从中药网络药理学的研究现状、研究方法、中药网络药理学的应用和展望四个方面进行综述，以期将中药网络药理学引入中兽药学的研究，并为之提供理论依据。

旨在探讨Myf5基因与鸡生长繁殖性状的关联性。本研究采用PCR-SSCP方法，检测Myf5基因在京海黄鸡群体中的多态性，并对这些多态位点进行单倍型关联分析。结果表明：在Myf5基因外显子处共检测到8个SNPs位点。在379只京海黄鸡的群体中形成了9种单倍型。最小二乘分析结果显示，在生长性状方面，单倍型组合H1H5对8和12周龄体重影响显著（P<0.05），单倍型组合H2H6则对12和14周龄体重影响显著（P<0.05）；在繁殖性状方面，单倍型组合H1H5在开产体重上为优势单倍型组合，显著高于单倍型组合H1H4和H2H4（P<0.05），极显著高于单倍型组合H1H3（P<0.01）。就300 d蛋重均值来说，单倍型组合H1H3为劣势单倍型组合；对300 d的产蛋数数据分析显示，单倍型组合H1H3的300 d产蛋数极显著高于H1H4（P<0.01）。因此，京海黄鸡Myf5基因外显子的多态性对其生长和繁殖性状都有一定影响，为探索鸡育种过程中的标记辅助选择提供了参考资料。

本研究以鸡原始生殖细胞（Primordial germ cells，PGCs）为材料进行Piwi基因的干扰，并探究Piwi和生殖特异性标记基因CVH、Dazl和CDH及调控干细胞多能性转录因子基因Sox2、Nanog和PouV间的关系。由孵化至19期的鸡胚分离出PGCs，经鉴定后，利用RNA干扰技术抑制Piwi基因表达，相对实时荧光定量PCR检测目的基因的表达。结果发现，体外抑制Piwi后，CVH、Dazl和Nanog表达量显著增加（P＜0.05），PouV和Sox2表达量显著下降（P＜0.05），CDH表达量变化不显著（P＞0.05）。本研究在家禽PGCs中建立Piwi基因干扰模型，并发现其干扰后影响生殖特异性标记基因和干性转录因子的表达，为其在生殖生物学中的功能研究提供了新的依据。

旨在构建基于GFP报告基因的ZFN真核细胞筛选体系，为ZFN的筛选提供一种直观、准确、灵敏的方法。以pEGFP-N1为基础，去除EGFP基因的起始密码子后在多克隆位点上游插入ATG，构建筛选体系的通用载体pEGFP-ATG。将ZFN的靶序列插入到通用载体EGFP基因上游，且使起始密码子和EGFP基因处于不同ORF中，构建筛选载体pEGFP-728。将pEGFP-728转入Hela细胞中，G418筛选Hela-728细胞系，转染ZFN到Hela-728，48 h内通过观察荧光判断ZFN是否有效，挑取荧光细胞进行PCR、测序验证靶序列的敲除。测序分析表明，通用载体pEGFP-ATG和含靶序列的筛选载体pEGFP-728序列完全正确；pEGFP-728转入Hela细胞中观察不到绿色荧光，说明靶序列插入后使EGFP发生移框；转染靶序列对应的ZFN到Hela-728中，48 h观察到荧光的表达，说明ZFN有效；挑取6个荧光细胞单克隆，PCR、测序表明4个克隆靶序列发生缺失突变。锌指核酸酶真核细胞筛选体系构建成功。相对于其他方法本筛选体系更加准确、直观、灵敏，更适用于动植物等真核细胞的ZFN筛选，同时还可应用于TALEN和CAS9的筛选。

