293-FT包装细胞,获得慢病毒样粒子,并用其感染Marc-145细胞,杀稻瘟菌素抗性筛选获得阳性细胞克隆,通过PCR、CPE、TCID50、Real-time PCR和间接免疫荧光试验等方法分别验证上述细胞株的稳定整合以及其表达的shRNA对PRRSV增殖的抑制效果。结果显示:优势干扰序列和无关序列被稳定整合在靶细胞基因组上,无论观察细胞病变效应、免疫荧光产生情况、致细胞半数感染量还是实时定量分析相对表达量,与正常Marc-145和整合有无关序列的两株阴性对照细胞相比,整合有NSP9-4和NSP9-6的两株细胞由于表达了靶向抑制PRRSV复制的shRNA,PRRSV对其易感性降低,而且差别显著,分别将其命名为Marc/pU6/NSP9-4和Marc/pU6/NSP9-6。经验证,本研究成功构建两株稳定表达靶向抑制PRRSV复制的shRNA细胞——Marc/pU6/NSP9-4、Marc/pU6/NSP9-6,同时获得一株表达无意义shRNA的Marc/pU6-CON辅助细胞,该细胞表达的shRNA具有明显抑制PRRSV复制的功能,不仅可以从细胞模型水平阐明抑制PRRSV复制的关键靶基因,也为PRRSV感染引起宿主细胞的变化以及对机体的致病机制等研究提供资料。

水貂阿留申病毒纳米PCR检测方法的建立与初步应用
杨瑞梅,张传美,张洪亮,单虎
畜牧兽医学报, 2016, 47(11):  2288-2293.  doi:10.11843/j.issn.0366-6964.2016.11.017
摘要 ( 196 )   HTML( )    PDF (2843KB) ( 350 )  
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为建立便捷、灵敏的水貂阿留申病病毒(AMDV)纳米PCR检测方法,根据AMDV NS1基因的保守序列设计一对特异性引物,对纳米PCR反应的退火温度、胶体金浓度进行了优化;测序检测扩增基因是否发生变异;对特异性和灵敏度进行了评估。结果表明,此纳米PCR的最佳退火温度为51 ℃,普通PCR为55 ℃;加入胶体金最佳浓度在0.2~0.8 nmol•L-1,纳米PCR与普通PCR产物测序相似性大于99%。特异性检测表明该纳米PCR方法只扩增AMDV而不能扩增犬瘟热病毒和水貂肠炎细小病毒。在粪尿样品检测中该纳米PCR敏感性比普通PCR高10倍。检测40份临床样品,结果表明该方法比对流免疫电泳检测敏感性提高,从而为用粪、尿等低病毒样品检测水貂阿留申病提供了一种新的有效方法。

基础兽医
瘤胃4株纤维降解细菌的分离鉴定及其纤维降解特性
王卫云,李大彪, 于永强,邢媛媛,李子健
畜牧兽医学报, 2016, 47(11):  2294-2300.  doi:10.11843/j.issn.0366-6964.2016.11.018
摘要 ( 208 )   HTML( )    PDF (1103KB) ( 426 )  
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作者从蒙古绵羊瘤胃内容物中筛选出四株纤维素降解细菌并进行鉴定,将其编号为H1、H2、N1、N2,对菌株生长特性和纤维素酶活力进行测定,以期为后续试验提供试验材料。通过生理生化特征、DNA序列分析对分离菌株进行鉴定,比浊法测定细菌生长曲线,用还原糖法测定四株细菌的滤纸酶活力、羧甲基纤维素酶活力、水杨苷酶活力和微晶纤维素酶活力。结果表明:经鉴定,四株菌中H1、H2为黄色瘤胃球菌(Ruminococcus flavefaciens),N1、N2为链球菌(Streptococcus);生长曲线测定表明菌株H1生长延迟期为4 h,H2、N1、N2均为3 h,黄色瘤胃球菌最大菌体浓度出现在28 h,链球菌为14 h;四株细菌均具有良好的纤维降解特性,其中H2滤纸酶活力、羧甲基纤维素酶活力、微晶纤维素酶活力显著高于菌株H1、N1、N2(P<0.05),H1滤纸酶活力最低,为0.08 μmol•(mL•min) -1。本试验利用hungate滚管法分离出4株具有纤维素酶活力的细菌,可以满足后续试验需要。

