畜牧兽医学报 ›› 2011, Vol. 42 ›› Issue (5): 711-716.

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抗猪甲型H1N1流感病毒血凝素蛋白单克隆抗体的制备与特性分析

张健,陈艳,乔传玲,杨焕良,唐续,辛晓光,陈化兰
  

  1. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 兽医生物技术国家重点实验室 农业部动物流感重点开放实验室,哈尔滨 150001
  • 收稿日期:1900-01-01 修回日期:1900-01-01 出版日期:2011-05-26 发布日期:2011-05-26
  • 通讯作者: 乔传玲

  • Received:1900-01-01 Revised:1900-01-01 Online:2011-05-26 Published:2011-05-26

摘要: 本研究旨在制备猪甲型H1N1流感病毒血凝素(HA)蛋白的特异性单克隆抗体。采用RTPCR方法扩增猪甲型H1N1流感病毒的HA基因,将其克隆至真核表达载体pCAGGS上,获得重组质粒pCAGGSHA,转染293T细胞,通过间接免疫荧光(IFA)检测表明HA蛋白在293T细胞中得到表达。将pCAGGSHA 以100 μg·只1剂量免疫5周龄BALB/c小鼠,获得4株稳定分泌抗HA蛋白单克隆抗体(MAb)的杂交瘤细胞株,分别命名为11G7、3C10、3G3和2B11。其中11G7诱导小鼠产生的腹水HI效价为14log2,中和效价为1∶8 192,HI试验结果进一步表明11G7只与甲型H1N1流感病毒发生反应,而不与其他H1N1、H1N2、H3N2、H5N1及H9N2亚型流感病毒反应。该MAb的制备将为建立猪甲型H1N1流感病毒与传统亚型SIV的鉴别诊断方法奠定基础。

关键词: 甲型H1N1猪流感病毒, HA, MAb