三株递呈猪流行性腹泻病毒S基因的减毒鼠伤寒沙门菌的生物学特性研究

doi:10.11843/j.issn.0366-6964.2015.02.015

畜牧兽医学报 ›› 2015, Vol. 46 ›› Issue (2): 279-287.doi: 10.11843/j.issn.0366-6964.2015.02.015

三株递呈猪流行性腹泻病毒S基因的减毒鼠伤寒沙门菌的生物学特性研究

梁恩涛¹，陈杰¹，黄小波^1,2*，文心田^1,2，曹三杰^1,2，吴学婧¹，朱书权¹

（1.四川农业大学动物医学院，动物传染病与基因芯片实验室，雅安 625014；2．四川农业大学人兽共患病研究室与猪病防治研究中心，成都 611130）

收稿日期:2014-06-07 出版日期:2015-02-23 发布日期:2015-02-25
通讯作者: 黄小波，教授，E-mail：rsghb110@126.com
作者简介:梁恩涛（1989-），男，河南平顶山人，硕士生，主要从事猪流行性腹泻新型口服疫苗的研究，E-mail：pdsliangentao@sina.com；陈杰（1992-），男，四川绵竹人，硕士生，主要从事猪流行性腹泻疫苗的研究，E-mail：chenjie1992@sina.com。二人并列第一作者
基金资助:
国家自然科学基金（31072144；30901084）；国家公益性行业（农业）科研专项（20123056）

Study on the Biological Characteristics of Three Attenuated Salmonella typhimurium Strains Harboring Porcine Epidemic Diarrhea Virus S Gene

LIANG En-tao¹，CHEN Jie¹,HUANG Xiao-bo^1,2*，WEN Xin-tian^1,2，CAO San-jie^1,2，WU Xue-jing¹，ZHU Shu-quan¹

(1.Key Laboratory of Animal Disease and Human Health of Sichuan Province，College of Veterinary Medicine，Sichuan Agricultural University，Ya’an 625014，China；2.Laboratory of Zoonosis and Pig Disease Prevention Research Center，Sichuan Agricultural University，Chengdu 611130，China)

Received:2014-06-07 Online:2015-02-23 Published:2015-02-25

摘要/Abstract

摘要：

为了探究减毒沙门菌递呈不同长度猪流行性腹泻病毒（PEDV）S基因的可行性，本研究对3株携带不同长度S基因片段的减毒鼠伤寒沙门菌进行了生物学特性评估。主要进行了对所构建的重组减毒沙门菌菌株SL7207（pVAX-S_499-650）（长456 bp，编码 S蛋白N末端499—650位氨基酸）、SL7207（pVAX-S_499-789）（长873 bp，编码S蛋白N末端499—789位氨基酸）和前期构建的菌株SL7207（pVAXD-S_1-789）（长2 367 bp，编码S蛋白N末端1—789位氨基酸）的生物学特性研究，包括生长曲线测定、携带质粒的体内/外稳定性、回肠组织内的转录、在小鼠体内动态增殖规律、小鼠口服的安全性等。结果表明：SL7207（pVAX-S_499-650）、SL7207（pVAX-S_499-789）、SL7207（pVAXD-S_1-789）3种口服菌株均具有较高的稳定性；携带的目的基因可在肠道组织内转录；菌株在小鼠肝、脾中增殖约5周后逐渐被机体清除；小鼠口服具有良好的安全性。本研究结果表明减毒鼠伤寒沙门菌SL7207可递呈不同长度的S基因抗原片段，为后续开展3种菌株的实际口服免疫效果比较研究奠定了基础。

关键词: 猪流行性腹泻病毒, S基因, 减毒鼠伤寒沙门菌, 口服, 生物学特性

Abstract:

To explore the feasibility of attenuated Salmonella typhimurium as the carrier of porcine epidemic diarrhea virus (PEDV) S gene，the biological characteristics of three recombinant attenuated Salmonella strains harboring varying length of PEDV S gene were researched.The biological characteristics research of SL7207(pVAX-S_499-650) (456 bp，encoding 499-650 amino acid of N-termanal S protein，SL7207(pVAX- S_499-789) (873 bp，encoding 499-789 amino acid of N-termanal S protein)，SL7207(pVAXD-S_1-789) (2 367 bp，encoding 1-789 amino acid of N-termanal S protein) which harboring PEDV S genes in varying length plasmid DNA showed：SL7207(pVAX-S_499-650)，SL7207(pVAX-S_499-789) and SL7207(pVAXD-S_1-789) were steady in vivo/vitro；the target genes could be transcribed in the ileum tissue of mouse；recombinant strains could colonize in liver and spleen of mice and gradually eliminated by host；safety to BALB/c mouse at the dosage of 1×10⁹ CFU by oral administration.All of this，demonstrating the attenuated S.typhimurium could be the carrier of PEDV S gene and laying the foundation for evaluating the immunogenicity of recombinant attenuated Salmonella strains in piglet.

Key words: porcine epidemic diarrhea virus, S gene, attenuated Salmonella typhimurium, oral administration, biological characteristics

中图分类号:

S858.285.3

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三株递呈猪流行性腹泻病毒S基因的减毒鼠伤寒沙门菌的生物学特性研究

Study on the Biological Characteristics of Three Attenuated Salmonella typhimurium Strains Harboring Porcine Epidemic Diarrhea Virus S Gene

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