旨在克隆羊驼TGF-β1基因，了解TGF-β1序列特征及其在不同组织中的表达特征，寻找TGF-β1基因的mRNA表达量与毛色之间的相关性，为研究TGF-β1基因的生物学功能提供基础。以羊驼为材料，利用3′和5′RACE技术克隆羊驼TGF-β1基因，利用DNAman、PROSITE和megAlign软件分别分析序列特征和相似性，应用荧光定量PCR （qRT-PCR）分析TGF-β1基因在不同被毛颜色羊驼皮肤组织中的表达及TGF-β1在山羊不同组织中的表达特异性。结果表明，羊驼TGF-β1 cDNA克隆全长为1 364 bp（GenBank登录号：KF887499），ORF长1 173 bp，编码390个氨基酸。氨基酸序列分析显示，羊驼TGF-β1具有其家族的典型结构特征，与其他哺乳动物相似性很高，与野猪的亲缘关系最近。羊驼TGF-β1 基因在棕色羊驼皮肤组织中的表达量是白色羊驼皮肤组织的3.5倍。组织特异性分析表明，TGF-β1在山羊不同组织中均有表达，且在淋巴组织中表达量相对最高。羊驼TGF-β1 全长cDNA的克隆和不同组织器官TGF-β1基因表达分析显示，TGF-β1与羊驼毛色形成密切相关。本研究为深入探讨TGF-β1参与动物毛色形成及调控的分子机制奠定了基础。

采用Annexin-V、JC-1和TUNEL对A、B、C、D 4头种公牛性控X冻精进行了凋亡分析，并对凋亡分析结果与性控精液体外受精卵裂率和囊胚率的关系进行了相关分析。结果表明：（1）公牛A的活精子（AN^-•PI^-）百分率（89.30%±3.04%）高于其他公牛（(74.39%±3.24%)~(81.17%±4.25%)），差异显著（P<0.05），而其DNA片段化精子百分率（12.24%±1.25%）低于其他公牛（(19.09%±1.27%)~(27.56%±3.17%)），差异显著（P<0.05）；（2）公牛A 的X冻精体外受精（IVF）卵裂率、囊胚率（(76.82%±3.00%)~(20.45%±1.44%)）均高于其他3头公牛（(22.00%±6.85%)~(31.88%±6.69%))，(3.33%±2.67%)~(4.00%±3.26%)），差异显著（P<0.05）；（3）活精子百分率与其IVF卵裂率和囊胚率呈正相关，而DNA片段化百分率与之呈负相关。综上表明：Annexin-V分析能够准确地预测牛X性控冻精的体外受精效率，这对于促进牛性控体外胚胎的生产效率有着重要意义。

本研究旨在探讨猪不同发育时期的卵泡甲状腺激素受体α（TRα）蛋白的表达规律，以及体外培养猪卵母细胞和早期胚胎中TRα的表达模式。采用化学发光免疫分析法（CLIA）测定了不同直径大小猪卵泡甲状腺激素（THs）的含量，运用免疫组化法对猪卵巢TRα进行定位染色，应用免疫荧光技术和QRT-PCR技术分别检测体外培养猪卵母细胞和孤雌激活早期胚胎TRα蛋白的表达定位和TRα mRNA水平表达变化规律。结果表明：猪卵泡中T3含量随着卵泡直径的增大呈现先下降后上升的趋势。免疫组化染色结果显示，阳性信号主要见于GC、TC及卵母细胞。随着卵泡的发育，TRα阳性细胞数量呈增长趋势，原始卵泡、初级卵泡、次级卵泡和成熟卵泡之间阳性细胞数量差异显著。QRT-PCR结果显示，猪TRα基因在不同成熟培养阶段的COCs均有表达，在孤雌激活早期胚胎1-细胞、2-细胞和4-细胞胚胎期显著高于8-细胞胚胎期、桑椹期和囊胚期（P<0.05）。免疫荧光观察到在猪体外成熟的COCs不同发育阶段颗粒细胞均表达TRα蛋白，在24~36 h卵丘颗粒细胞表达阳性最强。TRα蛋白在猪孤雌激活早期胚胎不同阶段中均有表达，且 8-细胞、桑椹胚和囊胚的阳性信号较强。结果提示，不同直径猪卵泡液中均存在THs，不同成熟阶段COCs和早期胚胎中TRα均呈现表达，推测THs可能通过与TRα结合而参与调控猪卵泡发生和早期胚胎发育。

旨在研究革兰阴性菌感染对母兔下丘脑、卵巢和输卵管中TLR4以及其下游炎症细胞因子IL-1β、IL-6表达的影响。选取36只健康新西兰白兔，4只兔不作处理作为0 h组；16只兔作为LPS组，按0.5 mg•kg^-1体重耳缘静脉注射脂多糖（LPS），对照组的16只兔注射等量的生理盐水作为对照组，在注射后0.0、1.5、3.0、6.0和12.0 h(n=4)后收集下丘脑、卵巢和输卵管，采用实时荧光定量PCR分析其TLR4、IL-1β和IL-6的mRNA表达水平，以及采用ELISA测定IL-1β和IL-6在组织中的浓度。结果显示：下丘脑、卵巢和输卵管中均有TLR4的表达，但LPS诱导后，TLR4转录水平仅在卵巢中显著增加（P<0.05），而IL-1β和IL-6的转录水平在下丘脑、卵巢和输卵管中均显著增加（P<0.05），但IL-1β和IL-6对LPS免疫应激在不同器官存在差异：下丘脑对LPS引起的免疫应激反应快，持续时间长；卵巢和输卵管的免疫应激反应慢，持续时间短。结果表明：LPS免疫应激可以上调TLR4、IL-1β和IL-6在下丘脑中以及IL-1β和IL-6在卵巢、输卵管中的表达量。

为探究本课题组获得的2头体细胞克隆猪隐睾症形成的可能原因，本研究利用相对荧光定量PCR技术检测了WT1和FGF9基因在睾丸组织中mRNA表达量变化，同时利用亚硫酸氢盐测序法分析了其启动子区CpG岛甲基化状态。结果表明：WT1和FGF9基因在2头克隆猪睾丸中表达量均高于对照组，其中克隆猪C1中2个基因的表达量与对照组相比差异明显（3.49、9.83 vs 1.00）。亚硫酸氢盐测序结果显示，WT1基因启动子区在克隆猪C1和C2中的甲基化程度没有明显变化，而FGF9基因启动子区2个CpG岛在克隆猪C1中甲基化程度高于对照猪N（94.54% vs 18.18%，71.11% vs 26.67%），而在克隆猪C2中不明显。综上表明：WT1基因的异常表达可能是引起克隆猪发生隐睾的原因之一，但其甲基化水平不是影响该基因异常表达的因素；克隆猪C1睾丸组织FGF9基因启动子区发生超甲基化，这可能导致其mRNA表达异常，从而成为诱导克隆猪隐睾发生的可能原因。

为了探讨Ghrelin对绵羊早期胚胎发育的影响。利用绵羊体外受精技术制备绵羊早期胚胎，并分别将受精胚胎放置在4组培养液中进行发育培养：①梯度添加300、600、1 000、4 000、10 000 ng•mL^-1 Ghrelin的培养液；②梯度添加1、10、200、400 ng•mL^-1 Ghrelin受体拮抗剂培养液；③含400 ng•mL^-1 Ghrelin受体拮抗剂且梯度添加300、1 000、4 000 ng•mL^-1 Ghrelin的培养液；④空白对照组。在胚胎受精第2、3、4、5天时观察胚胎发育情况，分别统计绵羊2-细胞、4-细胞、8-细胞和16-细胞胚胎的卵裂率。结果显示：与空白对照组比较，在培养液中添加不同浓度的 Ghrelin的体外受精胚胎的卵裂率均无显著变化(P＞0.05)；在培养液中梯度添加Ghrelin受体拮抗剂，绵羊2-细胞、16-细胞胚胎的卵裂率无明显变化(P＞0.05)，但4-细胞、8-细胞胚胎的卵裂率显著降低，且在200、400 ng•mL^-1 时差异极显著(P＜0.01) ；在含受体拮抗剂且梯度添加Ghrelin组，4-细胞、8-细胞胚胎卵裂率有所恢复，但与空白对照组比较差异显著（P＜0.05)。结果表明： Ghrelin对绵羊4-细胞、8-细胞胚胎发育具有促进作用。

