畜牧兽医学报 ›› 2009, Vol. 40 ›› Issue (7): 1088-1096.doi:
陈琳1,2,刘健华1,张俊丰3,陈杖榴1*,曾振灵1
CHEN Lin 1,2, LIU Jianhua 1, ZHANG Junfeng 3,CHEN Zhangliu 1* ,ZENG Zhenling 1
摘要: 为调查和分析猪肠道菌的氨基糖苷类药物耐药机制,用PCR及序列分析方法检测鉴定2个猪肠道菌中4种16S rRNA甲基化酶耐药基因rmtA、rmtB、rmtC和armA和10种氨基糖苷钝化酶基因,用接合试验研究rmtB基因和10种氨基糖苷钝化酶基因的水平转移机制,用微量稀释法测定携带rmtB基因的分离菌及其接合子对20种抗菌药物的敏感性。结果,从分离的152株猪肠道菌中共检测到49株(323%)rmtB阳性菌,其中48株为大肠埃希氏菌,1株为阴沟肠杆菌,未检出其它16S rRNA甲基化酶编码基因。49株rmtB阳性菌中检测到7种氨基糖苷类钝化酶基因,检出率从高到低依次是aac(3)Ⅱ(878%)、aph(3′)Ⅶ (796%)、aph(3′)Ⅱ(776%)、aadA1 (347%)、aac(6′)Ib (143%)、aac(3)Ⅳ (102%) 和aph(4)Ⅰ(82%)。46株rmtB阳性菌可以通过接合试验将rmtB、aac(3)Ⅱ、aph(3′)Ⅶ、aph(3′)Ⅱ和aadA基因传递给受体菌E.coli C600和E.coli 488 Rifr,接合率从30×10-6~46×10-13不等。所有rmtB阳性菌株及其接合子对卡那霉素、阿米卡星、妥布霉素、西梭米星、萘替米星、庆大霉素6种氨基糖苷类抗生素均高度耐药(MIC≥512 μg·mL-1)。研究结果表明,rmtB基因和氨基糖苷钝化酶基因广泛存在于两猪场,它们共同介导猪源肠道菌对庆大霉素、阿米卡星等氨基糖苷类药物的高度耐药。 rmtB基因与aac(3)Ⅱ、aph(3′)Ⅶ、aph(3′)Ⅱ和aadA基因位于同一接合性质粒上,共同传播氨基糖苷类的耐药性。