畜牧兽医学报 ›› 2012, Vol. 43 ›› Issue (1): 138-144.doi:
张光超1,王晓松1,马泽芳1*,唐超1,崔凯1,刘永举1,蒋小明2
ZHANG Guangchao1, WANG Xiaosong1, MA Zefang1*, TANG Chao1,
CUI Kai1, LIU Yongju1, JIANG Xiaoming2
摘要: 研究不同生理时期梅花鹿全血中GSHPx含量变化及其纯化技术,为开发鹿血抗衰老资源奠定理论基础。用DINB法测定梅花鹿的溶血液、血细胞内容物、血浆和血细胞细胞膜中GSHPx含量并计算全血GSHPx含量;利用10%~100%饱和度的(NH4)2SO4盐析和柱层析技术纯化GSHPx;用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳测定其亚基相对分子质量。试验结果表明:全血GSHPx含量以生茸期最高为(1 973.07±25.43) U·mL-1,与配种期的(1 727.74±12.46) U·mL-1差异极显著(P<0.01),与生茸前期的(1 961.83±16.54) U·mL-1差异不显著(P>0.05);GSHPx的初始比活力为24.9 U·mg-1,经纯化后得到GSHPx 0.37 mg·mL-1,最终比活力1 347.7 U·mg-1,纯化倍数为54.1倍,回收率25.00%;鹿血GSHPx亚基的相对分子质量为17.2 ku。结果提示生茸期鹿血的GSHPx含量最高,开发利用价值最大,GSHPx含量与生理特性相关;鹿血GSHPx盐析条件为40%~80%饱和度的(NH4)2SO4,此时所得GSHPx纯化倍数较高。