本试验旨在研究不同日粮阴阳离子差（Dietary cation-anion difference，DCAD）对围产期山羊血浆Ca²⁺和胃肠道钙结合蛋白9kDa（Calcium binding proteins 9kDa，CaBP-D9k）表达水平的影响，探索低DCAD日粮预防围产期奶牛低血钙的可能机制。将27头围产期贵州黑山羊随机分为3组，每组9头，分别饲喂3组DCAD日粮：高DCAD（HD，+325）日粮组、对照组（CON，+179）、低DCAD（LD，-110）日粮组。在产前10 d、产羔当天、产后3 d分别采血并屠宰山羊，检测其血浆离子指标与胃肠道CaBP-D9k表达水平。结果表明，与高DCAD日粮相比，低DCAD日粮不影响山羊采食，酸化了山羊尿液pH（P<0.05），提高了整个试验期内血浆Cl^-水平（P<0.05）。孕期内，山羊血浆Ca²⁺浓度随日粮DCAD水平的降低而增加（P<0.05），采食低DCAD日粮导致了更高的产后血浆Ca²⁺浓度（P<0.05）。除回肠、盲肠及直肠外，低DCAD日粮较高DCAD日粮明显上调山羊胃肠道其余区段内CaBP-D9k mRNA表达水平（P<0.05），并缓和了产后皱胃、空肠与回肠CaBP-D9k mRNA表达水平的降幅（P<0.05）。由此可见，低DCAD日粮有利于维持围产期山羊血浆Ca²⁺稳恒，伴随胃、十二指肠、空肠及结肠肠段CaBP-D9k mRNA表达水平的上调，表明上述区段的钙吸收能力得到增强。这可能是低DCAD日粮有效维持围产期奶牛血浆Ca²⁺稳恒的作用机制。

本试验用日粮饲喂量梯度方法研究杜寒杂交母羊不同生理时期氮的表观消化代谢规律和维持的净蛋白质需要。15只同期发情和人工授精妊娠母羊按体重分为3组：1）自由采食组，2）80%自由采食组，3）60%自由采食组；另有9只空怀母羊做对照。消化代谢试验分别在空怀期，妊娠期 40、100和130 d，哺乳期20、50和80 d进行，得到母羊不同时期的氮表观代谢和维持净蛋白质需要参数。氮的表观消化率在空怀期,妊娠40、100、130 d及哺乳20、50、80 d时分别为45.21%～51.34%；59.71%～64.14%、69.98%～71.91%、67.34%～68.80%；73.72%～82.71%、72.79%～80.51%、73.57%～76.47%。在空怀期和哺乳中、后期存在显著差异（P＜0.01）；空怀期、妊娠40、100、130 d及哺乳20、50、80 d时母羊氮采食量（N intake，g•kg^-1 W^0.75•d^-1）和氮沉积量（RN，g•kg^-1 W^0.75•d^-1）之间的回归方程分别为RN=0.341 5NI-0.269 7；RN=0.489 5NI-0.303 7、RN=0.384 5 NI-0.323 4、RN=0.457 4NI-0.496 2；RN=0.252 1NI-0.338 0、RN=0.282 1NI-0.313 6、RN=0.286 3NI-0.298 2（P＜0.01）。母羊空怀期、妊娠40、100、130 d及哺乳20、50、80 d 7个阶段的维持净氮需要分别为269.7、303.7、323.4、496.2、338.0、313.6和298.2 mg•kg^-1 W^0.75•d^-1。

旨在研究豆粕、菜粕和棉粕3种蛋白质饲料对四川宣汉黄牛瘤胃固相粘附蛋白分解菌［嗜淀粉瘤胃杆菌(R.amylophilus)、溶纤维丁酸弧菌(B.fibrisolvens)、瘤胃普雷沃氏菌(P.ruminicoal)和牛链球菌(S.bovis)］数量的影响。选用4头健康且体重相近装有永久瘤胃瘘管的宣汉黄牛，采用4×4的拉丁方设计，共4期，每期10 d，分别饲喂以豆粕（SBM）、菜粕（RSM）和棉粕（CSM）替换基础日粮（CN）精料15%的日粮，采用PCR技术分析蛋白分解菌数量的变化。结果表明：1）豆粕组嗜淀粉瘤胃杆菌、溶纤维丁酸弧菌、栖瘤胃普雷沃氏菌和牛链球菌的数量分别在采食后9、9、5和5 h时达到最大值，菜粕组分别在采食后3、7、7和1 h时达到最大值，棉粕组分别在采食后9、9、7和1 h时达到最大值；2）豆粕组嗜淀粉瘤胃杆菌数量的平均值最高，棉粕组最低（P<0.05）；棉粕组溶纤维丁酸弧菌、栖瘤胃普雷沃氏菌和牛链球菌数量的平均值最高，豆粕组最低（P<0.05）。综上，不同蛋白质饲料显著影响瘤胃固相粘附蛋白分解菌的数量，以棉粕对瘤胃固相粘附蛋白分解菌的促进效应最好。

