畜牧兽医学报 ›› 2015, Vol. 46 ›› Issue (10): 1851-1857.doi: 10.11843/j.issn.0366-6964.2015.10.019
张倩,杨琨,黄玉风,潘阳阳,余四九,何俊峰,刘鹏刚,崔燕*
ZHANG Qian,YANG Kun,HUANG Yu-feng,PAN Yang-yang,YU Si-jiu,HE Jun-feng,LIU Peng-gang,CUI Yan*
摘要:
CD8α是细胞毒性T 淋巴细胞重要的表面标志,广泛参与对MHCⅠ分子递呈抗原的识别和信号传递,对细胞免疫应答和防御机制至关重要。本研究采用RT-PCR方法克隆牦牛(Bos grunniens) CD8α编码区,通过实时荧光定量PCR、Western blot及免疫组织化学SP法,检测成年雄性牦牛的主要免疫器官(胸腺、脾、肠系膜淋巴结及血结)内CD8α mRNA及蛋白的表达。RT-PCR反应扩增得到牦牛CD8α mRNA序列编码区长为729 bp,编码243个氨基酸,与黄牛有较高的同源性。实时荧光定量PCR和Western blot检测结果显示,CD8α mRNA及蛋白在各免疫器官中均有表达,且在胸腺表达量最高,在脾与血结表达量相似,二者表达量均高于肠系膜淋巴结(P<0.01)。免疫组织化学结果显示,CD8α阳性T细胞在胸腺皮质、髓质均有分布;在脾主要分布在动脉周围淋巴鞘和红髓髓索;肠系膜淋巴结及血结内,CD8α 阳性细胞主要分布在淋巴小结周边及髓索。结果提示,牦牛胸腺的CD8α阳性 T淋巴细胞输出量可能影响次级淋巴器官内T细胞含量;血结可能与淋巴结及脾一样,在细胞免疫发挥同等重要的作用。这些数据将为适时免疫、致病机理和疾病防治等研究提供新的资料。
中图分类号: