LPS通过TLR4影响绵羊输卵管上皮细胞SBD-1的表达

doi:10.11843/j.issn.0366-6964.2016.01.011

畜牧兽医学报 ›› 2016, Vol. 47 ›› Issue (1): 79-84.doi: 10.11843/j.issn.0366-6964.2016.01.011

LPS通过TLR4影响绵羊输卵管上皮细胞SBD-1的表达

李琦，智达夫，延沁，刘默宁，郑欣欣，曹贵方^*

（内蒙古农业大学兽医学院动物组织胚胎与发育生物学研究室，呼和浩特 010018）

收稿日期:2015-06-02 出版日期:2016-01-23 发布日期:2016-01-19
通讯作者: 曹贵方，教授，博士生导师，E-mail:guifangcao@126.com
作者简介:李琦（1987-），女，呼和浩特人，博士生，主要从事组织胚胎学与分子生物学研究,E-mail:liqi253762@163.com
基金资助:
国家自然科学基金项目（31360593；31060328）；内蒙古自治区科技计划项目（20130317）

LPS Induces SBD-1 Expression via TLR4 in Ovine Oviduct Epithelial Cells

LI Qi，ZHI Da-fu，YAN Qin，LIU Mo-ning，ZHENG Xin-xin，CAO Gui-fang^*

(Center of Histology and Developmental Biology，College of Veterinary Medicine，Inner Mongolia Agricultural University，Huhhot 010018，China)

Received:2015-06-02 Online:2016-01-23 Published:2016-01-19

摘要/Abstract

摘要：

旨在研究脂多糖（LPS）对绵羊输卵管上皮细胞β-防御素-1（SBD-1）表达的影响及其调控途径，本研究设置不同浓度（10 ng•mL^-1、50 ng•mL^-1、100 ng•mL^-1、200 ng•mL^-1、1 mg•mL^-1）LPS，分别作用不同时间（0、1、3、6、12和24 h），检测绵羊输卵管上皮细胞SBD-1和Toll样受体-4 (TLR4) mRNA表达水平，通过免疫组化检测SBD-1表达定位，并进一步通过TLR4阻断试验来证实TLR4介导LPS引起SBD-1表达。结果表明，SBD-1蛋白表达于输卵管上皮细胞。LPS以浓度和时间依赖方式影响绵羊输卵管上皮细胞中SBD-1的表达，且100 ng•mL^-1 LPS在作用12 h后，SBD-1的表达水平达到最高。阻断试验表明，TLR4介导LPS对SBD-1的表达调控。综上表明，LPS可以影响绵羊输卵管上皮细胞表达SBD-1，且该过程通过TLR4介导。

关键词: 输卵管, 脂多糖, 绵羊β-防御素-1, Toll样受体-4

Abstract:

The aim of this study was to explore the effect of lipopolyscharride (LPS) on induction of sheep beta defensin-1 (SBD-1) in ovine oviduct epithelial cells (OOECs).In this study，OOECs were cultured and then exposed to LPS for up to 24 hours，with a range of concentrations (10 ng•mL^-1-1 mg•mL^-1).qRT-PCR was performed to detect SBD-1 mRNA.The results showed that LPS stimulated the expression of SBD-1 in a time-(maximal at 12 hours) and concentration-(maximal at 100 ng•mL^-1) dependent manner.Moreover，IHC staining showed that SBD-1 was mainly expressed in epithelial cells.Importantly，TLR4 was detected in OOECs and stimulated by LPS.LPS induced SBD-1 mRNA expression was markedly inhibited by blockage of TLR4 activity using anti-TLR4 antibody.In conclusion，these results suggest that LPS might induce the expression of SBD-1 in the ovine oviduct epithelial cells,and the expression are mediated by TLR4.

Key words: oviduct, lipopolyscharride, sheep β-defensin-1 (SBD-1), toll-like receptor 4 (TLR4)

中图分类号:

S826.2

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LPS Induces SBD-1 Expression via TLR4 in Ovine Oviduct Epithelial Cells

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