畜牧兽医学报 ›› 2007, Vol. 38 ›› Issue (12): 1389-1393.doi:
潘登科;万荣;刘吉;牟玉莲;张莉;李奎;冯书堂
PAN Deng-ke;WAN Rong;LIU Ji;MU Yu-lian;ZHANG Li;LI Kui;FENG Shu-tang
摘要: 分离培养了成年猪前脂肪原代细胞,并对前脂肪细胞向成熟脂肪细胞进行诱导分化,油红O染色法鉴定了脂肪细胞。利用脂质体介导的方法将质粒pEGFP-N1转染前脂肪细胞,经过G418筛选获得了阳性细胞株。然后分别以前脂肪细胞、转绿色荧光蛋白(GFP)前脂肪细胞及胎儿成纤维细胞为核供体进行体细胞核移植,结果表明:前脂肪细胞(8.8%)和胎儿成纤维细胞(8.3%)的囊胚发育率无显差异著(P > 0.05);与前脂肪细胞相比,转基因前脂肪细胞的囊胚发育率降低,但差异不显著(3.7% vs. 8.8%,P > 0.05)。前脂肪细胞为核供体生产转基因克隆胚胎,能够获得转基因囊胚。虽然囊胚发育率不高, 但为生产脂肪细胞转基因克隆猪奠定了基础。