为了鉴定口蹄疫病毒（FMDV）插入位点并获得标记的重组病毒，本研究利用口蹄疫病毒反向遗传操作技术，在RGD基序后第9位和第10位氨基酸处（+9）引入组氨酸（His）标签，获得了含有His标签的FMDV全长cDNA克隆（命名为prAsia1-9His）。将prAsia1-9His质粒转染BHK-21细胞后，能够出现典型的细胞病变，对收获的病毒分别用RT-PCR、间接免疫荧光进行鉴定，结果证实，成功拯救了含His标签的重组病毒（命名为rAsia1-9His），该重组毒株能够稳定表达His标签。最后，比较测定了其对BHK-21细胞和乳鼠的致病性，结果表明，该重组毒株与亲本毒株（rAsia1）具有相似的生物学特性。含有标签标记的口蹄疫病毒的成功拯救，为深入研究口蹄疫病毒的致病机制以及分子标记疫苗奠定了基础。

为研究脑心肌炎病毒（encephalomyocarditis virus，EMCV）对不同猪种的感染情况，本研究应用改进的“细胞接种与RT-PCR方法相结合”技术，成功分离到中国国内首株地方土猪源EMCV、首株家养野猪源EMCV和3株良种猪源EMCV，并进行了全基因组序列测定和分析。结果显示，5株EMCV分离毒株的基因组全长7 724～7 735 bp，彼此间核苷酸相似性为99.3%～99.8%，与其他不同动物源EMCV参考毒株的相似性为79.9%～99.9%，与国内猪源、鼠源毒株的相似性均在99.4%以上；各基因片段中，以VP1和2A变异幅度最大，VP2和3D最为保守；基于EMCV全基因组、ORF和VP1基因序列绘制的系统发育进化树显示，EMCV可分为 G1、G2和G3 3个群，猪源EMCV主要分布在G1群和G2群，鼠源EMCV 在G1群和G3群中均有分布；5株EMCV分离毒株与其他国内参考毒株同属于G1群。研究结果证实，地方土猪和家养野猪可感染EMCV并引起发病，提醒在进行地方品种养殖和野生动物家养时要充分考虑人兽共患疫病传播的生态学；鼠在不同猪种间交叉感染EMCV时，可能起到重要媒介作用；EMCV流行毒株存在较大的地域差异，其传播具有一定的区域限制性；EMCV在感染不同猪种时可能会发生某些氨基酸突变，以适应新的宿主。

为表达小反刍兽疫病毒（PPRV）H蛋白，并探讨其免疫原性，通过RT-PCR克隆PPRV Nigeria75/1毒株H基因，将其克隆至供体质粒pFB-LIC-Bse中，测序验证后将重组质粒pFB-LIC-Bse-PPRV-H转化至DH10Bac感受态细胞中，经同源重组获得重组杆状病毒穿梭质粒bacmid-PPRV-H，将其转染昆虫细胞sf21获得含有PPRV H基因的重组杆状病毒。采用SDS-PAGE、Western blot、IFA及小鼠免疫试验鉴定表达产物的反应原性及免疫原性。结果表明，在杆状病毒表达系统中表达的PPRV H蛋白能与His-tag单克隆抗体及PPRV阳性血清发生特异性反应，其相对分子质量为68 ku；表达产物接种小鼠可诱导其产生特异性抗体和抗小反刍兽疫病毒中和抗体，淋巴细胞增殖试验检测结果表明重组杆状病毒rBacmid-H能与相应抗体和致敏的效应淋巴细胞发生较强的特异性反应。本试验获得的重组杆状病毒表达的PPRV H蛋白具有良好的免疫原性及反应原性，可诱导小鼠产生保护性中和抗体，该试验为进一步开发小反刍兽疫亚单位疫苗奠定了基础。

