| 遗传繁育 |
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| 西农萨能奶山羊泌乳中期和后期乳腺组织差异基因的筛选
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武会娟1,2，罗军1*，赵旺生1，王伟1
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1. 西北农林科技大学动物科技学院，杨凌 712100；2. 北京市理化分析测试中心，北京 100193
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收稿日期 2008-12-24
修回日期
网络版发布日期
接受日期
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摘要 旨在利用抑制性削减杂交（SSH）技术筛选西农萨能奶山羊泌乳中期和后期的差异表达基因，并用实时定量PCR（QPCR）分析差异基因的表达丰度，探讨奶山羊不同泌乳阶段乳腺组织的基因表达规律。本研究以西农萨能奶山羊泌乳中期和后期乳腺组织的mRNA互为检测子（Tester）和驱动子(Driver)构建cDNA消减文库（ML和LM），随机挑选克隆测序，进行序列比对分析，并检测部分差异基因在乳腺组织中的表达丰度。结果，成功构建了泌乳中期和后期的cDNA文库，随机挑选30个克隆测序，得到ML和LM文库中与细胞凋亡、抗氧化、脂类代谢、能量代谢等生理过程相关的差异基因，对其中的6个基因进行实时定量分析，发现5个均为阳性克隆，表达水平增加了1.3～5.5倍不等。结果表明，利用SSH技术成功构建了泌乳中期和后期乳腺组织正反向消减cDNA文库，筛选出24个差异基因，为进一步研究奶山羊乳腺组织基因调控机理奠定了基础。
关键词
西农萨能羊；乳腺组织；抑制性削减杂交；差异表达基因；实时定量PCR
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