畜牧兽医学报 ›› 2011, Vol. 42 ›› Issue (11): 1562-1569.doi:
李平花,白兴文,孙普,李冬,卢曾军, 包慧芳,曹轶梅,付元芳,
陈应理,谢宝霞,殷宏,刘在新*
LI Pinghua, BAI Xingwen, SUN Pu, LI Dong, LU Zengjun, BAO Huifang, CAO Yimei, FU Yuanfang, CHEN Yingli, XIE Baoxia, YIN Hong, LIU Zaixin*
摘要: 近年来,O型口蹄疫病毒已演化出多种谱系。目前应用的疫苗已不能有效保护多谱系口蹄疫的流行,这给我国猪口蹄疫的防控带来了极大的困难。为了进一步发展免疫原性好、抗原谱广的猪O型口蹄疫疫苗候选株,本研究以O/HN/93现用疫苗毒株的感染性克隆为骨架,构建了含VP3(58位)和VP1(43、48、137、139、140、141和142位)氨基酸改造的全长克隆。线性化的全长cDNA和T7RNA 聚合酶质粒共转染BHK细胞后获得拯救病毒。RTPCR和乳鼠致病性试验表明拯救病毒遗传稳定,具有与亲本病毒相似的致病性。用拯救的基因工程病毒灭活疫苗免疫猪28 d后分别用中国谱系、泛亚谱系和缅甸98谱系猪源毒的流行毒攻击,结果均获得了完全保护(16/16)。O/HN/93灭活疫苗免疫猪能完全保护泛亚谱系和缅甸98谱系猪源病毒的攻击(16/16),但不能完全保护(12/16)中国谱系猪源病毒的攻击。结果表明基因工程病毒制备的灭活疫苗提高了对中国型猪源谱系病毒的免疫保护,拓展了抗原谱,是具有良好开发前景的疫苗候选株。