旨在研究不同毒力猪肺炎支原体对宿主细胞的侵入以及侵入后在宿主细胞内的分布位置。首先用猪肺炎支原体野毒株XLW-1感染PK15细胞不同时间后，间接免疫荧光染色，激光扫描共聚焦显微镜对PK15细胞进行断层扫描，以观察XLW-1能否侵入细胞以及感染时间对XLW-1侵入细胞的影响。然后，在能侵入细胞的基础上，用不同毒力的猪肺炎支原体感染宿主细胞STEC、PK15、SJPL和3D4/21，观察它们对宿主细胞的侵入情况。结果表明，猪肺炎支原体野毒株XLW-1与PK15细胞作用8 h时不能侵入PK15，作用10 h以上时可以侵入PK15，并且随着作用时间的延长侵入的猪肺炎支原体也在增加。研究还表明猪肺炎支原体野毒株XLW-1、168致弱株和168疫苗株均能侵入STEC、PK15、SJPL和3D4/21。并且，STEC中3个菌株均随机分布在细胞质中；PK15中3个菌株均主要分布在靠近细胞膜和细胞两端狭长的细胞质中；SJPL中XLW-1和168疫苗株主要分布在贴近细胞膜内侧的细胞质中，168致弱株则散布在细胞质中；3D4/21中XLW-1和168致弱株主要分布在贴近细胞膜内侧的细胞质中，168疫苗株则在整个细胞质中分布较多。结果提示不同毒力的猪肺炎支原体均能侵入宿主细胞STEC、PK15、SJPL和3D4/21。

2010年至2011年在中国广东地区活禽交易市场进行流行病学调查时，在鸭咽和泄殖腔拭子中分离到2株H6N6亚型禽流感病毒，分别命名为A/Duck/Guangdong/C45/2010(H6N6)、A/Duck/Guangdong/C120/2011(H6N6)。应用RT-PCR分别对2株毒株的8个基因片段进行了克隆、测序与分析，结果表明：2毒株的HA裂解位点附近的氨基酸序列为P-Q-I-E-T-R-G，只有1个碱性氨基酸，符合低致病性禽流感病毒HA裂解位点附近的氨基酸序列特征；与2毒株HA基因相似性最高的毒株为A/Duck/Guangxi/GXd-5/2010(H6N1)，与NA基因相似性最高的毒株分别为A/Duck/Fujian/3242/2007(H6N6)和A/Duck/Fujian/6159/2007(H6N6)。全基因组分子遗传演化分析表明，2毒株的8个基因片段均属于欧亚谱系的禽源演化分支；但HA基因属于ST2853-like分支，NP基因属于HN573-like分支，PB2、PB1、PA、M和NS基因属于ST339-like分支，说明本研究中的2株病毒为不同基因群间基因交换的重组病毒。因此，有必要加强H6亚型禽流感病毒流行病学调查以便及时关注其遗传变异与致病性进化，为中国禽流感的预防与控制提供数据支持和理论指导。

旨在克隆鸡 β-防御素Gal-9 基因，对其预测的成熟肽基因进行原核表达，并对产物进行抑菌活性的检测。根据 GenBank发表的鸡β-防御素基因Gal-9（NM_001001611.2）设计引物，采用RT-PCR方法从鸡食道中扩增得到鸡β-防御素Gal-9基因，将该成熟肽基因克隆到原核表达载体pET-32a（+）的EcoRⅠ/XhoⅠ双酶切位点上，构建重组原核表达质粒pET-32a-Gal-9。将重组质粒转化大肠杆菌BL21（DE3），于37 ℃进行诱导表达。结果扩增出Gal-9，其cDNA为204 bp，成熟肽编码42个氨基酸。SDS-PAGE电泳表明，重组鸡Gal-9蛋白大小约为25 ku，与预期大小一致，重组蛋白主要以包涵体形式存在。重组鸡 Gal-9 蛋白对金黄色葡萄球菌（ATCC 25923）、粪肠球菌（ATCC 29212）、大肠杆菌（ATCC 25922）、酵母菌 （GS115） 都能产生抑菌作用，最小抑菌浓度分别为62.50、31.75、125.00、31.75 mg•L^－1。成功获得了鸡 β-防御素Gal-9成熟肽基因的表达产物，证实了重组鸡Gal-9蛋白具有广谱的抗菌活性，体外抑菌试验为其在家禽生产中应用提供了理论基础。

