畜牧兽医学报 ›› 2011, Vol. 42 ›› Issue (6): 759-764.

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猪SelS基因启动子区的克隆及序列分析

张宁波,井文倩,李奎*   

  1. 1. 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所 动物营养学国家重点实验室,北京 100193;2. 临沂师范学院 生命科学学院,临沂276005
  • 收稿日期:2010-05-26 修回日期:2011-02-25 出版日期:2011-06-25 发布日期:2011-06-25
  • 通讯作者: 李奎

  • Received:2010-05-26 Revised:2011-02-25 Online:2011-06-25 Published:2011-06-25

摘要: 本研究旨在克隆和分析猪硒蛋白S基因(Selenoprotein S,SelS)启动子序列,并初步探讨潜在转录因子结合位点对其表达的影响。通过SONPCR技术克隆猪SelS基因启动子序列,利用PromoterScan、Promoter 2.0等在线工具预测其启动子特征,利用细菌脂多糖(Lipopolysaccharides,LPS)刺激PK15细胞,研究NFkappaB转录因子对猪SelS基因启动子活性的影响。试验获得了猪SelS基因约3 kb的启动子序列,部分序列比对发现猪、人、牛和小鼠物种间相似性仅7%~51%。预测猪SelS基因转录起始位点在-398 bp,猪和人SelS基因启动子存在系列保守的转录因子结合位点,包括NFkappaB、CCAAT box、SP1、USF等,但均未发现典型的TATA box。细胞试验表明,NFkappaB转录因子可以上调猪SelS基因的表达。结果提示,物种间SelS基因启动子相似性较低,但猪和人SelS基因的转录因子非常保守,LPS诱导试验提示,猪SelS基因表达可能受NFkappaB转录因子的调控。

关键词: SONPCR, 猪, SelS基因, 启动子, 序列分析