畜牧兽医学报 ›› 2008, Vol. 39 ›› Issue (3): 296-301.doi:
陈秀萍;陈锋剑;姜勋平;李兆国;丁家桐
CHEN Xiu-ping;CHEN Feng-jian;JIANG Xun-ping;LI Zhao-guo;DING Jia-tong
摘要: 根据已发表的Bcl-2基因序列设计3对siRNA(Small interference RNA)序列,构建干扰表达载体,转染体外培养的鹅卵泡颗粒细胞,48 h后利用流式细胞术(Flow cytometry,FCM)检测颗粒细胞Bcl-2蛋白表达量、凋亡和增殖情况,收集细胞培养液用放射免疫分析法检测孕激素(P)的分泌水平;此外,还检测了F1~F4卵泡、最小的排卵前卵泡(The smallest preovulatory follicle, SPF)、小黄卵泡(Small yellow follicle, SYF)和闭锁卵泡(Atresic follicle)颗粒细胞Bcl-2蛋白表达和凋亡情况。结果表明:(1)各级卵泡颗粒细胞Bcl-2蛋白的表达存在着差异,正常卵泡颗粒细胞Bcl-2蛋白表达量显著高于闭锁卵泡(P < 0.05),SPF颗粒细胞Bcl-2蛋白表达水平显著高于SYF(P < 0.05);(2)干扰组Bcl-2蛋白表达水平显著低于所有对照组(P < 0.05),而细胞凋亡指数(Apoptosis index, AI)、增殖指数(Proliferation index, PI)和P分泌水平均高于对照组。