弓形虫强免疫原性排泄分泌抗原组分的鉴定

doi:10.11843/j.issn.0366-6964.2015.11.020

畜牧兽医学报 ›› 2015, Vol. 46 ›› Issue (11): 2063-2068.doi: 10.11843/j.issn.0366-6964.2015.11.020

弓形虫强免疫原性排泄分泌抗原组分的鉴定

叶强¹，王萌¹，张念章¹，殷宏^1，2，张德林^1，2*

（1.中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室，兰州 730046；2.江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心，扬州 225009）

收稿日期:2015-02-12 出版日期:2015-11-23 发布日期:2015-11-20
通讯作者: 张德林，E-mail：zhangdl2005@163.com
作者简介:叶强（1986-），男，四川绵阳人，硕士，主要从事蛋白质组学研究，E-mail：yeqiang251@163.com
基金资助:
甘肃省创新研究团体计划项目（1210RJA006）；国家肉牛牦牛产业技术体系（NBCIS CARS-38）

Identification of High Immunogenic Components of Toxoplasma gondii Excreted-secreted Antigens

YE Qiang¹，WANG Meng¹，ZHANG Nian-zhang¹，YIN Hong^1，2，ZHANG De-lin^1，2*

（1.State Key Laboratory of Veterinary Etiological Biology，Key Laboratory of Veterinary Parasitology of Gansu Province，Lanzhou Veterinary Research Institute，Chinese Academy of Agricultural Sciences，Lanzhou 730046，China；2.Jiangsu Co-innovation Center for Prevention and Central of Important Animal Infectious Disease，Yangzhou 225009，China）

Received:2015-02-12 Online:2015-11-23 Published:2015-11-20

摘要/Abstract

摘要：

旨在筛选弓形虫排泄分泌抗原（ESA）中具有强抗原性的蛋白质组分。通过双向电泳和免疫印迹技术，对弓形虫ESA进行分析。结果共筛选到了18个免疫显性蛋白质点，并成功对其中6个具有代表性的蛋白质点进行了质谱鉴定，显示为微线体蛋白1、微线体蛋白4、包囊基质蛋白和14-3-3蛋白，共4种。本研究进一步为弓形虫病的诊断和疫苗研究提供新的实验依据。

关键词: 弓形虫, 排泄分泌抗原, 双向电泳, 免疫印迹, 质谱

Abstract:

The objective of this study was to screen the main immunogenic antigen of Toxoplasma gondii excreted-secreted antigen（ESA）.2-DE combined with Western blotting were used to analysis the components of T.gondii ESA.Eighteen positive protein points were detected in this study.Among them，6 protein spots were selected to identify by matrix-assisted laser desorption/lionization time of flight mass spectrometry（MALDI-TOF/TOF），belonging to microneme protein 1，microneme protein 4，cyst matrix protein and 14-3-3 protein.This study provides a new reference for looking for new candidate molecules for prevention and diagnosis of toxoplasmosis.

Key words: Toxoplasma gondii, ESA, 2-DE, Western blotting, mass spectrometry

中图分类号:

S852.729

叶强，王萌，张念章，殷宏，张德林. 弓形虫强免疫原性排泄分泌抗原组分的鉴定[J]. 畜牧兽医学报, 2015, 46(11): 2063-2068.

YE Qiang，WANG Meng，ZHANG Nian-zhang，YIN Hong，ZHANG De-lin. Identification of High Immunogenic Components of Toxoplasma gondii Excreted-secreted Antigens[J]. ACTA VETERINARIA ET ZOOTECHNICA SINICA, 2015, 46(11): 2063-2068.