将90只海兰褐雏鸡分为对照组、毒害艾美尔球虫（E.necatrix）1次感染组和2次感染组，应用SP免疫组化法，通过对热休克蛋白(HSP)-70表达的检测，较全面系统地研究了E.necatrix感染雏鸡后，其肠组织HSP-70表达的动态变化。研究发现，雏鸡初次感染E.necatrix后第5～9天，其肠组织HSP-70表达均不同程度的低于对照雏鸡，其中十二指肠、空肠和盲肠显著或极显著低于对照雏鸡（P<0.05或P<0.01），之后迅速上升，于第14天高于对照雏鸡并达峰值；E.necatrix二次攻击性感染雏鸡后，其十二指肠、空肠HSP-70表达呈现“先显著低于对照雏鸡，随后上升”，并逐渐高于对照雏鸡。而E.necatrix 1次大剂量感染雏鸡后，其肠组织HSP-70表达则于第6、10、15天高于对照雏鸡。表明E.necatrix初期感染雏鸡肠组织HSP-70表达受到一定程度的抑制，而E.necatrix大剂量感染雏鸡后，HSP-70表达的增高与E.necatrix对机体的损害程度密切相关。该项研究为进一步探讨球虫的致病机制提供了重要参考依据。

猪胰高血糖素样肽-2 （porcine glucagon-like peptide-2，pGLP-2）能够特异性地促进肠黏膜生长与损伤后修复，本试验研究了葡聚糖硫酸钠（dextran sulfate sodium，DSS）致小鼠结肠炎模型下pGLP-2对肠道损伤的修复效果，为其治疗各种因素引起的仔猪肠道损伤和功能紊乱提供了试验依据。18只BALB/c小鼠随机分为3组，DSS组小鼠饮用3% DSS建立小鼠结肠炎模型，DSS+pGLP-2组饮用3% DSS且连续7 d腹膜外注射pGLP-2，饮水组小鼠正常饮水。试验期10 d。结果表明，与饮水组相比，DSS组小鼠体重、结肠紧密连接闭锁小带（zonula occludens-1，ZO-1）基因的相对表达量显著降低，注射pGLP-2能够显著抑制体重降低和增加ZO-1的表达量；与饮水组相比，DSS组显著增加了结肠炎性评分、髓过氧化物酶（myeloperoxidase，MPO）活性和白细胞介素-6（interleukin-6，IL-6）、白细胞介素-10（interleukin-10，IL-10）和干扰素-γ（interferon-γ，INF-γ）的相对表达量，注射pGLP-2极显著降低了结肠炎性评分、MPO活性和IL-6、IL-10和IFN-γ的表达量。结果提示，pGLP-2可抑制结肠炎小鼠的炎性病变，为其治疗肠道疾病提供了试验依据。

以聚乙二醇6000和泊洛沙姆188(PEG6000∶P188=1∶2)为联合载体，通过熔融法制备阿苯达唑固体分散体。当阿苯达唑与联合载体的比例为1∶5时，通过相溶解度试验和体外溶出度的测定，评价该固体分散体的溶出特性。通过X-射线衍射法、红外光谱法及扫描电镜方法对固体分散体进行物相鉴定。结果表明，PEG6000和P188作为联合载体制备阿苯达唑固体分散体时，能显著提高阿苯达唑的体外溶出度，达90.48%。物相鉴定显示，联合载体和药物之间未发生化学反应，固体分散体以非晶型态存在。综上，选出PEG6000和P188比例为1∶2作为联合载体，利用熔融法制备固体分散体能显著提高阿苯达唑的体外溶出度，且制备方法简单。

暗腹雪鸡是中国珍贵的野生禽类物种，在中国主要分布在西北海拔2 000 m以上的高原地区。本研究采用全自动微生物分析仪和16S rRNA序列分析相结合的方法对4只暗腹雪鸡胃肠道需氧菌的种类与分布进行初步调查。从胃肠道分离纯化出3种需氧菌（肠杆菌、葡萄球菌、肠球菌），共37株，经过鉴定后得出：肠杆菌20株，葡萄球菌7株以及肠球菌10株。所测定3种需氧菌在胃肠道内的数量分布情况：嗉囊21.62%，腺胃18.92%，十二指肠16.22%，回肠18.92%，盲肠24.32%。回肠和盲肠内缺乏葡萄球菌的分布。这一特点可能与暗腹雪鸡特殊生境及食性特点有关。本研究为暗腹雪鸡胃肠道微生态学研究和雪鸡的人工驯养繁殖提供了基础资料。