畜牧兽医学报 ›› 2008, Vol. 39 ›› Issue (3): 309-313.doi:
赵永贞;肖邦;张兴举;唐中林;崔文涛;杨述林;李奎
ZHAO Yong-zhen;XIAO Bang;ZHANG Xing-ju;TANG Zhong-lin;CUI Wen-tao;YANG Shu-lin;LI Kui
摘要: 受精卵原核内核酸酶对外源基因的降解是导致显微注射法制备转基因动物效率低的重要原因之一,RecA蛋白可与单链DNA结合而阻止细胞核内核酸酶对单链DNA的降解。本试验建立了显微注射和RecA蛋白结合制备转基因动物的技术模型,并初步探讨了RecA蛋白对显微注射法制备转基因动物效率的影响。以单链DNA、RecA蛋白与单链DNA的复合体以及双链DNA为外源基因进行受精卵原核显微注射转基因试验,分别获得F0代小鼠28、41和32只,并通过PCR和Southern blot进行了转基因鉴定。结果显示,在小鼠受精卵原核显微注射RecA+ssDNA复合体获得的F0代中14.6%(6/41)为转基因个体,显微注射dsDNA获得的F0代中转基因个体占6.2%(2/32),而显微注射ssDNA获得的F0代中无一为转基因个体。