| 预防兽医 |
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| 猪瘟病毒E2基因噬菌体展示多肽库的构建及表位鉴定
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徐和敏,王琴*,徐璐,范学政
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中国兽医药品监察所 猪瘟参考实验室, 北京 100081
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收稿日期 2009-9-27
修回日期
网络版发布日期
接受日期
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摘要 本研究通过建立CSFV噬菌体展示多肽库,并对其进行生物淘选,以期获得E2蛋白上新的抗原表位。选择CSFV石门株(SM)和疫苗株(HCLV)为代表株,采用噬菌体展示技术,以T7select4151b为载体,分别构建了CSFV SM株和HCLV株E2基因噬菌体展示多肽库(SME2 库和HCLVE2 库)。通过生物淘选和噬菌体原位杂交技术,采用7株猪瘟单克隆抗体和1株猪瘟高免血清分别对构建的SME2 库和HCLVE2 库进行抗原表位筛选。结果共筛选到了5条与E2蛋白高度同源的序列,在E2蛋白上的同源区域分别为TAVSPTTLR、YYEP、TTWKEYSH、GGQ(V)VK和PDGLPHY。结果表明,TAVSPTTLR、YYEP和TTWKEYSH序列与目前已知E2蛋白表位一致,说明它们是E2蛋白上的优势表位;GGQ(V)VK和PDGLPHY序列与预测表位一致,推测是E2蛋白上潜在的抗原表位。
关键词
猪瘟病毒;E2蛋白;抗原表位;噬菌体展示多肽库
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