亚剂量硫酸新霉素对黄羽肉鸡回肠黏膜菌群组成的影响
容庭,刘志昌,王刚,李书宏,张洁,蔡追,陈庄
畜牧兽医学报, 2016, 47(11):  2301-2309.  doi:10.11843/j.issn.0366-6964.2016.11.019
摘要 ( 237 )   HTML( )    PDF (2737KB) ( 411 )  
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以1日龄岭南黄肉鸡(♂)为试验动物,研究在日粮中长期添加亚剂量硫酸新霉素对黄羽肉鸡回肠黏膜菌群动态变化与组成的影响。于1、7、14、21、28、35及42日龄分别从A组(饲喂基础日粮)和D组(饲喂基础日粮+50 mg•kg-1硫酸新霉素)采集鸡回肠肠段并提取黏膜细菌基因组DNA,采用PCR-DGGE技术分析鸡回肠黏膜菌群结构,同时应用16S rDNA基因序列技术,建立42日龄鸡回肠黏膜细菌16S rDNA的随机克隆文库。DGGE图谱分析发现,A、D两组1~28日龄回肠黏膜细菌结构存在明显差异,其相似性为40%~60%;A、D两组肉鸡1~35日龄菌群结构发生变化的程度不同,A组的动态变化值(%change)为9%~33%,D组的动态变化值为17%~45%。分析回肠文库发现,A组文库有94个序列,共产生9个OTUs(Operational Taxonomic Units),其中未知菌属(微杆菌属)所占克隆总数比例最大为48.94%(46/94),其次是乳杆菌属占38.30%(36/94);D组文库有93个序列,共产生6个OTUs,其中乳杆菌属所占克隆总数比例最大为49.46%(46/93),其次是微杆菌属占45.16%(42/93);两组回肠文库中其他菌属的组成种类与数量存在差异,且未发现与大肠杆菌相关的序列。A组与D组42日龄肉鸡回肠黏膜菌群的组成及多样性存在差异,尤其是乳杆菌属的组成比例,这种差异可能是抗生素持续压力的影响所致。

临床兽医
复方中药对腹水综合征肉鸡肝组织α-SMA、I型和III型胶原蛋白含量的作用
韩烨晨,张娟,王俊武,员世宇,吴海萍,温爽,赵冬冬,王卓,苏晓菲,朱昱波,程佳,孙耀贵,王文魁,李宏全,段智变
畜牧兽医学报, 2016, 47(11):  2310-2317.  doi:10.11843/j.issn.0366-6964.2016.11.020
摘要 ( 253 )   HTML( )    PDF (2353KB) ( 354 )  
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本试验旨在研究腹水综合征(AS)肉鸡肝组织α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、I型胶原和III型胶原蛋白变化及复方中药的防治作用。将309羽7日龄罗斯肉鸡随机分为6组,空白组正常饲养,其余5组饲养环境为9~11 ℃、高能饲料和高钠饮水,模型组不给予任何药物,中药组(高、中、低剂量组)分别给予2、1、0.5 g•(kg•d)-1复方中药,L-Arg组饲料中添加1% L-Arg。结果表明:15、25、35和45日龄,与空白组相比,模型组AS发病率、腹水心脏指数、心脏指数、肺脏指数、肝脏指数、肝组织α-SMA、I型胶原和III型胶原蛋白含量显著增加(P<0.01或P<0.05),脾脏指数显著降低(P<0.01或P<0.05);与模型组相比,各剂量中药组和L-Arg组均能改善上述指标(P<0.01或P<0.05)。肉鸡腹水综合征肝组织α-SMA、I型胶原和III型胶原蛋白含量显著上升,参与AS病理发生发展;气血双补、行气利水的复方中药能有效防治AS,其机制与复方中药能显著降低AS肝组织α-SMA、I型胶原和III型胶原蛋白含量相关。

研究简报
猪链球菌3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶的原核表达、活性检测和同源建模
刘璨颖,徐卓菲,付强
畜牧兽医学报, 2016, 47(11):  2318-2324.  doi:10.11843/j.issn.0366-6964.2016.11.021
摘要 ( 180 )   HTML( )    PDF (2454KB) ( 393 )  
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旨在以猪链球菌(Streptococcus suis, S. suis)3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶(HMGR)为药靶,给S. suis病防治研制新型抗菌药提供理论和试验基础。原核表达了S. suis HMGR,用Ni-NTA树脂对重组蛋白质进行了纯化,并用分光光度法测定了其酶活力。此外,运用CLUSTALW对同源HMGR氨基酸序列进行多序列比对。通过SWISS-MODEL对S. suis HMGR三维结构进行同源建模,并用PROCHECK评价模型的质量。酶活力测定结果显示,催化HMG-CoA还原为甲羟戊酸的反应中,S. suis HMGR最佳反应温度和pH分别为37 ℃和5.0,其VmaxKm为846 U•mg-1和0.213 mmol•L-1。经分析显示,肺炎链球菌HMGR晶体结构(PDB ID:3QAE_A)是构建S. suis HMGR三维结构的最佳模板。构建的三维结构模型经质量评估证实为可靠的理论模型,将有助于虚拟筛选出对抗S. suis感染的新型抗生素,酶活力的测定为用试验手段验证S. suis HMGR抑制剂的有效性提供了可行性的方法。