参考文献

［1］DUBEY J P.Toxoplasmosis of animals and humans［M］.Secondth edition，Boca Raton，NewYork：CRC Press Inc，2010：1-313.
［2］COOK G C.Toxoplasma gondii infection a potential danger to the unborn fetus and AIDS sufferer［J］.Q J Med，1990，74（273）：3-19.
［3］DODDS E M.Toxoplasmosis［J］. Curr Opin Ophthalmol，2006，17（6）：557-561.
［4］MONTOYA J G，LIESENFELD O.Toxoplasmosis［J］.Lancet，2004，363（9425）：1965-1976.
［5］ZHANG N Z，CHEN J，WANG M，et al.Vaccines against Toxoplasma gondii：new developments and perspectives［J］.Expert Rev Vaccines，2013，12（11）：1287-1299.
［6］李润花，孟晓丽，殷国荣，等．霍乱毒素佐剂联合弓形虫ESA鼻内免疫小鼠抗弓形虫感染作用［J］．热带医学杂志，2010，10（10）：1184-1186．
LI R H，MENG X L，YIN G R，et al.Intranasal immunization with CT adjuvant and ESA proteces mice against Toxoplasma gondii infection［J］.Journal of Tropical Medicine，2010，10（10）：1184-1186.（in Chinese）
［7］白昀，王海燕，王占伟，等．猪弓形虫重组MIC3蛋白单克隆抗体的制备及其初步应用［J］．畜牧兽医学报，2013，44（10）：1622-1628．
BAI Y，WANG H Y，WANG Z W，et al.Preparation and preliminary application of monoclonal antibodies against rMIC3 of Toxoplasma gondii［J］.Acta Veterinaria et Zootechnica Sinica，2013，44（10）：1622-1628.（in Chinese）
［8］COSTA-SILVA T A，MEIRA C S，FERREIRA I M，et al.Evaluation of immunization with tachyzoite excreted-secreted proteins in a novel susceptible mouse model（A/Sn） for Toxoplasma gondii［J］. Exp Parasitol，2008，120（3）：227-234.
［9］BLANCHARD N，GONZALEZ F，SCHAEFFER M，et al.Immunodominant，protective response to the parasite Toxoplasma gondii requires antigen processing in the endoplasmic reticulum［J］.Nat Immunol，2008，9（8）：937-944.
［10］AHN M H，SON H J，LEEM M H，et al.Antigen analysis of Toxoplasma gondii lysate and excretory-secretory materials by enzyme-linked immunoelectrotransfer blot（EITB）［J］. Korean J Parasitol，1994，32（4）：249-257.
［11］DARYANI A，SHARIF M，KALANI H，et al.Electrophoretic patterns of Toxoplasma gondii excreted/secreted antigens and their role in induction of the humoral immune response［J］.Jundishapur J Microbiol，2014，7（4）：e9525.
［12］REISS M，VIEBIG N，BRECHT S，et al.Identification and characterization of an escorter for two secretory adhesins in Toxoplasma gondii［J］.J Cell Biol， 2001，152（3）：563-578.
［13］MEISSNER M，REISS M，VIEBIG N，et al.A family of transmembrane microneme proteins of Toxoplasma gondii contain EGF-like domains and function as escorters［J］.J Cell Sci，2002，115（Pt 3）：563-574.
［14］AHN H J，KIM S，NAM H W.Host cell binding of GRA10，a novel，constitutively secreted dense granular protein from Toxoplasma gondii［J］.Biochem Biophys Res Commun，2005，331（2）：614-620.
［15］BRADLEY P J，WARD C，CHENG S J，et al.Proteomic analysis of rhoptry organelles reveals many novel constituents for host-parasite interactions in Toxoplasma gondii［J］.J Biol Chem，2005，280（40）：34245-34258.
［16］SAOUROS S，EDWARDS-JONES B，REISS M，et al.A novel galectin-like domain from Toxoplasma gondii micronemal protein 1 assists the folding，assembly and transport of a cell adhesion complex［J］.J Biol Chem，2005，280(46)：38583-38591.
［17］FRIEDRICH N，SANTOS J M，LIU Y，et al.Members of a nove1 protein family containing microneme adhesive repeat domains act as sialic acid-binding lectins during host cell invasion by apicomplexan parasites［J］.J Biol Chem，2010，285（3）：2064-2076.
［18］LOURENÇO E V，BERNARDES E S，SILVA N M，et al.Immunization with MIC1 and MIC4 induces protective immunity against Toxoplasma gondii［J］. Microbes Infect，2006，8(5)：1244-1251.
［19］PENG G H，YUAN Z G，ZHOU X H，et al.Sequence variation in Toxoplasma gondii MIC4 gene and protective effect of an MIC4 DNA vaccine in a murine model against toxoplasmosis［J］. J Anim Vet Adv，2010，9（10）：1463-1468.
［20］FERGUSON D J，PARMLEY S F，TOMAVO S，et al.Evidence for nuclear localisation of two stage-specific isoenzymes of enolase in Toxoplasma gondii correlates with active parasite replication［J］.Int J Parasitol，2002，32（11）：1399-1410.
［21］DI CRISTINA M，DEL PORTO P，BUFFOLANO W，et al.The Toxoplasma gondii bradyzoite antigens BAG1 and MAG1 induce early humoral and cell-mediated immune responses upon human infection［J］.Microbes Infect，2004，6（2）：164-171.
［22］PARMLEY S，SLIFER T，ARAUJO F.Protective effects of immunization with a recombinant cyst antigen in mouse models of infection with Toxoplasma gondii tissue cysts［J］.J Infect Dis，2002，185（suppl 1）：90-95.
［23］FU H，COBURN J，COLLIER R J.The eukaryotic host factor that activates exoenzyme S of Pseudomonas aeruginosa is a member of the 14-3-3 protein family［J］.Proc Natl Acad Sci USA，1993，90（6）：2320-2324.
［24］ZHA J，HARADA H，YANG E，et al.Serine phosphorylation of death agonist BAD in response to survival factor results in binding to 14-3-3 not BCL-X（L）［J］.Cell，1996，87（4）：619-628.

