大鼠脑微血管内皮细胞的体外培养与鉴定

doi:10.11843/j.issn.0366-6964.2014.08.008

畜牧兽医学报 ›› 2014, Vol. 45 ›› Issue (8): 1260-1264.doi: 10.11843/j.issn.0366-6964.2014.08.008

大鼠脑微血管内皮细胞的体外培养与鉴定

王鑫¹，冯波^1,2，刘晓晔¹，张倩¹，董虹^1*，穆祥^1*

(1.北京农学院兽医学（中医药）北京市重点实验室，北京 102206；2.中国农业大学动物医学院，北京 100193)

收稿日期:2014-01-25 出版日期:2014-08-23 发布日期:2014-08-22
通讯作者: 董虹，副教授， Tel：010-80799480，E-mail：donghong523@163.com；穆祥，教授， Tel：010-80789515，E-mail：muxiang1109@sina.com
作者简介:王鑫（1992-），男，江西靖安人，硕士生，主要从事中兽医药及疾病防控方面研究，E-mail：williamxin0217@163.com
基金资助:
北京市教委科技面上项目（KM201210020008）；国家自然科学基金（31101850）；北京市自然基金（6132007）

Isolation and Cultivation of Rat Brain Microvascular Endothelial Cells in vitro

WANG Xin¹，FENG Bo^1,2，LIU Xiao-ye¹，ZHANG Qian¹，DONG Hong^1*，MU Xiang^1*

（1.Beijing Key Laboratory of Traditional Chinese Veterinary Medicine，Beijing University of Agriculture，Beijing 102206，China；2.College of Veterinary Medicine，China Agricultural University，Beijing 100193，China)

Received:2014-01-25 Online:2014-08-23 Published:2014-08-22

摘要/Abstract

摘要：

本研究旨在建立1种简单易行、获得细胞纯度较高的体外分离、培养大鼠脑微血管内皮细胞的方法。取7～10日龄SD大鼠，分离大脑皮质，经Ⅱ型分散酶消化、葡聚糖3次离心法获得大鼠脑微血管段，用胶原/分散酶消化后，在37 ℃ 5% CO2 培养箱中进行原代细胞培养。利用第Ⅷ因子相关抗原免疫荧光检测法，结合细胞形态学观察对培养的细胞进行鉴定。成功分离培养了大鼠脑微血管内皮细胞，倒置显微镜下单个细胞呈短梭形或多角形，汇合后呈铺路石样，单层贴壁生长；免疫荧光检测第Ⅷ因子相关抗原呈阳性。本试验成功建立了分离纯度较高的大鼠脑微血管内皮细胞的体外培养方法。

关键词: 大鼠, 脑微血管内皮细胞, 体外分离培养

Abstract:

To establish a simple and feasible method for isolation of highly purified rats brain microvascular endothelial cells（RBMECs）from 7-10 days SD rats，the relatively pure cerebral microvessel fragments were obtained by careful dissection in dispase II and three times centrifugation with dextran.After digested with collagenase/dispase enzyme，cells were grown in a humidified atmosphere of 5% CO2 at 37 ℃,then were identificated by the factor Ⅷ-related antigen.The results showed that primary endothelium cells formed monolayers with the characteristic cobble-stone morphology and were strongly positive for Ⅷ-related antigen factor.It was indicated that relatively pure primary culture of RBMECs was successfully established using this method.

Key words: rat, brain microvascular endothelial cells, isolation and cultivation in vitro

中图分类号:

S813.1

王鑫，冯波，刘晓晔，张倩，董虹，穆祥. 大鼠脑微血管内皮细胞的体外培养与鉴定[J]. 畜牧兽医学报, 2014, 45(8): 1260-1264.

WANG Xin，FENG Bo，LIU Xiao-ye，ZHANG Qian，DONG Hong，MU Xiang. Isolation and Cultivation of Rat Brain Microvascular Endothelial Cells in vitro[J]. ACTA VETERINARIA ET ZOOTECHNICA SINICA, 2014, 45(8): 1260-1264.

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Isolation and Cultivation of Rat Brain Microvascular Endothelial Cells in vitro

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