畜牧兽医学报 ›› 2012, Vol. 43 ›› Issue (2): 204-210.doi:
李君1,葛婷2,罗军1*,孙雨婷1,石恒波1,朱江江1,郝娟1,赵旺生1
LI Jun1, GE Ting2, LUO Jun1*, SUN Yuting1, SHI Hengbo1, ZHU Jiangjiang1, HAO Juan1, ZHAO Wangsheng1
摘要: 本研究旨在对山羊脂肪酸合酶基因(Fatty acid synthase, FASN)启动子进行结构与功能的初步分析,进而对其转录调控机制进行探讨。采用PCR技术从西农萨能羊基因组DNA中克隆FASN基因启动子,通过缺失分析,构建7个包含不同缺失片段的荧光素酶报告基因载体,转染山羊乳腺上皮细胞和MCF7细胞,利用双荧光素酶系统检测不同片段的启动活性。结果表明,克隆得到FASN基因的启动调控序列2 589 bp,生物信息学分析发现,该启动子序列含有典型的启动转录元件TATAbox和Ebox,分别位于转录起始位点(+1)上游-41和-74 bp处。报告基因分析表明,启动子核心区域定位在-293~-79 bp,在线软件预测发现,该区域含有Sp1、NFY、USF和SREBP等转录因子结合位点。结果显示,FASN基因启动子前端存在负调控元件,Sp1、NFY、USF和SREBP等转录因子可能参与FASN基因的转录调控。