[1]	高俊莹, 张东超, 李璇, 王华琳, 姜宁. 弓形虫表面抗原SAG1黏附宿主细胞表面硫化肝素的特性研究[J]. 畜牧兽医学报, 2019, 50(9): 1874-1881.
[2]	徐律, 程天印. 褐黄血蜱卵蛋白质组分析[J]. 畜牧兽医学报, 2019, 50(3): 627-636.
[3]	徐律, 程天印. 褐黄血蜱卵蛋白质组分析[J]. 畜牧兽医学报, 2019, 50(3): 627-636.
[4]	廖博, 崔燕, 杨雪, 何俊峰, 宋亮丽, 杨晓晴, 刘鹏刚. HSP70在牦牛肠道中的分布与变化规律[J]. 畜牧兽医学报, 2018, 49(8): 1735-1742.
[5]	廖博, 崔燕, 杨雪, 何俊峰, 宋亮丽, 杨晓晴, 刘鹏刚. HSP70在牦牛肠道中的分布与变化规律[J]. 畜牧兽医学报, 2018, 49(8): 1735-1742.
[6]	马群山, 刘欣超, 孙晓妮, 王帅, 徐立新, 宋小凯, 严若峰, 李祥瑞. 刚地弓形虫钙依赖蛋白激酶9对小鼠Ana-1巨噬细胞功能的影响[J]. 畜牧兽医学报, 2017, 48(4): 731-739.
[7]	马群山, 刘欣超, 孙晓妮, 王帅, 徐立新, 宋小凯, 严若峰, 李祥瑞. 刚地弓形虫钙依赖蛋白激酶9对小鼠Ana-1巨噬细胞功能的影响[J]. 畜牧兽医学报, 2017, 48(4): 731-739.
[8]	李祎, 李星, 周冰洁, 李木子, 马磊, 刘群, 刘晶. 三株弓形虫对昆明鼠致病性的比较研究[J]. 畜牧兽医学报, 2017, 48(10): 1976-1982.
[9]	李祎, 李星, 周冰洁, 李木子, 马磊, 刘群, 刘晶. 三株弓形虫对昆明鼠致病性的比较研究[J]. 畜牧兽医学报, 2017, 48(10): 1976-1982.
[10]	邓廷贤，庞春英，朱鹏，段安琴，陆杏蓉，杨炳壮，梁贤威. 水牛STAT1基因多态与产奶性状关联分析[J]. 畜牧兽医学报, 2016, 47(1): 48-54.
[11]	邓廷贤，庞春英，朱鹏，段安琴，陆杏蓉，杨炳壮，梁贤威. 水牛STAT1基因多态与产奶性状关联分析[J]. 畜牧兽医学报, 2016, 47(1): 48-54.
[12]	王晨燕，王隆柏，车勇良，吴学敏，陈如敬，邵良平,周伦江. 应用双向电泳分析2株不同毒力的副猪嗜血杆菌蛋白质表达的差异[J]. 畜牧兽医学报, 2015, 46(3): 503-508.
[13]	王晨燕，王隆柏，车勇良，吴学敏，陈如敬，邵良平,周伦江. 应用双向电泳分析2株不同毒力的副猪嗜血杆菌蛋白质表达的差异[J]. 畜牧兽医学报, 2015, 46(3): 503-508.
[14]	李鹏飞，孟金柱，刘岩，黄洋，陈建伟，姜晓龙，曹霞，姚晓磊，赵妙妙，吕丽华. 免疫共沉淀筛选牛卵泡CART相互作用蛋白的研究[J]. 畜牧兽医学报, 2015, 46(12): 2169-2175.
[15]	赵东岳，陈金锋，韦剑辉. 弓形虫截短SAG2基因的克隆表达与免疫活性分析[J]. 畜牧兽医学报, 2015, 46(12): 2258-2263.

弓形虫强免疫原性排泄分泌抗原组分的鉴定

Identification of High Immunogenic Components of Toxoplasma gondii Excreted-secreted Antigens

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